Granulocitopoeza Medicinska škola Dubrovnik Smjer : Zdravstveno – laboratorijski tehničar
Stanice granulocitopoeze
6 citomorfološki prepoznatljivih stupnjeva sazrijevanja :
-mijeloblast -promijelocit (progranulocit) -mijelocit -metamijelocit -nesegmentirani granulocit ("band") -segmentirani ili polimorfonuklearni granulocit
za vrijeme tog procesa sazrijevanja najznačajnije citomorfološke promjene se događaju na jezgri
nukleoli nestaju, kromatin postaje zgusnut (kondenziran), jezgra od okrugle postaje bubrežasta i na kraju segmentirana u najzrelijem obliku
citoplazma od oskudne, bazofilne bez granula postaje obilna, svijetlo-ružičasta s brojnim zrncima u najzrelijim oblicima granulopoeze
MIJELOBLAST najnezrelija stanica koja se citomorfološki može prepoznati
visok odnos jezgra:citoplazma
jezgra je okrugla ili ovalna, nježnog kromatina sa 3-5 nukleola
kondenzacija kromatina na nuklearnoj membrani
citoplazma-oskudna, bazofilna bez zrnaca, no MPO ipak može biti pozitivna
svjetlo neobojeno područje u blizini jezgre predstavlja Golgijev aparat
PROMIJELOCIT
veći od mijeloblasta zbog obilne citoplazme
jezgra je još uvijek velika, obično ekscentrično smještena, uočavaju se i 2-3 nukleola
kromatin je nešto kondenziraniji, ali još uvijek nježan
citoplazma je obilna, bazofilna sa velikim crvenim zrncima (primarna,azurofilna ili nespecifična)
granule sadrže brojne enzime i druge substance (kisela fosfataza, MPO, kisele hidrolaze, lizozim, sulfatni mukopolisaharid i dr.)
MIJELOCIT
odnos jezgra:citoplazma manji jer je jezgra manja
jezgra je okrugla, ekscentrično smještena, nukleoli se obično ne vide
kromatin kondenziraniji
zreliji B mijelocit- jezgra postaje bubrežasta, a u citoplazmi se nalaze gotovo samo sekundarna zrnca
zadnji stupanj zrelosti gdje je moguća dioba
u obilnijoj citoplazmi se nalaze specifična ili sekundarna zrnca, no u nezrelijem A mijelocitu nalaze se i primarna zrnca, no njihova sinteza opada
METAMIJELOCIT
nešto manji nego mijelocit
najveća razlika u odnosu na mijelocit je u izgledu jezgre koja je sada bubrežasta
kromatin kondenziran, nukleoli se ne vide
citoplazma je svijetlo ružičasta s dominacijom sekundarnih zrnaca
NESEGMENTIRANI GRANULOCIT
razlika prema metamijelocitu - kada je udubljenje jezgre veće od 1/2
jezgra-oblik potkovice, kromatin je izrazito zgusnut, citoplazma je kao u metamijelocita
prva forma st. granulopoeze koja se može naći u perifernoj krvi (1-5%)
SEGMENTIRANI (POLIMORFONUKLEARNI) GRANULOCIT
slične veličine kao i neseg.granulocit
više od 5 segmenta jezgre -hipersegmentacija (npr. kod megaloblastične anemije)
kromatin kondenziran
kriterij segmentiranosti - kada spoj kromatina izmenu segmenata nema strukturu (ili 1/3 debljine najdebljeg dijela jezgre)
citoplazma kao u neseg.granulocita
KINETIKA NEUTROFILA
absolutni broj leukocita 4-10 x 109/L; neutrofila 2- 7 x 109/L
dnevni ritam -niže vrijednosti ujutro, veće popodne
leukocitoza, leukopenija uz promjenu u diferencijalnoj krvnoj slici često je prvi znak bolesti
granulocitopenija - snižen broj sve tri populacije granulocita
neutropenija - ispod 2 x109/L - smanjena proizvodnja u koštanoj srži, povećan izlazak u tkiva, pojačano raspadanje u perifernoj krvi
agranulocitoza - ispod 0.5 x 109/L - velik rizik za nastajanje infekcije pa se bolesnik mora izolirati iz okoliša
granulocitoza - povećan broj granulocita
neutrofilija - povećan broj neutrofila- iznad 7 x 109/L - kod bakterijskih infekcija, metaboličkih intoksikacija, intoksikacija lijekovima, nekroza tkiva
granulociti se zadržavaju oko 10 sati u perifernoj krvi prije no što dijapedezom (prolaz granulocita kroz intaktni endotel krvnih žila)
DINAMIKA STVARANJA GRANULOCITA U KOŠTANOJ SRŽI 1.MITOTIČKI ODJELJAK proliferacijski - stanice koje mogu stvarati DNA 3- 6 dana, 4-5 diobe, 3 na stupnju mijelocita 2. POSTMITOTIČKI ODJELJAK maturacijski 5-7 dana do prelaska u perifernu krv 3.PERIFERNA KRV 6-10 sati do prelaska u tkiva
Otpuštanje granulocita iz koštane srži
normalno - ulazak granulocita u perifernu krv iz koštane srži jednak odlasku u tkiva
povećana potreba za granulocitima - npr. Infekcije broj granulocita se povećava(ubrzanim sazrijevanjem, preskakanjem staničnih dioba, ranijim otpuštanjem stanica iz koštane srži)
mehanizam koji regulira produkciju i otpuštanje neutrofila nije u potpunosti istražen - najvjerojatnije je osnova povratna sprega između cirkulirajućih granulocita i koštane srži
normalno se iz odjeljka rezerve u koštanoj srži oslobađaju samo segmentirani i tek nešto neseg.granulocita
mehanizam otpuštanja nije potpuno objašnjen, no smatra se da je djelomično reguliran veličinom pora u endotelu sinusa koštane srži i sposobnošću zrelog granulocita da se deformira i provuče kroz poru
nezrele stanice se zbog veće jezgre ne mogu deformirati i proći kroz poru, no kada ih je više dio se otpušta u perifernu krv
starija dob - rezrve granulocita u koštanoj srži jednake kao u mlađoj dobi, no manja je mobilizacija granulocita u perifernu krv
novorođenče - osjetljivost na infekciju veća zbog manje rezerve i manje sposobnosti leukocita da migriraju prema mjestu infekcije
FUNKCIJA i METABOLIZAM GRANULOCITA
granulociti u tkivu fagocitiraju i uništavaju mikroorganizme te sudjeluju u drugim fiziološkim procesima
migracija prema mjestu infekcije se ostvaruje pomoću adhezije na endotel
Adherencija
migracija je regulirana mehanizmom prepoznavanja između granulocita i endotela
3 faze prepoznavanja 1) primarna adhezija (reverzibilna) 2) aktivacija leukocita s kemijskim spojem ili signalom posredovanim staničnim kontaktom koji potiče ekspresiju sekundarnih leukocitnih receptora (receptora ovisnih o aktivaciji) 3) jako prijanjanje leukocita na endotel (vezanje ovisno o aktivaciji)
nakon nekoliko minuta ozljede ili infekcije neutrofili reagiraju s endotelom - "kotrljaju" se prema zahvaćenom području ozljede usporavaju – aktiviraju se - dolazi do ekspresije receptora za adheziju zaustavlja se kotrljanje - dolazi do čvrstog prijanja uz endotel adhezijske molekule i njihovi receptori na leukocitima i endotelu ih vežu i potiču daljnja zbivanja
3 obitelji adhezijskih molekula
posreduju reakcije leukocita s imunosnim sustavom
1) β2 integrini 2) selektini 3) imunoglobulinska obitelj i njihovi ligandi
usmjeravanje prema oštećenju tkiva
Migracija
nakon adherencije na ET neutrofili se pomoću pseudopodija provlače kroz ET
kretanje leukocita je usmjereno pomoću vezanja kemoatraktanskih molekula i proteina ekstracelularnog matriksa na specifične leukocitne receptore
Fagocitoza
neki mikroorganizmi mogu biti fagocitirani bez, a neki tek nakon opsonizacije (oblaganja protutijelima)
na bakteriju se veže Fab dio molekule protutijela, a Fc dio molekule protutijela se veže na receptor leukocita (vez poput mosta)
pseudopodiji okružuju mikrorganizam - nastaje fagosom
fagolizosom - u fagosom se oslobađa sadržaj primarnih, sekundarnih i tercijarnih zrnaca - degranulacija - funkcija im je da uništavaju i razgrađuju mikroorganizme
egzocitoza - oslobađanje sadržaja fagosoma izvan stanice upalni eksudat