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Determinación de Nitrógeno amínico: Método de Sorensen Aplicació Aplicación: n: Sirve Sirve para determ determinar inar N amínic amínicoo en muestras muestras líquida líquidass o extractos. extractos. La finalidad finalidad es es poder determ determinar inar la concentración de amoníaco o grupos amino libres de aminoácidos, péptidos y proteínas. Es útil para dosar aminoácidos libres en jugos de fruta, el grado de hidrólisis de una proteína, o amonio después de la destrucción de materia orgánica en el método de Kjeldahl, etc.
Determinación: Neutralizar Neutralizar 10 ml de muestra con NaOH 0,1 N usando fenolftaleína como indicador. Es importante no excederse en el agregado de NaOH, detenerse en el punto en que aparece una débil coloración rosada que persiste por 30 seg. Otra posibilidad es utilizar un pHmetro y llegar a pH 8. Agregar Agregar 10 ml de formol formol neutraliza neutralizado do recientem recientemente ente con fenolftal fenolftaleína eína y titular titular de inmediato inmediato la acidez acidez liberada con NaOH 0,1 N hasta ver el punto final. Tomar este último valor para el cálculo de N amínico y el primero para el cálculo de la acidez. Cálculo: g %N = V NaOH NNaOH 0,014 x 100/peso de muestra
DETERMINACION DEL CONTENIDO EN PROTEINAS (Método Sorensen-Walker) Fundamento Está técnica determina el contenido contenido en proteínas de la leche mediante una valoración ácido-base, ya que tras la adición adición de formol a la muestra, el formaldehido formaldehido se une a los grupos grupos amino de los aminoácidos de las proteínas dejando dejando los grupos carboxilos libres. Este hecho produce cambios cambios en la acidez titulable de la leche siendo valorada valorada con hidróxido sódico. sódico. La cantidad de hidróxido hidróxido sódico utilizado en la neutralización neutralización es utilizado para para calcular la cantidad de proteínas proteínas presente en la la muestra. Material • Bureta graduada en 0.1 mL. • Matraz erlenmeyer de 100 mL. • Pipetas de 10 mL y 5 mL. Reactivos • Solución de hidróxido sódico (0.1N). • Solución comercial de formol (40%). • Indicador: solución de fenoltaleína al 1 % Procedimiento • Tomar 10 mL de leche problema en un matraz erlenmeyer. • Añadir 20 mL de agua destilada y adicionar unas gotas de fenoltaleína. • Neutralizar la ácidez titulable natural de la leche con la solución de hidróxido sódico hasta la aparición de un color rosa. • Añadir posteriormente a la leche neutralizada 2 o 3 mL de formol para dejar libres los grupos carboxilos de los aminoácidos. Tras la adición del formol la muestra se vuelve a acidificar y se muestra nuevamente de color blanco. • Añadir unas gotas de fenoltaleína y valorar la acidez con hidóxido sódico, hasta la aparición nuevamente nuevamente del color rosa.