Citoquinas recombinantes recombinantes Las citocinas recombinantes son el resultado de la producción in vit vitro, me mediante la té técnica de DN DNA recombinant recombinante, e, de mediadores mediadores proteínicos proteínicos que pueden pueden ser Idénticos a los sintetizados de manera natural por células Del sistem sistema a inmunit inmunitari ario o durant durante e la inmunor inmunorre reacc acción ión.. Para que que est estas prot proteí eína nas s sean sean til tiles es desd desde e el Punto unto de vist vista a terapéutico tienen que conservar su actividad. Adem!s, se debe disminuir su inmuno"enicidad para el ser #umano. $on Copias de proteínas #umanas que actan uniéndose a receptores celulares e induciendo sus e%ectos.
¿Cómo se estudian las citoquinas? •
Los métodos m!s utilizados son&
Los
métodos inmunológicos &
La obtención de di%erentes citoquinas recombinantes #a permitido producir anticuerpos monoclonales ' desarrollar diversos métodos de valoración inmunoló"ica para varias citoquinas. (stos métodos, %undamentalmente inmunoenzim!ticos del tipo (LI$A, presentan elevada sensibilidad ' especi)cidad para la captación ' cuanti)cación de citoquinas, pero tienen el inconveniente que pueden detectar ' cuanti)car citoquinas no activas bioló"icamente. (n las ltimas décadas se #an identi)cado ' clonado m!s de *+ citoquinas ' %actores de crecimiento, muc#os de los cuales an no #an sido completamente Caracterizados. La tecnolo"ía de ADN recombinante #a permitido el clonado ' la producción masiva de citoquinas que se utilizan para di%erentes aplicaciones clínicas.
Las técnicas de ADN recombinante: (l ADN recombinante es resultado del uso de diversas técnicas que los biólo"os moleculares utilizan para manipular las moléculas de ADN.(l proceso consiste en tomar una molécula de ADN de un or"anismo, sea virus, planta o una bacteria ' en el laboratorio manipularla ' ponerla de nuevo dentro de otro or"anismo. (sto se puede #acer para estudiar la e-presión de un "en, para producir proteínas en el tratamiento de una en%ermedad "enética, vacunas o con )nes económicos ' cientí)cos.
Producción de anticuerpos
Si una sustancia extraña (antígeno) se inyecta en el cuerpo de un ratón o un humano, alguna de las células B de su sistema inmune se transformará en células plasmáticas y empezarán a producir anticuerpos ue se unirán a ese antígeno! "ada célula B produce un solo tipo de anticuerpo, pero diferentes linfocitos B producirán anticuerpos estructuralmente diferentes ue se unen a distintas partes del antígeno! #sta mezcla fisiológica natural de anticuerpos es
Los métodos moleculares& $e #an podido desarrollar "racias al conocimiento de las di%erentes secuencias de un "ran nmero de citoquinas, que #a permitido la adaptación de técnicas de ampli)cación de PC,permitiendo detectar distintas citoquinas en di%erentes te/idos o células. (stas técnicas, que #o' día pueden ser también cuantitativas, pueden detectar ' cuanti)car las di%erentes citoquinas, aunque como en el caso de los métodos inmunoló"icos, su detección no implica necesariamente, actividad bioló"ica.
“La producción de citoquinas recombinantes es en la actualidad muy limitada y no se disponen en el mbito comercial! lo cual limita la producción de anticuerpos monoclonales"#
Dentro de los tipos de citoquinas recombinante encontramos a las siguientes:
La aldesleu$ina%&L'(& (s una %ormulación de interleu0ina12 3IL124 recombinante. $e trata de una interleu0ina12 biosintética no "licosilada 3también conocida como %actor de crecimiento de las células 54 que di)ere sólo li"eramente en la secuencia de amino!cidos con producto natural. La interleu0ina acta como un mensa/ero molecular entre los leucocitos. La aldesleu$ina es mu' tó-ica ' sólo debe ser empleada en medios #ospitalarios ba/o la supervisión de médicos cuali)cados en el tratamiento de los %!rmacos anticancerosos.
6so& La aldesleu0ina est! indicada para el tratamiento del carcinoma renal metast!sico ', en la actualidad, est! siendo estudiada para el tratamiento de la leucemia a"uda mieloide, el lin%oma no de 7od"0in, la in%ección por 7I8 ' la lepra, así como para mantener la respuesta después de un transplante de médula.
)ecanismo de acción & los e%ectos de la aldesleu0ina son idénticos a los de la interleu0ina IL12 endó"ena. La aldesleu0ina interacciona con los receptores IL12 de alta a)nidad e-presados en las células del sistema inmunoló"ico ' estimula la cascada de cito0inas en las que est!n implicados los inter%erones, interleu0inas ' %actor de necrosis tumoral. Como otras cito0inas, la aldesleu0ina induce la proli%eración ' di%erenciación de células 9 ' 5, monocitos, macró%a"os ' lin%ocitos citotó-icos. $e cree que la actividad antitumoral de la aldesleu0ina resulta de la activación de los lin%ocitos citotó-icos, aunque el mecanismo e-acto no se conoce. No est! claro si la aldesleu0ina acta directamente o a través de un se"undo mensa/ero, aunque sí se sabe que la aldesleu0ina eleva la producción de interleu0ina1*, del %actor de necrosis tumoral al%a ' beta, del inter%eron "amma ' de la interleu0ina1:.
&nter*erones +!, y Los inter%erones son unas proteínas producidas naturalmente por el sistema inmunitario de la ma'oría de los animales como respuesta a a"entes pató"enos, tales como virus ' células cancerí"enas. Los inter%erones son "licoproteínas de la clase de las citocinas. $e unen a receptores en la super)cie de las células in%ectadas, activando di%erentes vías de se;alización en las que participan diversas proteínas antivirales 3como la P<4, para impedir la replicación de una amplia variedad de virus de AN ' ADN. Cumplen, adem!s, otras %unciones& activan células inmunes, como los macró%a"os ' las células N< = incrementan el reconocimiento de células cancerí"enas o in%ecciones al dinamizar la presentación de antí"enos a los lin%ocitos 5 ', )nalmente, incrementan la capacidad de las células sanas para resistir a nuevas in%ecciones víricas. Ciertos síntomas como el dolor
muscular ' la )ebre est!n relacionados con la producción de inter%erones durante la in%ección. Los inter*erones se pueden producir de manera natural pero también de manera arti.cial! es decir en laboratorios en *orma de inyección o de pastillas para las personas que padecen de alguna en*ermedad autoinmune como la esclerosis m/ltiple! s0ndrome de s1ogren! etc Principios&
(n la ma'oría de casos, la producción de inter%erón es inducida por otras citocinas, por e/emplo, IL1*, IL12, 5N> ' C$>, que son sintetizadas en respuesta a la aparición de virus en el cuerpo. $u metabolismo ' e-creción se produce principalmente en el #í"ado ' ri;ones. Di%ícilmente atraviesan la placenta ' la barrera #ematoence%!lica. (l inter*erón al*a y beta es producido por varios tipos celulares& las células 5' las células 9, macró%a"os, )broblastos, células endoteliales ' osteoblastos entre otras, ' son importantes componentes de la respuesta antiviral. (stimulan a los macró%a"os ' las células N< ' son activas contra los tumores. 2l inter*erón gamma participa en la re"ulación de las respuestas inmune e in?amatoria. (n los #umanos, sólo #a' un tipo de inter%erón "amma. $e produce en células 5 activadas. (l inter%erón "amma tiene e%ectos antivirales ' antitumorales, pero "eneralmente débiles. $in embar"o, potencia los e%ectos del inter%erón al%a ' beta. Desa%ortunadamente, el inter%erón "amma necesita ser liberado en el tumor en dosis mu' peque;as ' no es, actualmente, mu' til en el tratamiento del c!ncer.
(l inter%erón "amma es se"re"ado por las células 5#* ' envía leucocitos al punto de in%ección, dando como resultado una in?amación. 5ambién estimula a los macró%a"os para eliminar bacterias que #an sido %a"ocitadas. (ste inter%erón es también importante en la re"ulación de la respuesta de las células 5#2. Al estar
íntimamente relacionado con la respuesta inmunitaria, su producción puede derivar en desórdenes inmunitarios. 2l inter*erón tiene ' acciones bsicas:
Impide la replicación en células in%ectadas que an no #an sido destruidas por la acción vírica. Activa unos lin%ocitos, denominadas N< 3del in"lés natural killer 4, capaces de reconocer células in%ectadas por virus ' eliminarlas.
2l inter*erón act/a en dos ni3eles:
por un lado evita la replicación vírica en células an sanas ', por otro lado, %avorece la destrucción de las células 'a in%ectadas. 4sos *armacológicos:
5res viales llenados con inter%erón leucocitario #umano. La producción de inter%erón era cara #asta *@ cuando "enes de inter%erón %ueron introducidos en bacterias usando tecnolo"ía de recombinación de ADN, permitiendo el cultivo masivo ' puri)cación de las emisiones bacterianas. Actualmente e-isten varios tipos de inter%erón que #an sido aprobados para su uso en #umanos, ' la terapia de inter%erón se utiliza /unto con la quimioterapia ' la radioterapiaen el tratamiento del c!ncer. Cuando se usa
de esta manera, el inter%erón B ' el inter%erón se administran "eneralmente mediante in'ecciones intramusculares. La in'ección de inter%erón en los msculos, venas o ba/o la piel es comnmente bien tolerada. 2l inter*erón al*a est! indicado en el tratamiento de la #epatitis C ' de la leucemia mieló"ena crónica. 2l inter*erón , se utiliza en el tratamiento ' control de la esclerosis mltiple. Por un mecanismo an desconocido, in#ibe la producción de las citocinas de 5#* ' la activación de monocitos. 5ambién tiene una labor importante en el s#oc0 séptico.
2l *actor estimulante granulocitos o 56C78&
de
colonias
de
(s una "licoproteína que se produce en di%erentes te/idos ' promueve la maduración de células precursoras localizadas en la médula ósea a neutró)los, un tipo de "lóbulo blanco presente en la san"re. 5ambién %avorece la activación de los neutro)los ' su liberación al torrente san"uineo. (l %actor estimulante de colonias de "ranulocitos se inclu'e en el "rupo de sustancias llamadas %actores de crecimiento Cuando tiene lu"ar una in%ección bacteriana, la liberación de 1C$> aumenta de %orma natural, debido a que al"unos componentes del a"ente in%eccioso estimulan su producción. (l 1C$> produce un aumento en la maduración de los neutró)los ' su liberación a la san"re. Los neutro)los a su vez atacan a los a"entes in%ecciosos, %avoreciendo su destrucción.
La producción de >actor estimulante de colonias de "ranulocitos en el laboratorio, mediante el empleo de técnica recombinante, #a permitido disponer de las
cantidades necesarias para emplear la sustancia en el tratamiento de en%ermedades. La proteína que se obtiene es idéntica a la proteína #umana, presentando como unica di%erencia el a;adido de una nica metionina en un e-tremo de la molécula. $e utiliza como medicamento con el nombre de >il"astrim con varias indicaciones, una de ellas es incrementar el nmero de células #ematopo'éticas precursoras en los donantes de médula osea, antes de reco"er el te/ido para realizar un trasplante de médula. 5ambién se emplea para estimular la producción de "ranulocitos en pacientes con c!ncer que reciben tratamientos que causan un descenso en los recuentos de "lóbulos blancos.
8unciones biológica
(l 1C$> es producido por di%erentes células del or"anismo, inclu'endo células endoteliales, macró%a"os ' otras células del sistema inmunitario. (l receptor para el 1C$> est! presente en las células precursoras de la médula ósea, ' cuando es estimulado produce como respuesta la proli%eración ' di%erenciación de las células precursores que se convierten en "ranulocitos maduros. (l 1C$> induce también la movilización de los "ranulocitos que partiendo de la médula ósea se diri"en a la corriente san"uínea. 4so terape/tico
(l 1C$> estimula la producción de "lóbulos blancos. (n #ematolo"ía ' oncolo"ia se emplea una %orma recombinante de esta "licoproteina para %acilitar la recuperación de los pacientes con cancer que su%ren neutropenia como e%ecto secundario de la quimioterapia.
9iblio"ra%ía& #ttp&EEes.Fi0ipedia.or"EFi0iEInter%erGCHG9Hn #ttp&EEFFF.iqb.esEcbasicasE%armaE%armaEa:.#tm #ttp&EEes.Fi0ipedia.or"EFi0iE>actorJestimulanteJdeJcoloniasJ deJ"ranulocitos #ttp&EEes.Fi0ipedia.or"EFi0iEAnticuerpoJmonoclonal #ttp&EEbibliotecavirtual.unl.edu.ar&*EtesisEbitstreamE*E+KE KEIntroducciGCHG9Hn.pd%
