Cromatografía en papel
ESTUDIANTES: Guerra Dina Luz Pérez Nayda Luz Grupo 19A
DIRIGIDO A: M. Sc. Jesús Arturo Reyes Lemus Identificación: 3727168 Laboratorio De Química Orgánica Código De Asignatura: 23337 Aula: 507B Mesa: 5
Universidad Del Atlántico Facultad: Ciencias De La Educación Programa: Licenciatura En Biología Y Química Plan De Estudios: 2011 Extendida III Semestre - II Corte Código Snies: 11759 Registro Calificado Resolución 4403 Del 1 De Junio De 2011
Kilómetro 7 Vía Puerto Colombia Barranquilla - Atlántico - Colombia Sábado, 05 De abril De 2018
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FACULTAD CIE CIE NCIAS DE LA E DUCACIÓN PROGRAMA DE LICENCI ATURA EN BIOLOGÍA BIOLOGÍA Y QUÍMICA PLAN DE E STUDIOS 201 20111 EXTENDI DA
Cromatografía en papel
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Registro calificado Resolución 4403 del 1 de Junio de 2011
Contenido
Introducción Introducción ....................................................................................................................... 3 Justificación ....................................................................................................................... 4 Marco teórico ..................................................................................................................... 5 Objetivos............................................................................................................................ 6 Metodología Metodología ....................................................................................................................... 7 Conclusiones Conclusiones ..................................................................................................................... 8 Bibliografía Bibliografía ......................................................................................................................... 9 Anexos ............................................................................................................................ 10
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Introducción Los métodos cromatográficos son métodos de separación que involucran la transferencia reversible de un compuesto que está adsorbido en una fase estacionaria (adsorbente) a una fase móvil mó vil (disolvente) que fluye a través de la fase estacionaria. La separación surge de las interacciones mutuas de componentes de una muestra, disolvente y adsorbente. El adsorbente está presente en un gran exceso, con una gran superficie y con sitios polares capaces de unir reversiblemente pequeñas concentraciones de sustancias por un proceso esencialmente electrostático. El disolvente compite con los componentes de la muestra por los sitios de unión. Estos componentes son desplazados reversible y continuamente en la dirección del flujo del disolvente. El proceso descrito puede escribirse como un equilibrio competitivo en donde hay una partición de los componentes entre la fase estacionaria y la fase móvil: Componentes-adsorbente ↔ disolvente -adsorbente ↔ componente -disolvente Entre más polar sea un compuesto, más fuertemente se adsorbe en la fase estacionaria, por lo que su migración a lo largo de ella es menor, siendo eluído (arrastrado) más lentamente por la fase móvil, que los compuestos menos polares. De este modo, la separación selectiva de los componentes de una muestra, por cromatografía, se debe a las diferencias en la migración de los componentes individuales a lo largo de la fase estacionaria.
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Justificación
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Marco teórico La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar unos análisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica muy potente no requiere de ningún tipo de equipamiento. La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de papel filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la solución y evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como fase móvil se hace ascender por capilaridad. Luego se coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra de abajo dentro de un recipiente que contiene fase móvil en el fondo. Después de unos minutos cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al extremo se retira el papel y se deja secar. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se verán las manchas manch as de distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de revelado. Hay varios factores de los cuales depende una cromolitografía eficaz: la elección del disolvente y la del papel de filtro. Un ejemplo podría ser que utilices un pedazo peda zo de papel y le hagas puntos de d e colores con plumones permanentes y le pongas un lapiz del lado donde no están los puntos de colores (esto te servirá como soporte), después en un vaso pon alcohol y coloca la tira de papel con el lapiz horizontalmente en la parte de arriba para que el papel no caiga y tienes que esperar para que el alcohol haga efecto en el papel, lo que sucederá es que a los puntos de colores se les harán unas pequeñas líneas hacia arriba. El descubrimiento de la cromatografía en papel en 1943 por el químico inglés Archer John Porter Martin (1910-2002) y el también bioquímico inglés Richard Laurence Millington Synge (1914-1994) proporcionó, por primera vez, los medios de explorar los constituyentes de plantas y para su separación e identificación. Hubo una explosión de actividad en este campo a partir de 1945.
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Objetivos Aplic Aplicar ar la la croma cromatog tograf rafía ía en pape papell como como técnic técnica a de separa separació ción n de una mezcla mezcla de componentes. Comparar la eficiencia y aplicación de la cromatografía en papel como ejemplo de los métodos cromatográficos.
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Metodología Materiales y reactivos Equipos e implementos
1 Gotero 1 Lápiz o pedazo de manguera 2 Vidrios de reloj 2 placas par CCD 2 Beacker de 20 mL 1 Gradilla 4 tubos de ensayo Procedimiento:
1. Cromatografía en papel Análisis de resultados:
Reactivos
Fenacetina pura Cafeína pura Ácido acetil salicílico Alúmina Etanol Indicador de fluorescencia hf254 Solución sulfocrómica
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Conclusiones Se logró aplicar la cromatografía en papel como técnica de separación de los pigmentos determinando que la técnica es apropiada y eficiente. Se consiguió comparar la eficiencia y aplicación de la cromatografía en papel como ejemplo de los métodos cromatográficos. Esta práctica de laboratorio se culminó con éxito y con los resultados obtenidos se evidencia que se adquirió habilidad en el manejo de la técnica de separación descrita en este informe, en donde se aprendió a utilizar los materiales e instrumentos necesarios para la realización de esta práctica de nivel básico de química orgánica.
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Bibliografía Haslam, Edwin (2007). «Vegetable tannins – Lessons of a phytochemical lifetime». Phytochemistry 68 (22 –24): 2713-21. PMID 18037145. Curso Práctico De Química Orgánica Ray Q Brewster Alhambra 1978 España 253 Pp Qd251 B743 1970. Cromatografía de capa delgada, separación de los pigmentos de una planta.Alonso Marrugo González Profesor Químico- MsC-PhD. Universidad de Cartagena. Guzmán, D. 2010. Cromatografía en papel. Laboratorio Labo ratorio de química orgánica. Universidad Nacional de Colombia. 23-29 Pp. Harry W. Lewis & Christopher J. Moody (13 de junio de 1989). Experimental Organic Chemistry: Principles and Practice (ilustrada edición). WileyBlackwell. pp. 159-173. ISBN 978-0-632-02017-1. Volver arriba↑ A.I. Vogel; A.R. Tatchell; B.S. Furnis; A.J. Hannaford; P.W.G.
Smith. Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry (5ª edición). ISBN 0-582-46236-3.
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Anexos Cuestionario 1. ¿Cuáles son algunos criterios que deben tenerse en cuenta en la elección de absorbente en una separación cromatográfica determinada? R/:
Hay varios factores que deben tomarse en cuenta en la elección de un adsorbente para una separación cromatográfica determinada. Desde luego debe ser insoluble en el disolvente que se va a utilizar para la separación y no debe reaccionar con las sustancias que van a separarse ni debe actuar como catalizador de sus descomposición, transposición o isomerización, ha de tener un compuesto uniforme prescindiendo de su origen y debe ser incoloro cuando sean de localizar visualmente las unas correspondientes a compuestos coloreados. Teóricamente cuando menor sea el tamaño de las partículas del adsorbente mayor será el grado de separación de la mezcla tratada sin embargo desde el punto de vista práctico se debe tener en cuenta que cuanto menor sea el tamaño de las partículas menor será la velocidad con la que el disolvente o la solución pasaran a través de la columna, por tanto se necesita una situación de compromiso. El adsorbente no debe ser ni de grano muy grueso ni muy fino, el diámetro medio de las partículas debe ser de unas 8 a 12 micras. Cuando necesariamente se tienen que utilizar como adsorbente polvo muy fino , la velocidad de la solución o el disolvnt6e atreves del adsorbente se puede aumentar mezclando este con un coadyuvante de filtración tal como el “HYFLOSUPERCEL” la aplicación de una
subsidian suave ( de unos 680mm) o de cierta precisión puede también acelerar la velocidad del disolvente atreves de la columna el adsorbente más utilizado es la
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El poder adsorbente de un producto determinado dep ende no solo de su naturaleza n aturaleza sino también del disolvente utilizando en la preparación del cromatográma. Por tanto no es posible establecer una clasificación rigurosa del poder adsorbente relativo a las distintas sustancias que se pueden utilizar. Sin embrago se puede establecer aproximadamente la siguiente clasificación: adsorbentes muy activos: alúmina con un contenido de agua pequeña, carbón car bón activado y arcilla. Adsorbentes intermedios: gel de sílice, acido silícico, carbonato de calcio, fosfato de cálcico, magnesia y cal apagada, adsorbentes débiles: sacarosa, inulina, almidón y talco. 2.
¿En qué consiste la cromatografía de CCD preparativa? R/:
La cromatografía preparativa comprende un amplio campo de aplicaciones, desde el aislamiento de 1 µg. de muestra para identificación espectroscópica hasta el aislamiento de un compuesto puro de una mezcla de 100 g. La cromatografía preparativa se diferencia de la técnica básica en muchos aspectos, desde la preparación de la papilla. Ésta debe hacerse con menos agua que de ordina rio. Una papilla más espesa ayuda a estabilizar el grosor de las placas que se precisa para una carga de mayor magnitud. El espesor óptimo oscila desde un mínimo de 1 mm. Hasta un máximo de 2 mm. Las placas utilizadas en cromatografía preparativa son placas grandes, de aproximadamente 20x20 cm. que permiten separar aproximadamente 1 g. de mezcla utilizando unos 35 g. de adsorbente. La siembra de la muestra se realiza mediante la ayuda de una jeringuilla o tubo capilar. La siembra se realiza a lo largo de una línea recta (existen en el mercado diverso utensilios para evitar torcerse). Si al terminar la primera siembra todavía
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separar el compuesto y la fase estacionaria. Una vez separado se elimina el disolvente (destilación), con lo cual se obtiene el componente separado. Si no se dispone de indicador fluorescente, no se pueden usar reveladores químicos sobre toda la placa. El proceso a seguir es el siguiente: se raya la placa separando totalmente una pequeña franja de placa, sobre la cual se aplica el revelador químico, y a partir de esta franja se marcan las franjas de compuestos. 3. Usted tiene un compuesto compuesto impuro y quisiera saber cuántas sustancias están contaminando su compuesto. Explique cómo lo haría utilizando cromat ografía de capa delgada o de papel. R/:
Al realizar el procedimiento proc edimiento respectivo para una cromatografía de capa delgada de lgada la cual separa compuestos orgánicos de una muestra sirve para determinar si el compuesto orgánico esta impuro y que sustancias lo están contaminando. Por consiguiente en la placa cromatografía cromatogr afía de capa delgada al mirar el e l extendido de las sustancias en la placa se mostraran puntos o manchas al ser absorbida o atraídas con mayor fuerza por la capa estacionaria, por ende entre menos manchas allá en el extendido menos impura será esas manchas corresponderán a las sustancias
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manchas desaparecen con el tiempo con lo que es conveniente señalar las manchas aparecidas. Otro reactivo revelador bastante utilizado es el ácido sulfúrico, que reacciona con los componentes orgánicos produciendo manchas negras luego de ser carbonizadas. También es utilizado el permanganato potásico, que deja unas manchas de color amarillo. El tamaño de las manchas no está relacionado con la cantidad de componente separado. Además de estos reveladores generales, existen otros específicos: 2,4 dinitrofenilhidracina (para aldehídos y acetonas). Verde de bromocresol (para ácidos carboxílicos). Paradimetil aminobenzaldehido (para aminas). Ninhidrina (para aminoácidos).