Jurnal Praktikum Mikrobiologi Dasar Perkenalan Alat dan Sterilisasi Erna Pali, Aditya Setiawan, Alimaturrosyidah, Alimaturrosyidah, Nurlilayanti, Nurdiah, Nur Aini, Oktafanie Mega S. . elom!ok "A Praktikum Mikrobiologi Dasar #akultas Matematika dan $lmu Pengetahuan Alam
Abstrak
Sterilisasi adalah suatu bentuk usaha untuk membebaskan alat%alat atau bahan%bahan dari segala bentuk kehidu!an terutama mikroba. Praktikum Praktikum ini bertu&uan untuk mengetahui 'ara%'ara sterilisasi, &enis%&enis !eralatan%!eralatan yang digunakan dalam !raktikum serta kegunaannya. Praktikum Praktikum ini dilaksanaka dilaksanakan n !ada hari Selasa, () Oktober Oktober "(*+ !ada !ukul (.*(%**.+( (.*(%**.+( -$A -$A yang bertem!at di /aboratorium Mikrobiologi dan 0enetika Molekuler, #akultas Matematika dan $lmu Pengetahua Pengetahuan n Alam, Alam, 1ni2ersitas 1ni2ersitas Mulawarman Mulawarman,, Samarinda. Samarinda. Pada saat !erkenalan alat dilaboraturium
ada ada ma'am ma'am%m %ma'a a'am m !eral !eralata atan n se!ert se!ertii autoklave, autoklave, vortex, vortex, tabun tabung g reaksi reaksi dan lain%l lain%lai ain. n. Pada Pada !raktikum ini alat yang disterilkan adalah 'awan !etri. 1ntuk mensterilkan alat digunakan metode ua! bertekanan dan metode ua! bertekanan mengg enggu unaka nakan n autoklave. esim!ulan autoklave. esim!ulan yang dida!at !ada !ada !rak !rakti tiku kum m ini ini iala ialah ada ber berbaga bagaii ma'a ma'am m !eralatan yang ada di laboraturium yang terdiri dari !eralatan gelas se!erti tabung reaksi dan gelas ukur serta !eralatan dari kayu atau logam se!erti s!atu s!atula, la, o2en o2en dan dan inkub inkubato ator, r, dari dari semua semua alat alat yang yang diseb disebut utkan kan diata diatass memi memili liki ki fungs fungsii dan kegunaan masing%masing. Kata Kunci: Peralatan, Sterilisasi, Mikroba anggal Praktikum3 ) Oktober "(*+4 Diserahkan anggal ** Oktober "(*+.
Sebelum melakukan !raktikum mengena mengenaii Pendahuluan !eralatan yang ingin kita gunakan harus Mikr Mikrob obio iolo logi gi mem!e em!ela la&a &ari ri menge engena naiidist dister eril ilka kan n dahu dahulu lu.. Ster Steril ilis isas asii yaitu !roses organisme hidu! yang berukuran mikrosko!is.membunuh segala bentuk kehidu!an mikroorganisme Duni Duniaa mikro ikroor org ganis anism me terd terdir irii dari dari lim limayang ada dalam sam!el> sam!el>'ont 'ontoh, oh, alat%ala alat%alatt atau atau kelom!ok organisme3 bakteri, !roto5oa, 2irus,lingkungan tertentu Dalam bidang bakteriologi serta rta alga algaee dan 'end endawa awan mikr ikrosko! sko!iis.kata sterilisasi sering di!akai untuk Sterilisasi adalah suatu usaha untuk menggambarkan langkah yang diambil agar men'a!ai membebaskan alat%alat atau bahan dari segalatu&u tu&uan an meniad meniadak akan an atau membu membunu nuh h semua sem ua bentuk ben tuk bentuk kontaminasi dari mikroba. Proseskehidu!an mikroorganisme 6:7. steri sterili lisas sasii alat alat dan mediu medium m dalam dalam kegiat kegiatan an =ahan atau !eralatan yang di!ergunakan dalam !raktikum atau !enanganan sam!el mikroba bidang mikrobiologi mikrob iologi harus haru s dalam keadaan steril. s teril. sangat sangat dibutuhk dibutuhkan an sterili sterilisasi sasi.. A!abil A!abilaa teknik teknik Steril Steril artinya artinya tidak tidak dida!atk dida!atkan an mikroba mikroba yang steri sterili lisas sasii tidak tidak diter ditera!k a!kan an maka maka hasil hasil yang yangtida tidak k diha dihara ra!k !kan an keha kehadi dira ranny nnya, a, baik baik yang yang di'a di'a!a !aii tida tidak k maksi aksima mall dan dan meni menimb mbul ulka kan nmeng enggan gangu kehid hidu!an u!an dan !ros !rosees yang ang berbagai kontaminasi baik dari alat mau!undiker&akan 6;7. 6*7.. media tumbuh mikroba 6*7 Sela Selama ma ster steril ilis isas asii alat alat,, medi mediaa dan dan baha bahan n !erlu !er lu Pengena Pengenalan lan alat%ala alat%alatt laborato laboratorium rium !enting !entingdist di ster eril ilka kan. n. Media Media adalah adalah susun susunan an bahan bahan baik baik bahan bahan dilak lakukan ukan unt untuk kese kesellamat amataan ker&a er&a saat aatalami ?se!e ?se!erti rti tauge, tauge, kenta kentang, ng, dagin daging, g, telur telur,, melakukan melakukan !enelitian. !enelitian. Sterilisasi Sterilisasi adalah usahawortel dan sebagainya nya@ atau!un bahan buatan untuk membebaskan alat%alat dari mikroba yang?berb berbeentuk ntuk seny enyawa kim kimia, ia, org organik nik ata atau!un u!un tidak diinginkan. anorganik@ yang di!ergunakan untuk Asisten Pendamping: *. 8e! 9ikmat ". Ersaliany Ersaliany Nurul, :. Nur !ertumbuhan dan !erkembangbiakan !erkembangbiaka n mikroba Maulida ;.
bertu bertu&ua &uan n untuk untuk steri sterili lisas sasii yang akan digunakan dalam !raktikum. Manfaat dari !raktikum ini adalah
/aboratorium Mikrobiologi dan =ioteknologi, =iologi, #M$PA 1nmul
Jurnal Praktikum Mikrobiologi Dasar agar !raktikan mengetahui bagaimana 'ara mensterilisasikan !eralatan yang akan ; digunakan sebelum di!akai untuk melakukan !embuatan medium dan lai%lain. Metode Praktikum Waktu dan Tempat
'air. Magnetik Stirer Menghomogenkan larutan
+
=atang Magneti'
1ntuk mengambil magneti' stirer
)
Corte
1ntuk menghomogenkan larutan atau 'am!uran
$nkubator
1ntuk menginkubasi bakteri
Pinset
1ntuk men&e!it ob&ek glass dan 'o2er glass. Mengambil ob&ek.
Objek Glass
em!at meletakkan ob&ek atau s!esimen
Cover Glass
1ntuk menutu! ob&ek glass
Beaker Glass
Sebagai untuk larutan
Hot late
1ntuk memanaskan, mereaksikan
Praktikum ini dilaksanakan !ada hari Selasa, () Oktober "(*+ !ada !ukul (.*(%**.+( -$A yang bertem!at di /aboratorium Mikrobiologi dan 0enetika Molekuler, #M$PA, 1ni2ersitas Mulawarman, Samarinda.
Bahan-bahan =ahan yang digunakan yaitu karet gelang, kertas, air, ka!as, alumunium foil, aBuades, sarungF tangan, tissue, hand sanitizer , masker, kertas label dan alat tulis lengka!.
Metodologi Percobaan Sterilisasi dengan menggunakan autoklaf, menggunakan air kemudian di!anaskan dalam tem!at tertutu!. Pada !roses !emanasan menghasilkan ua! &enuh bertekanan dengan*( tem!eratur diatas *(( dera&at 'el'ius. Sebagian besar mikroorganisme tergolong bakteri, terbunuh dalam autoclave selama !emanasan selama "( menit, suhu** *"( dera&at 'elsius dengan tekanan tertentu.
asil dan Pembahasan =erdasarkan hasil !raktikum yang telah*" dilakukan, dida!atkan hasil sebagai berikut3 abel *.* Perkenalan Alat dan #ungsi
tem!at menaruh
No
Nama Alat
#ungsi
*:
Sebagai wadah
*
Autoclave
1ntuk mensterilkan alat dan mrdia
/abu Erlenmeyer
*;
Jarum Ose
1ntuk mengambil media yang 'air dengan ukuran tertentu
1ntuk menginokulasikan bakteri, fungsi dan yeast.
*+
Hocke! "tick
1ntuk meratakan sus!ensi !ada media !adat
*)
8awan Petri
-adah untuk meletakkan media
*
Gak reaksi
"
:
Mi'ro Pi!et
Blue Tip dan =lue i! ?(,*@ untuk Yellow Tip mengambil biakan mikroba dari media 'air,
tabungSebagai tem!at tabung reaksi
/aboratorium Mikrobiologi dan =ioteknologi, =iologi, #M$PA 1nmul
Jurnal Praktikum Mikrobiologi Dasar *F
Pi!et 2olume
1ntuk larutan
mengambil
*
S!atula
1ntuk media
mengambil
"(
/am!u =unsen Sebagai tem!at untuk menyalakan a!i
"*
Cuvet
1ntuk tem!at mensentri2uge
""
0elas ukur
1ntuk bahan
":
"hakker
1ntuk menghomogenkan dan menumbuhkan bakteri
";
#e$ri%ator
1ntuk menyim!an media agar tidak mem!er'e!at !ertumbuhan mikroba
mengukur
Pada !raktikum ini digunakan sterilisasi ua! bertekanan, sterilisasi ua! bertekanan menggunakan autoklaf. Autoklaf adalah sterilisasi untuk alat dan medium kultur åan. Alat%alat yang beru!a glass ukur mau!un 'awan !etri sebelum digunakan harus disterilkan dahulu. Demikian &uga medium yang sudah dimasukkan ke dalam botol medium harus disterilkan &uga. Dengan !emanasan di dalam autoklaf maka bakteri dan mikrobia da!at mati akibat suhu yang tinggi ?*"(H8@ dan tekanan ua! air yang besar ?*,+ kg>'m@ selama * menit. Autoklaf mem!unyai 'ara ker&a yang ham!ir sama dengan alat masak !ressure 'ooker , sebab alat ini meru!akan sebuah be&ana yang diisi air dan ditutu! ra!at%ra!at. Autoklaf ada yang model listrik teta!i ada !ula yang harus diletakkan diatas kom!or gas. Jika alat ini di!anaskan, maka akan ter&adi ua! air yang tidak da!at keluar karena be&ana tertutu! ra!at, sehingga tekanan di dalam autoklaf naik sam!ai melebihi tekanan normal 6+7.
=ila ob&ek yang disterilisasi banyak, transfer !anas !ada bagian dalam autoclave akan lambat, sehingga ter&adi !er!an&angan waktu !emanasan total untuk memastikan bahwa semua ob&ek bersuhu "+ /aminar air1ntuk mengisolasi *"* dera&at 'elsius untuk waktu *(%*+ menit. $low cabinet dan mentransfer Medium yang disterilkan ditem!atkan di dalam mikroba autoclave selama *+%"( menit. Medium yang akan disterilkan ditem!atkan dalam wadah yang agak Pada tabel tersebut da!at kita lihat berbagai ke'il. Setelah !intu autoclave ditutu! ra!at, barulah ma'am alat yang digunakan dalam !raktikum kran !ada !i!a ua! dibuka dan tem!eratur akan strerilisasi. Masing%masing alat memiliki fungsi dan terus%menerus naik sam!ai *"* dera&at 8elsius. kegunaan tersendiri. Setia! alat%alat tersebut harus enaikan tekanan ua! ini akan disterilkan terlebih dahulu sebelum digunakan. Dengan mengetahui fungsi dan kegunaan dari setia! menyebabkan air mendidih di atas *(( dera&at alat dihara!kan mam!u menggunakan alat tersebut 'elsius. A!abila tekanan ua! tidak diatur, maka akan sam!ai bertambah tinggi. 8ara !engaturan dengan baik.
Pada !raktikum !erlu dilakukan sterilisasitekanan ua! dalam alat ini adalah dengan sebelum menggunakan alat dan bahan untuk mengatur katub yang terda!at !ada tutu! menghilangkan mikroba yang terda!at dalamautoklaf. arena suhu akan naik sesuai dengan alat dan bahan tersebut.. Sterilisasi adalah suatutekanan ua! yang dikehendaki katu! akan !roses untuk membunuh segala bentuk membuka karena desakan ua!. Dengan demikan kehidu!an mikroorganisme yang ada di dalam sam!eltekanan akan da!at di!ertahankan sebab sebagian atau 'ontoh, alat%alat atau lingkungan tertentu.ua! keluar. 1ntuk memantau tekanan ua! dan Dalam bidang bakteriologi kata sterilisasi seringsuhu, autoklaf dilengka!i denan manometer dan di!akai untuk menggambarkan langkah yang diambilthermometer 6+7. agar men'a!ai tu&uan meniadakan atau membunuh semua bentuk kehidu!an mikroorganisme. 8araabel *." Sterilisasi alat yang digunakan Alat 8ara er&a sterilisasi yang te!at tergantung !ada &enis dan No sifat bahan yang disterilkan. /aboratorium Mikrobiologi dan =ioteknologi, =iologi, #M$PA 1nmul
Jurnal Praktikum Mikrobiologi Dasar *.
8awan !etri Membungkusnya dengan kertas, sisi kanan dan kiri dili!at membentuk segitiga, lalu li!at ke bawah membentuk kotak.
!a"tar Pustaka
6*7
Dwid&ose!utro, D. &asardasar 'ikrobiolo%i( Jakarta3 D&ambatan3 *F, !!. ++% +)
Dari tabel diatas da!at dilihat berbagai &enis !eralatan yang terda!at !ada laboratorium setia! alat 6"7 0abriel, J. #. )isika *edokteran Jakarta3 E083 *), !!. :"%: memiliki atau mem!unyai fungsi dan kegunaan. Dengan mengetahui berbagai alat dan kegunaannya 6:7 9idayat, N, M. 8. Padaga dan S. Suhartini. dihara!kan da!at menggunakan berbagai alat yang 'ikrobiolo%i +ndustri
6+7 Kesimpulan esim!ulan yang dida!at !ada !raktikum ini ialah ada berbagai ma'am !eralatan yang ada di laboraturium yang terdiri dari !eralatan gelas se!erti tabung reaksi dan gelas ukur serta !eralatan dari kayu atau logam se!erti s!atula, o2en dan in'ubator, dari semua alat yang disebutkan diatas memiliki fungsi dan kegunaan masing%masing. Alat%alat yang telah digunakan
9endrayono, D.P dan -i&ayani, A. eknik ultur Jaringan
disterilisasi dengan autoclave !ada suhu *"( dera&at 'elsius dan ditunggu, waktu yang di!erlukan autoclave untuk sterilisasi sekitar *+%:( menit tergantung banyaknya alat yang disterilisasi.
/aboratorium Mikrobiologi dan =ioteknologi, =iologi, #M$PA 1nmul