Laboratorium Ilmu Tanaman Jurusan Budidaya Pertanian Fakultas Pertanian UGM
PETUNJUK PRAKTIKUM
DASAR-DASAR FISIOLOGI TUMBUHAN
2013
TATA TERTIB PRAKTIKUM
PETUNJUK PRAKTIKUM 1.
2.
DASAR-DASAR FISIOLOGI TUMBUHAN (PNA 2200)
3.
4. 5. 6.
7.
Laboratorium Ilmu Tanaman Jurusan Budidaya Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Gadjah Mada Yogyakarta 2013 Lab.Ilmu Tanaman
8.
Praktikan harus sudah siap 15 menit sebelum praktikum mulai. Praktikan yang datang terlambat tidak diperkenankan mengikuti praktikum. Sebelum waktu praktikum praktikan tidak diperbolehkan masuk ke dalam laboratorium. Praktikan yang tidak dapat hadir harus memberikan keterangan sah secara tertulis. Praktikan yang 2 kali berturutturut tidak hadir tanpa memberikan keterangan yang sah, tidak diperkenankan mengikuti acara praktikum selanjutnya. Praktikan harus sudah mempelajari hal-hal yang berhubungan dengan acara praktikum yang akan dilakukan, dan sebelum praktikum diadakan tes. Nilai praktikum berdasarkan nilai tes, nilai pelaksanaan, dan nilai laporan. Setiap kelompok harus menulis nomor kelompok dan golongannya pada laporan praktikum. Setelah selesai praktikum, alat-alat harus dikembalikan pada tempatnya dalam keadaan bersih. Praktikan bertanggung jawab akan kerusakan alat-alat praktikum yang digunakan. Pada akhir setiap acara praktikum, praktikan harus membuat : a. Laporan sementara yang disahkan Ko.Assisten jaga. Laporan sementara berisi tentang data pengamatan b. Laporan akhir ditulis dengan rapi. Laporan akhir harus diserahkan satu minggu sesudah acara praktikum yang bersangkutan berakhir sesuai jadwal yang ditentukan. c. Laporan perbaikan, apabila laporan yang diserahkan masih ada kekurangan atau kesalahan, diserahkan sesuai dengan tanggal yang dicantumkan di dalam laporan Pada saat menyerahkan laporan, praktikan wajib meminta tanda tangan penerima pada kartu laporan. Mahasiswa berpakaian rapi (berkerah) dan mengenakan sepatu.
Lab.Ilmu Tanaman
PEDOMAN PEMBUATAN LAPORAN DAFTAR ISI (Halaman depan/cover) Acara LAPORAN PRAKTIKUM DASAR-DASAR FISIOLOGI TUMBUHAN (PNA 2200) Acara praktikum Nama NIM Gol / kelompok Nama rekan
: : : : :
1. 2. 3.
Acara 1. Acara 2. Acara 3. Acara 4. Acara 5. Acara 6. Acara 7. Acara 8.
Halaman Pengaruh faktor lingkungan terhadap laju fotosintesis ........... Pengaruh suhu terhadap laju respirasi aerob ....................... Potensial osmotik sel ........................................................... Pengukuran kehijauan dan kandungan klorofil daun ............. Pengaruh faktor lingkungan terhadap laju transpirasi ............ Pengukuran kandungan air nisbi .......................................... Mengamati densitas dan lebar stomata ................................ Mengamati penampang melintang bagian-bagian tanamn .....
Hari/Tgl Praktikum : Ko.Assisten : (Halaman 2 dan seterusnya)
Jadwal Praktikum
1. Tujuan acara praktikum 2. Tinjauan pustaka (singkat dan berhubungan dengan acara praktikum yang dilakukan) 3. Metode Pelaksanaan Praktikum 4. Hasil dan Pembahasan (grafik berdasarkan data matang) 5. Kesimpulan 6. Daftar Pustaka 7. Lampiran (data mentah dan perhitungan)
Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4 Minggu 5
: : : : :
Yogyakarta, Ko.Assisten
Praktikan
Tanda Tangan (Nama Terang)
Tanda Tangan (Nama Terang)
Lab.Ilmu Tanaman
Lab.Ilmu Tanaman
Acara 1 Acara 2 dan 3 Acara 4 dan 8 Acara 5 Acara 6 dan 7
1 10 14 17 20 23 25 27
1 ACARA 1 PENGARUH FAKTOR LINGKUNGAN TERHADAP LAJU FOTOSINTESIS Tujuan : Mengetahui pengaruh faktor lingkungan antara lain intensitas cahaya, warna, cahaya, dan suhu terhadap laju fotosintesis Latar belakang Fotosintesis adalah sebuah proses anabolisme yang terjadi pada semua organisme fotoautotrof. Pada proses fotosintesis terjadi proses penangkapan energi radiasi matahari dan diubah menjadi energi kimia dalam bentuk karbohidrat. Proses fotosintesis dapat diukur dengan menggunakan banyak cara. Fotosintesis merupakan gabungan dari banyak reaksi-reaksi antara, meskipun demikian secara keseluruhan reaksi fotosintesis tersebut dapat diringkas menjadi persamaan reaksi yang sederhana sebagai berikut (perhatikan tanda panah):
Oksigen yang diproduksi dalam proses fotosintesis serta pengetahuan mengenai anatomi daun dapat digunakan sebagai dasar untuk menciptakan sebuah metode yang sederhana yang dapat dipergunakan untuk menginvestigasi beberapa variabel fotosintetis. Pada struktur anatomi daun, banyak dijumpai ruang antar sel. Ruang antar sel tersebut secara normal akan diisi dengan gas untuk tujuan pertukaran (gas exchange). Kondisi inilah yang menjadi penyebab mengapungnya daun pada permukaan badan air pada saat daun tersebut dicelupkan. Akan tetapi, apa yang akan terjadi pada daun jika semua udara yang mengisi ruang antar sel ditarik keluar dari ruang udara di dalam daun? Apakah yang akan terjadi selanjutnya pada daun? Apabila kebutuhan dasar untuk fotosintesis dipenuhi semuanya, oksigen yang diproduksi oleh daun akan membentuk gelembung-gelembung gas dan daun akan terapung kembali. Pada praktikum yang akan dilakukan, pengukuran laju fotosintesis Lab.Ilmu Tanaman
2 mendasarkan kepada metode eksperimen. Pada metode ini, potongan-potongan kecil dari daun akan digunakan sebagai pengganti daun keseluruhan untuk melakukan piringan daun mengambang/floating leaf disk assay (FLDA). Metode FLDA dapat dipergunakan untuk menjawab beberapa pertanyaan, termasuk di dalamnya adalah: bagaimana pengaruh variasi intensitas cahaya, panjang gelombang atau konsentrasi CO2 terhadap laju fotosintesis? Salah satu masalah yang akan timbul pada saat mengukur laju fotosintesis dengan metode FLDA adalah berlangsungnya sebuah proses yang menjadi kompetitor dari fotosintesis pada waktu yang bersamaan, yaitu respirasi seluler, sebuah proses yang mengkonsumsi oksigen. Metode FLDA secara aktual akan mengukur laju fotosintesis mendasarkan kepada jumlah oksigen yang diproduksi dalam fotosintesis dikurangi dengan jumlah oksigen yang dipergunakan dalam respirasi selama periode yang sama. Metode FLDA mengukur laju fotosintesis bersih, yaitu keuntungan energi yang dibuat oleh tumbuhan. Aktivitas fotosintesis aktual pada kenyataannya lebih besar jika dibandingkan dengan yang terukur pada FLDA, dan biasanya disebut sebagai laju fotosintesis kotor. Apabila laju respirasi seluler dapat diukur secara terpisah, sebuah teknik perhitungan sederhana dapat digunakan untuk menentukan fotosintesis kotor. Bahan dan Alat Bahan Alat
: Sodium Bikarbonat(Baking Soda/Na2CO3), sabun cair, daun bayam (Amaranthus spp.), dan lain-lain : plastik jarum suntik (10 ml atau lebih besar, jarumnya dibuang), perforator, erlenmeyer, timer, sumber cahaya, dan lain-lain
Metode Pelaksanaan Praktikum: 1. Sodium bikarbonat berfungsi sebagai sumber karbon dioksida yang akan digunakan dalam fotosintesis. Disiapkan 0,2% larutan sodium bikarbonat. Cara menyiapkan larutan sodium bikarbonat adalah sebagai berikut: sebanyak 1/8 sendok teh sodium bikarbonat dilarutkan dalam 300 ml air, aduk hingga larutan homogen. Lab.Ilmu Tanaman
3
4
2. Tambahkan satu tetes sabun cair (encer) ke dalam larutan sodium bikarbonat. Sabun tersebut berfungsi untuk membasahi permukaan hidrofobik dari daun sehingga larutan sodium bikarbonat akan mampu ditarik oleh daun. Pada saat meneteskan larutan sabun cair, lakukan dengan hati-hati, hindarilah terbentuknya busa. Jika larutan membentuk busa, larutan perlu diencerkan dengan menambahkan lebih banyak larutan sodium bikarbonat. 3. Siapkan 10 atau lebih piringan daun yang seragam untuk setiap percobaan. Pembuatan piringan daun dilakukan dengan menggunakan perforator. 4. Pilihlah jenis daun yang akan digunakan dalam praktikum. Tidak semua daun cocok untuk diukur laju fotosintesisnya dengan menggunakan metode FLDA. Tipe/jenis daun yang akan digunakan merupakan aspek kritis dari keakuratan metode FLDA. Permukaan daun harus halus dan jangan terlalu tebal. Jangan pergunakan daun yang permukaannya banyak mengandung bulu (trikomata). Dari sekian banyak jenis daun, bayam adalah jenis yang paling memungkinkan untuk diukur laju fotosintesisnya dengan FLDA. Hindarilah juga daun-daun yang banyak mengandung urat-urat daun primer. 5. Infiltrasi larutan sodium bikarbonat ke dalam piringan daun, caranya: a. Lepaskan piston dari tabung jarum suntik dan masukkan piringan daun ke dalam tabung jarum suntik b. Posisikan kembali piston seperti pada posisi semula secara hati-hati jangan sampai merusak piringan daun. Doronglah piston sampai dengan volume tabung jarum suntik mencapai < 10% dari total volume, dan piringan daun dibiarkan tetap berada dalam tabung jarum suntik c. Tariklah beberapa ml larutan sodium bikarbonat ke dalam tabung jarum suntik, tepuklah tabung jarum suntik supaya piringan daun masuk ke dalam larutan sodium bikarbonat d. Tutuplah lubang pada bagian ujung tabung jarum suntik dengan menggunakan jari tangan, tarik kembali piston untuk menciptakan kondisi vakum di dalam tabung jarum suntik. Biarkan tetap dalam kondisi vakum selama kurang lebih 10 detik. Sambil menciptakan kondisi vakum di dalam tabung,
tabung ditepuk-tepuk untuk mencampurkan piringan daun dengan larutan Hentikan proses pemvakuman. Larutan sodium bikarbonat akan berinfiltrasi ke dalam ruang udara dalam jaringan daun sehingga menyebabkan piringan daun tenggelam. Praktikan mungkin harus mengulangi prosedur ini sebanyak 2β3 kali untuk menjadikan piringan daun tenggelam. Jika praktikan kesulitan untuk menjadikan piringan daunnya tenggelam sesudah proses pemvakuman dilakukan sebanyak 3 kali, hal ini kemungkinan disebabkan oleh kurangnya sabun cair dalam larutan sodium bikarbonat. Tambahkan lagi satu tetes sabun cair. Tuanglah piringan daun beserta larutan sodium bikarbonat ke dalam sebuah erlenmeyer. Tambahkan lagi larutan sodium bikarbonat ke dalam erlenmeyer hingga kedalaman larutan mencapai 3 cm. Pergunakanlah tingkat kedalaman larutan yang sama untuk setiap percobaan. Erlenmeyer beserta piringan daun dan larutan sodium bikarbonat di tempatkan di bawah sumber cahaya dan hidupkan timer. Pada setiap akhir menit, hitunglah jumlah piringan daun yang tenggelam dan catat. Aduklah larutan sodium bikarbonat dalam cangkir platik bening untuk mencegah melekatnya piringan daun di bagian tepi cangkir. Lanjutkan hingga semua piringan daun terapung.
Lab.Ilmu Tanaman
e. f.
6.
7.
Perlakuan: Sub acara A. : Pengaruh Intensitas Cahaya Intensitas cahaya terbagi dalam 5 aras perlakuan yaitu 100%, 75%, 50%, 25%, dan 0%. Masing-masing perlakuan menggunakan plastik naungan dengan penerusan cahaya berbeda sesuai angka yang tertulis pada alat. Kemudian tempatkan erlenmeyer yang telah berisi piringan daun dan larutan sodium bikarbonat di bawah sumber cahaya, yang mana diantara sumber cahaya dan erlenmeyer ditempatkan plastik penaung dengan kemampuan penerusan cahaya bervariasi sesuai dengan perlakuan. Lanjutkan kerja sesuai dengan petunjuk umum acara fotosintesis.
Lab.Ilmu Tanaman
5
6
Sub acara B : Pengaruh Warna Cahaya Warna cahaya terbagi dalam 5 perlakuan warna yaitu bening, merah, kuning, hijau, dan biru. Masing-masing perlakuan ditutup menggunakan plastik penutup, satu warna penutup untuk setiap perlakuan. Tempatkan erlenmeyer yang telah berisi piringan daun dan larutan sodium bikarbonat di bawah sumber cahaya. Pada saat erlenmeyer berisi piringan daun dan larutan sodium bikarbonat terpapar pada sumber cahaya, masing-masing cangkir tersebut ditutup dengan plastik penutup yang warnanya disesuaikan dengan perlakuan yang akan dikenakan pada cangkir tersebut. Lanjutkan kerja sesuai dengan petunjuk umum acara fotosintesis.
kembali. Catat waktu yang diperlukan untuk mencapai 50% piringan daun tenggelam kembali. Catat semua data waktu (dalam menit) pada tabel pengamatan yang telah disiapkan.
Sub acara C : Pengaruh Suhu Pengaruh suhu terbagi dalam 5 aras yaitu 5oC, 15oC, 25oC, o 35 C, dan 45oC. Untuk membuat suhu yang sesuai dengan perlakuan maka pada larutan sodium bikarbonat dalam erlenmeyer perlu penambahan es untuk mendapatkan suhu rendah dan untuk mendapatkan suhu yang tinggi dibutuhkan pemanasan. Pengukuran suhu menggunakan termometer pada larutan di dalam erlenmeyer. Setelah mendapatkan suhu yang sesuai dengan perlakuan maka lanjutkan kerja sesuai dengan petunjuk umum acara fotosintesis. Petunjuk Umum: 1. 2. 3. 4.
Tempatkan erlemeyer di bawah sumber cahaya (untuk semua perlakuan) Catatlah waktu yang dibutuhkan untuk 50% (Effective Time/ET50) piringan daun yang tadinya tenggelam mengapung dipermukaan larutan. Tunggu hingga semua piringan daun terapung di permukaan larutan Setelah semua piringan daun mengapung dipermukaan larutan (catat waktu yang diperlukan untuk mencapai 100% piringan daun terapung), matikan sumber cahaya dan tutuplah semua erlenmeyer (untuk semua perlakuan) dengan menggunakan plastik penutup berwarna gelap. Setiap menit setelah ditutup plastik gelap, hitung jumlah piringan daun yang tenggelam
Lab.Ilmu Tanaman
5.
Tabel Pengamatan: Sub acara A. : Pengaruh Intensitas Cahaya
Perlakuan (%)
50% piringan daun terapung setelah terpapar pada sumber cahaya, waktu dihitung dari sejak sumber cahaya dihidupkan (menit) Ulangan 1 Ulangan 2
50% piringan daun tenggelam setelah sumber cahaya dimatikan, waktu dihitung dari sejak sumber cahaya dimatikan (menit) Ulangan 1 Ulangan 2
0 25 50 75 100
Sub acara B : Pengaruh Warna Cahaya
Perlakuan
50% piringan daun terapung setelah terpapar pada sumber cahaya, waktu dihitung dari sejak sumber cahaya dihidupkan (menit) Ulangan 1 Ulangan 2
Bening Merah Kuning Hijau Biru
Lab.Ilmu Tanaman
50% piringan daun tenggelam setelah sumber cahaya dimatikan, waktu dihitung dari sejak sumber cahaya dimatikan (menit) Ulangan 1 Ulangan 2
7 πΏπππ’ πππ πππππ π =
Sub acara C : Pengaruh Suhu
Perlakuan (oC)
50% piringan daun terapung setelah terpapar pada sumber cahaya, waktu dihitung dari sejak sumber cahaya dihidupkan (menit) Ulangan 1 Ulangan 2
50% piringan daun tenggelam setelah sumber cahaya dimatikan, waktu dihitung dari sejak sumber cahaya dimatikan (menit) Ulangan 1 Ulangan 2
5 15 25 35 45
Perhitungan: Waktu yang dibutuhkan untuk 50% piringan daun bergerak dari dasar ke permukaan disebut ET50. ET singkatan dari Effective Time. Data hasil pengamatan merupakan nilai ET 50 yang merupakan inversi (kebalikan) dari laju fotosintesis. Hal tersebut dapat ditunjukkan jika dibuat grafik, maka garis ET 50 akan turun seiring nilai x (peubah dalam hal ini intensitas cahaya dan suhu) bertambah. Garis tersebut memilki pola turun akibat peubah tersebut dinaikkan nilainya sehingga jelas waktu (nilai y) yang dibutuhkan untuk daun menuju ke permukaan akan semakin cepat sehingga nilai y akan turun seiring bertambahnya nilai x. Dengan demikian agar nilai y dapat menggambarkan laju fotosintesis, maka perlu dilakukan inversi yaitu 1/ ET50. Dengan demikian, laju fotosintesis akan naik seiring bertambahnya nilai x (intensitas cahaya dan suhu). Untuk menghitung laju fotosintesis kotor, maka yang harus dihitung adalah laju respirasi dan laju fotosintesis bersih. Laju respirasi didapat dari waktu yang dibutuhkan untuk 50% piringan daun tenggelam kembali. Laju fotosintesis bersih didapat dari waktu yang dibutuhkan untuk 50% piringan daun ke permukaan.Laju fotosintesis kotor dihitung dari penjumlahan laju respirasi ditambah laju fotosintesis bersih. Perhitungan tersebut dengan demikian sebagai berikut:
Lab.Ilmu Tanaman
8 1 πΈπ50βππππ
πΏπππ’ πππ‘ππ πππ‘ππ ππ ππππ ππ =
1
πΈπ50βπππ ππ‘ 1 1 πΏπππ’ πππ‘ππ πππ‘ππ ππ πππ‘ππ = + πΈπ50βπππ ππ‘ πΈπ50βππππ πΏπππ’ πππ‘ππ πππ‘ππ ππ πππ‘ππ πππ ππ πππ‘ππ πππ‘ππ ππ πππ‘ππ: πππ πππππ π = πΈπ50βππππ Rasio fotosintesis kotor:respirasi menunjukkan perbandingan karbohidrat yang dihasilkan dengan yang dipakai untuk respirasi. Jika rasio tersebut bernilai > 1, maka terdapat surplus karbohidrat. Setelah dihitung laju fotosintesis bersih, maka dibuat regresi per sub acara. Regresi yang dilakukan adalah regresi laju fotosintesis kotor ke nilai peubahnya berupa perlakuan masing-masing perlakuan sub acara (intensitas cahaya, suhu, dan warna cahaya). Dengan demikian, terdapat tiga grafik regresi. Untuk perlakuan warna cahaya, analisislah data menggunakan rancangan acak lengkap serta buat histogram laju fotosintesis untuk tiap warna cahaya Laju fotosintesis (m-1)
Intensitas cahaya (fc) Gambar 1a.Laju fotosintesis daun bayam pada beberapa intensitas cahaya
Lab.Ilmu Tanaman
Laju fotosintesis ( )
Warna Cahaya (nm) Gambar 1.b. Laju fotosintesis daun bayam pada beberapa warna cahaya
10
9 Laju fotosintesis (m-1)
ACARA 2 PENGARUH SUHU TERHADAP LAJU RESPIRASI AEROB Tujuan :
Suhu (oC) Gambar 1.c. Laju fotosintesis daun bayam pada beberapa tingkatan suhu
Mengetahui pengaruh suhu lingkungan terhadap laju respirasi aerob kecambah kacang hijau
Latar belakang Laju respirasi sangat dipengaruhi oleh suhu lingkungan. Suhu kardinal untuk respirasi adalah suhu minimum 0oC, optimum 30oC, dan maksimum 45oC. Suhu antara optimum dan maksimum dapat meningkatkan laju respirasi pada tahap awal, tetapi kemudian akan menurunkan laju proses ini. Bahan dan Alat Bahan yang digunakan yaitu larutan NaOH 0,2 N, larutan BaCl2, larutan HCl 0,1 N, larutan indikator phenolptalein, kecambah kacang hijau dan kain kelambu serta tali. Alat yang diperlukan yaitu 8 botol volume 250 ml dengan tutup karet, 4 termometer, erlenmeyer 125 ml, buret dan lemari es Metode Pelaksanaan Praktikum Suhu yang digunakan terdiri dari 4 aras yaitu suhu 0oC, 15oC, suhu kamar (lab) dan suhu rumah kaca. Masing-masing perlakuan suhu terdiri dari 2 botol yang berisi 50 ml larutan NaOH 0,2 N. Satu botol diberi kecambah dan satu botol lagi tanpa pemberian kecambah. Kecambah yang digunakan seberat 5 gram, kemudian kecambah dibungkus dengan kain kelambu dan diikat dengan tali. Masukan kecambah tersebut ke dalam botol dan diatur agar kecambah tersebut tidak menyentuh NaOH. Tutup semua botol dan diberi selotip agar kedap udara atau udara dari luar tidak dapat masuk ke dalam botol. Letakan pasangan botol (botol dengan kecambah dan botol tanpa kecambah) pada masing-masing kondisi suhu perlakuan. Ukur suhu awal pada kondisi tersebut dengan menggunakan termometer.
Lab.Ilmu Tanaman
Lab.Ilmu Tanaman
11 Setelah 24 jam keluarkan kecambah dari masing-masing botol, dan tutup kembali dengan cepat. Tentukan jumlah CO 2 yang dibebaskan dari respirasi dengan cara titrasi. Pipet 10 ml larutan dari tiap botol dan dimasukkan ke dalam erlenmeyer. Tambah dengan 5 ml BaCl2 dan 3 tetes phenolptalein, larutan akan berwarna merah jambu. Titer dengan HCl 0,1 sampai warnanya hilang. lakukan titrasi dengan cara yang sama untuk semua perlakuan termasuk kontrol. Ulangi 2-3 kali, hitung rata-ratanya. Tabel 2. Jumlah HCl yang digunakan untuk titrasi Jumlah HCl (ml) No. Suhu Tanpa Kecambah Dengan Kecambah 1 2 3 1 2 3 1 2 3 4
Reaksi 1. 2 NaOH + CO2
Na2CO3 + H2O
2. Na2CO3 + BaCl2
BaCO3 + 2 NaCl
3. NaOH (sisa) + HCl
Lab.Ilmu Tanaman
NaCl + H2O
12 Perhitungan Misalnya NaOH mula-mula = M mol I. Diambil 10 ml NaOH dari botol kontrol, misalnya untuk titrasi diperlukan X ml Hl 0,1 N; maka HCl 0,1 N untuk titrasi = 0,1 X mgrek. dari reaksi 3) NaOH sisa 0,1 X mgrek HCl jadi NaOH yang mengikat CO2 udara = (M-0,1 X) mgrek karena NaOH bervalensi 1 = (M-0,1 X) mgrl dari reaksi 1) CO2 = Β½ (M-0,1 X) mgrl II. Diambil 10 ml NaOH dari botol perlakuan, misalnya HCl 0,1 N= Y ml = 0,1 Y mgrek HCl NaOH sisa 0,1 Y mgrek HCl (reaksi 3) NaOH yang mengikat CO2 udara = (M-0,1 Y) mgrek = (M-0,1 Y) mgrl Dari reaksi 1) CO2 (udara + respirasi) = Β½ (M β 0,1 Y) mgrl Dari I dan II CO2 respirasi = CO2 (udara + respirasi) β CO2 udara = Β½ (M-0,1 Y) β Β½ (M-0,1 X) mgrl = Β½ (M-0,1 Y β M+0,1 X) mgrl CO2 respirasi = Β½ (0,1 X β 0,1 Y) mgrl (untuk 10 ml NaOH) untuk 50 ml NAOH = 50/10 x Β½ x 0,1 (X-Y) mgrl= 50/10 x Β½ x 0,1 x 44 (X - Y) mg = 11 (X - Y) mg
Lab.Ilmu Tanaman
13
14
Pertanyaan Bagaimana kaitan antara kadar CO 2 hasil respirasi dengan suhu, apakah hal tersebut berpengaruh terhadap proses lain dalam tubuh tanaman?
Buat persamaan regresi hubungan suhu dengan jumlah CO 2 hasil respirasi. Buatlah kesimpulan dari analisis data tersebut. Laju respirasi (mg/g/jam)
Suhu (oC)
Gambar .2
Laju respirasi kecambah kacang hijau pada beberapa suhu lingkungan
ACARA 3 POTENSIAL OSMOTIK SEL Tujuan : Menghitung potensial osmotik sel Latar Belakang Salah satu cara untuk menentukan potensial osmotik (Ξ¨s) sel adalah dengan mengamati proses plasmolisis. Proses ini mudah diamati di bawah mikroskop pada sel yang mengandung zat warna. Bila sel yang diamati ditempatkan pada suatu seri larutan yang mempunyai sifat mulai dari yang hipotonik terhadap cairan sel sampai dengan yang bersifat hipertonik, maka akan terjadi proses osmosis. Pada sel yang terdapat di dalam larutan yang hipotonik maka akan terjadi osmosis dari larutan ke dalam sel, sehingga sel menggembung. Sebaliknya pada sel yang terdapat di larutan yang bersifat hipertonik, maka cairan sel akan keluar sehingga sel mengalami plasmolisis. Akibat terjadinya plasmolisis dapat diamati dengan terlepasnya membran plasma dari dinding sel yang tampak sebagai hilangnya zat warna dari dalam sel. Sel yang terdapat di dalam larutan yang bersifat isotonik akan mengalami plasmolisis batas (incipient plasmolysis). Dalam keadaan ini potensial tekanan (Ξ¨p) sel = 0 , sehingga potensial osmotik (Ξ¨s) sel sama dengan potensial air ( Ξ¨w) sel. Karena terjadi keseimbangan dinamis maka Ξ¨w sel = Ξ¨w larutan, sehingga Ξ¨s sel = Ξ¨s larutan. Bahan dan Alat Bahan yang digunakan yaitu daun Rhoeo discolor dan gula pasir. Alat yang digunakan yaitu beaker glass, pinset, alat penghitung (hand counter), object glass dan mikroskop. Metode Pelaksanaan Praktikum Sel yang akan diamati potensialnya didapat dari tanaman yang telah diperlakukan dengan penyiraman yang berbeda sehingga diharapkan memiliki potensial air sel yang berbeda pula. Perlakuan tersebut terdiri dari 3 kondisi tanaman yang berbeda yaitu tanaman
Lab.Ilmu Tanaman
Lab.Ilmu Tanaman
15
16
cukup air (disiram setiap hari), tanaman yang agak kering (disiram tiga hari sekali) dan tanaman yang dikondisikan kering (disiram semunggu sekali).
Pertanyaan Setelah melakukan percobaan ini, apakah ada sel yang tidak mengalami plasmolisis? apa penyebabnya? Jelaskan salah satu praktek di lapangan yang berkaitan dengan potensial osmotik sel!
Dari setiap tanaman tersebut diambil jaringan bagian bawah daun yang berwarna merah kemudian diletakkan di atas object glass. Stelah itu diamati jumlah sel pada jaringan tersebut di bawah mikroskop. Setelah jumlah sel didapatkan maka jarigan tersebut dimasukkan ke dalam beaker glass yang berisi larutan sukrosa dengan molalitas 0 m; 0,1 m; 0,2 m dan 0,3 m. Masukkan sayatan tersebut ke dalam tabung reaksi sampai benar-benar terendam. Cara membuat larutan tersebut yaitu dengan menyiapkan lebih kurang 100 ml larutan sukrosa 1 M dengan melarutkan 36 g gula pasir ke dalam 100 ml air. Encerkan sesuai dengan perlakuan menggunakan persamaan m1v1 = m2v2 dimana m = molalitas dan v = volume Setelah 30 menit periksalah jaringan tadi dengan mikroskop dan hitunglah jumlah sel yang tersisa. Dengan mengitung jumlah sel yang tersisa maka kita dapat mengetahui jumlah sel yang mengalami plasmolisis yaitu mengurangi jumlah sel awal dengan sel yang tersisa. Larutan sukrosa yang menyebabkan separuh jumlah sel utuh yang direndam mengalami plasmolisis dianggap mempunyai potensial osmotik sama dengan potensial osmotik sel. Potensial osmotik larutan dapat dihitung sebagai berikut :
Tabel 3. Persentase sel yang mengalami plasmolisis pada beberapa potensial osmotik larutan perendam No.
Molalitas larutan (ml)
1 2 3 4
0,3 0,2 0,1 0
Potensial osmotik larutan (bar)
Jumlah sel utuh mulamula
Jumlah sel yang mengalami plasmolisis
Persentase sel yang mengalami plasmolisis
Buatlah grafik dengan potensial osmotik sebagai absis dan p ersentase sel yang mengalami plasmolisis sebagai ordinat .
Sel yang mengalami plasmolisis (%) 100 80 60
Ξ¨s = - miRT Ξ¨s = potensial osmotik larutan m = molalitas larutan (mol/1000 ml H 2O) i = tetapan ionisasi, untuk sukrose = 1 R = tetapan gas = 22,7/273 = 0,0831 T = suhu Kelvin = (273+ t oC)
40 20 0 0,1
0,2
0,3
molalitas
Gambar 3. Persentase sel yang mengalami plasmolisis pada beberapa potensial osmotik larutan perendam Lab.Ilmu Tanaman
Lab.Ilmu Tanaman
18
17
ACARA 4 PENGUKURAN KEHIJAUAN DAN KANDUNGAN KLOROFIL DAUN Tujuan : 1. Mengetahui cara mengukur kehijauan dan kandungan klorofil dari daun tumbuhan 2. Mengetahui hubungan antara kehijauan dengan kandungan klorofil daun Latar belakang Daun merupakan organ tumbuhan yang penting kerana berfungsi sebagai tempat berlangsungnya aktifitas fotosintesis. Daun tumbuhan mampu menjalankan aktifitas fotosintesis karena mengandung organela kloroplas yang di dalamnya terdapat pigmen klorofil. Pigmen klorofil akan menangkap radiasi matahari dan kemudian menggunakannya untuk menjalankan aktifitas fotosintesis. Oleh karena itu, kandungan klorofil di dalam daun tumbuhan menentukan aktifitas fotosintesis tumbuhan tersebut. Kandungan klorofil di dalam daun tumbuhan berkorelasi positif dengan kehijauan daun, dengan pola kecenderungan linier. Artinya, semakin tinggi kandungan klorofil di dalam daun maka warna daun tersebut akan semakin hijau. Oleh karena itu, dengan melihat warna daun sebetulnya dapat menggambarkan kandungan klorofil di dalam daun. Terdapat beberapa metode praktis untuk mengukur kehijauan daun tumbuhan yaitu dengan menggunakan alat SPAD 502 maupun Bagan Warna Daun (BWD). Bahan dan Alat Bahan yang diperlukan yaitu beberapa helai daun tanama kangkung dan aceton 80%. Alat yang dibutuhkan yaitu mortir, timbangan, kertas saring, erlenmeyer, pipet ukuran 1 ml dan 10 ml, spectronic 21D, BWD, dan SPAD 502.
Metode Pelaksanaan Praktikum Pengukuran kehijauan daun dilakukan pada tanaman yang telah diberi perlakuan pemupukan N yang berbeda yaitu N0 (tanpa diberi pupuk urea), N1/2 (diberi Β½ dosis urea yang dianjurkan) dan N1 (dipupuk urea dengan dosis yang dianjurkan. Dari setiap kondisi tanaman tersebut maka diamati kehijauan daun dengan menggunakan BWD dan SPAD 502. Pengukuran kehijauan daun menggunakan BWD dilakukan dengan membandingkan warna daun terhadap warna masing-masing skor kehijauan yang ada pada BWD. Tentukan warna pada BWD yang paling sesuai dengan warna daun kemudian catatlah skor kehijauannya. Setiap helai daun kangkung yang telah diukur menggunakan BWD selanjutnya diulangi lagi pengukuran kehijauan daunnya menggunakan SPAD 502. Pengukuran kehijauan daun menggunakan SPAD 502 dilakukan dengan cara menjepit daun menggunakan alat tersebut, kemudian secara otomatis pada alat akan muncul skor kehijauannya. Pengukuran Kandungan Klorofil Daun dilakukan dengan cara daun kangkung sebanyak 1 g ditumbuk dengan mortir. Setelah lumat, ke dalam tumbukan dituangkan 20 ml aceton 80 %. Campuran aseton dan tumbukan daun disaring dengan kertas saring yang diletakkan di dalam corong yang dimasukkan ke dalam erlenmeyer. Larutan ini mengandung klorofil a, klorofil b, dan karotenoid. Spectronic 21D dinyalakan, didiamkan selama 10 menit. Larutan aseton 80 % (murni) dimasukkan ke dalam cuvet hingga batas sebagai standar blangklo. Tombol pengatur diatur pada panjang gelombang 645 nm, kemudian absorbance diatur menunjuk pada angka nol. Sampel larutan pigmen dituangkan ke dalam cuvet yang lain hingga batas, dicatat berapa absorbancenya. Hal yang sama dilakukan pula pada panjang gelombang 663 nm. Diulangi sekali lagi untuk masing-masing panjang gelombang, kemudian hasil pengukuran dirata-ratakan. Kemudian dihitung kadar klorofil total dengan rumus sebagai berikut : (satuan: mg/g berat segar daun) (20,2 x A645 + 8,02 x A663 ) x
A645 A663 Lab.Ilmu Tanaman
20 ml 1000 x 1 gram
= absorbance pada panjang gelombang 645 nm. = absorbance pada panjang gelombang 663 nm.
Lab.Ilmu Tanaman
19 Pertanyaan 1. Menurut Anda, bagaimana hubungan antara kehijauan dan kandungan klorofil daun dengan aktifitas fotosintesis tumbuhan? 2. Apa yang akan terjadi pada tumbuhan apabila daunnya berwarna pucat (kandungan klorofilnya rendah)? 3. Apakah pertumbuhan tumbuhan akan terpengaruh oleh daun yang kandungan klorofilnya rendah (berwarna pucat)?
Dari data yang diperoleh maka tentukan Hubungan antara Kehijauan dengan Kandungan Klorofil Daun (Menggunakan Grafik Regresi dengan Absis Kehijauan Daun dan Ordinat Kandungan Klorofil Daun). Kandungan Klorofil Daun
Kandungan Klorofil Daun
Kehijauan Daun (BWD)
Kehijauan Daun (SPAD)
20 ACARA 5 PENGARUH FAKTOR LINGKUNGAN TERHADAP LAJU TRANSPIRASI Tujuan :
Mengetahui pengaruh faktor lingkungan terhadap laju transpirasi
Latar belakang Transpirasi adalah proses hilangnya air dari tubuh tanaman dalam bentuk uap. Jalan utama difusi uap air ke udara ini adalah melewati stomata. Transpirasi sangat dipengaruhi faktor lingkungan antara lain anasir iklim mikro tempat tanaman tumbuh. Pada siang hari di tempat terbuka, tanaman akan menerima sinar matahari dalam jumlah yang lebih banyak dibanding di bawah naungan. Karena sinar matahari merupakan sumber energi utama untuk transpirasi, maka pada faktor lingkungan lain yang tetap, semakin banyak energi matahari yang diterima, transpirasi dapat semakin besar. Selain itu suhu yang lebih tinggi, kelembaban relatif udara yang lebih rendah, kecepatan angin yang lebih tinggi ditambah dengan stomata yang membuka lebih lebar ditempat terbuka, akan dapat memacu transpirasi menjadi lebih cepat. Pengukuran laju transpirasi dilakukan dengan pendekatan menggunakan waktu yang diperlukan untuk mengubah kertas kobal klorid dari biru menjadi merah jambu (Akunda dan Kumar, 1981). Kertas kobal klorid yang kering akan berubah warna menjadi merah jambu bila terkena uap air, termasuk yang berasal dari transpirasi. Semakin cepat laju transpirasi, semakin pendek waktu yang diperlukan untuk berubah warna. Bahan dan Alat Bahan yang digunakan yaitu tanaman kedelai, kertas saring wathman, larutan kobal klorid 10%. Sedangkan alat yang diperlukan yaitu oven, plastik, penjepit kertas, termometer maksimum minimum, higrometer, dan lightmeter.
Lab.Ilmu Tanaman
Lab.Ilmu Tanaman
21 Metode Pelaksanaan Praktikum Laju transpirasi diukur pada tanaman kedelai yang dikondisikan dengan perlakuan cukup air (disiram setiap hari), tanaman yang agak kering (disiram tiga hari sekali) dan tanaman yang dikondisikan kering (disiram semunggu sekali). Setiap perlakuan kondisi tanaman diamati kadar lengas dan laju transpirasi. Laju transpirasi menggunakan kertas kobal klorid dan dengan metode gravimetri. Kadar lengas tanah diukur dengan mengambil 10 gram tanah kemudian dikeringkan dalam or\ven sampai berat kering stabil. Kemudian dihitung selisih antara berat awal dengan berat akhir sehingga didapatkan kadar lengas tanah untuk setiap kondisi tanah pada masing-masing perlakuan. Untuk membuat kertas kobal klorid digunakan kertas saring Whatman no. 1. Ukuran 2 x 2 cm yang direndam dalam larutan kobal klorid 10%. Kertas dikeringkan di dalam oven suhu 50OC sampai diperoleh warna biru merata. Kertas diletakkan dalam kantung plastik yang berisi silika gel. Pengukuran dilakukan pada daun ke 2-4 yang telah membuka penuh pada tajuk bagian luar. Kertas diletakkan di bawah plastik transparan keras tebal berukuran 3 x 3 cm pada bagian bawah daun, dijepit dengan penjepit kertas. Dicatat waktu yang diperlukan untuk mengubah warna kertas kobal klorid dari biru menjadi merah jambu sama dengan standar. Lakukan pengamatan yang sama pada tajuk bagian dalam. Amati suhu, intensitas cahaya, dan kelembaban di kedua tempat tersebut. Hitung dan bandingkan laju transpirasi pada keadaan yang berbeda tersebut.
22 Metode gravimetri dilakukan oleh masing-masing kelompok mengambil satu pot tanaman untuk perlakuan cukup air, agak kering dan kering. Setelah itu pot ditutup dengan plastik hingga ke batang tanaman kemudian ditimbang (A). Dibiarkan hingga 24 jam kemudian ditimbang kembali (B). Jumlah air yang ditranspirasikan adalah A-B Tabel 5. Perlakuan
Banyaknya air yang ditranspirasikan (gram) Kadar Lengas
Kadar Lengas
Suhu (oC)
RH (%)
Intensitas cahaya
Air yang ditranspirasikan
Buatlah grafik hubungan kadar lengas tanah dengan air yang ditranspirasikan. Regresikan air yang ditranspirasikan ke kadar lengas tanah dan buatlah kesimpulan dari hasil analisis tersebut. Pertanyaan 1. Menurut Anda, bagaimana hubungan antara laju transpirasi dengan kadar lengas dalam tanah? 2. Apa yang akan terjadi pada tumbuhan apabila kadar lengas tanah berkurang?
Intensitas Lama cahaya Transpirasi
Cukup air Agak Kering Kering
Lab.Ilmu Tanaman
RH (%)
Cukup air Agak kering Kering
Tabel 4. Lama transpirasi tanaman............... (menit)
Perlakuan
Suhu (oC)
Lab.Ilmu Tanaman
23 ACARA 6 PENGUKURAN KADAR AIR NISBI Tujuan : Menghitung kadar air nisbi daun suatu tanaman
Latar Belakang Air memiliki fungsi yang sangat penting bagi tumbuhan. Air berfungsi sebagai : penyusun tubuh tanaman (70%-90%); Pelarut dan medium reaksi biokimia, Medium transpor senyawa; Memberikan turgor bagi sel (penting untuk pembelahan sel dan pembesaran sel); Bahan baku fotosintesis serta menjaga suhu tanaman supaya konstan. Air dapat mengganggu pertumbuhan tanaman bila dalam keadaan berlebih atau kekurangan sehingga menimbulkan cekaman. Tanaman yang mengalami cekaman kekeringan akan mengakibatkan terjadinya penurunan kadar air nisbi pada daun. Bahan dan alat: Bahan yang diperlukan dalam praktikum ini adalah daun tanaman, air. Sedagkan alat yang diperlukan yaitu plastik dan timbangan. Metode Pelaksanaan Praktikum Daun yang digunakan untuk percobaan ini adalah daun yang diperlakukan pada kondisi lengas yang berbeda yaitu kondisi lengas cukup air, kondisi lengas agak kering dan kondisi lengas kering. Daun tanaman dari masing-masing perlakuan tersebut dirompes, kemudian ditimbang masing-masing sebagai bobot segar (BS). Kemudian daun tersebut masing-masing dimasukkan ke dalam plastik yang berisi air dan didiamkan selama 24 jam. Daun yang telah disimpan dalam air kemudian diambil dan dikibaskan sebanyak 3 kali kibasan kemudian ditimbang sebagai (BJ*). Hasil penimbangan BJ* dimasukkan ke dalam persamaan regresi bobot daun basah untuk mendapatkan bobot jenuh air (BJ). Daun yang telah ditimbang kemudian dioven hingga bobotnya konstan (BK). Kandungan air nisbi dihitung dengan cara :
24 Buatlah grafik hubungan kadar lengas tanah dengan kadar air nisbi. Regresikan kadar air nisbi ke kadar lengas tanah dan buatlah kesimpulan dari hasil analisis tersebut. Catatan : Untuk pembuatan persamaan regresi bobot daun basah, diperlukan daun tanaman dari varietas yang sama dengan perlakuan. Seluruh daun tanaman dirompes dan ditimbang dengan interval bobot tertentu misal : 5g,10g, 15g, 20g, 25g (A). Masingmasing daun yang telah ditimbang tersebut dicelupkan ke dalam air hingga basah, kemudian diambil dan dikibaskan sebanyak tiga kali. Daun yang telah dikibaskan tersebut ditimbang kembali (pada permukaan daun ini masih terdapat air yang menempel (B)). Bobot daun yang diperoleh yaitu A dan B dihubungkan dalam bentuk kurva sebagai absis dan ordinat serta dibuat persamaan regresinya. Persamaan ini dipergunakan untuk menera bobot sebenarnya tanpa air yang menempel di permukaan daun, digunakan pada perhitungan kandungan air nisbi (untuk mencari BJ). Data penimbangan daun : A (g) 5 10 15 20 25
B (g) 6,5 14,2 18,4 24,3 26
(BJ β BK )
Lab.Ilmu Tanaman
25
y = 4,91x + 3,15
Series2
20 15
Linear (Series2)
10 5 0 5
10
15
20
25
Persamaan untuk praktikum diberikan kemudian.
(BS β BK) KAN :
30
X 100% Lab.Ilmu Tanaman
25 ACARA 7 PENGAMATAN STOMATA Tujuan : Mengamati kerapatan dan lebar bukaan stomata Latar Belakang : Stomata merupakan lubang kecil yang terletak diantara dua sel penjaga. Stomata berfungsi sebagai jalur utama difusi gas dan uap air dari jaringan ke lingkungan, begitu juga sebaliknya. Pengambilan CO2 dan pengeluaran O2 pada tanaman terjadi melalui stomata, demikian pula halnya dengan proses transpirasi pada tanaman. Stomata kebanyakan berada pada epidermis daun bagian bawah. Membuka dan menutupnya stomata dipengaruhi oleh tekanan turgor tanaman. Terdapat beberapa teori mengenai mekanisme membuka dan menutupnya stomata antara lain adalah teori perubahan pati dan gula, teori pengangkutan proton K +, serta teori bukaan stomata pada tanaman sukulen.
26 dengan mikrometer berbentuk pagar perbesaran 420 X. Buatlah grafik hubungan kadar lengas tanah dengan lebar bukaan stomata dan densitas stomata. Regresikan lebar bukaan stomata dan densitas stomata ke kadar lengas tanah dan buatlah kesimpulan dari hasil analisis tersebut.
Pertanyaan Bagaimana hubungan antara tekanan turgor dengan proses membuka dan menutupnya stomata?
Bahan dan alat Bahan yang diperlukan yaitu daun tanaman, cat kuku bening, dan selotip. Alat yang digunakan yaitu object glass, cover glass, mikroskop, micrometer okuler pagar dan micrometer okuler jaring. Metode Pelaksanaan Praktikum Pengamatan stomata dilakukan pada tanaman yang diberi perlakuan dengan kondisi cukup air, agak kering dan kering. Pengamatan stomata meliputi kerapatan dan lebar bukaan stomata. Pengamatan dilakukan pada daun nomor dua pada tunas yang terbentuk, pada permukaan daun sebelah bawah. Pengamatan dilakukan pada siang hari dengan jalan mengoleskan cat kuku bening pada permukaan daun bagian bawah. Setelah kering cat kuku dilepas dengan menempelkan selotip bening dan mengangkatnya. Cetakan stomata dari cat kuku tersebut dilekatkan pada gelas benda dan diamati di bawah mikroskop. Untuk kerapatan stomata diamati dengan okuler yang dilengkapi mikrometer berbentuk jaring menggunakan perbesaran 100 X, sedangkan untuk lebar bukaan stomata menggunakan okuler Lab.Ilmu Tanaman
Lab.Ilmu Tanaman
27 ACARA 8 MENGAMATI PENAMPANG MELINTANG BAGIAN-BAGIAN TANAMAN Tujuan : Membuat dan mengamati penampang nelintang bagianbagian tanaman. Latar Belakang: Pengamatan penampang baik melintang maupun membujur organ tanaman diperlukan untuk mengamati bagian-bagian penyusun organ tersebut. Secara umum struktur anatomi akar tersusun atas jaringan epidermis, sistem jaringan dasar berupa korteks, endodermis, dan empulur, serta sistem berkas pembuluh. Pada akar sistem berkas pembuluh terdiri atas xilem dan floem yang tersusun berselangseling. Struktur anatomi akar tumbuhan monokotil dan dikotil berbeda. Secara umum batang tersusun atas epidermis yang berkutikula dan kadang terdapat stomata, sistem jaringan dasar berupa korteks dan empulur, dan system berkas pembuluh yang terdiri atas xilem dan floem. Daun tumbuhan tersusun atas epidermis yang berkutikula dan terdapat stomata atau trikoma. Sistem jaringan dasar pada daun monokotil dan dikotil dapat dibedakan atas jaringan pagar dan jaringan bunga karang, tidak demikian halnya pada monokotil khususnya famili Graminae. Sistem berkas pembuluh terdiri atas xilem dan floem yang terdapat pada tulang daun. Pengamatan melintang dapat dilakukan dengan pemotongan preparat segar maupun awetan menggunakan alat berupa microtome. Alat : rotary microtome Bahan : organ tanaman (akar, batang atau daun) Cara kerja a. Preparat penampang melintang segar. Organ yang akan dipotong melintang diletakkan di rotary microtome kemudian dipotong dengan ketebalan tertentu yang dapat diatur pada alat microtome. Objek yang telah dipotong diletakkan pada gelas benda dan diamati di bawah mikroskop. Lab.Ilmu Tanaman
28 b. Preparat penampang dengan embeddig (menggunakan paraffin) Hari ke-1 Fiksasi menggunakan FAA: Formalin Asam asetat glasial Alkohol 70% Kemudian didiamkan selama 24 jam
5 bagian 5 bagian 90 bagian
Hari ke-2 Pencucian dan Dehidrasi Dibuang diganti berturut-turut Alkohol 70% 30 menit Alkohol 80% 30 menit Alkohol 95% 30 menit Alkohol 100% 30 menit Alkohol 100% 30 menit Dealkoholisasi Alkohol/Xilol 3:1 30 menit Alkohol/Xilol 1:1 30 menit Alkohol/Xilol 1:3 30 menit Xilol 30 menit Xilol 30 menit Campuran xilol/paraffin 1:9 dengan temperature 57Β°C selama 24 jam Hari ke-3 Infiltrasi: campuran xilol/paraffin 1:9 dibuang, diganti dengan paraffin murni. Temperature tetap 57Β°C selama 24 jam. Hari ke-4 Penyelubungan: paraffin dituang diganti dengan paraffin yang baru. Setelah 1 jam dibuat blok. Hari ke-5 Pengirisan: dibuat irisan-irisan dengan rotary microtome Diletakkan pada gelas benda dan diawetkan menggunakan canada balsam.
Lab.Ilmu Tanaman
29 Daftar Pustaka
Gardner, F.B., R.B. Pearce and R.L. Mitchel. 1985. Physiology of Crop Plant. Iowa State University Press. Ames Pandey, S.N and B.K Sinha. 1972. Plant Physiology. Vikas Publishing House. New Delhi Ross, C.W. 1974. Plant Physiology Laboratory Manual. Wadsworth. California Sutikno. 2004. Petunjuk Praktikum Mikroteknik Tumbuhan. Fakultas Biologi UGM. Taiz, L. and E. Zeiger. 1998. Plant Physiology. Sinauer Associates. Inc. Publisher. Massachusetts
Lab.Ilmu Tanaman
Lab.Ilmu Tanaman
