Guía de cultivo de Psilocybe Cubensis De Mazateka para la comunidad Psiconautas.org
Índice Lista de necesidades para el cultivo El Glove-Box (cámara estril! "raspaso de esporas al medio l#$uido %ulturas l#$uidas Preparaci&n del grano ' tipos de grano Preparaci&n de arroz 'aman# & integral Preparaci&n de trigo ' centeno o)re los *rascos Esterilizaci&n+ tindalizaci&n+ pasteurizaci&n En*rascado ' esterilizaci&n del grano ,noculaci&n ,ncu)aci&n ,ncu)adoras ustratos+ )ulk ' casing Pasteurizar sustrato Esterilizar vermiculita ructi*icaci&n Paso a paso de la *ructi*icaci&n Preparaci&n de )ande/as "ipos de *ructi*icadoras %osec0a ' recolecci&n de esporas ecado ' guardado 1nexo2 %ontaminaciones (*uente2 %anna)isca*e.net!
Lista de necesidades para el cultivo (Pueden variar seg3n el criterio de cada cultivador! 4erramientas2 - 5lla a presi&n (Marmicoc+ mage*esa+ se consiguen a )uen precio usadas! - %ontenedor de 67 litros (para armar el glove)ox! - "uppers para *ructi*icar & )ande/as de aluminio (descarta)les! para *ructi*icadora+ & - "upper de 87 & 67 litros (si se *ructi*ica en monotu)! - rascos & vasos+ tama9o ' tipo a criterio del cultivador. cultivador. - %olador - :entilador de P%+ *uente de ;8: ' temporizador analogico (si se *ructi*ica en poor man
%onsumi)les2 - Granos (trigo+ arroz+ centeno+ ma#z partido+ etctera! - Bosta de vaca (pre*erentemente! & - 4umus de lom)riz & - Bosta de ca)allo - :ermiculita :ermiculita ' tur)a - Papel aluminio - %inta de enmascarar (de papel+ 8cm de anc0o! - %inta micropore de 6M ($uir3rgica & 0ipoalergnica+ de papel. =o conviene de plástico! - >eringas de ;7 ml (las marca "erumo "erumo son )uenas! )uena s! - oluci&n *isiol&gica (;77 ml! - Encendedor - 1lco0ol (de a litro! - 1gua oxigenada (de a litro! - iltro de spar (si se *ructi*ica en poor man
Lista de necesidades para el cultivo (Pueden variar seg3n el criterio de cada cultivador! 4erramientas2 - 5lla a presi&n (Marmicoc+ mage*esa+ se consiguen a )uen precio usadas! - %ontenedor de 67 litros (para armar el glove)ox! - "uppers para *ructi*icar & )ande/as de aluminio (descarta)les! para *ructi*icadora+ & - "upper de 87 & 67 litros (si se *ructi*ica en monotu)! - rascos & vasos+ tama9o ' tipo a criterio del cultivador. cultivador. - %olador - :entilador de P%+ *uente de ;8: ' temporizador analogico (si se *ructi*ica en poor man
%onsumi)les2 - Granos (trigo+ arroz+ centeno+ ma#z partido+ etctera! - Bosta de vaca (pre*erentemente! & - 4umus de lom)riz & - Bosta de ca)allo - :ermiculita :ermiculita ' tur)a - Papel aluminio - %inta de enmascarar (de papel+ 8cm de anc0o! - %inta micropore de 6M ($uir3rgica & 0ipoalergnica+ de papel. =o conviene de plástico! - >eringas de ;7 ml (las marca "erumo "erumo son )uenas! )uena s! - oluci&n *isiol&gica (;77 ml! - Encendedor - 1lco0ol (de a litro! - 1gua oxigenada (de a litro! - iltro de spar (si se *ructi*ica en poor man
El Glove-Box (cámara estéril El Glove-Box es una cámara estril $ue se utiliza para evitar contaminaciones. Básicamente es un cu)o transparente donde no corre el aire ' podemos esterilizar *ácilmente con alco0ol en un atomizador+ pulverizandolo por dentro antes de inocular & pasar las esporas al medio l#$uido. Es altamente e*ectivo ' recomiendo muc0o su utilizaci&n. =o es imprescindi)le+ se puede inocular ' pasar esporas a l#$uido en el )a9o (luego de 0a)er ec0ado alg3n sanitizador de am)ientes & similar ' 0a)er desin*ectado )ien el área de tra)a/o!+ pero no es lo más seguro. El Glove-Box $ue arm lo 0ice con un tupper de 67 litros invertido (la tapa 0ace de )ase!+ en el cual cal 8 agu/eros del tama9o de mis manos+ en los cuales puse 8 puertos de plástico (/unta de *lexi)le de inodoro!. 1 estos puertos de plástico les puse 8 mangas de guante de limpieza. e pueden 0acer 8 mangas con )olsas pegadas con cinta del lado de a*uera tam)in+ no es imprescindi)le los plásticos con guantes. 4a' $uienes usan guantes de látex para 0acer todo el proceso+ 'o directamente me sanitizo )ien las manos con alco0ol ' tra)a/o sin guantes+ la manga del guante naran/a impide $ue pase aire casi totalmente.
!raspaso de esporas al medio lí"uido Las esporas por lo general se comparten en prints (sellos de esporas so)re papel aluminio!. Para esto vamos a necesitar /eringas de ;7 ml+ un *rasco de soluci&n *isiol&gica de ;77ml+ un print+ un *rasco estril (de los de muestra de orina!+ un encendedor+ alco0ol en un spra' ' algod&n. - Procedemos a sanitizar todo lo $ue vamos a usar con alco0ol antes de meterlo en el glove)ox. - ?na vez esterilizado el glove)ox por dentro con alco0ol en spra'+ esperamos @ minutos a $ue evaporen un poco los gases del alco0ol ' empezamos. - Auemamos la punta de una /eringa con un encendedor+ de/amos en*riar. - 1)rimos el *rasco estril+ a)rimos tam)in el print de esporas ' con la punta de la /eringa vamos raspando el papel aluminio para $ue va'an ca'endo las esporas dentro del *rasco estril. - ?na vez 0ec0o esto+ ec0amos dentro del *rasco su*iciente soluci&n *isiol&gica como para & @ /eringas (seg3n el tama9o del print!. - :amos /untando el l#$uido con las esporas con cada /eringa 0asta $ue no $uede nada - inalmente esterilizamos las puntas de las /eringas con el encendedor 0asta $ue $uede al ro/o vivo la agu/a - Las /eringas pueden guardarse en un ziploc cerrado dentro de un tupper en la 0eladera durante meses+ 0asta $ue sea necesario usarlas. - Es recomenda)le 0idratar las esporas al menos durante 80s+ por eso es me/or tener preparadas las /eringas antes $ue esterilizar los *rascos. Como no tengo fotos de mis procesos, dejo algunas imágenes a modo ilustrativo (tomadas de Mus0planet .com .com )
Culturas lí"uidas Las culturas l#$uidas (a veces conocidas como 0one' tek! son una excelente *orma de reproducir esporas+ a veces nos puede salvar de perder una cepa (si nos $ueda mu' poca soluci&n de esporas & algo as#!+ tam)in nos puede servir para sa)er si una espora $ue conseguimos está contaminada & no. %onsiste en inocular un *rasco con una mezcla de agua ' alg3n tipo de azucar (miel+ dextrosa+ extracto de malta! para $ue las esporas germinen ' empiecen a desarrollar micelio l#$uido. La gran venta/a $ue proporciona inocular con micelio l#$uido es la velocidad de colonizaci&n ' la cantidad de soluci&n $ue podemos o)tener. Procedimiento2 - =ecesitamos un *rasco de C77cc (& del tama9o $ue $uerramos!+ miel (si es orgánica me/or!+ agua mineral (con agua de la canilla tam)in se puede!+ una /eringa+ sellador ro/o de alta temperatura+ papel aluminio+ cinta de papel ' un *iltro (tran$uilamente podemos usar cinta micropore!. - %alamos en la tapa del *rasco 8 ori*icios+ uno del tama9o de la /eringa+ la cual tiene $ue ir sellada a la tapa con silicona ro/a de am)os lados+ sin la agu/a+ con el pico 0acia el lado de adentro del *rasco. El otro ori*icio )asta con $ue lo 0agamos con una mec0a de ;mm ' lo tapemos con cinta micropore do)le (si $ueremos podemos pintar el ori*icio con convertidor de &xido para $ue no se oxide!. La /eringa nos sirve para romper el micelio cuando se desarrolle+ 'a $ue la agu/a de la /eringa se suele tapar al extraer el l#$uido ' es di*#cil a)sor)er el micelio. - Ponemos la cantidad de agua $ue $uerramos dentro del *rasco (677ml+ 77ml! ' calculamos ponerle el 6 de miel. Para esto podemos a'udarnos con una /eringa (están graduadas en mililitros! - %erramos el *rasco+ lo tapamos con papel aluminio ' cinta de papel ' lo esterilizamos en la olla a presi&n durante 67 minutos (no esterilizar durante más tiempo 'a $ue la miel corre riesgo de cristalizarse! - De/amos en*riar a temperatura am)iente+ inoculamos ;+@ml de soluci&n de esporas ' guardamos el *rasco a 8C durante el tiempo $ue tarde en colonizar la soluci&n+ luego podemos extraer micelio l#$uido para inocular cual$uier *rasco de grano $ue $uerramos. 1cá una muestra de c&mo $uedar#a la tapa con la /eringa ' de c&mo usarla al momento de romper el micelio+ pu)licado por el usuario F%0ampi9on %asero en 'outu)e.com 0ttps2 HHH .'outu)e .com Hatc0 I v J M 8 5s/D 87 /sH
Preparaci#n de $ranos y tipos de $rano El grano a utilizar como medio para desarrollo del micelio cumple un papel mu' importante en el cultivo. La calidad ' cantidad de la cosec0a está directamente relacionada con la calidad alimenticia $ue provee el grano a la 0ora del crecimiento del 0ongo+ aun$ue in*lu'en varios *actores más. 4a' granos más *áciles ' más di*#ciles de tra)a/ar. Los granos *áciles por lo general son el arroz 'aman#+ el arroz integral+ el ma#z partido+ el ma#z pisingallo+ entre otros. Estos tienen la venta/a de $ue no se avinagran con tanta *acilidad como otros granos+ lo cual permite $ue el 0ongo se termine de desarrollar incluso con temperaturas relativamente altas ' en largos per#odos de tiempo+ por eso se los recomienda a iniciantes. Los granos di*#ciles de tra)a/ar son el trigo+ el centeno+ la avena+ entre otros. Estos tienen la particularidad de $ue avinagran con muc0a *acilidadK si tienen muc0a 0umedad+ & demasiado calor+ & no los esterilizamos )ien & los remo/amos demasiadas 0oras+ en pocos d#as pueden empezar a oler a vinagre+ lo cual )lo$uea el desarrollo del micelio ' nos arruina el cultivo. El grano cocido $ue usemos puede ser mezclado con vermiculita 0idratada ' colada previamente+ esto va a criterio de cada uno+ pro) esta tcnica con ma#z partido ' tuve mu' )uenos resultados+ us un ;@ de vermiculita ' @ de grano cocido. La vermiculita lo $ue 0ace es garantizar la 0umedad dentro del *rasco para el correcto desarrollo del micelio. 1 veces el grano tiende a secarse ' el micelio pierde velocidad de crecimiento.
Preparaci#n de arro% yamaní # inte$ral - Por cada vaso $ue $uerramos llenar+ ponemos de su capacidad de arroz integral+ & N de su capacidad de arroz 'aman# - Lavamos )ien el arroz para eliminar impurezas ' cosas $ue puedan $uedar *lotando - Ponemos agua a 0ervir en una olla+ cuando rompe el 0ervor recin ec0amos el arroz ' contamos ;@<+ vamos tanteando 0asta $ue el arroz empieza a a)landar. - %uando el arroz empieza a estar cocinado pero no Fal dente+ apagamos el *uego ' ec0amos el arroz en un colador+ /unto con un c0orro de agua *r#a para cortar la cocci&n. - De/amos $ue el arroz se va'a secando con su propio vapor+ revolviendo con una cuc0ara & espátula cada @ minutos 0asta $ue est seco por *uera. - %uando podamos poner arroz so)re una servilleta sin $ue la mo/e+ el arroz está listo para llenar los vasos. - De ser necesario podemos usar un secador de pelo para terminar de secar el arroz (no más de @ minutos!
Preparaci#n de tri$o y centeno La tcnica $ue vo' a a)ordar la utilizo tanto para el trigo como para el centeno+ con la sola di*erencia de tiempo de cocci&n+ 'a $ue el centeno es más duro ' re$uiere ;7 minutos más para estar )ien cocido. (Oeceta para vasos grandes! - Oemo/o N kg de grano en agua durante 8 0oras+ lo lavo )ien antes de de/arlo en agua ' saco cual$uier impureza $ue pueda $uedar *lotando. - La importancia de remo/ar durante 8 0oras el grano radica en la necesidad de $ue las )acterias germinen ' *ermenten+ 'a $ue de no 0acerlo las endoesporas de las )acterias pueden resistir la esterilizaci&n ' germinar cuando estamos incu)ando el micelio. - Despus de remo/arlo+ lo lavo durante un rato )ien largo 0asta $ue de/e de salir agua sucia ' empiece a salir más transparente el agua. %on la mano lo vo' presionando un poco durante el proceso. - Pongo el grano en una olla con 8 dedos más de agua $ue el grano ' lo llevo a *uego *uerte. - Despus de $ue rompe el 0ervor+ vo' controlando el color de los granos. 4a' un momento en $ue los granos empiezan a ponerse más transparentes ' pierden el color claro+ en ese momento corto la cocci&n ' los llevo al colador (desde $ue prendo el *uego son 67< & 6@< para el trigo ' 7< & @< para el centeno+ dependiendo de la olla+ la 0ornalla+ etctera! - ?na vez en el colador+ vo' removiendo los granos una vez cada @ minutos para $ue solos con su propio vapor va'an secándose por *uera ' $uedando 03medos por dentro. - i despus de un rato todav#a $uedan mo/ados por *uera+ con un secador de pelo se puede completar la operaci&n (no más de @ minutos con el secador!. La idea es $ue al apretarlos se los note 03medos por dentro pero $ue por *uera no lleguen a mo/ar una servilleta. - Luego de esto 'a está listo para llenar los *rascos ' ser esterilizado. - Es ?=D1ME="1L $ue el grano est seco por *uera. i el grano está pasado de 0umedad+ ' despus de esterilizar se ve enc0arcado por dentro el *rasco+ es mu' pro)a)le $ue el grano termine avinagrandose. Para evitar esto+ conviene secar )ien el grano antes. i el grano enc0arca un po$uito las paredes del *rasco luego de esterilizar+ se puede agitar el grano antes de inocular para empare/ar la 0umedad ' evitar el vinagre. Algunas fotos de la preparación del trigo. A la izquierda el grano después de 2 minutos de cocción, todav!a con partes "lancas. A la derec#a, el grano luego de $% minutos de cocción, #a"iéndolo colado & en proceso de secado, muc#o más transparente ' amarronado.
&obre los 'rascos El 0ec0o de usar *rascos+ vasos & )olsas no es de una in*luencia decisiva en el resultado *inal+ pero a veces puede llegar a a0orrarnos un par de d#as de incu)aci&n & proporcionarnos ma'or pulcritud ' menos pro)a)ilidades de contaminaciones. Lo )ásico $ue tiene $ue tener un *rasco+ vaso & )olsa de polipropileno es un puerto de intercam)io gaseoso ' un puerto de inoculaci&n (si usamos *rascos con tapas de metal & )olsas de polipropileno!. El micelio a medida $ue va desarrollándose+ va consumiendo ox#geno ' descartando di&xido de car)ono+ con lo cual es altamente necesario $ue 0a'a un ori*icio por el cual pueda darse el intercam)io de gases. i el *rasco es ciego+ el micelio consume todo el ox#geno ' detiene su crecimiento+ por más $ue la 0umedad ' la temperatura estn correctas. Las opciones son varias+ vo' a tratar s&lo 62 rascos con tapa2 Es la opci&n $ue us durante )astante tiempo. Permite agitar el grano a la mitad de la incu)aci&n+ 0aciendo $ue los granos se mezclen ' la colonizaci&n se agilice )astante (si la 0umedad es su*iciente ' el grano no se avinagr&!. La tapa de los *rascos lleva @ ori*icios+ de los cuales están cu)iertos por una silicona de alta temperatura (*astix alta temperatura+ loctite *orma /untas+ etctera!+ ' un puerto adicional para intercam)io gaseoso+ $ue va tapado con cinta micropore (se cam)ia cada vez $ue se inicia un cultivo!. Ese puerto adicional conviene 0acerlo muc0o más c0ico+ del tama9o de una mec0a de @mm+ ' pintar sus )ordes con convertidor de &xido negro+ para evitar $ue el &xido contamine todo.
rasco o vaso tapado con papel aluminio2 Es *ácil ' más 0iginico $ue usar tapas de metal. e ponen 8 tapas de aluminio+ cada tapa de aluminio es un papel aluminio do)lado en 8+ de modo tal $ue $uedan capas de aluminio al introducirlo en la olla. La primer tapa de aluminio se encinta al *rasco sellandolo )ien+ ' se le 0acen @ per*oraciones en el centro con una /eringa+ para luego taparlos con un pedazo de cinta micropore+ esto actuará como puerto de intercam)io gaseoso. rimer capa de aluminio antes de perforar *ntercam"iador gaseoso cu"ierto c' micropore
1dicionalmente se agregan pedazos más de cinta micropore en cruz cerca de los )ordes del *rasco+ $ue a'udarán durante la inoculaci&n a $ue no se rompa muc0o el papel aluminio cuando pinc0emos con la agu/a. Los agu/eros $ue 0agamos al inocular serán vueltos a cu)rir con más cinta micropore para evitar contaminaciones. La segunda tapa de aluminio se coloca encima de la primera+ ' se vuelve a encintar con cinta de papel+ esta tapa evitará $ue el grano se llene muc0o de 0umedad durante la esterilizaci&n ' protegerá la primera tapa durante el tiempo entre la esterilizaci&n ' la inoculaci&n. +rasco con do"le tapa de aluminio, listo para esterilizar
Bolsas de polipropileno2 Esta tcnica no la implement a3n. "iene muc0as venta/as+ no 0a' $ue almacenar *rascos vac#os $ue ocupan lugar en los mue)les+ es muc0#simo más 0iginico $ue un *rasco+ entra más cantidad de grano en la olla por cada esterilizaci&n ' no 0a' $ue andar lavando nada despus. %onviene $ue las )olsas de polipropileno sean de más de @7 micrones+ las denominadas FM'co Bags $ue se usan en cultivos pro*esionales ' resisten las altas temperaturas de autoclave son de entre C@-7 micrones. El colega Brodka en psiconautas.org pu)lic& un tutorial para 0acerlas+ mu' )ueno 0ttp 2 psiconautas.org vieHtopic .p0p I*J@QRtJC8
Algunas imágenes del usuario -A de s#roomer&.org
/tras imágenes del usuario C&"er de s#roomer&.org
Esterili%aci#n tindali%aci#n pasteuri%aci#n undamentalmente son tres tcnicas distintas $ue sirven para eliminar microorganismos+ 0ongos ' )acterias $ue necesitamos sacar para evitar $ue le ganen la carrera de colonizaci&n al micelio+ 'a $ue nos pueden contaminar todo el cultivo ' o)ligarnos a tirar todo a la )asura. Esterilizaci&n2 %onsiste en llevar por encima de los ;87 celsius a$uello $ue necesitamos esterilizar durante un m#nimo de ;287 0s (lo ideal son 8 0oras!. Esto se puede lograr con un autoclave & alg3n dispositivo $ue mantenga una presi&n de alrededor de ;@ P, (en nuestro caso+ con una olla a presi&n!. Luego de pasado el tiempo de esterilizaci&n+ se apaga el *uego ' se de/a en*riar 0asta llegar a temperatura am)iente "indalizaci&n2 Es otro tipo de esterilizaci&n. Es un mtodo más seguro+ 'a $ue nos garantiza eliminar casi el ;77 de los organismos $ue puedan 0a)er $uedado vivos en lo $ue necesitemos esterilizar. %onsiste en repetir al menos 6 veces el proceso de esterilizaci&n mencionado anteriormente+ de/ando en*riar 0asta llegar a temperatura am)iente entre una esterilizaci&n ' otra. Es un proceso )astante largo pero nos garantiza la me/or esterilizaci&n. De todas *ormas+ si )ien nos garantiza esterilidad+ tiende a secar muc0o los granos+ con lo cual 0a' $ue inocular )astante soluci&n de esporas ' agitar los *rascos & )ien inocular con soluci&n *isiol&gica & agua estril. =ormalmente esterilizando )ien una sola vez+ alcanza. Pasteurizaci&n2 En este caso lo $ue se )usca es mu' distinto a la esterilizaci&n. e utiliza para matar s&lo algunas )acterias ' 0ongos (los más peligrosos para nuestro cultivo!+ sin llegar a eliminar todos los microorganismos+ evitando $ue lo $ue pasteuricemos $uede Fvirgen. Esta tcnica se aplica 3nicamente para preparar el sustrato con el cual vamos a alimentar al micelio una vez $ue ste coloniz& todo el grano. La venta/a de esto radica en un par de cosas2 - Descartamos organismos $ue amenazan seriamente al micelio. - De/amos organismos $ue si )ien pueden ser una amenaza+ $uedan mu' de)ilitados+ dándole muc0o más tiempo al micelio para desarrollarse. - 1l 0a)er varios organismos viviendo en el sustrato todav#a+ act3an como de*ensa *rente a otros organismos *oráneos $ue podr#an desarrollarse rápidamente si el sustrato estuviera esterilizado. Para pasteurizar un sustrato+ )asta con llevarlo a una temperatura constante alrededor de los Q7 durante 8 0oras. Luego de ese tiempo+ se apaga el *uego+ se de/a en*riar a temperatura am)iente ' 'a se puede tra)a/ar con l.
En'rascado y esterili%aci#n de los 'rascos ?na vez cocinado el grano+ procedemos a llenar los *rascos para esterilizar el grano. Durante la esterilizaci&n lo $ue se logra es matar la ma'or cantidad posi)le de )acterias ' 0ongos $ue pueda 0a)er en el grano ' Fatontar ' de/ar *uera de com)ate por un lapso de tiempo a algunos microorganismos llamados Fextrem&*ilos $ue soportan las altas temperaturas de la esterilizaci&n+ para darle lugar al micelio del psiloc')e cu)ensis a crecer ' ocupar todo el grano $ue preparamos antes $ue las )acterias ' 0ongos so)revivientes empiecen a desarrollarse. La esterilizaci&n en la)oratorios se 0ace en autoclaves+ dispositivos mu' caros para cultivadores 0o))istas+ por eso es $ue usamos ollas a presi&n. La olla $ue me procur+ una mage*esa de S litros usada $ue consegu# por poca plata2
eg3n el tipo de *rasco $ue 0a'amos adoptado+ podemos llenar los *rascos consecuentemente. i usamos *rascos con tapa ' pretendemos agitar el *rasco a la mitad de la colonizaci&n para acelerar el proceso+ conviene llenar los *rascos al Q7 para de/ar espacio (si al agitar notamos $ue el grano está un poco seco+ podemos volver a inocular los *rascos con soluci&n *isiol&gica+ teniendo muc0o cuidado!. ino+ los podemos llenar al S7 de/ando un espacio para evitar tocar el grano con la /eringa. Lo $ue 0a' $ue tener en cuenta es $ue cuanto más grano 0a'a en el *rasco más tiempo va a demorar en colonizar todo. Los *rascos siempre de)en estar cerrados con una 3ltima capa de papel aluminio do)le+ encintado con cinta de papel (de enmascarar! para evitar $ue entre 0umedad adentro del *rasco ' se nos enc0ar$ue el grano.
La olla adentro de)er#a tener un separador de metal para evitar $ue los *rascos to$uen el *ondo ' el agua. Lo $ue 'o utilizo es un posapavas de metal+ $ue de/a los *rascos a cm de la )ase de la olla ' permite $ue 0a'a 6 cm de agua a)a/o+ de modo tal $ue lo 3nico $ue toca a los *rascos es el vapor.
0etalle del separador al fondo de la olla ("ol invertido & posapava) dejando algunos cent!metros de agua, evitando tocar los frascos
Ponemos los *rascos adentro de la olla+ cerramos )ien procurando $ue la tapa apo'e )ien so)re todo el )orde ' llevamos a *uego *uerte la olla 0asta $ue empiece a salir vapor a lo loco. ?na vez $ue empez& a salir vapor se supone $ue alcanz& los ;@ P, (siempre con la pesita de la tapa puesta!+ ponemos la olla al m#nimo ' conta)ilizamos ;287 0s desde ese momento. Pasado el tiempo de esterilizaci&n+ se apaga la 0ornalla ' no se toca la olla 0asta $ue se 0a'a en*riado por completoK si a)rimos la olla antes+ la despresurizaci&n ' el cam)io de temperatura )rusca puede 0acer ingresar contaminaciones al interior del *rasco+ además de condensar muc0a 0umedad en el interior del *rasco. Lo ideal es de/ar los *rascos C 0oras m#nimo adentro de la olla 0asta $ue est a temperatura am)iente. 4ec0o esto+ se puede empezar la inoculaci&n.
)noculaci#n En este proceso+ lo $ue 0acemos es in'ectar en los *rascos con grano esterilizado las esporas $ue preparamos en /eringas con soluci&n *isiol&gica. Para esto es mu' importante tra)a/ar tomando las máximas medidas de 0igiene posi)le+ con lo cual una vez más el glove)ox es de gran utilidad. Procedimiento2 - Lavarse mu' )ien las manos antes de empezar - anitizar a)solutamente todo lo $ue vamos a usar adentro del glove)ox+ inclu'endo los *rascos+ con alco0ol (si es alco0ol T agua oxigenada me/or! - ,ntroducir las cosas a utilizar en el glove)ox ' ec0ar alco0ol adentro del glove)ox con el spra' (esperar @ minutos a $ue se disipe el vapor del alco0ol+ 'a $ue vamos a tra)a/ar con *uego ' se puede in*lamar el aire+ es peligroso! - Auemar la punta de las agu/as antes de cada pinc0azo+ siempre 0asta $ue est al ro/o vivo. Luego+ de/ar $ue se en*r#e la agu/a un instante. - ,n'ectar en puntos opuestos del *rasco 0asta llegar a un total de 8ml (con cada /eringa de ;7ml se de)er#an poder inocular *rascos!. %uidado de no inocular muc0o+ podr#a 0acer c0arco adentro del *rasco ' ec0ar todo a perder. i se nos va la mano inoculando+ siempre podemos agitar el *rasco para repartir la 0umedad. - Despus de cada pinc0azo+ tapar el ori*icio con cinta micropore. reparando todo para inocular, esterilizando aguja e inoculación propiamente dic#a
)ncubaci#n "emperatura2 "eniendo inoculados los *rascos+ necesitamos u)icarlos en alg3n lugar donde la temperatura est alrededor de los 8C+ por encima de los 8S el riesgo de contaminaci&n es mu' alto+ ' por de)a/o de los 87 el crecimiento es mu' lento+ aun$ue puede colonizar a casi cual$uier temperatura+ alrededor de los 8C es lo más propicio para la incu)aci&n. Por $u no usar incu)adora2 4e pro)ado $ue a temperaturas am)iente de alrededor de 88-8@ coloniza )astante )ien+ con lo cual no considero para nada necesario usar una incu)adora. Pro)a)lemente una temperatura ligeramente más alta 0aga más rápido el proceso+ pero a ma'or temperatura es más la cantidad de microorganismos $ue se ven )ene*iciados ' es más pro)a)le $ue se nos contaminen los *rascos. i en invierno de repente 0ace muc0o *r#o+ suelo a'udarme con algunos rincones de la casa donde las temperaturas son un poco más altas. "engo un 0ueco entre la 0eladera ' el aparador $ue está arri)a donde entran per*ecto ;7 *rascos+ el cual genera un am)iente cálido ' pare/o de alrededor de 8C+ per*ecto para incu)ar. ino+ tengo tam)in la parte alta de la cocina+ donde por lo general siempre 0acen un par de grados más $ue en la parte )a/a. 5tra gran desventa/a de la ma'or#a de las incu)adoras $ue conozco+ es la disparidad de temperatura $ue 0a' entre la )ase del *rasco ' la parte alta. Las incu)adoras $ue calientan desde a)a/o ('a sea con calentador de pecera & con manta elctrica! logran $ue la parte de los *rascos $ue están en contacto con la )ase tengan ma'or temperatura $ue el resto del *rasco+ 0aciendo $ue 0a'a di*erencias de 0asta 6 & grados a lo largo del *rasco. Esto naturalmente incide en el tiempo de incu)aci&n. "iempo de incu)aci&n ' consideraciones generales2 ?na incu)aci&n promedio puede demorar alrededor de 6 semanas+ dependiendo de una amplia variedad de *actores+ a veces más+ a veces menos. 1 la mitad de la incu)aci&n+ algunos optan por agitar el *rasco 0asta romper ' separar el )lo$ue de granos+ para as# repartir los granos colonizados por todo el *rasco ' lograr $ue colonice más rápido (s&lo válida si usamos tapas de metal+ el aluminio se puede romper de nada+ en tal caso se puede usar triple capa de aluminio!. Esta tcnica considero adecuada usarla si tenemos la certeza de $ue la 0umedad en el *rasco es per*ecta ' no tenemos signos de avinagramiento (granos pegados a las paredes del *rasco como con agua & cam)ios de color en el grano tirando a amarillo & rosado!. Puede 0acernos ganar un par de d#as como tam)in puede 0acernos tirar el *rasco+ $ueda a criterio del cultivador. En mi caso+ 0e agitado exitosamente una camada de *rascos+ $ue tuve $ue re0idratar con soluci&n *isiol&gica en ese mismo momento 'a $ue 0a)#a perdido muc0a 0umedad. El resultado *u una colonizaci&n completa en ;6 d#as con temperaturas am)iente de alrededor de 86. 1lgunos cultivadores pre*ieren incu)ar los *rascos a oscuras+ otros dicen $ue con un poco de luz van más rápido. Personalmente no presto atenci&n a la luz durante la colonizaci&n. El grano de)e estar ;77 colonizado+ no de)e $uedar ni rastro de grano sin colonizar. De $uedar una porci&n sin colonizar+ de)emos tener la precauci&n de evitar esa parte a la 0ora de *ructi*icar+ 'a $ue es pro)a)le $ue contamine el tra)a/o.
)ncubadoras De cual$uier *orma+ de/o algunas alternativas de incu)adoras para $uienes vivan en lugares *r#os2 - %a/&n de plástico con manta trmica2 e colocan los *rascos dentro del ca/&n de plástico+ pueden ir tapados con una manta & una )olsa plástica grande. 1)a/o del ca/&n+ separado por unos tacos de madera+ va colocada una manta elctrica+ $ue genera calor constantemente ' lo irradia al ca/&n. Es mu' importante controlar la temperatura con term&metro para no pasarse+ e ir regulando la altura del ca/&n acorde a la temperatura deseada. - La incu)adora de Psiloc')e anaticus2 ?n mtodo mu' di*undido+ el *avorito de muc0os. %onsiste en utilizar un contenedor dentro de otro+ entre los cuales 0a' agua ' un calentador de pecera puesto a 8 ' encendido las 80s+ de modo tal $ue $uede el agua ' el calentador entre am)os contenedores. Esto 0ace $ue la temperatura del agua se transmita a los *rascos $ue están adentro del contenedor ' se pueda mantener una temperatura constante sin alteraciones.
*mágenes e1tra!das del clásico P -"ek en *ungi*un.org
&ustratos (bul* y casin$ Las tcnicas $ue se usan actualmente para *ructi*icar inclu'en distintos tipos de sustrato+ el cual se adiciona al grano colonizado. e puede usar una amplia variedad de elementos+ entre ellos estircol de vaca & ce)3+ estircol de ca)allo+ vermiculita+ tur)a+ *i)ra de coco+ 'eso agr#cola+ 0umus de lom)riz+ rastro/o de cereal+ etctera. Me vo' a centrar en mi com)o *avoritoK estircol de vaca+ tur)a ' vermiculita. De lo $ue pude pro)ar 0asta a0ora+ *u con lo $ue me/ores rendimientos ' resultados tuve siempre. ?na de las venta/as del estircol de vaca es el olor+ 0uele a tierra ' no apesta para nada+ incluso durante la pasteurizaci&n. Los porcenta/es $ue uso de cada componente del sustrato $ue preparo son2 C7 estircol 87 tur)a 87 vermiculita Por lo general mezclo la cantidad $ue vo' a necesitar en una *uente grande+ 0idrato )ien la mezcla con agua 0asta $ue $uede un pe$ue9o c0arco en el *ondo (no muc0o!+ la presiono )ien para $ue largue el excedente de agua ' lleno *rascos de C77cc+ los cuales introduzco dentro de la olla para pasteurizar. stiércol de vaca, tur"a & vermiculita
iempre $ue armamos un )ulk conviene tener @7 de grano )lanco per*ectamente colonizado ' @7 de sustrato (relaci&n ;2;!. La importancia de esto radica en $ue cuanto más grano colonizado tengamos+ menos tiempo tardará el micelio en recuperarse ' colonizar el resto del sustrato+ 'a $ue de usar una cantidad menor de grano podr#amos dar lugar a $ue otros microorganismos proli*eren ' le ganen la colonizaci&n al micelio. La relaci&n m#nima de granosustrato de)er#a ser ;28 (66 grano+ CC sustrato!+ de esta *orma tardar#a muc0o más en colonizar ' el riesgo de contaminaci&n es más alto+ pero es más alimento para el micelio. 1 la 0ora de mezclar el sustrato con el grano+ lo $ue se suele 0acer es poner en la )ase (del contenedor & )ande/a! una capa de sustrato pasteurizado (el @7!+ enseguida una capa con todo el grano colonizado (el ;77! ' so)re eso otra capa más de sustrato pasteurizado (el @7 restante!. 4a' $uienes optan por mezclar todo el grano colonizado con el sustrato lo más 0omogneo posi)le+ va a criterio de cada uno.
3uppers con sustrato & grano en plena colonización, relación 454
El casing es simplemente una *ina capa de vermiculita esterilizada $ue se coloca so)re la torta de grano ' sustrato+ $ue cumple la *unci&n de proveer 0umedad al micelio ' en casos en los $ue se 0a'a *ormado un micelio mu' duro en la super*icie+ provee aireaci&n & porosidad+ lo cual estimula al micelio a *ormar primordios so)re toda su super*icie+ en lugar de 0acerlo *ocalizado en los costados 3nicamente. Lo $ue 0ago 'o es incu)ar la torta de grano ' sustrato durante & @ d#as 0asta empezar a ver micelio en la super*icie de la )ande/a+ en ese momento es cuando aplico el casing de vermiculita esterilizada. De)e ser mu' *ino el casing+ con una capa de medio cent#metro alcanza.
Pasteuri%ar sustrato + Esterili%ar vermiculita Para preparar el sustrato $ue usaremos para alimentar al micelio a la 0ora de *ructi*icar es necesario pasteurizarlo. La pasteurizaci&n es un proceso mediante el cual se sostiene una temperatura de alrededor de Q7 durante una 0ora ' media & dos+ con el o)/etivo de matar gran parte de los microorganismos $ue nos pueden arruinar el cultivo+ pero de/ando viva cierta cantidad+ logrando as# $ue no $uede Fvirgen el sustrato+ ' creando una ventana de tiempo en la cual los organismos vivos en el sustrato $uedan inactivos+ dando lugar al avance del micelio. Por $u no esterilizar el sustrato2 1lgunos sostienen $ue al pasteurizar $uedan vivas algunas )acterias )en*icas $ue no entorpecen el desarrollo del micelio ' a'udan a proteger el sustrato de la contaminaci&n+ otros dicen $ue es más *ácil $ue se contamine el sustrato cuando se esteriliza 'a $ue el sustrato $ueda mu' Fvirgen ' cual$uier espora de tric0oderma 3 otro 0ongo puede germinar mu' rápido+ 0a' muc0as teor#as. Lo cierto es $ue parad&/icamente la pasteurizaci&n protege muc0o más ' durante más tiempo el sustrato+ )a/ando muc0#simo la tasa de pro)a)ilidades de contaminaci&n del pan. 4e compro)ado por mi cuenta las venta/as de una correcta pasteurizaci&n ' realmente )a/& muc0#simo la cantidad de contaminaciones en mis cultivos.
Pasteurizaci&n2 Para pasteurizar nuestra mezcla de sustrato+ necesitaremos un term&metro pinc0a-carne+ una )olsa de polipropileno (celo*án! ' una olla. (,mágenes pu)licadas por el usuario 1gar para s0roomer'.org en este link! - Primero $ue nada+ 0idratamos )ien nuestro sustrato durante una 0ora+ luego lo colamos ' removemos todo el excedente de agua presionándolo+ podemos a'udarnos apo'ando un plato so)re el colador.
- Para sa)er si *iltramos )ien el sustrato+ )asta con agarrar un pu9ado de sustrato ' apretarlo no mu' *uerteK no de)er#an salir más $ue algunas gotitas. i al apretar sale un c0orro de agua+ 0a' $ue presionar más el sustrato 0asta $ue supere la prue)a de la 0idrataci&n.
- 4ec0o esto+ procedemos a em)olsar & en*rascar el sustrato.
- inalmente+ cerramos la )olsa (& tapamos los *rascos con una )olsa limpia ' )anditas elásticas! ' la introducimos en la olla /unto con el term&metro+ cu)rindola casi en su totalidad con agua (el agua no de)e mo/ar el sustrato+ sino tendr#amos $ue volver a *iltrar el mismo!.
Lo $ue 0ago es prender el *uego de la 0ornalla en máximo 0asta llegar a los Q@+ en ese momento apago el *uego unos minutos+ cuando veo $ue )a/a a C@ vuelvo a prender el *uego 0asta llegar a Q@+ ' as# vo' repitiendo el proceso durante dos 0oras. Lo ideal es mantener una temperatura de alrededor de Q7 constantes (algunos dicen C@+ otros dicen Q@!+ se podr#a usar un calentador elctrico con termostato+ pero 'a es incursionar muc0o en la electr&nica (con un arduino+ placa de rela's ' un lm6@ )ien aislado es sencillo! =?=%1 P11OE DE L5 7+ la pasteurizaci&n de)e 0acerse dentro de ese rango de temperaturas+ 'a $ue de excederse podr#a matar las )acterias $ue necesitamos para proteger al micelio durante su colonizaci&n. - 4ec0o esto+ sacamos la )olsa (& *rascos!+ de/amos en*riar 0asta alcanzar temperatura am)iente ' procedemos a preparar las )ande/as & monotu) para *ructi*icar. - 1lgunos colegas suelen usar una *unda de almo0ada donde directamente meten toda la mezcla de sustrato seco+ la cierran con un nudo ' la meten en la olla+ tapándola con agua. 1s# como está lo pasteurizan a Q7 ' le exprimen el l#$uido al *inal+ cuando se termina de en*riar. 1m)os mtodos *uncionan. Esterilizar vermiculita para casing El casing+ como di/imos+ es una delgada capa de vermiculita (por lo general! $ue se coloca L?EG5 de la colonizaci&n del sustrato+ cuando el micelio cop& el @ del mismo+ ' al momento de pasar la )ande/a & monotu) a condiciones de *ructi*icaci&n. La vermiculita es conveniente 0idratarla )ien antes de esterilizarla. Para esto podemos poner toda la cantidad de vermiculita $ue necesitemos en un )ol+ llenarlo de agua caliente (se 0idrata me/or! ' de/arlo reposar una 0ora+ luego con un colador *ino la colamos lo me/or $ue podamos+ en*rascamos+ cerramos el *rasco con do)le capa de aluminio ' cinta de papel ' lo llevamos a la olla de presi&n durante ;287 0s.
,ructi'icaci#n Es la etapa *inal del cultivo. En esta etapa lo $ue 0acemos a grandes rasgos es colocar el grano en una )ande/a & tupper grande+ mezclarlo con otros componentes (lo $ue ser#a el sustrato!+ incu)arlo nuevamente algunos d#as para $ue el micelio colonice parte del nuevo sustrato ' *inalmente darle condiciones de *ructi*icaci&n+ a la espera de $ue nazcan los *rutos de nuestro tra)a/o. La temperatura de *ructi*icaci&n es más )a/a $ue la de incu)aci&n+ aun$ue se puede 0acer todo en el mismo rango de temperatura. eg3n el manual de Paul tamets+ lo ideal es lograr una temperatura $ue ronde los 86-8@+ puede *ructi*icar a menor & ma'or temperatura+ *uera de ese rango tienden a tardar más en salir los primordios ' pueden no salir en cantidad. Por encima de los 8Q se corre el riesgo de contaminaci&n+ con lo cual es conveniente )uscar un lugar más *resco para la *ructi*icadora. Para desarrollar temperatura esta)le en invierno se puede usar calentadores de pecera & manta elctrica+ seg3n el tipo de *ructi*icadora $ue tengamos. La 0umedad en la *ructi*icadora $ue usemos de)e ser alta+ cercana al S@ en los momentos previos al desarrollo de los primordios ' un tanto menor (@! durante los d#as *inales del crecimiento de las setas. Para generar 0umedad dentro de la *ructi*icadora (seg3n el tipo de *ructi*icadora $ue tengamos! se puede atomizar con agua mineral 6 veces por d#a so)re las paredes del contenedor+ entre otras tcnicas (>amás atomizar agua so)re un pan en plena *ormaci&n! La ventilaci&n de la *ructi*icadora de)e ser progresiva+ durante los d#as previos a la aparici&n de los primordios es recomenda)le no ventilar+ ' a medida $ue empiezan a aparecer los primeros pins+ empezar a ventilar progresivamente 0asta llegar a ventilar 6 & veces por d#a (más adelante 0a)lar de automatizar un extractor! "andas de *ructi*icaci&n (conocidas tam)in como *lus0es!2 Los panes de sustrato colonizado no dan *rutos una 3nica vez+ los dan por tandas & *lus0es. %ada vez $ue recolectemos nuestras setas+ si se mantienen las condiciones adecuadas+ pueden volver a salir más. Entre cada tanda lo $ue se estila 0acer es re0idratar los panes+ 'a $ue las setas drenan gran parte del agua $ue tiene disponi)le el micelio. Para esto 0a' varias tcnicas+ algunos riegan el pan con agua mineral 0asta taparlo por completo+ lo de/an 80s+ luego drenan el agua ' esperan la siguiente tanda. 5tros simplemente roc#an con agua mineral una a)undante cantidad+ ' lo de/an as#. 1lgunos tam)in le in'ectan agua con una /eringa esterilizada en m3ltiples lugares del pan+ esto var#a seg3n la *ructi*icadora $ue usemos. La inducci&n de la *ructi*icaci&n empieza cuando el micelio se da cuenta de tres cosas *undamentales2 la introducci&n de aire *resco ' la ca#da de temperatura (pero más $ue nada el primer *actor!. 1 veces si colonizamos completamente a oscuras ' destapamos las )ande/as & monotu)+ la introducci&n de luz estimula la *ructi*icaci&n. 1 esto se lo conoce como Fponer en condiciones de *ructi*icaci&n
Paso a paso de la 'ructi'icaci#n - "raemos a la mesa de tra)a/o todo lo necesario2 sustrato pasteurizado+ grano ;77 colonizado+ cuc0ara+ spra' con alco0ol+ algod&n+ cutter. - i usamos monotu)+ traer tam)in una )olsa de consorcio grande con la $ue 0aremos el *ondo ' un co)ertor para el sustrato durante la primer etapa de colonizaci&n. - i usamos )ande/as de aluminio & tuppers+ tam)in traer papel aluminio+ cinta micropore & la tapa de los tuppers. - =os lavamos )ien las manos antes de empezar ' sanitizamos a)solutamente todo lo $ue va'amos a usar con alco0ol+ lo limpiamos )ien con algod&n ' empezamos. - En esta etapa no es necesario usar el glove)ox+ 'a $ue el micelio es menos sensi)le a la contaminaci&n $ue en la etapa de colonizaci&n del grano+ además el sustrato pasteurizado se suele colonizar rápidamente (en @ d#as más o menos! - En el contenedor $ue utilicemos+ tenemos $ue poner la mitad del sustrato $ue pasteurizamos en la )ase del mismo. i usamos monotu)+ sanitizamos )ien una )olsa de consorcio con alco0ol en spra' ' algod&n ' la colocamos en el *ondo del monotu) antes de poner el sustrato. - Luego de la primer capa de sustrato+ colocamos todo el grano colonizado+ desparramandolo de *orma pare/a *ormando la segunda capa. - 1cto seguido cu)rimos con la otra mitad de sustrato pasteurizado. De)e $uedar una torta de 6 capas+ sustrato-grano-sustrato. - inalmente+ de)emos tapar esta torta. La necesidad de esto es para $ue se concentre el %58 ' la 0umedad relativa sea cercana al ;77+ )ene*iciando la colonizaci&n del sustrato recin colocado. - i usamos monotu)+ sanitizamos )ien otro pedazo de )olsa de consorcio negra ' con ella cu)rimos )ien todo el sustrato+ $uedando la )olsa pegada al mismo+ impidiendo la respiraci&n (permite el intercam)io gaseoso igual!. "am)in tenemos $ue cerrar los C puertos de ventilaci&n+ para esto podemos usar )olsas pegadas desde a*uera con cual$uier cinta (la micropore no+ es cara! - i usamos tuppers+ podemos usar las tapas de los tuppers para taparlo ' concentrar el %58 (las tapas de)en tener puertos de intercam)io gaseoso igual+ son agu/eritos tapados con cinta micropore!. - i usamos )ande/as de aluminio+ de)emos cu)rir la )ande/a con un papel aluminio sanitizado+ al cual tenemos $ue 0acerle pe$ue9os agu/eros con una agu/a ' taparlos con cinta micropore para permitir el intercam)io gaseoso. - 4ec0o esto+ de)emos permitir colonizar el sustrato $ue agregamos 0asta llegar al @ de su totalidad. Podemos ir c0e$ueandolo+ por lo general tarda entre @ ' Q d#as. %uando gran parte de la super*icie se pone )lanca+ 'a está listo para entrar en condiciones de *ructi*icaci&n. - En este momento es cuando se 0ace el casing. El d#a previo a pasar la )ande/a a *ructi*icaci&n de)emos esterilizar la vermiculita para poder aplicarla en ese momento. - 1)rimos la )ande/amonotu)tupper+ destapamos los puertos de ventilaci&n del monotu)+ ' esta)lecemos las condiciones de *ructi*icaci&n. - 1 partir de ese momento+ los primordios pueden aparecer en una semana+ a veces más & menos. Desde $ue salen los primordios+ pasan entre @ ' Q d#as 0asta $ue están completamente maduros+ listos para cosec0ar.
Preparaci#n de bandeas El 0ec0o de no utilizar un monotu) implica la utilizaci&n de )ande/as & tuppers. En mi caso 0e pro)ado usar )ande/as de aluminio ' tuppers transparentes+ am)os con )uenos resultados. =os da ciertas venta/as el uso de )ande/as & tuppers a di*erencia del monotu)+ 'a $ue no tenemos necesidad de 0acer grandes cantidades de sustrato ' grano. El rendimiento es menor de todas *ormas. ?sar tuppers2 Los tuppers tienen la venta/a de $ue se puede usar la tapa de los mismos durante la etapa previa a la *ructi*icaci&n+ 'a $ue necesitamos @ d#as para $ue el micelio se recupere ' colonice el @ del sustrato. %omo el tupper está cerrado+ podemos tener colonizando el sustrato con el grano en cual$uier lugar $ue $ueramos+ *uera de la *ructi*icadora. 1 las tapas de los tuppers les 0ice algunos ori*icios de intercam)io gaseoso+ los 0ice con mec0a de @mm+ los cuales tap con cinta micropore durante la colonizaci&n del sustrato. 5tra venta/a de usar la tapa con agu/eros+ es $ue la podemos usar como colador a la 0ora de 0idratar los panes. encillamente tapamos los agu/eros con cinta+ llenamos el tupper con el sustrato de agua+ tapamos con la tapa+ de/amos pasar 80s+ sacamos la cinta de la tapa ' *iltramos el sustrato+ de/ando drenar toda el agua a travs de los ori*icios. 4ec0o esto+ sacamos la tapa ' devolvemos la )ande/a a la *ructi*icadora. %omo desventa/a+ podemos decir $ue 0a' $ue lavarlos mu' pero mu' )ien despus de usarlo+ so)re todo si 0u)o alguna contaminaci&n. "am)in está el pro)lema de la transparenciaK si no pintamos de negro los tuppers por *uera & no los envolvemos de costado con algo+ los panes empiezan a *ructi*icar por los )ordes ('a $ue les da la luz!. ?sar )ande/as de aluminio2 "ienen la venta/a de $ue son opacas (no 0a' $ue pintarlas ni envolverlas!+ al no ser reutiliza)les son más 0iginicas $ue los tuppers. La desventa/a es $ue no es tan c&modo re0idratar el pan+ ' luego de llenar la )ande/a con grano ' sustrato+ 0a' $ue taparlo con papel aluminio+ al cual es conveniente 0acerle unos pocos ori*icios de intercam)io gaseoso. 6andejas de 7azatapec listas para fructificar
!ipos de 'ructi'icadoras Los dise9os de *ructi*icadoras $ue se usan actualmente es mu' amplia. 1lgunas de ellas cuentan con )ande/as donde ponen el sustrato con el grano+ las cuales son u)icadas dentro de la *ructi*icadora+ a excepci&n del clásico Fmonotu). :o' a 0a)lar principalmente de el tipo de *ructi*icadora con la cual más experiencia tengo+ se llama FPoor man
Poor man.s pod/ Es una *ructi*icadora $ue provee 0umedad ' aireaci&n constante+ de modo tal $ue podemos mantenerla cerrada durante muc0o tiempo ' evitar introducir contaminantes. Esto es una gran venta/a si tenemos la *ructi*icadora en la cocina (donde 0a' muc0as esporas de *rutas ' verduras dando vueltas! & si en nuestra casa tenemos 0ongos en las paredes (tenemos esporas de 0ongos en toda la casa!. La otra gran venta/a de esta *ructi*icadora es la desatenci&nK si la con*iguramos )ien prácticamente no tenemos $ue a)rirla ni tocar nada durante d#as+ lo cual nos permite estar ;8 0oras *uera de casa sin preocuparnos. Para esto necesitamos2 - ?n tupper de 67 litros con tapa - 1ireador de pecera - "emporizador anal&gico - "u)os de plástico para el aireador ' C sopapas para los tu)os - %alentador de pecera (si donde vivimos 0ace muc0o *r#o! - %utter ' cinta aisladora (si usamos calentador de pecera! - 1tornillador elctrico ' mec0as de ;mm ' @mm - ellador de silicona - Leca (piedra volcánica+ se consigue en viveros! & - Perlita (en reemplazo de la leca! - %ooler de P% ' *uente de @v ;777 m1 - iltro de spar - Planc0a Lo primero es 0acer los ori*icios en la parte de arri)a para pasar los tu)os de plástico del aireador+ para esto usamos la mec0a de @mm. Luego+ en los dos tu)os de plástico 0acemos ori*icios separados @cm entre cada uno de ellos con la mec0a de ;mm+ a traves de los cuales saldrá el aire. Pasamos los tu)os 0acia adentro del tupper ' los *i/amos con las sopapas. i vamos a usar calentador de pecera+ es necesario 0acer otro ori*icio con una mec0a de @mm en la parte superior+ para de/ar pasar el ca)le del mismo. Lamenta)lemente para pasar el ca)le 0a' $ue cortarlo+ pasarlo ' empalmarlo+ para esto pelamos el ca)le con el cutter ' lo volvemos a unir con cinta lo más proli/amente posi)le. ?na vez pasados los tu)os ' el ca)le conviene sellar las /untas entre los tu)os ' el tupper ' entre el ca)le ' el tupper con silicona+ como se puede ver en las *otos. Podemos optar por montar el aireador so)re el tupper con un tornillo ' una tuerca para $ue $uede más proli/o.
Agujereamos las mangueritas cada %cm
na vez que las instalamos, pro"amos poner un poco de agua para ver cómo funciona
resentamos todo adentro & sellamos las juntas con silicona
5tra necesidad es 0acer pe$ue9os ori*icios en la parte superior del tupper ' en la parte )a/a (por encima de la piedra!+ tapados con micropore & algod&n+ para permitir la ventilaci&n. 0etalle del aireador +ructificadora casi lista con orificios superiores (faltan a"ajo)
Lo $ue nos *alta a0ora ser#a instalar el ventilador de P%. Para esto tenemos $ue 0acer una serie de ori*icios en alguna de las paredes del tupper+ los cuales vamos a tapar con el *iltro de spar. Lo $ue 'o recomendar#a es instalarlo a la altura del ca)le del calentador+ pero en la pared de en*rente (es decir+ en la parte superior del tupper!. i lo instalan como lo instal 'o en la parte )a/a+ van a tener pro)lemas de se$uedad en los panes+ conviene $ue est alto ' le/os de las )ande/as+ ' $ue la intracci&n del aire sea pasiva ' por los ori*icios de la parte )a/a del tupper. Para instalarlo+ )asta con usar 8 de los tornillos $ue vienen con el cooler+ 0aciendo los ori*icios con la mec0a de @mm.
0etalle del e1tractor & de uno de los orificios de intracción de aire. 0el otro lado del cooler se puede ver encintado el filtro de spar
El *iltro de Fpar es un *iltro de extractor de cocina+ es una *i)ra sinttica )astante 3til para 0acer *iltros descarta)les para el extractor de la *ructi*icadora. Para 0acerlo+ tenemos $ue prender la planc0a en m#nimo+ de/arla calentar )ien+ do)lar el *iltro de spar en + apo'arlo so)re una tela+ apo'arle una tela más encima ' planc0arlo con cuidado 0asta $ue $uede *inito (se ac0ica muc0o con el calor+ %?,D1D5 al 0acer esto+ si se pasan de calor se puede $uedar pegado el *iltro a la tela $ue usemos+ igualmente se despega *ácil!. De esta *orma $ueda un *iltro )ien delgado ' poroso $ue podemos instalar del lado de adentro de la *ructi*icadora+ de/ando el ventilador del lado de a*uera. En mi caso+ lo pego con cinta micropore ' lo cam)io cada vez $ue empiezo un cultivo nuevo. +iltro de spar ó e1tractor de cocina 0etalle de cómo queda el filtro de spar luego de planc#arlo
%onsideraciones so)re esta *ructi*icadora2 - Es ?=D1ME="1L lavar mu' pero mu' )ien la leca & la perlita $ue usemos+ 'a $ue es posi)le $ue sea un *actor de contaminaci&n importante. - e puede reemplazar la leca & perlita por un plástico re/illa suspendido a cm de la )ase+ & alg3n ingenio similar. er#a lo más 0iginico - 1l agua $ue pongamos dentro de la *ructi*icadora conviene ponerle un )uen porcenta/e de agua oxigenada+ la cual a'udará a mantener la asepsia en el cultivo. - =ormalmente el agua tiene $ue cu)rir los tu)os del aireador+ con eso alcanza ' dura unos cuantos d#as. - En mi caso nunca cam)io durante una *ructi*icaci&n el agua+ 0a' algunos $ue s#+ para eso conviene improvisarle a la *ructi*icadora un tap&n de goma en el *ondo
0onotub/ 4e a$u# la vedette de las *ructi*icadoras+ la más simple ' la más rendidora de todas. %on un monotu) )ien 0ec0o+ el rendimiento es alt#simo en comparaci&n con el uso de )ande/as+ realmente es una animalada lo $ue se puede cosec0ar utilizando esta *ructi*icadora. "iene como venta/as el gran rendimiento ' la simpleza del dise9o. %omo contrapartida+ tiene la desventa/a de $ue 0a' $ue ventilarla ' rociar con agua sus paredes varias veces por d#a+ para mantener la ventilaci&n ' la 0umedad en el punto /usto. 1demás+ la cantidad de grano colonizado ' sustrato $ue se necesita es )astante ma'or. - Básicamente es un tupper de más de 87 litros transparente con tapa+ en el cual se 0acen C ori*icios para ventilaci&n+ los cuales van cu)iertos con guata algod&n *iltro de spar & lo $ue más nos guste. - de los ori*icios de)en 0acerse /usto por encima de donde termina el sustrato+ ' los 8 restantes de)en 0acerse. - En el *ondo del tupper+ luego de sanitizarlo completamente con alco0ol+ se de)e colocar una )olsa de consorcio (tam)in sanitizada con alco0ol!+ de modo tal $ue cu)ra todo el contorno in*erior ' lateral del pan de micelio ' sustrato+ para $ue todos los primordios salgan en la super*icie ' no de costado & de a)a/o. - 1ntes de introducir el grano ' el sustrato+ se de)en cerrar 0ermticamente los puertos de ventilaci&n+ 'a $ue durante la primer etapa es necesario $ue se incrementen los niveles de %58 para $ue el micelio se recupere ' colonice el sustrato+ ' para inducir la *ormaci&n de primordios. - ?na vez listo el grano ' el sustrato pasteurizado+ se lo introduce en el tupper+ se lo cu)re con una )olsa & papel aluminio esterilizado con alco0ol ' se lo de/a & @ d#as 0asta $ue el micelio 0a'a copado el @ de la super*icie. - En ese momento+ se descu)re la super*icie del pan ' se a)ren los puertos de ventilaci&n+ 0asta $ue empiecen a salir los primordios. - ?na vez $ue empiezan a salir los primordios+ es necesario empezar a ventilar manualmente una vez por d#a e ir 0aciendolo 8 veces por d#a & 6 a medida $ue va'an creciendo más ' más los *rutos. %onsecuentemente+ 0a' $ue ir rociando las paredes del tupper para no perder la 0umedad relativa (nunca rociar el pan ni las setas!. +ran89orrigan de :#roomer&.org #izo un e1celente tutorial de monotu"s ACA
;a grosera cantidad que se puede lograr
/tro monotu" pu"licado por nnn<&an en :#roomer&.org ACA
Cosec1a y recolecci#n de esporas ?na vez $ue los primordios asoman+ tardan alrededor de @ & C d#as en alcanzar su tama9o máximo+ siempre ' cuando las condiciones sean &ptimas. En el momento en $ue están a punto de romper el velo+ se dice $ue es el momento en el $ue más concentraci&n de psiloci)inapsilocina tienen+ aun$ue todav#a puede ser $ue les $uede un d#a más de crecimiento en tama9o. Personalmente no me interesa la potencia+ los vo' cortando despus de $ue rompen el velo. stado de la seta en su punto de má1ima concentración de alcaloides
Para recolectar esporas+ es necesario $ue el som)rero de la seta se a)ra 0asta $uedar 0orizontal & paralelo al suelo+ 'a $ue si está mu' cerrado pro)a)lemente no suelte esporas. %onviene recolectar esporas de la primera camada+ de las primeras setas $ue se a)ran )ien+ 'a $ue lo $ue )uscamos es o)tener esporas no contaminadas (a medida $ue van pasando los *lus0es es más pro)a)le tener alg3n tipo de contaminaci&n! stado de la seta previo a la esporulación stado de la seta perfecto para esporular (som"rero a"ierto, #orizontal)
%&mo 0acer un print de esporas (+otos tomadas de Mus0planet .com ) Para esto vamos a necesitar2 - Escalpelo & cutter - 1lco0ol ' encendedor - Papel aluminio (otros usan papel *otográ*ico! - 1lgod&n - El Glove-Box - :asos de vidrio ' platitos de ca* para cada vaso mu' limpios - Uiploc de al menos ;7cm x ;7cm %uidadosamente seleccionamos las setas de las $ue vamos a recolectar las esporas+ tenemos $ue elegir las $ue estn más a)iertas+ con el som)rero casi 0orizontal. Dentro del glove)ox colocamos todas nuestras 0erramientas+ previamente sanitizadas con alco0ol+ incluso el glove)ox. De/amos evaporar un poco los gases del alco0ol antes de empezar a tra)a/ar+ 'a $ue si nos excedemos con el alco0ol podemos llegar a matar las esporas. Preparamos en un platito de ca* un rectangulo de aluminio de Qcm x ;cm & similar (algo $ue entre en el ziploc+ de más o menos el tama9o del som)rero!. Lo sanitizamos )ien con alco0ol+ tiene $ue estar per*ectamente limpio. %osec0amos la seta $ue vamos a usar ' la introducimos en el glove)ox lo más rápido posi)le+ para evitar contaminaciones. sterilizamos el escalpelo ó cutter con alco#ol & el encendedor, cortamos el som"rero de la seta & lo colocamos so"re el papel aluminio (en el caso de la foto, usaron papel fotográfico). Acto seguido, tapamos el som"rero con un vaso "oca a"ajo para evitar todo tipo de contaminación.
;uego de dejar 2=#s el som"rero so"re el papel, #a"rá soltado todas sus esporas so"re el mismo. Con cuidado retiramos el vaso & el som"rero, do"lamos el papel aluminio (en la foto no lo #acen) & guardamos el print en un ziploc. ;o podemos almacenar en #eladera, dentro de un tupper (no en el freezer>)
&ecado y $uardado Para conservar durante muc0o tiempo las setas $ue aca)amos de cosec0ar+ lo me/or es des0idratarlos completamente ' guardarlos )ien sellados en *reezer+ de esta *orma se conservan durante meses sus propiedades sin perder potencia. Lo cierto es $ue al secarse+ gran parte de la psilocina se degrada+ $uedando una ma'or concentraci&n de psiloci)ina $ue de psilocina en ellos. rescos son más potentes+ pero por lo general los cultivadores no suelen conservarlos en ese estado durante más de ;7 d#as en la 0eladera. Es de suma importancia secar las setas 0asta $ue $ueden como galletitas (cracker dr'!+ 'a $ue corremos riesgo de $ue se contaminen con 0ongos (en casa de 0erreroV!. =o descuidar este paso+ es tan importante como todos los demás. ecado2 Para esto considero $ue lo me/or es usar un cooler de P%+ cuanto más grande me/or. En mi caso+ consegu# un extractor de servidor de ;8v S7m1 de ;8cm a rulemanes (el escándalo $ue 0ace! ' una *uente de ;8v ;777m1 (/ugad#simo! $ue la ro) de un router vie/o. %on un cooler más c0ico se puede de todas *ormas+ siempre es me/or $ue nada. ?so como )ande/a una panera de plástico+ dentro de la cual introduzco las setas recin cortadas ' la tapo con una tela negra para evitar el contacto con la luz. Esta panera la coloco so)re un )id&n de plástico con cortes $ue simulan patas en su )ase ' el ventilador *i/o adentro+ de modo tal $ue el ventilador 0ace circular aire de a)a/o 0acia arri)a+ secando las setas a gran velocidad. 0etalles del secador de setas
En 0s están )astante secas+ pero el secado de*initivo lo 0ago con el calor de una lámpara. Para esto+ envuelvo las setas casi secas en una tela negra+ las pongo en la panera ' las de/o durante C 0oras con una lámpara 0al&gena incandescente de C7 Hatts a ;@ cm+ controlando $ue la temperatura de la super*icie de la tela no pase los @7 (es seguro+ la psiloci)ina se empieza a degradar )astante por encima de los ;77! :ecado final. A"ajo puede verse un modem que a&udó en el proceso.
Las setas por lo general están compuestas en un S8 de agua+ por lo tanto+ $uedará s&lo un de su peso original luego de un correcto secado. Antes del secado 0espués del secado
Contaminaciones El usuario 1kostraos a)ri& un 0ilo en canna)isca*e.net )ien detallado so)re contaminaciones+ con *otos ' todo. L,=W al t0read Bacterias, Bacillus: Las )acterias es una de las más comunes contaminaciones a la 0ora
de germinar las esporas en el sustrato elegido+ suelen darse a una mala esterilizaci&n del sustrato+ ' temperaturas altas+ con más raz&n si estamos cultivando en centeno en grano... por a$uello de las endoesporas+ $ue si no está )ien 0ec0a la esterilizaci&n+ no termina con ellas+ ' pueden llevar al traste nuestro cultivo... se puede identi*icar+ cuando pasados varios d#as+ o semanas+ no crece a)solutamente nada+ $ue por las )acterias $ueda paralizado+ tam)in+ en caso concreto como es el Bacillus+ suele darse una especie de l#$uido amarillo alrededor del grano+ ' si lo a)res notarás un olor a 0uevos podridos o vinagreta mu' recon*ortante. ?na )uena *orma de detener su crecimiento es a9adiendo )icar)onato s&dico so)re la manc0a(esto en caso de *ase de *ructi*icaci&n ! su)iendo el p0 ' limitando su expansi&n. Aspecto de contaminación de "acterias visi"le odemos apreciar el retroceso del crecimiento del micelio frenado por el contaminante
7arc#ando dos de "acillus>
"am)in existen Bacterias en hongos+ estas las podris ver+ por$ue a veces ocasionan Xestr#asX en los pies de las setas+ ' som)reros rotos... cuando no está avanzada... no 0a' riesgo+ cuando está avanzado podemos ver como mucosidad en los som)reros ' olor putre*acto... 6acteria pseudomona
Cobweb: ?na in*ecci&n $ue si eres novatillo+ la verdad+ te lo puedes pasar por alto sin darte
cuenta 0asta $ue tu pan est totalmente colonizado por l+ se suele dar en la *ase de colonizaci&n de la co)ertura ' está causado por el Dact'lium MildeH. "iene un color algo más grisáceo $ue el micelio ' puede cu)rir la super*icie de un pan en un par de d#as. Puede llegar a cu)rir el cuerpo entero de un 0ongo. uele darse en am)ientes mu' cargados de %o8+ ' con un so)reexceso de 0umedad...+ para prevenirlo+ no tener una 0umedad mu' alta ' *avorecer el intercam)io gaseoso+ 'a sea aireandolo más+ o metiendo más tiempo a la )om)a..... 1l o)servarlo con lupa o microscopio+ vemos en las puntas de sus 0i*as )olitas negras+ sus esporasV ;a espesa ?telara@a? de co"e" es visi"le encima del pan & el micelio.
-i los fte8 "ien colonizados se li"ran de este mal. n vasos colonizando tam"ién puede aparecer.
Trichoderma: Bueno este es nuestro peor enemigo+ ' el $ue más se dá+ tanto en la *ase de
*ructi*icaci&n+ como colonizaci&n+ 'a sea de sustrato o de colonizaci&n de la co)ertura...está causada por "ric0oderma 0arzianum+ comienza por un mo0o+ parecido al micelio+ pero más )rillante+ $ue+ cuando suelta las esporas se vuelve verde+ es mu' rápido+ te puede contaminar todo el pan en cuestion de dias+ ' es mu' di*#cil de com)atir+ se podr#a decir $ue si te sale tric0oderma+ el porcenta/e de $ue tu cultivo se va'a al garete+ está en un S@+ ' pudiendote costar tus otros cultivos en la *ructi*icadora+ por ello+ recomenda)le+ $ue a la minima manc0ita verde+ *uera el pan+ ' limpieza de *ructi*icadora+ 'a $ue al ser 0ongos+ suelta esporas+ $ue pro)a)lemente se $ueden por tu *ructi*icadora esperando el momento... se da+ por una mala pasteurizaci&n de la co)ertura+ )ulk etc... de una mala esterilizaci&n del sustrato+ suciedad o exceso de %o8 ' 0umedad... aun as#+ si $uieres com)atirlo... cortar la zona in*ectada con un )uen margen+ el 08o8 parará su crecimiento pero no lo matará+ tran$uilo+ al micelio no lo a*ecta+ su)ir el p0 con una cuc0arada de )icar)onato s&dico+ aplicar una disoluci&n de agua ' un par de )otas de )etadine+ etc.
;a tric#oderma es claramente visi"le n pf3e8 tam"ien es mu& aprecia"le la destrucción de la tric#oderma. :in dudarlo a la "asura>
odemos apreciar en una cultura de agar como va comiendo micelio.
Overlay: Parece micelio+ pero más algodonoso+ de no detenerse+ colonizara el pan+ incluso
des)ordandose por los lados+ se de)e a una 0umedad mu' )a/a ' temperaturas altas+ de estar avanzada+ tendrá $ue 0acerse una Fscratc0ing + $ue viene siendo $uitar el overla' con un cuc0illo previamente esterilizado ' spra'ando a continuaci&n una disoluci&n de o8T08o8 ;;7+ con eso )astará...
/verla&
Neuroespora: e suele dar en la *ase colonizaci&n del sustrato ( 'a sea grano o p.petri ! no
es mu' com3n+ está en la naturaleza ' suele producirse en el estircol+ es mu' rapido en cuestion de 8 0oras colonizará todo el sustrato... suelen darse a altas temperaturas+ ' 'a $ue es un 0ongo+ 0a' $ue tener cuidado con sus esporas 'a $ue se propagan mu' *acilmente ' pueden $uedarse en cual$uier lado esperando al acec0o... el mo0o rosa es de)ido a =eurospora sitop0ila+ la cual es mu' di*#cil de erradicar+ es aconse/a)le $ue al minimo sintoma de esta contaminaci&n des0acerse de la placa ec0ando le/ia por encima+ por si acaso... /tro de los contaminantes... "onito.
Aspergillus: Más *recuente $ue se d en agar+ o de)ido a malas pasteurizaciones... se da
en co)erturas más )ien con p0 alcalino+ las variaciones en cuanto al color de este contaminante pasan de amarillo a verde ' este a negro2 1spergillus niger+ como su nom)re lo indica+ es negroK 1spergillus *lavus es amarilloK 1spergillus clavatus es de color azul verdosoK el 1spergillus *umigatus es verde grisáceo+ ' 1spergillus versicolor ex0i)e una variedad de colores (verde a amarillento a rosado!. Estos mo0os+ como muc0os otros+ el cam)io en el color ' la apariencia de acuerdo con el medio en el $ue se producen. :arias especies son term&*ilas. Aueda decir+ $ue el 1spergillus en general+ 'a sea la variedad $ue sea son "YZ,%1 ' por lo tanto+ nocivas para nuestro organismo+ por lo $ue al menor aparecimiento+ lo aconse/a)le es retirar el grano placa con una mascarilla ' rociar con le/#a la placa+ ' tirarla... no 0agamos experimentos con estos contaminantes por *avor... Aspergillus devorando micelio en una cultura en agar. Aspergillus +lavus
Aspergillus -idulans
Aspergillus -iger Aspergillus Bersicolor
Sporendonema purpurescens: Mo0o raro+ suele colonizar en a)onos... estircol de vaca+
ca)allo+ etc+ este 0ongo cam)ia de color seg3n la maduraci&n de las esporas+ al principio es como )lanco+ luego a rosa+ luego ro/o+ ' *inalmente termina siendo color naran/a... su crecimiento es lento por lo $ue parece $ue ser#a *ácil de erradicarV Curioso tono rosa de este contaminante.
Penicillium: "iene un aspecto azul-verdoso+ sus esporas se reproducen por encima del
pan+ en la co)ertura+ se parece al aspergillus tanto de aspecto como de nivel destructivo+ am)os colonizan la co)ertura en 0oras... parte de 0idratos simples+ la celulosa+ el almid&n etc+ es como en la *ase de colonizaci&n del grano ' en culturas de agar+ ' suele ser uno de los contaminantes comunes+ mu' di*#cil de com)atir+ con este+ no experimentar+ tirar directamenteV
Cuando adquiere este color es a veces confundido con Aspergillus.
0eja por completo inutilizado el medio de cultivo.
Burbua seca: Está causada por :erticillium+ los sintomas varian segun la etapa de
desarrollo de este 0ongo+ suele darse+ por *alta so)re todo de 0igiene+ mos$uitos ' demás... seg3n la etapa2 En 0ongos /&venes+ los primordios salen de*ormados+ cam)iando a un color gris marronáceo . En 0ongos más desarrollados+ el tallo+ especialmente el pie+ aca)a engrosando de tama9o+ inclinándose el som)rero ' perdiendo la capa exterior de su cuerpo. 1ca)an teniendo un color gris-)lan$uecino. 1demás de controlar la 0igiene+ puede ponerse una monta9ita de sal de mesa so)re el )rote para controlar la propagaci&n.%uando a3n está empezando a desarrollarse t) puede ser e*ectivo espra'ar con alco0ol so)re el )rote.Disminuir la 0umedad al 7 ' la temperatura a unos ;@ durante unos d#as *renará la contaminaci&n so)re el resto de 0ongos.
7us#room infectadas por el Berticillium o "ur"uja seca. 7anc#as necróticas en som"reros.
:!ntomas en las capuc#as.
;as que provocan esas "a"as son levaduras. na rara contaminación "acteriana. sta "acteria genera fermento al consumir el sustrato, de a#! las "ur"ujas que se forman, mu& parecidas a un esputo.
2caros/ :o"re este som"rero deam"ulan unos animalitos diminutos que a muc#os dan alergia.
;a misma foto con un poquito más de zoom...
n esta ltima foto un #ongo en el que &a están #aciendo mella. :e lo están comiendo.
