DASAR TEORI HITUNG CAWAN Perhitungan jumlah suatu bakteri a!at melalui berbagai ma"am uji se!erti uji kualitati# k$li#$rm %ang se"ara lengka! teriri ari tiga taha! %aitu uji !enuga &uji kuantitati#' bisa engan met$e (PN)' uji !enguat an uji !elengka!* Waktu' Waktu' mutu sam!el' bia %a' tujuan analisis meru!akan bebera!a #akt$r #akt$r !enentu !enentu alam uji kualitati# kualitati# k$li#$rm* +akteri k$li#$rm k$li#$rm a!at ihitung ihitung engan engan menggunaka menggunakan n met$e met$e "a,an !etri &met$e &met$e !erhitunga !erhitungan n se"ara se"ara tiak langsung %ang iasarkan iasarkan !aa angga!an angga!an bah,a setia! sel %ang a!at hiu! akan berkembang menjai satu k$l$ni %ang meru!akan suatu ineks bagi jumlah $rganisme %ang a!at hiu! %ang tera!at !aa sam!el) &Penn' -..-)* /umlah mikr$ba alam suatu bahan a!at ihitung menggunakan menggunakan bebera!a "ara* Namun Namun se"ara garis besar ibeakan menjai 0 -* Cara Cara !er !erhi hitu tung ngan an langs langsun ung g Cara !erhitungan langsung berarti kita a!at mengetahui bebera!a jumlah mikr$ba !aa saat ilakukan ilakukan !erhitunga !erhitungan* n* Hasil !erhitunga !erhitungan n se"ara langsung menunjukka menunjukkan n seluruh seluruh jumlah jumlah mikr$ba %ang masih hiu! mau!un %ang suah mati* Aa!un "aran%a0 a* Pembua Pembuatan tan !re! !re!ara aratt seerh seerhana ana %ang %ang i,ar i,arnai nai b* (enggunakan ruang hitung 1* Cara Cara !erh !erhitu itunga ngan n tiak tiak langsu langsung ng Cara !erhitungan tiak langsung' hasil !erhitungan jumlah mikr$ba baru a!at i!er$leh kemuian setelah ilakukan !erlakuan terlebih ahulu* Hasil !erhitungan tiak langsung akan menunjukan jumlah mikr$ba %ang masih hiu! saja* Aa!un "aran%a 0 a* (enghitung (enghitung jumlah t$tal mikr$ba mikr$ba &T$t &T$tal al !late !late "$unt "$unt 2 angka angka lem!eng lem!eng t$tal) t$tal) b* Cara !engen"eran "* (em!erkira (em!erkirakan kan jumlah jumlah terke"i terke"ill mikr$ba mikr$ba %ang %ang aa &(PN &(PN 2 ($st ($st Pr$bable Pr$bable Number Number)) * Cara Cara keke kekeru ruha han n &turb &turbi iita itas) s) Cara !erhitungan tiak langsung a!at igunakan baik untuk bahan !aat mau!un "air* 3husus untuk bahan !aat maka sebelum ilakukan !erhitungan bahan itu !erlu ilakukan !elarutan atau ibuat sus!ense' engan mem!erhitungkan #a"t$r !engen"erann%a* Tujuan !engen"eran (enghi (enghitun tung g jumlah jumlah kuman kuman aer$b aer$b %ang %ang tera! tera!at at alam alam !r$uk !r$uk $bat' $bat' $bat $bat traisi$ traisi$nal nal'' makana makanan' n' k$smetik an alat kesehatan*
Prinsi! !engen"eran
Seiaan %ang telah ih$m$genkan an ien"erkan engan !engen"eran %ang sesuai itanam !aa meia agar &PCA2 !late "$unt agar)' setelah inkubasi !aa suhu 456" selama 17879 jam ihitung jumlah k$l$ni %ang tumbuh* Satuan !erhitungan jumlah mikr$ba ikenal engan istilah C$l$n% :$rming Units&C:Us) untuk !erhitungan bakteri an ka!ang;khamir* :a"t$r !engen"eran 2 !engen"eran < jumlah %ang itumbuhkan /umlah k$l$ni 2 jumlah < -; #a"t$r !engen"eran S%arat k$l$ni %ang itentukan untuk ihitung aalah sebagai berikut0 -*
Satu k$l$ni ihitung - k$l$ni
1*
Dua k$l$ni %ang bertum!uk ihitung - k$l$ni
4*
+ebera!a k$l$ni %ang berhubungan ihitung - k$l$ni
7*
Dua k$l$ni %ang berhim!itan an masih a!at ibeakan ihitung 1 k$l$ni
=*
3$l$ni %ang terlalu besar &lebih besar ari setengah luas "a,an) tiak ihitung
>*
3$l$ni %ang besarn%a kurang ari setengah luas "a,an ihitung - k$l$ni*
Stanar !erhitungan Ca,an %ang i!ilih aalah %ang menganung jumlah k$l$ni 468466 k$l$ni' bebera!a k$l$ni %ang bergabung menjai satu ihitung sebagai satu k$l$ni' mau!un k$l$ni %ang se!erti seeretan garis tebal* Hasil %ang ila!$rkan teriri ari 1 angka' %aitu angka !ertama ie!an k$ma an angka ibelakang k$ma* /ika angka ketiga lebih besar ari = maka harus ibulatkan satu angka lebih tinggi !aa angka keua* -681 147 566
-684 19 -1=
-6
-687 1'4<-67
SPC &stanar !late "$unt)
1'4<-6=
jika semua !engen"eran menghasilkan angka kurang ari 46 k$l$ni !aa "a,an !etri maka han%a k$l$ni !aa !engen"eran terenah %ang ihitung* Hasiln%a ila!$rkan sebagai kurang ari 46 k$l$ni ikalikan engan #a"t$r !engen"eran teta!i jumlah sebenarn%a harus i"antumkan alam tana kurung*
-681 ->
-684 -
-687 ?4'6 < -64 &-'> < -64)
SPC &stanar !late "$unt)
/ika semua !engen"eran menghasilkan angka lebih ari 466 k$l$ni !aa "a,an !etri maka han%a k$l$ni !aa !engen"eran tertinggi %ang ihitung* Hasiln%a ila!$rkan sebagai lebih ari 466 k$l$ni ikalikan engan #a"t$r !engen"eran teta!i jumlah sebenarn%a harus i"antumkan ialam kurung* Cara !erhitungan han%a @ bagian saja kemuian hasiln%a ikalikan* -681 T+UD
-684
-687 SPC &stanar !late "$unt) ?4'6 < -6> &4'> < -6>)
4==
/ika semua !engen"eran menghasilkan angka antara 468466 k$l$ni !aa "a,an !etri* Perbaningan ari !engen"eran tertinggi an terenah ari keua !engen"eran lebih ke"il atau sama engan 1' tentukan rata8rata ari keua !engen"eran tersebut engan mem!erhitungkan !engen"erann%a* /ika !erbaningan antara hasil !engen"eran tertinggi an terenah hasiln%a lebih ari 1 maka %ang ila!$rkan han%a hasil %ang terke"il* -681 1.4
-684 7-
-687 7
SPC &stanar !late "$unt)
4'= < -67 &rata8rata -'7 2 ?1)
-76
41
1
-'7 < -67 &rata8rata 1'42 1)
Perhitungan u!l$ /ika igunakan ua "a,an !etri &u!l$) !er!engen"eran' ata %ang iambil harus ari keua "a,an tersebut' tiak b$leh iambil salah satu' meski!un salah satu ari "a,an u!l$ tiak memenuhi s%arat 468466 k$l$ni* +erikut "$nt$h u!l$ 0 -681
-684
-687
-5=
->
7
-'. < -67
169
-5
1
rata8rata !engen"eran -681
7
-687 -'= < -67
-681 -49 ->1
-684 71 74
1
SPC &stanar !late "$unt)
SPC &stanar !late "$unt)
Rata8rata !engen"eran -681
3arena !erbaningan !engen"eran -684 an -681 2 1'7
-681 1.6
-684 4>
7
196
41
1
-687 4'- < -67
SPC &stanar !late "$unt)
rata8rata !engen"eran -681 3arena !erbaningan !engen"eran
-684
an -681 82 -'1
:ariaB &-.9.) men%atakan aa bebera!a "ara %ang a!at igunakan untuk menghitung atau mengukur jumlah jasa renik i alam suatu sus!ensi atau bahan' %ang a!at ibeakan atas bebera!a kel$m!$k %aitu 0 A* Perhitungan jumlah sel -* Hitungan mikr$sk$!ik 1* Hitungan "a,an 4* (PN &($st Pr$bable Number) +* Perhitungan massa sel se"ara langsung -* $lumetrik 1* Graimetrik 4* 3ekeruhan &turbiimetri) C* Perhitungan massa sel se"ara tiak langsung -* Analisis k$m!$nen sel 1* Analisis !r$uk katab$lisme 4* Analisis k$nsumsi nutrien
Dari met$e8met$e tersebut' met$e hitungan "a,an !aling ban%ak igunakan* Hal ini isebabkan met$e hitungan "a,an meru!akan "ara %ang !aling sensiti# untuk menghitung jumlah mikr$ba karena0 -* Han%a sel %ang masih hiu! %ang ihitung 1* +ebera!a jenis mikr$ba a!at ihitung sekaligus 4*
Da!at igunakan untuk is$lasi an ienti#ikasi mikr$ba karena k$l$ni %ang terbentuk mungkin berasal ari satu sel engan !enam!akan !ertumbuhan %ang s!esi#ik* Prinsi! ari met$e hitungan "a,an aalah menumbuhkan sel mikr$bia %ang masih hiu! !aa met$e agar' sehingga sel mikr$bia tersebut akan berkembang biak an me mbentuk k$l$ni %ang a!at ilihat langsung engan mata tan!a menggunakan mikr$sk$! &:ariaB' -..4)*
(et$e hitungan "a,an a!at ibeakan atas ua "ara %aitu 0 -* (et$e tuang &!$ur !late) 1* (et$e !ermukaan &sur#a"e ; s!rea !late) Paa !erhitungan menggunakan met$e "a,an' i!erlukan suatu !engen"eran agar jumlah k$l$ni mikr$bia %ang aa !aa "a,an a!at ihitung an sesuai stanar' %aitu berjumlah 46 466 !er "a,an* Pengen"eran ilakukan se"ara e"imal %ntuk memuahkan !erhitungan* Perhitungan met$e "a,an menggunakan rumus sebagai berikut 0 :akt$r !engen"eran 2 !engen"eran < jumlah %amg itumbuhkan /umlah k$l$ni &SPC) 2 jumlah k$l$ni < Untuk mela!$rkan suatu analisis mikr$bi$l$gi igunakan suatu stanar %ang isebut FStanar Plate C$unt %ang menjelaskan "ara menghitung k$l$ni !aa "a,an serta "ara memilih ata %ang aa untuk menghitung jumlah k$l$ni alan suatu "$nt$h* Cara menghitung k$l$ni !aa "a,an aalah sebagai berikut 0 -* Ca,an %ang i!ilih an ihitung aalah %ang menganung jumlah k$l$ni antara 46 sam!ai 466* 1* +ebera!a k$l$ni %ang bergabung menjai satu meru!akan suatu kum!ulan k$l$ni %ang besarimana jumlah k$l$nin%a iragukan' a!at ihitung sebagai satu k$l$ni* 4* Suatu eretan &rantai) k$lini %ang terlihat sebagai suatu garis tebal ihitung sebagai satu k$l$ni* Seangkan ata %ang ila!$rkan sebagai SPC harus mengikuti !eraturan sebagai berikut 0
-* Hasil %ang ila!$rkan han%a teriri ari ua angka' %aitu angka !ertama ibelakang k$ma an angkan keua ibelakang k$ma* /ika angka ketiga sama engan atau lebih besar ari =' harus ibulatkan satu angka lebih tinggi !aa angka keua* 1* /ika semua !engen"eran %ang ibuat untuk menanam menghasilkan angka kurang ari 46 !aa "a,an !etri' han%a jumlah k$l$ni !aa !engen"eran %ang terenah %ang ihitung* Hasiln%a ila!$rkan sebagai kurang ari 46 ikalikan engan besarn%a !engen"eran' ta!i jumlah %ang sebenarn%a harus i"antumkan* 4* /ika semua !engen"eran %ang ibuat untuk menanam menghasilkan angka lebih besar ari 466 !aa "a,an !etri' han%a jumlah k$l$ni !aa !engen"eran %ang tertinggi %ang ihitung* Hasiln%a ila!$rkan sebagai lebih ari 466 ikalikan engan besarn%a !engen"eran' ta!i jumlah %ang sebenarn%a harus i"antumkan* 7* /ika "a,an ari ua tingkat !engen"eran menghasilkan k$l$ni engan jumlah antara 46 an 466' an !erbaningan antara hasil tertinggi an terenah ari keua !engen"eran tersebut lebih ke"il atau sama engan 1' %ang igunakan aalaha rata8ratan%a* /ika !erbaningan antara hasil tertinggi an terenah ari keua !engen"eran tersebut lebih besar ari 1' %ang ila!$rkan han%a hasil terke"il* =* /ika igunakan ua "a,an Petri &u!l$) !er !engen"eran' ata %ang iambil harus ari keua "a,an tersebut' meski!un salah satun%a tiak memenuhi s%arat iantara 46 an 466*
3$l$ni aalah kum!ulan ari mikr$bia %ang memilki kesamaan si#at8si#at se!erti bentuk' susunan' !ermukaan' an sebagain%a* Si#at8si#at %ang !erlu i!erhatikan !aa k$l$ni %ang tumbuh i !ermukaan meium aalah &D,ij$se!utr$' -.59) 0 -* +esar ke"iln%a k$l$ni* Aa k$l$ni %ang han%a seru!a suatu titik' namun aa !ula %ang melebar sam!ai menutu! !ermukaan meium* 1* +entuk* Aa k$l$ni %ang bulat' aa %ang memanjang* Aa %ang te!in%a rata' aa %ang tiak rata* 4* 3enaikan !ermukaan* Aa k$l$ni %ang rata saja engan !ermukaan meium' aa !ula %ang timbul %aitu menjulang tebal i atas !ermukaan meium* 7* Halus kasarn%a !ermukaan* Aa k$l$ni %ang !ermukaann%a halus' aa %ang !ermukaann%a kasar an tiak rata* =* Wajah !ermukaan* Aa k$l$ni %ang !ermukaann%a mengkilat' aa %ang !ermukaann%a suram* >* Warna* 3eban%akan k$l$ni bakteri ber,arna ke!utihan atau kekuningan* 5* 3e!ekatan* Aa k$l$ni %ang lunak se!erti lenir' aa %ang keras an kering* Paa !raktikum ini' bakteri %ang akan ihitung k$l$nin%a aalah Es"heri"hia C$li %ang meru!akan bakteri gram negatie berbentuk batang' bersi#at anaer$bi" #akultati#* Ukurann%a berkisar !aa 6'> < 1'684'6 m &Pel"Bar' -.9>)*
Sumber 0
D,ij$se!utr$' D* -.59* Dasar8Dasar (ikr$bi$l$gi* Penerbit Dja mbatan /akarta* :ariaB' S* -..4* Analisis (ikr$bi$l$gi Pangan* PT* Raja Gra#in$ Persaa /akarta* *-.9.* (ikr$bi$l$gi Pangan* PAU Pangan an GiBi IP+ +$g$r* S"hlegel' H*' G* -..7* (ikr$bi$l$gi Umum* Gajah (aa Uniersit% Press J$g%akarta* Suria,iria' Unus* -.9=* Pengantar (ikr$bi$l$gi U mum* Penerbit Angkasa +anung* Walu%$' K* 1667* (ikr$bi$l$gi Umum* U(( Press (alang*
