Lignina

Para la identificación de lignina usamos la reacción de Wiesner que produce una coloración roja-rosa o rojo cereza por la reacción con floroglucinol en ácido clorhídrico concentrado. Esta reacción sólo tiene carácter cualitativo dado que requiere que el polímero de lignina se halle en estado sólido para que sea posible la visualización de las estructuras lignificadas. El color rojo brillante se desarrolla debido a la presencia de grupos coniferaldehído en la lignina !sta junto con la celulosa forman parte de la pared secundaria lo que determina que ha"a menos agua " menos capacidad de hidratación al impregnar los poros sus mol!culas se forma por la polimerización de tres alcoholes #p-cumaril coniferil " sinapil$ que difieren en el grado de meto%ilación en la posiciones &' " &( en sus anillos aromáticos luego de que estos alcoholes se incorporan en el polímero de lignina reciben ciertos nombres) p-hidro%ifenil #*$ gua"acil #+$ " siringil #,$. a estructura polim!rica de la lignina se entrelaza con las microfibrillas de celulosa " tambi!n se une a las hemicelulosas " pectinas mediante enlaces !ster. El resultado es una red hidrofóbica que rodea los demás componentes de la pared a la que confiere ma"or resistencia " rigidez en dónde los alcoholes -/-alquil--hidro%icinamil de las ligninas se condensan con el floroglucinol para dar similares compuestos sólo en presencia de o%ígeno. 0eferencias1 http122333.biblio.colpos.m%14/4/2%mlui2bitstream2handle25/(652'4'27lmaraz89uen dia8:8;&8+anaderia86/55.pdf'?5/>>27nalisis-Practica- http122333.oepm.es2pdf2E,2////2///2/62/?2@2E,-6/?@?5895.pdf 

+ram positivas " negativas. El cristal violeta es violeta  es un colorante catiónico que penetra en todas las c!lulas bacterianas #tanto gram positivas como gram negativas$ a trav!s de la pared bacteriana. El lugol lugol es  es un compuesto formado por : 6 en equilibrio con A: " ,l #,iulterio ,iulterio$ $ los cuales están presente para solubilizar el "odo " actBan de mordiente haciendo que el cristal violeta se fije con ma"or intensidad a la pared de la c!lula bacteriana. El : 6 entra en las c!lulas " forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. a mezcla de alcohol-acetona que se agrega sirve para realizar la decoloración "a que en la misma es soluble el complejo :62cristal violeta.

os organismos gram positivos no se decoloran mientras que los gram negativos sí lo hacen. Para poner de manifiesto las c!lulas gram negativas se utiliza una coloración de contraste. *abitualmente es un colorante de color rojo como la safranina o la fucsina fucsina.. 7l t!rmino del protocolo las gram positivas se verán azulvioláceas " las gram negativas se verán rosas #si no se hizo la tinción de contraste$ o rojas #si se usó por ejemplo safranina$. El fundamento de la t!cnica se basa en las diferencias entre las paredes celulares de celulares  de las bacterias gram positivas " gram negativas. a pared celular de las bacterias gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglicano peptidoglicano además de dos clases de ácidos teicoicos1 teicoicos1 anclado en la cara interna de la pared celular " unido a la membrana plasmática se encuentran el ácido lipoteicoico lipoteicoico  " más en la superficie el ácido teicoico que teicoico que está anclado solamente en el peptidoglicano o mureína.. mureína Por el contrario la capa de peptidoglucano de las gram negativas es delgada " se encuentra unida a una segunda membrana plasmática e%terior #de composición distinta a la interna$ por medio de lipoproteínas. Ciene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana e%terior por lipoproteínas lipoproteínas.. a membrana e%terior está hecha de proteína proteínas s fosfolípido fosfolípidos s " lipopolisacárido lipopolisacáridos. s. Por lo tanto ambos tipos de bacterias se tiDen diferencialmente debido a estas diferencias constitutivas de la pared celular. a clave es el peptidoglicano "a que es el material que confiere su rigidez a la pared celular " las gram positivas lo poseen en mucha ma"or proporción que las gram negativas. a diferencia que se observa en la resistencia a la decoloración se debe a que la membrana e%terna de las gram negativas es soluble en solventes orgánicos orgánicos como por ejemplo la mezcla de alcohol2acetona. a capa de peptidoglucano que posee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta2"odo que se formó previamente " por lo tanto este complejo se escapa perdi!ndose la coloración azul-violácea por el contrario las gram positivas al poseer una pared celular más resistente " con ma"or proporción de peptidoglicanos no son susceptibles a la acción del solvente orgánico sino que este actBa deshidratando deshidratando los  los poros cerrándolos lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta2"odo " manteniendo la coloración azul-violeta.