BIOKIMIKA-2015-INFORME-4 (1)

Año de la Inversión para para el Desarrollo Rural y la Seguridad Seguridad Alimentaria Universidad Nacional de Piura Facultad de Ingeniería Industrial EP Ing Agroindustrial Agroindu strial In!orme de "a#oratorio N$ %

&urso'

(io)uímica

Docente'

(lga &laudia Ruí* +on*ales

Practica'

E!ectos de temperatura so#re glucosa ,-idasa E!ecto de p. so#re la glucosa o-idasa

.orario'

"unes /01/2 am

3esa' Alumnos'

3,RE (ERE&.E ED+ARD .UAN&A (,(ADI""A .ENR4 3,"INA

PEDR,

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Efecto de la temperatura sobre glucosa oxidasa Introducción "a te temp mper erat atur ura a de dell me medi dio o in in!l !luy uye e mu muc5 c5o o en la ac acti tivi vida dad d de la las s en* en*im imas as "a temperatura óptima para la acción de en*imas es la temperatura del cuerpo de los anim an imal ales es )u )ue e osc oscil ila a en el in inte terv rval alo o de %6 a 7/ 8& 8& co con n ci cier erto to au aume ment nto o de la temper tem peratu atura ra del med medio io ocurre ocurre ace aceler leraci ación ón de la reacción reacción a con consec secuen uencia cia de la activación de las mol9culas de sustrato A la ve*: incluso un aumento pe)ueño de la temperatura de las en*imas: necesaria para la mani!estación de su actividad catalítica Empie* Emp ie*a a gra gradua dualme lmente nte:: la des desnat natura urali* li*aci ación ón de la en* en*ima ima cua cuando ndo se ace aceler lera a #ruscamente la temperatura y esta so#repasa los ;08& la inactivación de la en*ima con aumente de la temperatura del medio es irreversi#le Al #a
TUBO II

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6iscusión "a en*ima glucosa o-idasa +,- Nmero E& //%7 es una o-idorreductasa )ue catali*a la o-idación de la glucosa glucosa para para !ormar peró-ido de 5idrógeno y 5idrógeno y D1glucono1G1lactona D1glucono1G1lactona En las c9lulas contri#uye a degradar los a*cares 5acia sus meta#olitos meta#olitos "a glucosa o-idasa es ampliamente utili*ada para la determinación y cuanti!icación de glucosa li#re en los !luidos !luidos #iológicos: #iológicos: tales como sangre sangre y y orina orina:: en materia prima vegetal y en la industria de los alimentos Ciene adem=s muc5as aplicaciones en #iotecnología #iotecnología:: y se utili*a para la !a#ricación de #iosensores sensi#les a glucosa @

(onclusión

H A una elevada temperatura predomina la desnaturali*ación con p9rdida precipitada de la actividad catalítica Por tanto las en*imas muestran una temperatura óptima de acción "os límites de actividad para la mayor parte de las en*imas tiene lugar entre los /0$& y ;0$& la temperatura óptima para las en*imas en el cuerpo se 5all alrededor de %?$& H El !actor por el cual un proceso #iológico aumenta para un incremento de temperatura de /0$& es el coe!iciente de temperatura o J/0 El J/0 para la mayor parte de las en*imas varía entre /; y % Referencias bibliogr7ficas bibliogr7ficas H (io)uímica ilustrada de .ARPER K edición /?ava 1 P=g H Principios de (io)uímica: 3c+raL .ill: /M>M H 5ttp'BB5tmlrincondelvagocomBe 5ttp'BB5tmlrincondelvagocomBe!ecto1de1la1temperatur !ecto1de1la1temperatura1y1del1p51so#re1unaen*im a1y1del1p51so#re1unaen*ima5tml a5tml H 5ttp'BBapuntesde#io)uimicatripodco 5ttp'BBapuntesde#io)uimicatripodcomBid>5tml mBid>5tml



Efecto del p8 sobre la glucosa oxidasa Introducción Para cada en*ima e-iste un óptimo de p. en el )ue se crean las condiciones m=s !avora !avora#le #les s para para el manten mantenimi imient ento o de la con!or con!ormac mación ión !uncio !uncional nalmen mente te activa activa de la mol9cula "os grupos amino y car#o-ilo de los restos de amino=cidos ioni*ados a una magnitud de p. determinada: participan en el mantenimiento de la con!ormación de la mol9cula proteica necesaria para la con!rontación de los centros catalíticos de la en*ima y !avorecen tam#i9n a su ligación con el sustrato A magnitud de p. distinta se altera la ioni*ación de los grupos correspondientes: y como resultados se rompen los enlaces )ue aseguran la !ormación de los centros catalíticos: y la en*ima se inactiva A los valores del p. muy altos o muy #a
Iden Identi tifc fcar ar los los camb cambio ios s de pH en el react eactiv ivo o de trabajo, sustancia buer con la glucosa oxidasa.

9RO(E6IMIE$TO) Calibración del equipo



1Una ve* logrado la medición correcta ya podemos medir las muestras de cada grupo Medición de la Absorvancia

1Preparar la muestra y agregar .&l o Na,. segn sea el caso 1Agregar / microlitros microlitr os de glucosa y 5omogeni*ar 1Incu#ar por /0 minutos a %?$& 1Antes de reali*ar la medición en el espectro!otómetro: limpiar las paredes del tu#o de ensayo para evitar malas lecturas y errores 1Reali*ar la lectura en el espectro!otómetro y los c=lculos correspondientes Metodología

RT $aO8 #%#"$ 8(l #%#"$ &lucosa Incubar "#min

TUBO I " ml #%" ml : " ul ,- (

TUBO II " ml : : " ul ,- (

TUBO III " ml : #%" ml " ul ,- (

*$E!O) Resultados mesa " Tubo I Tubo II Tubo III

*bsorbancia

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6iscusión ;im7tica+ (oncentración del sustrato 1 A mayor

concentración del sustrato: a una concentración !iima1 en>ima 1 Siempre y cuando 5aya sustrato disponi#le: un aumento en la concen concentra tració ción n de la en*im en*ima a aument aumenta a la veloci velocidad dad en*im= en*im=tic tica a 5acia 5acia cierto cierto límit límite e



mesas: de#ido a la presencia de algn !actor e-terno o una manipulación )ue puede )ue 5aya 5ec5o )ue nuestros resultados varíen &omo una mala incu#ación o adición de los reactivos o sustrato QEn*ima )ue o-ida la glucosa dando como resultado al D1glucono1delta1lactona: )ue )ue a su ve* se 5idrol 5idroli*a i*a a =cido =cido glucón glucónico ico y peróperó-ido ido de 5idróg 5idrógen eno o por por la lactonasa Cra#a
(onclusión

Ceóricamente el p. óptimo de acción de la glucosa o-idasa est= entre % y ? por lo tanto al desarrollar la pr=ctica podemos concluir )ue las muestra a las )ue se les agregó .&l y a las )ue no se les agrego ni .&l ni Na,. son las )ue m=s acción en*im=tica 5an tenido

Algunos resultados variaron muc5o de lo )ue teóricamente es lo correcto y esto nos da a entender )ue 5u#ieron otros !actores )ue a!ectaron a la acción en*im=tica en las muestras

Referencias bibliogr7ficas

Nelson D y &o- 3 200? "e5ninger' Principios de (io)uímica ;ta edición 3adrid: Editorial ,mega Plumer D /M>/ Introducción a la (io)uímica Pr=ctica Editorial 3ac+raL .ill Stryer " /MM; (io)uímica 7ta edición (arcelona: Editorial Reverte (iología y Juímica /era edición 3adrid: Editorial Santillana (io)uímica Ilustrada 2>ava edición: Editorial 3ac+raL .ill

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