ENTOMOLOGIA FORENSE Por Luis Arroyo Rivera Instituto Andaluz de Patología y Microbiología Microbiología Aplicada
¿Qué es la entomología forense?
Es la ciencia que estudia la aplicación de los insectos y otros artrópodos (o alguna de sus partes), en la resolución de investigaciones legales. A pesar de no ser muy conocida, su campo de actuación es muy amplio, dividiéndose en tres áreas principales: Entomología urbana. Se puede definir como los procedimientos legales que involucran a insectos u otros animales relacionados cuando estos afectan a estructuras hechas por el hombre, o bien a su medio ambiente próximo. Plagas de productos almacenados, estudiando los insectos que infestan alimentos almacenados (cereales, frutas, etc.). Entomología médico-legal, donde los insectos ayudan a resolver sucesos como asesinatos, suicidios o violaciones, junto con casos de abuso físico o tráfico de contrabando. Los principales objetivos son: Determinar el tiempo y lugar de la muerte de una persona u otro animal. Esclarecer casos de posible muerte súbita o accidentes de tráfico sin causa aparente. Detectar un uso criminal de los insectos (veneno, etc.). Seguir el rastro de una mercancía o individuo. Aunque la entomología forense es cada vez más respetada como apoyo a todas estas investigaciones, la realidad es que se encuentra muy retrasada con respecto a técnicas como el análisis de huellas, de fibras u óseo, las pruebas de ADN, la balística, o los patrones de manchas de sangre. Breve historia.
La entomología forense es una ciencia moderna, en el sentido de que es hoy día cuando está en periodo de crecimiento, pero a su vez los primeros datos conocidos indican también su antigüedad: se ha documentado en Extremo Oriente un tratado del año 1235 A.C., escrito por Sun Tz'u, donde se cita el caso más antiguo en el que se utilizaron los insectos como referencia. El primer experimento entomológico histórico fue llevado a cabo por Francesco Redi (1668), en su famosa refutación de la teoría de la generación espontanea, donde observo el crecimiento de moscas únicamente en las piezas de carne fresca expuestas al aire. Casi dos siglos más tarde fue Bergeret (1855) el que contribuyo a esclarecer el primer "caso criminal" de la era moderna, el de un bebé que había sido emparedado hacía varios años, gracias a las poblaciones de insectos en el cuerpo. La entomología forense experimento un auge que llevo a la publicación del primer tratado de entomología médica, por el francés Megnin (1895).
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Ya en el siglo XX, se comenzó a realizar la revisión taxonómica de aquellos grupos de importancia (Aldrich, Greenberg), junto con con la la aparición de claves para la determinación (Knipling). (Knipling). Estudios Estudios posteriores, desde la década de los veinte hasta la actualidad, incluyeron, fundamentalmente, fundamentalmente, aspectos de distribución distribución de las distintas especies (Hall, Townsend, Goddard) y la identificación en base a las características morfológicas al microscopio de barrido (Liu, Greenberg). La amplitud progresiva del conocimiento acerca de todo lo que rodea a la entomología forense ha llevado a la publicación de guías entomológicas (Meek, Vincent), un libro de texto (Smith) y una guía de procedimientos de campo (Haskell). Desarrollo.
Todos los estudios médico-legales forenses se basan en el hecho de que la llegada y la colonización de un cadáver por parte de las distintas especies de insectos (que los descomponen como corresponde a su alimentación carroñera) se lleva a cabo de forma ordenada y predecible. Cuando los restos de un animal se exponen at aire tras morir, y el cuerpo comienza a desprender olor, los insectos que primero los descubren son las moscas botella del genero Calliphoridae y las moscas de la carne del genero Sarcophagidae. Estas especies siguen un desarrollo llamado holometábolo, donde hay una fase de huevo (excepto unas cuantas moscas de la carne) que da lugar a las restantes fases larvarias, que crecen progresivamente gracias a tres mudas sucesivas, en las cuales se pierde la piel externa. Finalmente, la última muda da lugar al estado de pupa, donde la piel externa oscurecida recubre al adulto que se desarrolla en el interior. Este proceso de crecimiento es la base de todas las investigaciones entomológicas forenses, ya que permite estimar el intervalo de tiempo que ha transcurrido desde la muerte del sujeto: es el intervalo post-mortem o IPM. Las primeras hembras en encontrar el cadáver depositan en él sus huevos durante los dos primeros días tras la muerte (en condiciones normales a las pocas horas), ya sea alrededor de orificios naturales como ojos, nariz, orejas, ano o vagina; o bien en las heridas si es que qu e estas existen. A continuación se desarrolla la primera fase de larva, que vive en los tejidos y crece rápidamente, apareciendo tras un tiempo determinado las fases segunda y tercera. Cuando se completa el crecimiento se entra en el estado de pupa. Por término medio, se tarda entre 1-3 semanas en pasar de huevo a pupa según las condiciones de temperatura y humedad, ya que el desarrollo del insecto es dependiente de las variables medioambientales, lo que hace que cambie el periodo exacto entre la muerte, la puesta de los primeros huevos y la aparición de las larvas; además, influyen otros factores como que el cadáver se encuentre en un lugar abierto o cerrado, etc. La teoría, por tanto, es fácil de comprender: si se estima la edad de los insectos se estima el tiempo transcurrido desde la muerte. En el cadáver se sucede igualmente una sucesión de organismos "especializados" en diversas zonas corporales, ya que tras el consumo del cuerpo por las moscas (que pueden sobrevivir en un medio semilíquido) suelen aparecer diferentes especies de escarabajos una vez que el cuerpo se ha secado, tanto carroñeros
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Moscas botella/moscas de la carne Escarabajos estafilínidos Escarabajos derméstidos Escarabajos tineidos Ácaros
Algunos insectos se encuentran solo en condiciones determinadas; así, la mosca del queso Piophila casei solo se encuentra en cadáveres que llevan expuestos largo tiempo, tanto como 6 meses. El periodo del año también es muy importante, ya que en los restos encontrados en primavera se puede determinar si el suceso ocurrió antes o después del invierno, según la identificación de los insectos muertos en el cuerpo. Únicamente las larvas del mosquito invernal Trichocera son capaces de desarrollarse en la carroña durante los meses más fríos. Este cambio en la fauna se observa tanto en el cadáver como en sus alrededores. El estudio de las evidencias entomológicas no solo se utiliza para determinar cuando murió la víctima de un crimen, sino también para ayudar a responder cuestiones tan esenciales como son donde y como se produjo el deceso. De hecho, incluso es posible que la causa de muerte haya sido el propio insecto, por respuestas alérgicas a su veneno o por causar accidentes de tráfico. Igualmente, es posible detectar una larga lista de sustancias tóxicas (desde medicamentos a drogas adictivas) en la masa de gusanos y las pupas, procedentes de la ingestión por parte de estos de los tejidos del cadáver, y que llegan a interferir en el ciclo de vida de las moscas. Otra aplicación novedosa de los estudios sobre las larvas es la posibilidad de detectar ADN de la víctima en su interior, pero se encuentra aún en fases experimentales. En la reconstrucción de crímenes violentos podemos encontrar larvas en lugares donde no son normales, especialmente sobre las heridas. Otra estimación que puede realizarse es si el cadáver ha sido manipulado o no, ya que hemos comentado que las poblaciones del sustrato donde reposa varían cada cierto tiempo y se produce una sucesión similar a la del interior del cuerpo. Las diferencias al comparar la composición de la fauna de uno y de otro pueden indicar que el cuerpo se ha movido. Lo mismo ocurre si en ambientes cerrados se encuentran evidencias de actividad entomológica, o si los insectos que se recogen no se corresponden con la localización de los restos: algunas especies ( Lucilia Lucilia sp. ) son heliófilas, colocando los huevos en zonas soleadas, mientras que otras ( Calliphora sp. ) prefieren los lugares sombríos; determinadas moscas se encuentran solamente en áreas urbanas (Calliphora vicina), siendo otras rurales ( Calliphora vomitoria ). Variaciones en la distribución o el comportamiento pueden llevar a la sospecha.
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Toma de muestras.
Para aprovechar al máximo la información de la escena del crimen se debe realizar una recogida de muestras apropiada. El protocolo exacto varía con el hábitat, pero puede dividirse en: Observación visual y notas de la escena. Entre ellas se incluye, al menos a) Tipo de hábitat (rural, urbano, seco, acuático, en un bosque, en edificios cerrados o abiertos, etc.). Esto determina que insectos se encuentran normalmente en el cuerpo, por lo que si hallamos otros sugiere que el cadáver ha sido transportado. b) Número y tipo de insectos adultos, ya sean voladores o andadores del suelo. c) Zonas de mayor grado de infestación con huevos, larvas, pupas o adultos, solos o combinados. d) Frecuencia de insectos predadores (escarabajos, hormigas, etc.). e) Posible acción de otros carroñeros (ratas, peces, etc.), que pueden afectar al cadáver. Recolección de datos climatológicos. Son críticos en la escena del crimen, ya que afectan directamente al IPM al determinar la duración del ciclo vital de los insectos a) Temperatura ambiente, con lecturas a alturas entre 0'3-1'3 metros del cuerpo. b) Temperatura superficial del cuerpo (en la piel). p iel). c) Temperatura de la masa de gusanos. d) Temperatura del suelo circundante. e) Temperatura en la interfase entre el cadáver y el suelo f) Temperatura del suelo tras mover el cuerpo, tanto de debajo mismo como a 1-2 metros, tomada a profundidades de 0, 4 y 20 cm. También se debe contactar con la estación meteorológica más cercana para obtener datos de las temperaturas máximas y mínimas, precipitaciones, etc., desde la última vez que la víctima fue vista con vida hasta varios días después de encontrar el cadáver. Recolección de especímenes del cadáver y del área circundante (6 metros) antes de moverlo, y de debajo del cuerpo y sus proximidades (1 metro) tras retirarlo. Para obtener los insectos del cuerpo hay diferentes técnicas, pero en cualquier caso se debe obtener una muestra diferenciada por duplicado de cada lugar
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Como se ha comentado anteriormente, los insectos más importantes y abundantes en un cadáver son las moscas botella de color verde o azul metálico, de la familia Calliphoridae . Los huevos, de color blanco y alargados (unos 2mm de longitud), son depositados en racimo; deben buscarse en todos los orificios naturales o sobre las posibles heridas, donde las mucosas se hayan puesto en contacto con el aire. Su interés es muy grande, ya que el IPM se puede medir con mucha fiabilidad a partir de su identificación. La fase de huevo no suele durar más de 1 día. Las larvas también son blancas, con un cuerpo segmentado de forma cónica, con la boca en el extremo más estrecho. Precisamente en la boca es donde se sitúan los ganchos bucales, que se continúan con una especie de esqueleto interno que se usa en la identificación de especies. La otra característica morfológica utilizada para diferenciar especies son los espiráculos, orificios respiratorios posteriores que sirven a la mosca para respirar cuando hunden su cabeza en el cadáver. Tanto la silueta de los ganchos bucales como el tipo de espiráculos varían con la fase larvaria, ya que en estos se añade una hendidura por cada etapa de larva. Las larvas son la fase vital que se encuentra con más frecuencia, desde los pocos días hasta algunas semanas desde que los restos se exponen a la acción de los insectos: por término medio, su tamaño es de 5mm (1'8 días), 10mm (2'5 días) y 17mm (4-5 días). Inicialmente se concentran en los mismos sitios que los huevos, pero después invaden otras áreas. ár eas. La última etapa larvaria se denomina prepupa, donde el insecto se hace inactivo, sale del cuerpo y se empieza a oscurecer. Su tamaño aproximado es de 12mm (8-12 días). En cuanto a la pupa, su aparición no se debe más que a la contracción de la piel de la tercera larva (puparium) tomando forma de capsula, que se hace rígida y se oscurece, aunque se retienen detalles de los espiráculos y los ganchos bucales. El insecto que vive dentro es blanquecino, no se mueve y posee apéndices rudimentarios. Las pupas no se encuentran dentro del cuerpo, sino en sus cercanías, desde las propias ropas hasta una distancia de varios metros; su tamaño medio es de 9mm (18-24 días). El adulto presenta un color pálido al emerger del puparium y es muy suave, con alas sin expandir, por lo que tarda entre 1-2 días en adquirir sus caracteres normales. Aunque es un elemento muy interesante, por si solo no indica casi nada. Una vez se ha completado la tarea con los insectos presentes en el interior del cadáver, también se debe recolectar la fauna de los alrededores, tanto de la capa de hojarasca bajo el cuerpo (si es en campo abierto), como de los primeros centímetros de suelo. La diferenciación externa de las fases larvarias de moscas es bastante complicada, y solo hay claves verdaderamente útiles en el tercer estadio. Por el contrario, las larvas de escarabajos son muy distintas entre sí, pareciéndose solo en que presentan tres pares de patas. En el laboratorio, los insectos se hacen crecer en cámaras ambientales controladas, donde se regula estrictamente la temperatura, la humedad y el ciclo de luz. Una vez obtenidas, las muestras pueden montarse en preparaciones microscópicas permanentes que facilitan la identificación: se aclara la preparación con potasa y alcohol de 70%,
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Fiabilidad de las pruebas entomológicas y problemas que presentan.
Las pruebas entomológicas forenses son la forma más confiable de determinar el momento exacto de la muerte, exceptuando el testimonio de un testigo presencial. Si el cadáver se descubre en un periodo menor de 72 horas desde el fallecimiento, se pueden hacer cálculos aproximados en base a la temperatura corporal (etapa de descenso inicial, etapa de subida por la actividad bacteriana durante la putrefacción y nueva bajada), la coagulación sanguínea y el rigor mortis. El rigor mortis se debe a reacciones químicas anaerobias en los músculos, con producción de acido láctico y desorganización del esqueleto de actina-miosina que provoca rigidez corporal; va a depender de la temperatura y de la concentración inicial de acido láctico. La siguiente tabla refleja resumidamente la interpretación combinada de los datos de temperatura y del rigor rig or mortis respecto a la información que proporcionan. Temperatura del cuerpo Caliente Caliente Frio Frio
Rigidez del cuerpo
Tiempo desde la muerte
No Si Si No
< 3 horas Entre 3-8 horas Entre 8-36 horas > 36 horas
La descomposición del cuerpo se divide en varias etapas cuya duración varía en gran medida según una gran cantidad de factores: Etapa Descomposición inicial
Putrefacción Putrefacción negra
Fermentación butírica
Descomposición seca
Descripción
El cadáver aparece fresco externamente pero se descompone por dentro debido a la actividad bacteriana y parasitaria, presentes en el animal antes de la muerte El cadáver esta hinchado por el gas que se produce internamente, y se acompaña del olor de la carne en descomposición Consistencia carnosa o cremosa, con las partes expuestas de color negro. El cuerpo se colapsa cuando el gas escapa. El olor se hace muy fuerte El cadáver se seca progresivamente, aunque en fases iniciales se se mantienen retazos de tejido. Fuerte olor a queso. La superficie ventral se encuentra mohosa por la fermentación El cuerpo está totalmente seco, y la descomposición acaba por detenerse.
No obstante, la aplicación de estos criterios es más un arte que una ciencia, por lo que cada vez se utilizan con mayor frecuencia los insectos en la estimación del IMP. Además, una vez pasadas las 72 horas el cuerpo se enfría, desapareciendo el patrón coagulativo y los signos físicos. De cualquier forma, los estudios entomológicos no son la panacea, sino que presentan una serie de problemas que pueden ser vitales en la investigación: Generalmente, el estudio es muy complejo en zonas geográficas que no estén aisladas, por las diferencias en la distribución y abundancia de especies. e species. Es por ello que los grandes avances en este campo se han producido en áreas “cerradas” (pej: (pej: Hawaii)
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Los insectos demuestran distintos comportamientos según el estado de los restos: La ropa ayuda a conservar la humedad, por lo que las moscas azules perduran más tiempo Los gusanos devoran rápidamente la piel si el cadáver esta vestido, pero no así si va desnudo El desarrollo está sujeto a variaciones más sutiles de lo que se asume, ya que la temperatura es distinta en diferentes tramos del día aún dentro de la misma estación, y no se conoce en profundidad el efecto de estas fluctuaciones. A temperaturas muy frías el estudio entomológico es muy complicado.
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Principales especies de interés.
A continuación vamos a esbozar una pequeña clasificación taxonómica de los artrópodos más comunes en los cadáveres: Orden Acarina Muchos ácaros son transportados a la zona por otros insectos, mientras que el resto son habitantes del suelo con comportamiento depredador (algunas especies pueden alimentarse de los huevos o larvas), o con nutrición a base de hongos o detritus. Se encuentran en el suelo bajo el cuerpo, durante las últimas etapas de la descomposición.
Orden Aranae Predadoras de las especies carroñeras, pero por lo demás carecen de interés.
Orden Diptera Suborden Nematocer Nematocera a Familia Trichocerydae (Trichocera regelationis, T. saltator, T. maculipensis) Mosquitos de invierno, muy abundantes durante los meses más fríos del año. Sus larvas están activas cuando el resto de la fauna está ausente.
Suborden Brachycera Brachycera Familia Stratiomydae ( Hemeti Hemetiaa illuc illucens ens) Se observan en las últimas etapas del proceso pro ceso de descomposición, alimentándose de excrementos.
Suborden Cyclorrhapha Familia Syrphidae Moscas de aspecto similar a avispas o abejorros, con larvas muy típicas (gusanos cola de rata). Se encuentran fundamentalmente cerca de aguas muy sucias.
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Suborden Acalyptratae Familia Heleomyzid Heleomyzidae ae Familia Milichiidae Familia Sphaeroceridae Familia Dryomyzid Dryomyzidae ae Poco frecuentes, normales en las maderas húmedas. Familia Ephydridae
Moscas de hábitats muy húmedos, con co n larvas acuáticas.
Familia Drosophil Drosophilaa sp. sp.) Drosophilidae idae ( Drosophil Moscas de la fruta, que solo se encuentran ocasionalmente en cadáveres. Piophilidaee (Piophila casei) Familia Piophilida
De color oscuro brillante, en cuerpos que llevan muchos meses expuestos. Las larvas son capaces de dar grandes saltos.
Familia Sepsidae Muy abundantes alrededor de materia fecal o en descomposición. Las larvas presentan un gran cuerno respiratorio, mientras los adultos suelen ondear las alas.
Familia Coelopidae (Coelopa frigid a) a) De color marrón oscuro a negro, con tórax achatado, y cuerpo y patas muy peludos. Se encuentran sobre todo a la orilla del mar, especialmente cuando abundan las algas marinas (cadáveres en zonas acuáticas).
Suborden Calyptratae
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grisáceos.
Familia Calliphoridae (Calliphora vicina, C.vomitoria, Lucilia sericata, L.ilustris, Phormia regina, P. terranovae, Chrysomia rufifaciens, Cochlyomya macellaria) De lejos, las especies más representadas en los cadáveres. Moscas verde y azul botella, y los grandes moscardones negros. negro s.
Orden Choleoptera Familia Staphylinidae Son los escarabajos vagabundos, que llegan a las pocas horas de la muerte y permanecen activos en el proceso de descomposición. Tanto los adultos como las larvas pueden ser depredadores.
Familia Histeridae Histeridae (Saprimus sp., Dendrophilus sp. ) Se encuentran tanto en el proceso activo de descomposición como en las primeras etapas del secado. Son predadores, activos solo de noche.
Familia Derme Dermest stid idae ae ( Dermes Dermestes tes macu maculat latus us) Los llamados escarabajos de la piel, que solo so lo se encuentran cuando el cuerpo está totalmente seco.
Familia Silphidae ( Nicrophorus Nicrophorus orbicollis, orbicollis, Necrodes sp., Necrophilus americana, Necrobia Necrobia rufipes) Son los escarabajos carroñeros, clérigos o enterradores. Se alimentan tanto de carroña como de larvas de moscas.
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FICHA DE CAMPO PARA LA RECOGIDA DE MUESTRAS ENTOMOLOGICAS ENTOMOLOGICAS FECHA:
...................................................... CASO N°: ........................................................................
LOCALIDAD/PROVINCIA: ............................................................................................................... DIFUNTO: ............................................................................. EDAD: ................... SEXO: .................. VISTO ULTIMA VEZ CON VIDA: ..................................................................................................... FECHA EN QUE SE ENCONTRO: ..................................................................................................... DESCRIPCION DEL LUGAR: ............................................................................................................
Zona de la escena del crimen: Rural:
bosque………. zona de cultivo………… pastos . ………… maleza………… zona desértica ............... edificio al aire libre ............................ edificio cerrado…………… otros....................................... ....................... ................
Urbano/Suburbano: Urbano/Suburbano:
edificio cerrado………….. edificio al aire libre .......................... solar ........ …….. pavimento………….. contenedor de basura……………… otros...........................
Hábitat acuático:
estanque ………… lago……….. ensenada…………… riachuelo ................. río…………. canal de riego ……….. acequia……… golfo………. área pantanosa……. alcantarillado………….. mar…………. agua dulce………. agua salobre…… otros……
Exposición:
aire libre……………. enterrado……….………. ropa completa ....................... parcial……………. desnudo ……………….. porción del cuerpo vestido..................................................................................................... descripción de la ropa ............................................................................................................ tipo de restos en el cuerpo ......................................................................................................
Estado de descomposición:
fresco………………. hinchado…………. descomposición activa……………… putrefacción avanzada………… saponificación………… momificación………. desmembramiento ...........................................................................................