I.
INTRODUCCIÓN:
La luz es la fuente de energía fundamental para la vida en la tierra, es una señal ambiental importante para los organismos de todos los reinos de la vida. Aporta energía para la fotosíntesis, calor y permite la visión en microorganismos, plantas y animales, además de jugar un papel fundamental como señal ambiental, regulando el desarrollo y la siología de los organismos. La luz presenta distintas longitudes de onda, y no toda todass afec afecta tan n igua iguall a los los ong ongos os,, ya !ue !ue algu alguna nass so son n ca capa pace cess de detectarlas pero no otras. (Corrochano, 2007) "n el reino fungi, la luz puede regular la reproducción se#ual y ase#ual, !ue son aspectos importantes para la supervivencia y la distribución de la especie. La luz in$uye en varios procesos del desarrollo de los ongos de dife diferrent entes mane aneras, ras, esto sto pued puede e afe afectar ctar el me mettabol abolis ism mo de crec crecim imie ient nto, o, co coni nidi diac ació ión, n, form formac ació ión n de pigm pigmen ento tos, s, trop tropis ismo mo,, etc. etc. (Bet (B etin ina, a, 1995 1995). ). %eg&n (onto!a (onto!a,, 1999) 1999), las las dife difere rent ntes es foma fomass de radiaci radiación ón pueden pueden ser dañina dañinas, s, ben'c ben'cas as o inocua inocuass depend dependien iendo do del ongo y la fuente de radiación. "l efecto de la luz sobre un ongo puede ser morfog'nico (inducir o inibir la formación de estructuras) o no morfog'nico (in$uir en la velocidad o dirección de crecimiento de una estructura). La luz regula tambi'n el desarrollo y comportamiento de los hon"o#. "l desarrollo de un ongo ocurre en varias etapas* germinación de las esporas esporas,, creci crecimi mient ento o y rami ramicac cación ión de las ifas ifas y formac formación ión de las estructuras reproductoras para el desarrollo y dispersión de las esporas. "sto "stoss proc proces esos os es está tán n regu regula lado doss por por muc mucos os fact factor ores es am ambi bien enta tale les, s, incluyendo la presencia o ausencia de luz. La mayoría de respuestas a la luz en ongos se deben a la luz azul, aun!ue tambi'n se conocen respuestas a otras longitudes de onda como la luz roja o la luz del ultraviolet ultravioleta. a. Además Además de interveni intervenirr en el desarrol desarrollo lo de los ongos, la luz azul act&a como señal ambiental activando rutas metabólicas como la sínt síntes esis is de ca caro rote teno nos, s, o diri dirigi gien endo do el crec crecim imie ient nto o de es estr truc uctu turas ras reproductoras. La activación por la luz de la biosíntesis de carotenos ace !ue algunas especies de ongos obtengan esa coloración naranja típica, tambi'n presente, por ejemplo, en las zanaorias. La síntesis de caroteno sirve para protegerse de la radiación + del sol, al igual !ue nosotros sintetizamos melanina cuando nos ponemos al sol. (Ro$ri"%e& Ro'ero . et a.) "stos procesos, sin embargo, tienen implicaciones negativas a mucos aspe as pect ctos os de la vida vida uma umana na,, pues pues la prol prolif ifer erac ació ión n inco incont ntro rola lada da de
ongos puede conducir a enfermedades devastadora en plantas, a la tierra y a los umanos. -or otra parte, los ongos son esenciales para la degradación de la materia orgánica, en interacciones micorrizidas con las plantas y como fuente de sustrato para los metabolitos farmac'uticos de los seres umanos. "ntender el papel de señales ambientales en el desarrollo de los ongos es vital para aumentar las ventajas y disminuir los costos. A pesar de la importancia de la luz en el desarrollo de los ongos, todavía ay muco !ue estudiar sobre el efecto, el mecanismo de percepción y respuesta a la misma (I$n%r', 2005). -or otro lado, los bioplaguicidas constituyen un importante medio de control biológico de plagas en la agricultura, con probada efectividad en mucos países *Bati#ta, 1997+. "l grupo más importante de ongos entomopatógenos son los deuteromicetos u ongos imperfectos, en los cuales se desconoce la fase se#ual. Los g'neros más importantes son eauveria, erticillium, /etarizium, 0irsutella y -aecilomyces *ernan$e&-arrea, 2001+. "l ongo Beauveria bassiana se a estudiado como agente de control de insectos de plaga pertenecientes a diferentes órdenes. "n cultivos de la agricultura urbana *ina", 2007+ lo recomendaron para el control de varias especies de crisom'lidos !ue afectan a mucos cultivos ortícolas. -or otra parte, numerosas enfermedades afectan los cultivos sembrados en canteros en organopónicos y uertos intensivos *Ca#teano# et al., 2005+, las cuales re!uieren del empleo de fungicidas !uímicos para su control, !ue pueden afectar los ongos entomopatógenos !ue se aplican para el control de insectos plaga. "ntre los fungicidas !ue se recomiendan para el control de enfermedades f&ngicas en la agricultura urbana se encuentran difenoconazol, o#icloruro de cobre, mancozeb, zineb, azo#ystrobin, matala#yl y azufre *ina", 2007+. "stos están autorizados en mucos cultivos en 1uba donde se realizan tratamientos con ongos entomopatógenos, entre ellos con B. bassiana *CN/, 2005+. "l objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de la luz sobre el crecimiento y esporulación f&ngica, así como la inibición !uímica sobre el crecimiento f&ngico analizando el efecto del Lufenuron y sus posibles modos de acción.
II. -
TRI/ 1ultivos de*
- 2ricoderma sp. - -aecilomyces lilacilus - aeuveria bassiana - 3usarium o#ysporum
-apel celofán - 2ransparente - 4ojo - erde - Amarillo - Azul - 1artulina negra - 1orrector - 1inta %cotc -
III. 3TODO/ "ste trabajo se dividió en tres etapas* en la primera se determinó el efecto de los factores físicos sobre el crecimiento f&ngico sobre las colonias de Paecilomyces sp. y de Trichoderma sp., en la segunda fase se estableció el efecto de la luz sobre la esporulación de 2ricoderma sp. y en la tercera fase se estableció el efecto de factores !uímicos, mediante el plaguicida Lufenuron, el crecimiento de Baeuveria bassiana, Fusarium oxysporum, Trichoderma sp. y Paecilomyces lilacilus.
CTO/ D CTOR/ 4/ICO/ /OBR CRCINTO N6ICO 5. %e procedió con la siembra por puntura de* Trichoderma sp. y Paicilomyces lilacilus, en 6 placas con medio Agar glucosa fosfato cada uno. 7. 1ada una de las placas fue rotulada. 8. 1ada una de las placas se procedieron a envolverse en papel celofán de color* transparente, rojo, verde, amarillo y azul, para cada placa servida y sembrada. 9. %e dejaron todas las placas a las mismas condiciones (2: de 8;:1, durante ; días, misma cantidad de luz y oscuridad). 6. %e realizó la medida para comparar crecimiento de las colonias con el control, como para analizar el efecto de la luz sobre la pigmentación y esporulación.
CTO/ D U /OBR /8ORUCIÓN 5. %e procedió con la siembra por puntura de* Trichoderma sp. en 8 placas con medio Agar glucosa fosfato cada uno. 7. 1ada una de las placas fue rotulada. 8.
CTO/ D CTOR/ U4ICO/ /OBR CRCINTO N6ICO 5. %e procedió con la siembra por puntura de* Baeuveria bassiana, Fusarium oxysporum, Trichoderma sp. y Paicilomyces lilacilus, en 7 placas con medio Agar glucosa fosfato cada uno. 7. 1ada una de las placas fue rotulada. 8. 1ada una de las placas se procedieron a envolverse y fueron mandadas a encubación a una 2: de 8;:1 durante ; días. 9. Al s'timo día, se realizó la medida para comparar crecimiento de las colonias con el control, como para analizar el efecto del Lufenuron sobre la pigmentación y esporulación. 9.5 -ara ello, se tomó la medida de 7 radios de la placa con su respectiva colonia, y se procedió a sacar un radio promedio. 9.7 %e sacó el > de crecimiento en comparación de la medida de la placa control de cada colonia obtenida.
I.
R/UTDO/
2abla 5. "fectos de factores físicos sobre el crecimiento f&ngico de -aecilomyces lilacilus. 8aecio'!ce# iaci%#
CONTRO 88 CON ROO 88 CON U 88 CON RD 88 CON RIO
-?@/"2A1?B DD DDDD
14"1?/?"2C DD DD
D
DD
DD
DDD
l
DDDD
2abla 5. "fectos de factores físicos sobre el crecimiento f&ngico de 2ricoderma sp. Trichoderma sp.
-?@/"2A1?B D DDD DD DDD DD
CONTROL PAPL CLOF!N RO"O PAPL CLOF!N A#$L PAPL CLOF!N %R& PAPL CLOF!N A'AR(LLO
2abla 7. "fecto de la luz sobre la esporulación sobre 2ricoderma sp.
Tricho$er'a #;. onaci
Luz continua DEF
Luz discontinua D
Cscuridad F
2abla 8. "fecto de Lufenuron sobre crecimiento f&ngico.
Baeuveria bassiana Fusarium oxysporum Trichoderma sp. Pecilomyces
CONTROL ;.;6 mm
)* ppm G.76 mm
+** ppm 8.76 mm
59 mm
57.6 mm
57 mm
6 cm
8.H6 cm
7 cm
5.8 cm
5 cm
H.;6 cm
lilacilus 2abla 8. "fecto de Lufenuron sobre crecimiento f&ngico. CONTROL 5HH>
)* ppm IH.G6>
+** ppm 95.J9>
Fusarium oxysporum
5HH>
IJ.7J>
I6.;5>
Trichoderma sp.
5HH>
G5>
9H>
Pecilomyces lilacilus
5HH>
;G.J7>
6;.GJ>
Baeuveria bassiana
.
DI/CU/IÓN
"fectos de factores físicos sobre el crecimiento f&ngico "n comparación con el control= el efecto de la luz roja fue desfavorable para Paecilomyces lilacilus, pero positiva para la pigmentación y esporulación. "l efecto de la luz azul fue favorable para Paecilomyces lilacilus, pero negativa para la pigmentación y esporulación. "l efecto de la luz verde fue no tuvo ning&n efecto para Paecilomyces lilacilus, y el efecto de la luz amarilla fue muy favorable para Paecilomyces lilacilus, pero negativa para la pigmentación y esporulación. 1on lo !ue respecta al crecimiento, y en comparación con el control, se obrservó !ue Paecilomyces lilacilus creció más con color amarillo, el verde y el rojo siendo desfavorables para el crecimiento de Paecilomyces lilacilus. "stos resultados son consistente con otro estudio realizado con -aecilomyces fumosoroseus donde la producción má#ima de conidios se obtuvo con la luz blanca seguida por la luz azul, y la producción de conidios con luz verde y roja se da en varios ordenes de magnitud menores. %iendo suciente un pulso de luz azul para inducir en la respuesta fotomorfog'nica medida como producción de conidios (/=nche&-%rio ! co#, 200>). - -ara Trichoderma sp. solo se izo lectura para pigmentación. "n comparación al control, el efecto de la luz roja y verde fue desfavorable para Trichoderma sp, pero positiva para la pigmentación. "l efecto de la luz azul y amarilla fueron menos -
desfavorable Trichoderma sp, pero negativa para la pigmentación. "ste resultado es consistente con el estudio realizado en ongos (%áncez /urillo y 1ols. 7HH9) donde se armó !ue, Trichoderma sp. responde al espectro de luz azul, además de la luz +.. Además del estudio realizado en Trichoderma viride (Ca#a# ore# ! co#, 200>), donde la aplicación de un pulso breve de luz azul (9HHF 9IHnm) a una colonia radial induce una esporulación sincronizada la cual produce un anillo de conidioforos de color verde en el momento el cual la colonia fue e#puesta al pulso de luz. - "n estos resultados obtenidos, la luz produce cambios fotobiológicos o foto!uímicos al ser absorbida por una o varias mol'culas. Pecilomyces lilacilus, responde a la luz azul y amarilla, mientras !ue para Trichoderma sp. son la azul y amarillo= por lo !ue se sugiere !ue deben e#istir receptores !ue absorben luz de estas longitudes de onda. "fecto de la luz sobre la esporulación -
"fecto de factores !uímicos sobre el crecimiento f&ngico -
"l fungicida !uímico Lufenuron, manifestó alg&n nivel de to#icidad con respecto a la inibición del crecimiento micelial sobre Beauveria bassiana, Fusarium oxysporum, Trichoderma sp y Pecilomyces lilacilus. %iendo está relacionada con la concentración aplicada a cada medio de cultivo con su respectiva colonia sembrada. A una concentración de 6H ppm, 2ricoderma sp. fue la más afectada llegando su crecimiento solo asta el G5>, los cultivos de aeuveria bassiana y -aecilomyces lilacilus le siguieron, con un crecimiento má#imo de IH.G6> y ;G.J7>, mientras !ue 3usarium o#ysporum, fue la !ue mayor crecimiento tuvo a esa concentración de plaguicida con el IJ.7J>. A una
concentración de 56H ppm, las colonias más afectadas fueron la de aeuveria bassiana con 95.J9> y 2ricoderma sp. con el 9H>= seguida de -aecilomyces lilacilus con el 6;.GJ> y por <imo la de 3usarium o#ysporum con I6.;5>. - Los presentes resultados indican !ue debe tenerse cuidado al aplicar este plaguicida en áreas sometidas a tratamientos con Beauveria bassiana, ya !ue afectaron el crecimiento micelial del ongo, la conidiog'nesis y la germinación de los conidios. "sto puede deberse a !ue el Lufenurón, una benzoilurea de plaguicidas, inibe la producción de !uitina en los insectos. %in !uitina, una pulga larval nunca se va a desarrollar una cáscara e#terior dura ( e#oes!ueleto ). 1on sus órganos internos e#puestos al aire, el insecto muere de desidratación poco despu's de su nacimiento o desde la muda. Lufenurón tambi'n se utiliza para combatir ongos infecciosos, ya !ue las paredes celulares de los ongos son apro#imadamente un tercio de la !uitina y al no tener una forma de reparar el daño constante !ue se está aciendo a su pared celular, reduce el tamaño de su colonia, matando a las c'lulas f&ngicas, aciendo de este un e#celente antif&ngico de amplio espectro (a%"hter, 2005). - "#iste una característica importante, la 0"2"4C1A4?C%?%, !ue consiste en la coFe#istencia de diferentes clases de n&cleos en un mismo individuo, su activación dependerá distintamente seg&n las condiciones desfavorables del medio, seg&n las cuales será el n&cleo !ue se e#prese. La variabilidad !ue resulta de la eterocariosis y de la recombinación se#ual permite la rápida adaptación de los ongos a vencer la acción del plaguicida= esta característica se ace presente en Fusarium oxysporum, pudiendo ser una de las razones por la cual el ongo no fue muy afectado por el Lufenuron. La permeabilidad, es otro gran factor por el cual un ongo puede volverse tan o más resistente a un !uímico. -udiendo ser el caso entre 3usarium o#ysporum y 2ricoderma. Ctro factor muy importante, sería la volatilización de los !uímicos, !ue al disiparse rápidamente del ambiente, no restringirían el crecimiento f&ngico siendo su tiempo de uso menor. Además otros factores, como los bypass y el producto inibido, !ue pueden aumentar la resistencia a un ongo frente a un !uímico. - %i se ubiera dado el caso !ue en uno de nuestros ongos, ubiera crecido a&n más !ue el control, se podría deducir !ue el ongo está utilizando al !uímico Lufenuron como un sustrato.
I. CONCU/ION/
%e demostró !ue la luz tiene un efecto signicativo en el crecimiento yEo pigmentación y esporulación de Paecilomyces lilacilus y Trichoderma sp. - "l mayor efecto de la luz se observó con la luz amarilla y azul. - La luz afecta el desarrollo de Trichoderma sp, al cultivar el ongo en presencia de luz continua y discontinua se obtuvo una mayor esporulación y zonación, mientras !ue en completa obscuridad la esporulación y zonación fue escasa. - Lufenuron se clasicó como tó#ico para eauveria bassiana y 2ricoderma sp., mientras !ue para 3usarium o#ysporum y -aecilomyces lilacilus se clasicó como ligeramente tó#icos. -
II. BIBIO6RI: atista, %.* K%eguridad de los agentes de control microbianos, O. Biol-ico 6J(7)*;JFIG, %Mo -aulo, rasil, 5JJ;. 1asas 3lores, %., 4iosF/omberg /., ibbins /., -once oyola -. y 0errera "strella A. 7HH9. L4F5 and /L4F7, Ney regulatory elements of potoconidiation and mycelial groOt in 2ricoderma atroviride. /icrobiology. 56H*86G5F86GJ. 1astellanos, L.= 4. /ur= P. L. Ayala= 1. 3errer* K-rincipales enfermedades f&ngicas observadas en canteros de organopónicos y uertos intensivos y su manejo en enezuela, memorias del Q?Q 1ongreso enezolano de 3itopatología, ar!uisimeto, 7HH6. 1%* Lista Ccial de -laguicidas Autorizados,
%ancezF/urillo, 4. ?., 2orreF/artinez, /., AguirreFLinares, P. R 0errera"strella, A. 7HH9. LigtFregulated ase#ual reproduction in -aecilomyces fumosoroseus. /icrobiology. 56H* 855F85J. augter, %., 7HH6. Lufenuron 1andida treatment. "#traido de* ttp*EEbuyFlufenuron.comElufenuron.pdf .
