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R\u00e9publique alg\u00e9rienne d\u00e9mocratique e Universit\u00e9 Djillali Liabes Facult\u00e9 de M\u00e9decine D\u00e9partement de Pharmacie
TP TP N\u00b003 N\u00b003 Dosage de la bilirubine sanguine.
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HEMATOLOGIE - DOSAGE DE LA BILIRUBINE
II-- G\u00e9n\u00e9ralit\u00e9s : :
La bilirubine est le produit de d\u00e9gradation de la protoporphyrin l'h\u00e8me, qui est le groupement prosth\u00e9tique des h\u00e9m essentiellement par l\u2019h\u00e9moglobine.
La bilirubine est un pigment jaune, dont l'accumulation anormale da tissus d\u00e9termine un ict\u00e8re (ou " jaunisse "), qui peut relev La bilirubine int\u00e8gre le bol alimentaire au niveau de l\u2019int pigments biliaires. Elle est le principal pigment des f\u00e8ces, resp jaun\u00e2tre.
Dans les globules rouges, c'est plus pr\u00e9cis\u00e9ment la d\u00 transforme l'h\u00e8me en bilirubine. Cette substance donne sa couleur jaune \u00e0 l'urine et aux selles, ecchymoses.
Dans l'organisme humain normal, le taux de BNC (bilirubine non con inf\u00e9rieur \u00e0 17 \u00b5moles/l (10 mg).
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II: : II- M\u00e9tabolisme 1-
Production : : Production de delalabilirubine bilirubine
La bilirubine est le principal produit de d\u00e9gradation de l'h\u
form\u00e9e principalement dans la rate, gr\u00e2ce \u00e0 deux (microsomale) et la biliverdine r\u00e9ductase (cytosolique).
La source principale de la bilirubine est la destruction des h\u00e de vie est de 90 \u00e0 150 jours. En outre, 10 \u00e0 20 % de la d'autres sources : en premier lieu, le catabolisme de l'h\u00e8me
(principalement celui des cytochromes) ; en second lieu, la destru
moelle des pr\u00e9curseurs des h\u00e9maties avant leur lib\u0
p\u00e9riph\u00e9rique (\u00e9rythropo\u00ef\u00e8se inefficac
Un gramme d'h\u00e9moglobuline donne lieu \u00e0 la formation
La production quotidienne de bilirubine est de l'ordre de 250 \u00 Les \u00e9tapes de la synth\u00e8se de la bilirubine sont : h\u00e8me \u2192 biliverdine \u2192 bilirubine.
2-
Captation par Captation par le lefoie foie
La bilirubine ainsi form\u00e9e est transport\u00e9e dans le sang pigment est ensuite capt\u00e9 par l'h\u00e9patocyte apr\u00e8s Cette captation de la bilirubine se fait tr\u00e8s probablement pa l'interm\u00e9diaire d'un transporteur. Plusieurs prot\u00e9ines ont \u00e9t\u00e9 identifi\u00e9es et l'une d'entre elles a \u00e9 ovocytes de x\u00e9nope et clon\u00e9e. Dans les h\u00e9patocytes, la bilirubine est li\u00e9e \u00e0 des principalement la ligandine, qui appartient \u00e0 la famille des g Sign up to vote on this title Cette liaison rend compte du stockage d'une certaine quantit\u00 Useful Not useful l'h\u00e9patocyte. La bilirubine conjugu\u00e9e est \u00e9galem certaine mesure stock\u00e9e dans l'h\u00e9patocyte. En outre, u
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- glucuronyl transférase. Cette enzyme est située dans la membra Elle fait partie d'une famille d'uridine-diphosphates (UDP) - glucu transférases. Le donneur d'acide glucuronique est l'acide UDP - glucuronique, transféré dans la lumière du réticulum endoplasmique, pour être la conjugaison. D'autres conjugaisons, notamment au glucose et a importantes chez le chien, le chat, la souris et le lapin. 4-
Excrétion dans dans la Excrétion la bile bile
La plus grande partie de la bilirubine est excrétée dans la bile sou conjuguée. Le transport de la bilirubine de l'hépatocyte dans la b membrane canaliculaire se fait grâce à un transporteur, souvent d nom de cMOAT (c pour canaliculaire, multiple organic anion trans Ce transporteur est en effet commun avec les colorants (BSP, ICG les conjugués du glutathion, les opacifiants biliaires, les leucotriè antibiotiques comme la rifamycine. Il s'agit d'un transport actif, u est différent du transporteur responsable de l'excrétion des acide bile. Le cMOAT est génétiquement déficient chez les patients atteints de Dubin-Johnson. Dans ce cas, l'excrétion des acides biliaires et concentration dans le sang sont normales.
IIIValeurs usuelles III- Valeurs 1-
Bilirubine totale totale Bilirubine Naissance 1ière semaine 2ième semaine 3ième semaine 4ième semaine >1 mois et adulte :
14 - 45 µmol /l 8 - 25 mg /l 45 - 210 µmol /l 25 - 120 mg /l 17 - 190 µmol /l 10 -110 mg /l title 10 - 50 µmol /lSign up to vote on 6 this - 30 mg /l Not- useful 5 - 25 µmol /l Useful 3 15 mg /l 5 - 17 µmol /l 3 -10 mg /l
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IVVARIATIONSPATHOLOGIQUES PATHOLOGIQUES : LES : LES ICTERES ICTERES IV- VARIATIONS 1d'apport d'apport (dits (dits « préhépatiques « préhépatiques »): »): 11- Ictères par excès
Principales rincipales causes : : causes . Syndromes hémolytiques : les plus fréquents . Ictères par dérivation (la bilirubine se forme à partir de précurse incorporée dans les G.R.) Symptomatologie biologique : . Plasma : augmentation exclusive de la bilirubine non conjuguée . Urines : augmentation de l'urobilinogène urinaire.
22 l'UDP-glucuronyl glucuronyl transférase transférase 2- Ictères par déficit de l'UDP
Principales rincipales causes causes : : . Ictère du nouveau-né : déficit transitoire de l'enzyme . Déficits congénitaux : a) Maladie de GILBERT : bénigne, due à un déficit partiel de l'enzy b) Maladie de CRIGLER-NAJJAR : maladie grave avec risque d'ictè Symptomatologie biologique : : . Plasma : augmentation de la bilirubine non conjuguée, . Urines : pas d’↑ de l’urobilinogène ;
333- Ictères à bilirubine mixte :
Principales rincipales causes causes : : . Hépatites aiguës Anomalies du transport, de la conjugaison et de l'excrétion hépato . Cirrhoses . Maladie de DUBIN-JOHNSON : maladie congénitale rare et relat comportant un défaut d'excrétion de la bilirubine conjuguée. Symptomatologie biologique : : . Plasma : proportions variables de bilirubine conjuguée et non con Sign up to vote on this title .Urines : ↑ bilirubine ; Useful Not useful
444- Ictères à bilirubine conjuguée :
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V-- Dosage de la bilirubine : : unexamen examen d’urgnece d’ 1Conditions de Prélèvement Prélèvement (c’ )::) cc’est ’’est(un ’’urgnece d 11- C C Conditions de
Prélèvement de sang veineux (en général au pli du coude), avec le moins longtemps possible.
Le tube de prélèvement peut contenir un anticoagulant de préfér Il doit être conservé à l'abri de la lumière avant que le dosage ne Il n'est pas indispensable d'être à jeun.
Indiquer d'éventuels traitements en cours car certains médicame modifier les résultats.
222- Conservation:
Les échantillons doivent être protégés d’une lumière directe car l photolabile. Les échantillons peuvent être stockés réfrigérés pend
333- Intérêt clinique Au moins quartes sortes de bilirubines coexistent dans le sérum : direct (BD) correspond à la bilirubine dite mono et di-conjuguée
Bilirubine) ainsi qu’a la fraction δ qui est liée très fortement à l’al
bilirubine α, non conjuguée ou bilirubine indirecte, qui est transp
l’albumine. La bilirubine totale (BT) est la somme de ces différent
On distingue les ictères où prédomine la bilirubine indirecte (ictè maladie de Biermer, Thalassémie …etc.), des ictères ou prédomin directe (obstruction des voies biliaires extra ou intra-hépatique, h …etc.). Enfin les ictères ou les deux formes de bilirubine sont pré prédominance (cirrhose, maladie de Dublin-Johnson).
444- Principe de dosage
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Useful Not useful La plupart des méthodes actuellement utilisées pour doser la bilir sur la réaction entre la bilirubine et des solutions acides sulfaniliq
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555- Mode opératoire Blanc
BT
R1(D) ml R2(T) ml
1.5
R3(I) µm Echantillon Calibration
Blanc
BD
1.5
1.5
1.5 50
100
50
100
100
100
Après lecture au spectrophotomètre à 550 nm on obtient les vale •
: : Bilirubine totale totale Bilirubine Blanc (témoin) : 0,037 Réaction : 0,115 Calcul :
[BT] = (0,155-0,037) x 19.1 [BT] = 2,253 mg/dl •
: : Bilirubinedirect direct Bilirubine Blanc (témoin) :0,040 Réaction : 0,159 Calcul :
[BD] = (0,159 – 0,040) x 14 [BD] = 1,66 mg/dl
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