ARTIKEL ILMIAH PRAKTIKUM BIOKIMIA “IDENTIFIKASI ASAM AMINO”
OLEH TJOKORDA GDE PUTRA WIRAMA 1313031053
JURUSAN PENDIDIKAN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS PENDIDIKAN GANESHA 2016 IDENTIFIKASI ASAM AMINO Tjokorda Gde Putra Wirama Jurusan Pendidikan Kimia, Fakultas MIPA, UNDIKSHA Jalan Udaana, Sin!araja"#ali $mail% &okt'endut(!mail)&om &okt'endut(!mail)&om ABSTRAK
Tujuan percobaan ini adalah untuk mengidentifikasi asam-asam amino yang terdapat dalam larutan protein (albumin telur) serta dapat mengidentifikasi jenis asam amino yang terdapat dalam sampel unknown. Metode yang digunakan adalah metode uji kualitatif dengan cara uji reaksi Millon, Hopkins-ole, !inhidrin, "b#, dan !itroprusida. $ari hasil percobaan diperoleh bahwa pada albumin
telur mengandung asam amino tirosin, triptopan, asam %-amino bebas, asam amino yang dalam struktur asam aminonya mengandung belerang. #ampel unknown & mengahasilkan uji positif pada uji !itroprusida yang menandakan adanya asam aminosistein. #ampel unknown ' menghasilkan uji positif pada uji !inhidrin yang menandakan adanya asam %-amino bebasseperti tirosin, tiptopan, fenilalanin, glisin dan lain-lain kecuali prolin."ada sampel unknown mengahasillkan uji negatif pada semua uji asam amino yang menandakan tidak terkandung terkandung asam amino. Kaa !"#$% &asam amino, larutan albumin telur, sampel unknown ABSTRA'T
The purposeof thiseperimentisidentify the amino acids contained in the protein solution (egg albumin) and can identify the types of amino acids contained in the unknown sample. The method used is a *ualitati+e test method by means of Millon reaction test, Hopkins-ole, !inhydrin, "b#, and !nitroprusside test. 'rom the eperimental results obtained that the egg albumin-containing amino acid acid tyrosi tyrosine, ne, trypto tryptopha phan, n, %-amin %-amino o acids acids is free free amino amino acids acids in the struct structure ure of the amino acid acid containing containing sulfur. sulfur. nknown sample & positi+e positi+e test result result in the nitroprusside nitroprusside test indicating indicating the presence of the amino acid cysteine. nknown sample ' produces a positi+e test on !inhydrin test indicating the presence of %-amino acids such as tyrosine free, tiptopan, phenylalanine, glycine and others ecept proline. n the unknown sample aimlessly negati+e test for all test the amino acids that indicates not contained amino acids. Keywords: amino acids, egg albumin solution, samples of unknown
PENDAHULUAN Protein adala' *olimer an! terdiri atas monome monomer"m r"monom onomer er asam +"amino +"amino an! an! di'uun!kan den!an ikatan *e*tida) Seua' molekul molekul *rotein *rotein men!andun! men!andun! ratusan atau a'kan riuan unit asam amino) Unit"unit itu itu akan akan mem mement entuk uk er era! a!ai ai ma&a ma&am m komin kominasi asi an! an! jumla' jumla'na na 'am*ir 'am*ir tidak tidak teratas, se'in!!a jumla' jenis *rotein an! ada ada ju!a ju!a tida tidak k ter terata atass -Fri -Fried eda, a, .//. .//.0) 0) Protein Protein meru*a meru*akan kan sala' sala' satu kelom* kelom*ok ok a'an makronutrien) Tidak se*erti a'an makronutrie makronutrien n lainna lainna -karo'idr -karo'idrat, at, lemak0, lemak0, *rotein ini er*eran lei' *entin! dalam *ementukan iomolekul dari*ada sumer ener!i) Namun demikian a*aila or!anisme sedan! kekuran!an ener!i, maka *rotein ini da*at ju!a di *akai sea!ai sumer ener!i)
Semua Semua *rote *rotein, in, aik aik an! an! erasa erasall dari dari akt akter erii an! an! *ali *alin! n! tua tua atau atau an! an! erasal dari ke'idu*an an! tertin!!i dian! dian!un un dari dari ran!ka ran!kain in dasar dasar an! an! sama sama dari ./ asam amino an! erikatan ko1alen dalam urutan an! k'as -Tika, ./2/0) Asam amino adala' monomer dari *rotein) Asam"asam amino an! se&ara alami menusun *rotein mem*unai !u!us 3un!si karoksil -"455H0 dan amina -"NH .0 an! terikat *ada atom karon an! sama, aitu aitu atom karon karon al3a) al3a) Gu!us Gu!us karok karoksil sil dalam asam amino memerikan si3at asam dan !u!us !u!us amina amina memer memerika ikan n si3at si3at asa) asa) Gu!us lain an! terikat *ada 4 + adala' atom atom 'dro! 'dro!en en dan rantai rantai sam*in sam*in! ! an! an! er1ariasi -!u!us 60) #erikut adala' struktur umum dari asam amino)
H
5
H N H
4 6
4
5H
Ga()a* 1) Struktur Umum Asam Amino
Dari ke"./ asam amino, 27 meru*akan meru*akan asam +"amino, +"amino, sedan!kan sedan!kan satu asam amino an! menim*an! dari struktur umum umum adal adala' a' asam asam amin amino o *rol *rolin in kare karena na
asam amino ini mem*un mem*unai ai !u!us !u!us amino amino seku sekund nder er)) Dalam Dalam ent entuk uk laru laruta tan, n, asam asam amino amino ersi3 ersi3at at am3ote am3oterik rik aitu aitu &ender &enderun! un! menjadi asam *ada larutan asa dan menjadi
asa *ada larutan asam) Prilaku ini terjadi kare karena na asam asam amin amino o mam*u mam*u mem memen entu tuk k witter-ion. /witter-ion /witter-ion meru*akan molekul an! an! mem* mem*un un ai !u!u !u!uss *ola *olarr den! den!an an muatan muatan an! an! erla8 erla8ana anan) n) Karena Karena adala' adala' /witter-ion, /witter-ion, maka asam amino mem*unai si3at sena8a ion -6ed'ana,.//90) Dalam tuu' manusia asam amino dikelom*ok dikelom*okkan kan menjadi menjadi dua a!ian, a!ian, aitu asam amino esensial dan asama amino non esensial) Asam amino esensial adala' asam amin amino o an! an! tidak tidak da*a da*att disin disinte tesis sis ole' ole' tuu') 4onto' asam amino esensial % asam amino Tri*to3a Tri*to3an, n, Treonin Treonin,, Metionin, Metionin, :isin, :isin, :eusin :eusin,, Isoleu Isoleusin, sin, Fenilal Fenilalani anin n dan ;alin) lin) Sedan!kan asam amino non"esensial adala' asam asam amin amino o an! an! da*a da*att disin disinte tesis sis ole' ole' tuu') tuu') 4onto' 4onto' asam asam amino amino non"ese non"esensi nsial al adala' asam amino Tirosin, Sistein, Serin, Prol Prolin in,, Glis Glisin in,, Asam sam Glut Glutam amat at,, Asam sam as*artat, Ar!inin, Alanin, Alanin, Histidin, Glutamin dan As*ara!in) ;ariasi riasi an! an! terjad terjadii antara antara asam" asam" asam asam amin amino o terl terlet etak ak *ada *ada !u!u !u!uss 6 atau atau rantai rantai sam*in!na sam*in!na)) #erdasarka #erdasarkan n !u!us 6" na akan da*at diramalkan si3at"si3at suatu asam amino) amino) Asam" Asam"asam asam amino amino ini da*at da*at dia!i dia!i menjadi menjadi ti!a kelom*ok) kelom*ok) Kelom*ok asam amino den!an !u!us 6 *olar ermuatan *ositi3 atau ne!ati3 terdiri dari :isin, Ar!inin, dan Histidin an! ermuatan *ositi3, sedan!kan asam amino an! ermuatan ne!ati3 adala' Asam Asam As*artat dan Asam Asam Glut Glutam amat) at) Kelo Kelom* m*ok ok asam asam amin amino o den!an !u!us 6 *olar tak ermuatan teridiri dari Serin, Treonin Treonin,, As*ara!in As*ara!in,, Glutamin, Glutamin, Tirosin, dan Sistein) Kelom*ok asam amino den! den!an an !u!u !u!uss 6 non non *ola *olarr terd terdir irii dari dari Glisin, Glisin, Alanine, Alanine, ;alin, alin, :eusin, :eusin, Isoleusin, Isoleusin, Prolin, Metionin, Fenilalanin, dan Tri*to3an) Sela Selain in klas klasi3 i3ik ikas asii erd erdas asar arka kan n kemiri* kemiri*an an si3at si3at rantai rantai sam*in sam*in!n !na, a, asam
amino ju!a da*at diklasi3ikasikan diklasi3ikasikan menjadi dela*an kelom*ok erdasarkan strukturna) Klasi3ikasi ini didasarkan *ada si3at kimia dari !u!us 6"na se'in!!a akan memuda memuda'ka 'kan n dalam dalam men!in men!in!at !at si3at"s si3at"si3a i3att umum umum dari dari setia* setia* asam amino) amino) Kelom* Kelom*ok ok ali3at ali3atik ik terdir terdirii dari dari Glisin Glisin,, Alani Alanin, n, ;alin, lin, :eusin, dan Isoleusin) Kelom*ok Aromatik terdiri terdiri dari Fenilalanin, Fenilalanin, Tirosin, Tirosin, Tri*to3a Tri*to3an) n) Kelom*ok 'idrosiklik terdiri dari Serin dan Treonin) Kelom*ok karosiklik terdiri dari Asam Asam As*ar s*arta tat, t, dan dan Asam sam Glu Glutam tamat) at) Kelom*ok an! men!andun! sul3ur terdiri dari Sistein dan Metionin) Kelom*ok imino terdiri dari Prolin dan Histidin) Kelom*ok amin amino o terd terdir irii dari dari :isi :isin n dan dan Ar!in r!inin in)) As*ar!in dan Glutamin termasuk ke dalam kelom*ok amida -Tika, ./2/0) Asam Asam amin amino o memil emilik ikii *era *erana nan n *entin! a!i ke'idu*an terutama dalam meta metao oli lism sme) e) Sala' Sala' satu satu 3un! 3un!si si *ent *entin in! ! teru terutam tamaa adala adala' ' sea sea!a !aii an! an!un unan an lok lok *rotein an! linear dari rantai asam amino) Asam amino amino ju!a ju!a *entin *entin! ! dalam dalam ana anak k molekul iolo!i lainna, se*erti *ementukan a!ian koen
Ta)+, 1- 6eaksi untuk mendeteksi asam amino
R+a!% U.%
R+a!%R+a+#
Uji Millon
H!N5@ dala dalam m asam asam nitr nitraat den!an sedikit asam nitrit Uji Uji Ho*k Ho*kin ins" s"4o 4ole le Asam Asam Glio Glioksi ksilat lat dalam dalam H .S59 *ekat Nin'idrin Triketo'idrin Hidrat Hidrat
PS
PS -Timal Sul3at0
Nitro*rusida
Aa( a(%#/ 7a# 4%4++!% Tirosin
Wa*#a
Tri*to3an
4in&in un!u #iru
Asam +"amino dan *e*tide an! memiliki !u!us +" amino an! eas) Asam amino an! da*at mele*askan unsr S) Sistein
Natrium nitro*rusida dalam NH@ en&er sumber0 Tika, 1232 1232 0 14 5uku "enuntun "raktikum 5iokimia 5iokimia
U.% M%,,/#
Uji Millon dilakukan untuk men!identi3ikasi adana asam amino tirosin *ada suatu
:arutan :arutan *rotein *rotein an! men!andun men!andun! ! tri*to3an da*at direaksikan den!an *ereaksi Ho*i Ho*ins ns"4 "4ol olee an! an! men! men!an andu dun! n! asam asam !lioksilat -H554"4H50) Pereaksi ini diuat dari asam oksalat den!an seruk ma!nesium dalam air) Setela' di&am*ur den!an *ereaksi Ho*k Ho*kin ins" s"4o 4ole, le, asam asam sul3 sul3at at ditua dituan! n!ka kan n *erla'an"la'an se'in!!a mementuk la*isan l a*isan di a8a' a8a' laruta larutan n *rotein *rotein kemudi kemudian an akan akan ter teren entu tuk k &in& &in&in in un!u un!u *ada *ada atas atas antar antaraa kedua la*isan terseut) terseut) 4in&in un!u an! tam*a tam*ak k *ada *ada ida idan! n! ata atass antar antaraa kedu keduaa &airan &airan adala' adala' 'asil 'asil konden kondensas sasii tri*to tri*to3an 3an den!an !u!us alde'ida dari asam !lioksilat dalam suasana asam sul3at)
U.% N%#%4*%#
Mera'
Hitam
Mera'
A*a A*ail ilaa nin' nin'id idri rin n -tri -trike keto to'i 'idr drin in 'idrat 'idrat00 di*ana di*anaska skan n ersam ersamaa asam amino, amino, maka akan terentuk terentuk kom*leks kom*leks er8arna) er8arna) 6ea!en an! di!unakan *ada uji nin'idrin aitu trikto'idrin 'idrat) Asam amino an! dideteksi den!an uji nin'idrin aitu asam +" amino dan *e*tida an! memiliki !u!us +" amino eas) Untuk men!eta'ui a'8a uji ini ini *osi *ositi ti33 akan akan di'a di'asi silk lkan an 8arn 8arnaa iru iru)) Kese Keselu luru ru'a 'an n reak reaksi si asam asam amin amino o den! den!an an nin' nin'id idri rin n adala adala' ' sea sea!a !aii eri eriku kut) t) -a0 -a0 dekar dekaroks oksila ilasi si oksida oksidati3 ti3 dari dari asam amino amino dan *roduksi *roduksi nin'idrin nin'idrin tereduksi, tereduksi, amoniak amoniak dan karon karondio dioksi ksida da -0 reaksi reaksi nin'id nin'idrin rin teredu tereduksi ksi den!an den!an moleku molekull nin'id nin'idrin rin an! an! lain lain dan dan den! den!an an molek molekul ul amon amonia iak k an! an! die diea ask skan an -&0 -&0 *em *emen entu tuka kan n kom* kom*le leks ks er8arna iru) Untuk *rolin dan 'idroksi *rolin an! !u!us aminona tersustitusi meme emeri rika kan n 'asi 'asill er8a er8arn rnaa kunin unin! !) -Frieda, .//.0) U.% P)S
Uj i PS dilakukan untuk men!identi3ikasi adana asam amino sistein *ada suatu 0 = P.=-a>0 ? PS-s0 U.% N%*/*"%4a N%*/*"%4a
Protein an! men!andun! !u!us SH eas se*erti sistein memerikan 8arna kemera'"m kemera'"mera'an era'an jika direaksikan direaksikan den!an den!an natrium nitro*rusida, Na .Fe-4N0B N5).H N5).H.5 dalam larutan amoniak) Hal ini diseakan sela selain in men! men!an andu dun! n! !u!u !u!uss 455 455H H dan dan !u!u !u!uss NH NH., *ad *ada !u!u !u!uss 6 *ada ada asam asam amin amino o men! men!an andu dun! n! !u!u !u!uss tiol tiol -!u! -!u!us us sul3id sul3idril0 ril0 atau atau *e*tid *e*tidaa -!luta -!lutatt ion0) ion0) 6eaksi 6eaksi antar antaraa !u!u !u!uss sul3i sul3idr dril il dari dari asam asam amin amino o -sis -siste tein in0, 0, *e*t *e*tid idaa -!lu -!luta tati tion on00 da*a da*att dire direak aksik sikan an den! den!an an natr natrium ium nitro nitro*r *rus usida ida dala dalam m amon amonia ia erl erle ei' i' men!' en!'as asil ilka kan n kom*leks kom*leks er8arna er8arna mera', mera', den!an den!an reaksi reaksi sea!ai erikut) CFe@=-4N0B N5 N5." = NH@ = 6"SH ? -NH90.= CFe.=-4N0B N5S6 N5S6."
Sea Sean nak ak @ m: laru laruta tan n *rote rotein in -alumin -alumin telur0, larutan sam*el unknown A dan laruta larutan n asam amino amino -larut -larutan an tirosi tirosin, n, !lisi !lisin, n, tri* tri*to to3a 3an, n, 3eni 3enila lala lani nin, n, sistin sistin dan dan sistein0 ditama'kan B tetes rea!en Millon kemud kemudia ian n di*an di*anask askan an)) Peru Perua a'a 'an n an! an! terjadi kemudian diamati) Uji Hopkins – Cole
Sea Sean nak ak . m: laru laruta tan n *rote *rotein in,, larutan sam*el unknown A unknown A dan larutan asam amino -larutan tirosin, 3enilalanin, tri*to3an dan dan !lis !lisin in00 dita ditam ma'k a'kan an . m: rea! rea!en en Ho*k Ho*kin ins" s"4o 4ole le,, kemu kemudi dian an ditam ditama a'k 'kan an sediki sedikitt demi demi sediki sedikitt H.S59 *ekat) *ekat) Warna an! terentuk *ada *ertemuan kedua &airan diamat diamatii den!an den!an memuta memutarr *erla' *erla'an" an"la' la'an an 'in!!a terentuk &in&in er8arna un!u) Uji Ninhidrin
METODE A,a 4a# Baa#
Alat Alat"a "ala latt an! an! di!u di!una naka kan n dalam dalam *raktikum ini terdiri atas E ua' taun! reaksi, @ ua' *i*et tetes, . ua' !elas ukur B m:, 2 ua' lam*u s*iritus, 2 kotak korek a*i, . ua' *enje*it kau, 2 ua' *emanas, . ua' !elas kimia B/ m:, 2 ua' !elas kimia 2// m:, 2 ua' !elas kimia .B/ m:, 2 ua' ka&a arloji, 2 ua' s*atula, 2 ua' atan! *en!aduk, 2 ua' &oron!, &oron!, dan 2 ua' !ela !elass ukur ukur 2/ m:) #a'a #a'an n"a' "a'an an an! an! di!una di!unakan kan adala adala' ' 2@ m: alumi alumin n telur, telur, larutan P"asetat, . m: rea!en Millon, 2. m: rea! rea!en en Ho*k Ho*kin ins"4 s"4ol ole, e, @ m: rea! rea!en en Nin'idrin /,2, ./ m: larutan natrium nitro*rusida 2, @/ m: larutan asam sul3at *ekat, ./ m: a>uades, . m: ammonium 'idrok 'idroksid sida, a, 2/ m: larutan larutan Na5H, Na5H, 2E m: sam*el sam*el unkno8 unkno8n n A, asam amino amino tirosin tirosin,, tri*to tri*to3an 3an,, !lisin !lisin,, dan 3enila 3enilalan lanin in masin! masin!"" masin! E m:, 2/ m: sistein dan 2/ m: sistin)
P*/+4"* K+*.a Uji Millon
Seanak Seanak /,B m: larutan larutan nin'idrin nin'idrin /,2 /,2 ditam ditama'k a'kan an ke dalam dalam @ m: laruta larutan n *rotein, larutan sam*el unknown unknown A dan laru laruta tan n asam asam amin amino o -la -laruta rutan n tiro tirosi sin n, 3enilalanin, tri*to3an dan !lisin0, kemudian di*anaskan 'in!!a mendidi') Uji PbS
Seanak . m: larutan Na5H dan . tetes P"asetat P"asetat ditama'ka ditama'kan n ke dalam B m: larutan larutan *rotein *rotein dan larutan sam*el unknown A kemudian di*anaskan dalam *enan!as air) Perua'an 8arna an! terjadi diamati)
Uji Nitroprusida Sean Seanak ak /,B m: laruta larutan n natrium natrium nitr nitro* o*ru rusi sida da 2 dan /,B m: laru laruta tan n amonium 'idroksida ditama'kan ke dalam B m: m: larutan larutan *rotein *rotein,, laruta larutan n sam*el sam*el unknown A unknown A dan larutan sistein)
HASIL DAN PEMBAHASAN #erdasarka #erdasarkan n *er&oaan *er&oaan identi3ika identi3ikasi si asam amino *ada larutan *rotein -alumin telu telur0 r0 dan dan sam sam*el *el unknown an! an! tela' tela' dilakukan di*erole' 'asil se*erti taelerikut %
Ta)+, 2- Hasil uji identi3ikasi asam amino *ada larutan *rotein -alumin telur0 dan sam*elunknown sam*elunknown.
Sa(+,
U.% M%,,/#
Alumin Tirosin Tri*to3an
= = "
U.% H/!%# '/,+ = " =
Glisin
"
"
Fenilalani n Sistin
"
"
"
Sistein
"
A F G U.% M%,,/#
" " "
Tidak dilakukan Tidak dilakukan " " "
U.% N%#%4*%#
Pada Pada uji uji Mill Millon on,, larut larutan an *rot *rotei ein n -al -alum umin in telu telur0 r0 menu menunj njuk ukka kan n 'asi 'asill uji uji *ositi3 adana asam amino) Asam amino an! an! mem memer erik ikan an 'asil 'asil *osi *ositi3 ti3 *ada *ada uji uji Millon adala' tirosin) :arutan alumin telur ketika ditama'kan rea!en Millon terentuk enda*an *uti' -li'at !amar @a0) $nda*an *uti' an! terentuk meru*akan reaksi antar antaraa H!= den! den!an an asam asam amin amino o tiro tirosin sin)) $nda*a $nda*an n *uti' *uti' terse terseut ut men!al men!alami ami reaksi reaksi lei' lanjut den!an *emanasan)Selanjutna, *ada *roses *emanasan, HN5 @ an! mula" mula ula ert ertin inda dak k sea sea!a !aii *el *elarut arut an! an! = men! men!ok oksi sida dasi si ion ion H! menj menjad adii H!.=) $nda*an an! terentuk meru*akan !aram kom*le kom*leks ks dari dari tirosin tirosin an! an! ternit ternitras rasia ian! n! er8arna mera' -!amar @0) Terentukna Terentukna larutan larutan an! er8arna mera' menunjukkan menunjukkan
H5
H
H
4
4
H
N H
Tirosin
5 4
H
= = =
U.% #a*%"( #%*/*"%4a = Tidak dilakukan Tidak dilakukan
= " Tidak dilakukan = Tidak Tidak dilakukan dilakukan = Tidak Tidak dilakukan dilakukan Tidak Tidak Tidak dilakukan dilakukan dilakukan Tidak Tidak = dilakukan dilakukan " " = = " " " " " a'8a dalam alumin telur men!andun! asam amino tirosin)
Uji selanju selanjutn tnaa an! an! dilakuk dilakukan an adala' uji ter'ada* sam*el unkno8n A, F dan G menun menunjuk jukkan kan 'asil 'asil ne!ati3 ne!ati3 -t !amar 90) Hal ini menandakan a'8a dian dianta tara ra keti keti!a !a sam*e sam*ell ini ini tida tidak k ada ada sam*el an! men!andun! asam amino tiro tirosi sin) n) Pen Pen!uji !ujian an ju!a ju!a dila dilaku kuka kan n ter'ada ter'ada* * asam asam amino amino !lisin !lisin,, tri*to3a tri*to3an, n, tiro tirosi sin, n,3e 3eni nila lalan lanin in,, sist sistin in,, dan dan siste sistein in -!amar B0) Penama'an rea!en Millon *ada
5 H!=-a>0
5H -a>0
U.% P)S
4 -
H
H
4
4
N
H
5H H!=
O
H
-s0
H
Tirosin Ternitrasi
H5
H
H
4
4
H
N H
H
5 4
H
N =-a>0 HN5@-a>0 4 = 5H! .
5
4
5H
H
Tirosin
5"
N H
H -a>0
H!.=
4
H
-s0
Kom*leks tirosin ternitrasi -8arna mera'0
Ga()a* 2- 6eaksi *ementukan kom*leks tirosin ternitrasi
-a0 -0 Ga()a* 3) -a0 terentukna enda*an *uti' *ada alumin t elur -0 terentukna enda*an mera'*ada alumin telur)
-a0 -0 -&0 Ga()a* 8-Tidak terentuk enda*an mera' *ada sam*el & -a0 & -a0 sam*el ' sam*el ' -0 -0 sam*el -&0
-a 0
-0
-& 0
-d0
-e0
-30
Terentuk enda*an mera' *ada reaksi rea!en Millon den!an tirosin -d0, tidak terentuk Ga()a* 5-Terentuk enda*an mera' *ada Glisin -a0, Tri*to3an -0, Fenilalanin -&0, Sistin -e0, Sistein -30 'asil 'asil an! an! ne!ati3 ne!ati3 karena karena tidak tidak teren terentuk tuk U.% H/!%#'/,+ Pada *en!ujian *en!ujian ini, ketika larutan larutan &in&in un!u -!amar E0) Den!an demikian alumin telu telurr ditam tama'kan rea!en da*at disim*ulkan disim*ulkan a'8a sam*el unknown Ho**ki Ho**kins" ns"4ol 4olee dan H.S59 *ekat terentuk A, F dan G ukan asam amino tri*to3an) &in&in er8arna un!u *ada la*isan a8a' Pen!uj Pen!ujian ian ju!a ju!a dilaku dilakukan kan ter'ad ter'ada* a* asam" asam" -!amar 0) Warna un!u terseut meru*akan asam amino se*erti% asam amino tri*to3an, 'asil 'asil konde kondensas nsasii tri*to tri*to3an 3an den!an den!an !u!us !u!us laru laruta tan n !lisi !lisin, n, laru laruta tan n 3eni 3enila lala lani nin, n, dan dan alde'ida dari asam !lioksilat dalam suasana tirosin) tirosin) Dari *en!ujian *en!ujian terseut 'ana asam asam asam sul3 sul3aat) Hal ini men!i en!in ndikas ikasik ikan an amino tri*to3an an! men!'asilka men!'asilkan n &in&in a'8a dalam alumin telur men!andun! un!u -!amar 70) #erikut adala' *ersamaan asam amino tri*to3an) reak reaksi si an! an! terj terjad adii anta antara ra asam asam amin amino o Selanjutn Selanjutnaa dilakukan dilakukan *en!ujian *en!ujian tri*to3an den!an rea!en Ho*kins"&ole% sam*e sam*ell unknow unknown n A, F dan Gmenunjukkan 5 H. 4 4 N
H
H 4 4
5 5H -a>0
H.S59
4 5
H
5 NH -a>0
H.5
-l0
N H -a>0 H
Tri3to*an
5H
H 4
4
NH .
H
5H
H H
asam !lioksilat
asam .,@,9,B"tetra'idro"" Karolin"9"karoksilat Ga()a* 6- 6eaksi *ementukan *e mentukan asam .,@,9,B"tetra'idro"" Karolin"9"karoksilat
Ga()a* 9) Terentuk Terentuk &in&in un!u *ada reaksi antara rea!en Ho*kins"4ole den!an larutan alumin telur
Ga()a* :-Tidak terentuk &in&in un!u *ada rekasi antara rea!en Ho*kins" 4ole den!an keti!a s am*el unkno8n-A, F, G0
-a0
- -0
-&0
-d0
Terentuk &in&in un!u *ada reaksi antara rea!en Ho*kins"4ole den!an tri*to3an-&0, Ga()a* ;) Terentuk tidak terentuk &in&in un!u *ada Glisin -a0, -a0, Fenilalanin -0, dan tirosin -d0) -d0) U.% N%#%4*%#
Uji nin'id nin'idrin rin meru* meru*aka akan n uji an! an! dila dilaku kuka kan n untu untuk k mene menent ntuk ukan an ada ada atau atau tidakn tidaknaa asam" asam" α amino eas *ada suatu sam*el an! akan diidenti3ikasi) Pen!ujian larutan alumin telur men!!unakan rea!en Nin'idrin menunjukkan 'asil *ositi3, an! mana mana *ada *ada *en!uj *en!ujian ian ini, ini, ketika ketika alumi alumin n ditam ditama'k a'kan an laruta larutan n Nin'id Nin'idrin rin teren terentuk tuk laruta larutan n er8ar er8arna na iru iru setela setela' ' di*ana di*anaskan skan -!amar 220) Peme Pementu ntuka kan n laru larutan tan
Pen!ujian sam*el F ju!a menu menunj njuk ukka kan n 'asi 'asill an! an! *osi *ositi ti33 an! an! dita ditand ndai ai den! den!an an ter teren entu tukn kn a laru laruta tan n er8arna iru tua, sedan!kan untuk sam*el A dan G uji ernilai ne!ati3 karena larutan teta* teta* er8ar er8arna na enin! enin! dan tidak tidak erua erua' ' 8arna 8arna -!am -!amar ar 2.0) 2.0) Hal ini menun menunjuk jukkan kan sam sam*el *el F men! men!an andu dun! n! asam asam α amino eas, sedan!kan sam*el A dan G tidak) tidak)Pen Pen!uj !ujian ian ju!a ju!a dilaku dilakukan kan ter'ad ter'ada* a* asam amino amino tirosi tirosin, n, tri*to tri*to3an 3an,, !lisin !lisin dan 3enilalanin 3enilalanin)) Dari *en!ujian keem*at asam amin amino o menu menunj njuk ukka kan n 'asi 'asill *osi *ositi3 ti3 an! an! dita ditand ndai ai den! den!an an ter teren entu tukn kn a laru laruta tan n er8arna iru keun!uan -!amar 2@0) Hal ini menunjukkan a'8a asam amino tirsin, tri*to3an, !lisin dan 3enilalanin meru*akan asam α amino) #erikut adala' reaksina)
kom* kom*le leks ks er8 er8ar arna na iru iru ini ini terj terjad adii kare karena na deka dekar rok oksil silas asii oksid oksidati ati33 dari dari asam asam amin amino o dan dan *rod *roduk uksi si nin' nin'id idri rin n tereduk tereduksi, si, NH@ dan 45 45.) Kemu Kemudi dian an terjadi reaksi antara nin'idrin tereduksi den!an molekul nin'idrin an! lain dan den!an den!an moleku molekull NH@ an! dieaskan dieaskan se'in!!a se'in!!a terentuk terentuk kom*leks kom*leks er8arna er8arna iru)
5
5 H
5H H. N
4
NH @-a>0 45.
C
-!0
5H
-a>0
5
5H
5
5H -a>0
6
4
H
5
6
H-a>0
-a>0
5
Nin'idrin
asam α amino
Nin'idrin tereduksi
5
5 5H
H
H
5
5
Nin'idrin
5
H
N 5H -a>0
alde'id
@H.5 -l0
N
H. 5
-a>0
H -a>0
5
Nin'idrin tereduksi
-a>0
5
5
Kom*leks er8arna iru
Ga()a* 10- 6eaksi *ementukan kom*leks er8arna iru *ada uji Nin'idrin
Ga()a* 11-Terentuk Terentuk larutan er8arna iru *ada reaksi Nin'idrin den!an alumin telur
-a 0 -0 -&0 Ga()a* 12-Terentuk Terentuk larutan er8arna iru *ada reaksi Nin'idrin den!an sam*el F -0, tidak terentuk larutan er8arna iru *ada reaksi Nin'idrin den!an Sam*el A -a0 dan sam*el G -&0)
-a0 -0 -&0 -d - d0 Terentuk larutan er8arna iru *ada reaksi Ni n'idrin den!an asam Ga()a* 13) Terentuk aminoTirosin -a0, Tri*to3an Tri*to3an -0, !lisin -&0 , dan 3enilalanin -d0 $nda*a $nda*an n 'itam 'itam terse terseut ut meru*a meru*akan kan PS) Adan Adanaa enda enda*a *an n 'itam 'itam ini ini mena menand ndak akan an a'8a alumin telur men!andun! asam amino sistein)Uji ter'ada* sam*el A, F dan G memerikan 'asil ne!ati3 an! ditandai den!an den!an tidak terentukna terentukna enda*an enda*an 'itam -li'at -li'at !amar !amar 20) 6eaksi an! terjadi terjadi *ada uji PS adala' sea!ai erikut%
U.% P)S
Pen! Pen!uj ujia ian n PS PS dilak ilakuk ukan an untuk ntuk men!uji ada atau tidakna unsur S dalam suatu
S."-a>0= .Na5H-a>0 Na.S-a>0 = . 5H"-a>0
Na.S-a>0 = P-4H @4550.-a>0
PS-s0 = .4H @455Na-a>0
$nda*an 'itam Ga()a* 18- 6eaksi Uji PS
Terentuk enda*an 'itam setela' Ga()a* 15-Terentuk alumin alumin telur direaksikan direaksikan den!an den!an Na5H, *"asetat *"asetat di*anaskan
U.% N%*/*"%4a
Na*%"(
6eaksi 6eaksi antara antara !u!us !u!us sul3id sul3idril ril dari dari asam amino -sistein0, *e*tida, atau *rotein den!an den!an natrium natrium nitro*rusid nitro*rusidaa dalam amonia erlei' men!'asilkan kom*leks er8arna mera') Kom*leks er8arna mera' terseut meru*akan Na.Fe-4N0B N5).H N5).H.5) #erdas #erdasark arkan an *er&o *er&oaan aan an! an! dilaku dilakukan kan,, larutan larutan asam amino aitu sistein an! tela' diuji diuji nitro* nitro*ru rusida sida,, men!' men!'asi asilka lkan n laruta larutan n an! er8arna er8arna mera' -!amar -!amar 2E0) Hal ini menunjukkan a'8a dalam sistein meman! terda*at !u!us SH eas, karena reaksi ini s*esi3ik untuk !u!us SH eas) Dalam Dalam alu alumi min n telu telurr dida dida*a *atk tkan an 'asil uji *ositi3 *ositi3 ter'ada* ter'ada* nitro*rus nitro*rusida ida an!
Tidak idak tee teent ntuk uk Ga()a* 16enda*an enda*an 'itam setela' setela' keti!a sam*el direaksikan den!an Na5H, P"asetat dan di*anaskan
ditunj ditunjukk ukkan an den!an den!an teren terentuk tukn naa laruta larutan n er8arna mera' keun!uan -!amar 270) Hal ini men!indikasikan a'8a dalam alumin terda*atasam amino sistein) Uji sam*el F dan G memerikan 'asil ne!ati3 den!an den!an natrium natrium nitro*rusid nitro*rusidaa karena karena tidak terentuk kom*leks er8arna mera'!amar, sedan!kan untuk sam*el A memeri 'asil *ositi3 an! ditandai den!an terentukna kom*leks er8arna mera' -li'at !amar ./0 ) Den! Den!an an demi demiki kian an da*a da*att disi disim m*ulk *ulkan an a'8a sam*el F dan G ukan asam amino sistein sistein)) Sedan! Sedan!kan kan sam*el sam*el A adala' adala' asam asam amino amino sistein sistein)) Ada*u Ada*un n reaksi reaksi an! an! terjad terjadii adala' sea!ai erikut)
CFe@=-4N0B N5 N5."-a>0= .NH95H-a>0 = 6"SH-a>0 ? -NH90.=CFe.=-4N0B N5S6 N5S6."-a>0 Ga()a* 19- 6eaksi natrium nitro*rusida den!an asam amino
Ga()a* 1:-Terentuk Terentuk larutan mera' *ada reaksi antara natrium nitro*rusida den!an larutan sistein
Ga()a* 1;-Terentuk Terentuk larutan mera' *ada reaksi antara natrium nitro*rusida den!an larutan larutan Alumin telur)
-a 0 -0 -&0 Terentuk larutan mera' *ada reaksi antara natrium nitro*rusida den!an larutan Ga()a* 20-Terentuk sam*el A -a0, tidak terentuk larutan mera' *ada reaksi antara natrium nitro*rusida den!an larutansam*el F -0 sam*el G -&0 SIMPULAN #erdasarka #erdasarkan n 'asil *er&oaan *er&oaan an! di*erole' di*erole' da*at da*at disim*u disim*ulkan lkan a'8a *ada alumin alumin telur men!andun! men!andun! asam +"amino dan *e*tida an! memiliki !u!us +"amino eas, asam amino tirosin, asam amino tri*to3an, dan asam amino an! men!andun! men!andun! unsur eleran! eleran! aitu sistein) Sam*elunknown Sam*elunknown A meru*akan meru*akan asam amino siste sistein in kare karena na menu menunj njuk ukka kan n 'asil 'asil an! an! *ositi3 *ada uji Nitro*rusida, sam*el unknown F unknown F meru*akan asam asam +"amino eas karena menunjukkan 'asil *ositi3 *ada uji Nin'idrin) Sedan!kan untuk sam*el G tidak men!andun! asam amino karena
semua uji an! dilakukan menunjukkan menunjukkan 'asil an! ne!ati3) U'APAN TERIMA KASIH
U&a*a a*an terima ima kasi' *enulis sam*a sam*aika ikan n ke*a ke*ada da Dr) Dr) I Nom Noman an Tika Tika,, M)Si), sea!ai dosen *en!am*u mata kulia' Prak Prakti tiku kum m #iok #iokim imia ia atas atas im imin in!a !an n dan dan masu masuka kan n sela selama ma *rak *rakti tiku kum m ini, ini, Made Made Wira'adi Kusuma selaku asisten dosen, dan I De8a Suamia selaku laoran di Jurusan
Pend Pendid idik ikan an Kimi Kimiaa atas atas ant antua uan n dala dalam m mem emerikan se! se!ala ke*erluan an! an! erkaitan den!an *raktikum se'in!!a *er&oaan ini da*at dilaksanakan den!an aik) DAFTAR PUSTAKA
Ari8ulan, Da' 6) ./2.) 6eaksi ji terhad terhadap ap &sam &mino. &mino. Da*at diakses diakses *ada % 'tt*%ni!'tra2@" kuro)lo!s*ot)&om./2./2iokimia" *er&."reaksi"ter'ada*"uji)'tml)) diakses *er&."reaksi"ter'ada*"uji)'tml *ada tan!!al 2. Maret ./2) Fesse Fessend nden en,, F dan dan Fesse Fessend nden en)) 2779 2779)) 7ima 8rganik 9ilid 1. Jakarta % $rlan!!a Frieda Nurlita, dkk) .//.) 7imia .//.) 7imia 8rganik . Sin!araja % IKIPNe!eri Sin!araja 6ed'ana, 6ed'ana, I Waan) aan) .//9) 5iokimia 9ilid 3) Sin!araja% IKIP Ne!eri Sin!araja) Tika, I Noman) ./2/) "enuntun ./2/) "enuntun "raktikum 5iokimia) 5iokimia) Sin!araja% UNDIKSHA)