CRISPR-CAS9 ¿Qué signifca? Clustered Clustered regularly regularly-inter -interspace spaced d short palindrom palindromic ic repeats repeats a!!re"i a!!re"iated ated as CRISPR# pronounced crisper$% repeticiones palindr&micas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas interespaciadas
¿ Que son? Son loci de A'( )ue contienen repeticiones cortas de secuencias de !ases* +ras +ras cada repetici&n siguen segmentos cortos cortos de ,A'( espaciador, pro"eniente pro"eniente de eposiciones pre"ias a un "irus* Se encuentran en aproimadamente el ./0 de los genomas !acterianos y en el 9/0 de los genomas secuenciados de las ar)ueas* Con 1recuencia se hallan asociados con los genes cas# )ue codifcan para prote2nas nucleasas relacionadas con los CRISPR*
¿'&nde se aplica y en )ue consiste? 'esde 3/45# el sistema CRISPR%Cas se ha utili6ado para la edici&n de genes agregando# interrumpiendo o cam!iando las secuencias de genes espec2fcos$ y para la regulaci&n génica en "arias especies* Al administrar la prote2na Cas9 y los AR( gu2a apropiados a una célula# el genoma de esta puede cortarse en los lugares deseados# cuyas secuencias ser7n complementarias a las de los AR( AR( gu2a gu2a util utili6 i6ad ados os** 8sto 8sto perm permit ite e la elim elimin inac aci& i&n n 1unc 1uncio iona nall de gene genes s o la intro introduc ducci ci&n &n de mutaci mutacione ones s tras tras la repar reparaci aci&n &n del corte corte reali reali6ad 6ado o por la ma)u ma)uin inar aria ia celu celula larr de repar eparac aci& i&n n del del A'($ A'($ para para estu estud diar iar sus sus e1ec e1ecto tos* s* odifcaci odifcaciones ones recientes recientes del sistema sistema CRISPR%Cas CRISPR%Cas9 9 permiten permiten tam!ién tam!ién actuar actuar so!r so!re e la tran transc scri ripc pci& i&n n de los los gene genes# s# modi modifc fcan ando do as2 as2 solo solo su ni"e ni"ell de 1uncionamiento# pero no la in1ormaci&n genética* Qui67 puedan usarse los CRISPRs para construir sistemas de entrega de genes guiados por AR( )ue lleguen a alterar los genomas de po!laciones enteras*
¿Qué técnica se usa? CRISPR es una regi&n del A'( procariota )ue consiste de unidades repetidas espaciadas por secuencias "ariadas de origen eterno# 1ormando un m&dulo )ue puede llegar a tener m7s de cien unidades espaciador:repetici&n* ;ien# este este m&du m&dulo lo se trans transcr cri! i!e e a AR(# AR(# y ese ese AR( AR( larg largo o lueg luego o ser7 ser7 proc proces esad ado o cortado$ para de
de la repetici&n* 8ste proceso lo lle"an las prote2nas asociadas a CRISPR Cas > Crispr associated$* ;ien# pues cada uno de estos pe)ue=os AR(s maduros se une a un comple
+enemos entonces un sistema )ue corta A'( de 1orma muy espec2fca# !7sicamente# )ue es lo interesante para ingenier2a genética* ¿Por )ué el tipo II es tan interesante? Pues por)ue sustituye todo el comple
Cas 9 Benni1er 'oudna and 8mmanuelle Charpentier had independently !een eploring CRISPR-associated proteins to learn ho !acteria use spacers in their immune de1enses*D5EF +hey
Cas9 is a nuclease# an en6yme speciali6ed 1or cutting '(A* It has to acti"e cutting sites G(G and Ru"C$# one 1or each strand o1 the '(AHs dou!le heli* +he team demonstrated that they could disa!le one or !oth sites hile preser"ing Cas9Hs a!ility to home in on its target '(A* In 3/43# a group including !oth 'oudna and Charpentier com!ined tracrR(A and spacer R(A into a ,single-guide R(A, molecule that# mied ith Cas9# could fnd and cut the correct '(A targets* +heir study proposed that such synthetic guide R(As could !e used 1or gene editing*
Re1erencias http%%*sciencedirect*com%science%article%pii%S/E5.9EJ/4.//4954 http%%*nc!i*nlm*nih*go"%pu!med%3.9/K4.K http%%science*sciencemag*org%content%5.K%K345%43JL/9K
