93231220-casos-clinicos-automacao-sysmex MUY BUENO.pdf

Supervisado por: Department of Clinical and Laboratory Medicine, Osaka City University Medical School Professor Noriyuki Tatsumi, MD Editado por: Department of Clinical Hematology, Osaka City University Medical School Takahisa Yamane, MD Department of Central Clinical Laboratory, Osaka City University Hospital Hiroshi Kubota, MT Traducido al español por:

ANALIZADORES HEMATOLÓGICOS AUTOMATIZADOS

Sysmex Latinoamérica Oficina representativa en Miami

XE-2100

Casos clínicos Volumen 2

SYSMEX CORPORATION

´INDICE Introducción

3

Casos de células linfoides anormales

5

Casos de células inmaduras de tipo mieloide

25

Casos de células de apariencia específica

45

´INDICE Introducción

3


5


25


45

´ INTRODUCCION Como parte de los proyectos de colaboración internacional, frecuentemente visito laboratorios clínicos en ciudades del sudeste de Asia. En cada visita me he quedado impresionado por el conocimiento que tienen sobre las más recientes pruebas clínicas, su gran deseo por aprender y la atmósfera energética que existe en el lugar de trabajo. Algunos de estos laboratorios han introducido pruebas con métodos de punta, incluyendo la tecnología de PCR, mientras que otros están tratando de alcanzar la sistematización. No obstante, el desarrollo es lento debido a las inadecuadas condiciones sociales y financieras, aunque esto mejorará tanto como la economía crezca en el futuro. En los laboratorios de hematología de instituciones médicas de estas ciudades del sudeste de Asia, las mediciones automatizadas de sangre se están incrementando e incluyen los más recientes parámetros en hematíes y plaquetas, como por ejemplo, el cambio del diferencial de tres partes al de cinco partes en la cuenta de leucocitos. Además, está aumentando el reconocimiento a la importancia que debe tener la calidad de los análisis. Pese a ello, con la actual difusión de modernos analizadores multiparamétricos totalmente automatizados, algunos sectores tienen temor a que las técnicas de microscopio se pierdan. Este es un tema que debe recibir atención en los entrenamientos técnicos y médicos, mientras tanto, no se debe concluir que la automatización del diferencial es algo malo. Los analizadores automatizados del diferencial de leucocitos pueden proveer cuentas exactas y precisas de las células presentes con alto nivel de veracidad. Esto permite al personal del laboratorio tener tiempo suficiente para la examinación microscópica de las pocas muestras que no pueden ser manejadas por los equipos. Esto se debe aplicar no sólo en el sudeste de Asia, sino también en todo el mundo. Sin embargo, para usar los analizadores automatizados del diferencial de leucocitos eficiente y efectivamente, los laboratorios deben establecer estrategias para reconocer anormalidades en los histogramas y dispersogramas. También se deben establecer estrategias para el manejo de avisos y mensajes de interpretación proveídos por el instrumento. Métodos eléctricos, ópticos _ y ahora sistemas híbridos _ son ampliamente aceptados para la diferenciación de leucocitos debido a la superioridad que tienen en cuanto a precisión, exactitud y rapidez. No obstante, con el impresionante aumento en la velocidad del proceso de cómputo, en esta etapa de información en tecnología puede ser que esta actitud requiera de una reevaluación en un futuro cercano. Muchos hematólogos tienen más confianza en las características morfológicas encontradas en una tinción o coloración Giemsa particularmente para células raras . Por esta razón, es previsible que para un futuro cercano los técnicos y doctores deban mantener sus habilidades en la identificación de células por microscopio mientras aprecian el valor de los analizadores automatizados en la rutina práctica. Espero que la presente literatura les sea útil en el trabajo diario. Diciembre, 2000

Noriyuki Tatsumi Profesor, Departamento de Clínica y Laboratorio Médico, Escuela de Medicina de la Universidad de Osaka, Osaka (J apón)

3

´ CASOS DECELULAS LINFOIDES ANORMALES Leucemia de adultos célula tipo T (LAT) (1)

6

Leucemia de adultos célula tipo T (LAT) (2)

8

Leucemia de células peludas (LCP) (tipo japonés)

10

Caso de leucomogénesis a partir de un linfoma

12

Linfoma maligno (LM)

14

Linfoma linfocítico granular grande (LLGG)

16

Leucemia prolinfocítica-T (LPL-T)

18

Reincidencia de leucemia linfocítica aguda tipo T (LLA-T)

20

Leucemia linfocítica aguda tipo B (LLA-B)

22

5


LeucemiadeadultoscélulatipoT(LAT)(1) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & 6.56 [109/L] RBC 3.74 [1012/L] HGB 141 [g/L] HCT 38.8 [%] M CV 103.7 [fL] MCH 37.7 [pg] MCHC 363 [g/L] PLT 63 * [109/L] RDW-SD 56.2 + [fL] RDW-CV 14.8 [%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] P-LCR ---[%] PCT ---[%] NEUT 3.31 * [109/L] 50.4 * [%] LYMPH & 2.53 * [109/L] 38.6 * [%] M ONO 0.55 * [109/L] 8.4 * [%] EO 0.07 * [109/L] 1.1 * [%] BASO 0.10 [109/L] 1.5 + [%] NRBC 0.06 [109/L] 0.9 [/100WBC] RET 1.49 [%] 55.7 [109/L] IRF 10.3 [%] LFR 89.7 [%] MFR 9.3 [%] HFR 1.0 [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

IMI

SSC

NRBC

F R

C S F

DC

SFL

Diferencial manual WBC IP Messages

Abn Lympho/L_Blasts

RBC/RET IP M essages

PLT IP Messages

PLT Abn Distribution PLT Clumps (S)?

Banda 5.0 [%] Segmentados 65.5 [%] Linfocitos 17.0 [%] Monocitos 5.0 [%] Eosinófilos 3.0 [%] Basófilos 0.5 [%] Mielocitos 1.0 [%] Células atípicas 3.0 [%]

Observaciones

El límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la presencia de células linfoides anormales en este lugar. Estos puntos corresponden a los linfocitos atípicos de LAT (de los cuales se encontraron 3% en la sangre periférica). La aparición del aviso “Abn Lympho/L_Blasts?” demuestra la excelente sensibilidad del canal DIFF para detectar células linfocíticas anormales.

6

Información obtenida por el método de citometría de flujo Datos (sangre periférica) Células T

CD2 CD3 CD4 CD7 CD8

Células B

86.1 CD20 7.9 75.4 HLA-DR 31.4 54.8 72.9 24.6

Otros

CD25 51.4

Observaciones

Resultados positivos para marcadores CD7 y CD25. El valor de CD4 no aumentó significativamente, lo que sugiere que las células LAT no se incrementaron.

Información obtenida del análisis del frotis Tinción May-Giemsa

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones

Se encontraron células segmentadas, enclavadas y onduladas (también conocidas como “células en flor”) entre linfocitos maduros.

7


LeucemiadeadultoscélulatipoT(LAT)(2) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC RBC HGB HCT M CV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

24.58 4.77 165 48.0 100.6 34.6 344 145 50.1 13.6 16.4 12.8 49.1 0.18 ---------0.22 0.09 0.00 1.17 4.5 95.5 3.8 0.7

+ [109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] + [%] [%] [109/L] ---- [%] [109/L] ---- [%] [109/L] ---- [%] [109/L] 0.9 [%] [109/L] 0.4 [%] [109/L] 0.0 [/100WBC] [%] 55.8 [109/L] [%] [%] [%] [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

IMI

SSC

NRBC

F R

C S F

DC

SFL


WBC Abn Scattergram Leukocytosis Atypical Lympho? Abn Lympho/L_Blasts?


PLT IP Messages

Banda 4.0 [%] Segmentados 19.0 [%] Linfocitos 13.0 [%] Monocitos 4.0 [%] Eosinófilos 0.5 [%] Basófilos 0.5 [%] Células atípicas 59.5 [%]

Observaciones

El límite confuso entre las áreas de monocitos y linfocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la presencia de células linfoides anormales. Fueron consideradas como células LAT (encontradas en un 60% en la sangre periférica).

8


CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8

91.6 91.5 84.1 94.5 19.5 7.6

Células B

CD10 CD19 CD20 CD23

7.7 6.2 6.7 4.6

Observaciones

Otros

CD25 82.3

El alto índice de positividad para CD4 y CD25 sugiere células T tumorales, mientras que el bajo índice de positividad para CD7 sugiere leucemia T crónica o aguda en adulto. Este caso fue diagnosticado como LAT aguda.


Tinción May-Giemsa

Observaciones

Se encontró un significativo número de linfocitos con forma de flor segmentada.

(x 1000) (x 1000)

9


Leucemiadecélulaspeludas(LCP)(tipojaponés) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC RBC HGB HCT M CV MCH MCHC PLT RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

25.43 + [109/L] 4.24 [1012/L] 147 [g/L] 42.5 [%] 100.2 [fL] 34.7 [pg] 346 [g/L] 211 [109/L] 57.1 + [fL] 15.5 [%] 10.4 [fL] 10.1 [fL] 23.0 [%] 0.21 [%] ---[109/L] ---- [%] ---[109/L] ---- [%] ---[109/L] ---- [%] 0.30 [109/L] 1.2 [%] 0.07 [109/L] 0.3 [%] 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] 0.78 [%] 33.1 [109/L] 9.4 [%] 90.6 [%] 8.3 [%] 1.1 [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

IMI

SSC

NRBC

F R

C S F

DC

SFL


WBC Abn Scattergram Leukocytosis Atypical Lympho? Abn Lympho/L_Blasts?


PLT IP Messages

Banda 0.5 [%] Segmentados 8.5 [%] Linfocitos 23.5 [%] Monocitos 0.0 [%] Eosinófilos 0.0 [%] Basófilos 2.0 [%] Células peludas 65.5 [%]

Observaciones

Este es un caso de leucemia de células peludas (LCP). En el dispersograma DIFF se formó un grupo de puntos en la región del área de linfocitos hacia el área de monocitos (indicado por ), lo que sugiere la presencia de células peludas.

10


CD2 CD3 CD4 CD5 CD8

Células B

32.6 CD19 40.6 CD20 18.6 CD24 29.4 CD38 17.0 FMC7 SM-IgD SM-IgM SM -IgA SM-IgG SM-IgT SM-IgK SM-IgL

Observaciones

Moléculas de adhesión celular

69.3 63.9 3.7 14.9 80.4 1.5 37.7 7.7 78.2 75.4 4.5 2.4

CD11a 69.0 CD11c 97.3 Otros

CD25

20.0

Resultados positivos para marcadores CD19 y CD20, lo que sugiere un tumor de tipo célula B. CD11c-positivo, CD24negativo y FMC7-positivo indican leucemia de células peludas. El valor bajo para CD25 sugiere que la leucemia es de tipo japonés.

Información obtenida del análisis del frotis Tinción May-Giemsa (*secado con un ventilador)

Tinción May-Giemsa (*secado con un ventilador)

(x 1000)

Tinción May-Giemsa (aire seco)

(x 1000)

Tinción de fosfatasa ácida

(x 1000)

Prueba resistente al tartrato

(x 1000) (x 1000) Observaciones

Se observan células en forma de huevo frito. En el frotis están presentes células peludas con numerosas proyecciones. En la tinción de fosfatasa ácida se encontraron células granulares grandes que contienen una o dos células débilmente positivas, las cuales fueron resistentes al tartrato. Se sabe que la leucemia de células peludas de tipo japonés muestra positividad débil en la tinción de fosfatasa ácida. *La mayoría de laboratorios japoneses usan un ventilador para secar sus tinciones o coloraciones de sangre periférica.

11


Casodeleucomogénesisa partirdeunlinfoma Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & RBC HGB HCT MCV MCH M CHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH & MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

14.25 [109/L] 4.00 [1012/L] 113 [g/L] 34.0 [%] 85.0 - [fL] 28.3 [pg] 332 [g/L] 20 - [109/L] 46.5 [fL] 15.0 [%] 8.7 - [fL] 10.7 [fL] 29.6 [%] 0.02 - [%] 2.19 * [109/L]15.3* [%] 10.64 * [109/L] 74.7* [%] 0.98 * [109/L] 6.9* [%] 0.19 * [109/L] 1.3* [%] 0.25 * [109/L] 1.8* [%] 0.57 [109/L] 4.0 [/100WBC] 0.36 [%] 14.4 [109/L] 20.2 [%] 79.8 [%] 15.0 [%] 5.2 [%]

WBC IP M essages

Lymphocytosis Basophilia NRBC Present Blasts? Immature Gran?


DIFF

WBC/BASO

L F S

IMI

C S F

SSC

F R

NRBC

SSC

C S F

DC

SFL

Diferencial manual

PLT IP M essages

Thrombocytopenia

Banda 3.5 [%] Segmentados 2.5 [%] Linfocitos 8.5 [%] Monocitos 0.5 [%] Eosinófilos 1.5 [%] Basófilos 0.0 [%] Mielocitos 1.0 [%] Células anormales 82.5 [%] (Blastos +) Hematíes nucleados 2.5/100 leucocitos

Observaciones

El límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por sugiere la presencia de células linfoides anormales, ya que representan la mayoría en el frotis.

12

)



94.0 41.8 78.3 92.9 95.6 79.3

Células B

CD10 CD19 CD20 CD23 CD38 HLA-DR

69.0 2.2 2.2 4.9 89.6 6.7

Plaquetas Células NK

CD36 1.8 CD56 CD42 1.8

68.8

Granulocitos/ Monocitos


4.6 1.8 1.9 3.9 5.5 1.8


CD11a CD11b CD11c CD18 CD41

95.7 5.5 4.2 96.8 1.7

Observaciones

Los datos sugieren que existe una proliferación neoplásica de células pre-T, las cuales son CD3 negativas; y CD4, CD8, CD10 y CD56 fueron positivas.

Otros

CD25 12.0


(x 1000)

Tinción May-Giemsa

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones

Predominan pequeñas células con particiones celulares, las cuales se consideran como células de linfoma (82.5% del total).También se observa un pequeño número de células grandes y blastos.

13


Linfomamaligno(LM) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC 14.12 [109/L] RBC 4.24 [1012/L] HGB 116 [g/L] HCT 35.9 [%] M CV 84.7 - [fL] MCH 27.4 [pg] MCHC 323 [g/L] PLT 217 [109/L] RDW-SD 40.3 [fL] RDW-CV 13.4 [%] PDW 13.8 [fL] MPV 12.1 [fL] P-LCR 40.6 [%] PCT 0.26 [%] NEUT 10.80 * [109/L] 76.5 * [%] LYMPH 1.77 * [109/L] 12.5 * [%] MONO 1.34 * [109/L] 9.5* [%] EO 0.15 [109/L] 1.1 [%] BASO 0.06 [109/L] 0.4 [%] NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] RET 2.74 [%] 116.2 [109/L] IRF 25.0 [%] LFR 75.0 [%] M FR 19.9 [%] HFR 5.1 [%]

WBC/BASO

DIFF L F S

IMI

C S F

SSC

F R

NRBC

SSC

C S F

DC

SFL


Monocytosis Abn Lympho/L_Blasts?


PLT IP Messages

Banda 8.5 [%] Segmentados 74.0 [%] Linfocitos 6.5 [%] Monocitos 7.0 [%] Eosinófilos 0.5 [%] Basófilos 0.0 [%] Células linfoma maligno 3.5 [%]

Observaciones

El límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la presencia de células linfoides anormales, las cuales fueron clasificadas como células de linfoma maligno (3.5% del total del frotis). Aparece la alarma “Abn Lympho/L_Blasts?”.

14


Tinción May-Giemsa

Observaciones

Se encontraron células grandes de linfoma propensas a la segmentación y blastos (3.5% del total) en el frotis. (x 1000)

(x 1000)

15


Lin Li nfomali linfoc focííticogranulargrande(LLGG) Informac nformación ión del XE-2 -2100 Informac aciión medi edida da por el XE-2100 WBC 30.65 +[109/L] RBC 3.56 [1012/L] HGB 100 [g/L] HCT 30.6 [%] M CV 86.0 [fL] M CH CH 28.1 [pg] MCH MC HC 327 [g/L] PLT 125 [109/L] RDW-SD RDW -SD 46 46.5 .5 [fL] RDW-CV RDW -CV 14. 4.8 8 [%] PDW 13.1 [fL] M PV 10.7 [fL] P-LC LCR R 31.8 [%] PCT 0.13 - [%] NEUT 1.45 * [109/L] 4.7 .7 * * [%] 9 LYMPH 28.75 * [10 /L]93.8 L]93.8 * * [%] MONO MO NO 0.37 * [109/L] 1.2 .2 * * [%] 9 EO 0.03 [10 /L] 0.1 [%] BAS ASO O 0.05 [109/L] 0.2 [%] NRB NR BC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] RET 1.11 [%] 39.5 [109/L] IRF 6.8 [%] LFR 93.2 [%] M FR 5.9 [%] HFR 0.9 [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

IMI

SSC

F R

SS C

NRBC C S F

DC

SFL


Lymphocytosis Leukocytosis Abn Lympho/L_Blasts?

RBC/R RB C/RET ET IP M essages

PLT PL T IP M essages

Banda Seg Segmentados Linfocitos M onocitos Eosinófilos Basófilos Linfocitos granulares granulares grandes

0.0 [%] 11.0 [%] 1.5 [%] 1.5 [%] 0.0 [%] 0.0 [%] 86.0 [%]

Observaciones

Linfocitos granulares grandes (90% en el frotis) aparecen en el área de linfocitos del dispersograma DIFF, los cuales mostraban mayor dispersión lateral que los linfocitos normales debido a su gran contenido tenido granular (indicado por ).

16

Informac nformación ión obtenida por el método de citom citometría etría de flujo Datos Datos (sangre periférica) Células T


Células B

99.7 CD10 99.6 CD19 99.0 CD20 99.5 HLA -DR 82.9 87.4 apagado

1.1 0.9 0.8 9.2


Células NK

CD16

CD56

98.5

98.9

Otros

CD25

18.5

Observaciones

Los datos sugieren una proliferación neoplásica de células positivas para CD3, CD4, CD8 apagado, CD16 y CD56. El linfoma linfocítico granular grande es clasificado en células tipo T o células nulas. Es raro aun para células tipo T el expresar CD4.


Observaciones

La mayoría de linfocitos son grandes y contienen gránulos.

(x 1000) Tinción May-Giemsa

(x 1000)

17


Leucemiaprolinfocíticaa-T T(LPL-T) Informac nformación ión del XE-2 -2100 Informac aciión medi edida da por el el XE-2100 WBC 14.20 [109/L] RBC 5.53 +[1012/L] HGB 178 +[g/L] HCT 53.8 +[%] MCV MC V 97.3 [fL] M CH CH 32.2 [pg] MCH MC HC 331 [g/L] PLT 185 [109/L] RDW-SD 47.6 [fL] RDW-CV RDW -CV 13. 3.3 3 [%] PDW 12.7 [fL] M PV PV 11.0 [fL] P-LC LCR R 33.2 [%] PCT 0.20 [%] NEUT ---- [109/L] ---- [%] LYMPH 9.84 * [109/L] 69.3 L] 69.3** [%] MONO MON O 0.51 * [109/L] 3.6 .6** [%] 9 EO 0.09 [10 /L] 0.6 [%] BASO ---- [109/L] ---- [%] NRB NR BC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] RET 1.16 [%] 64.1 [109/L] IRF 7.1 [%] LFR 92.9 [%] M FR 6.0 [%] HFR 1.1 [%]

DIFF

WBC/BAS O

L F S

C S F

SS C

IMI

SSC

NRBC

F R

C S F

DC

S FL


WBC Abn A bn Scat S cattergra tergram m Lymphocytosis Abn Lympho/L_Blasts?

RBC/R RB C/RET ET IP M essages

PLT IP Messages

Banda Segmentados Linfocitos M onocitos Eosinófilos Basófilos Célula Célulass anor anorma male less

3.0 [%] 30.5 [%] 41.5 [%] 1.0 [%] 0.5 [%] 2.0 [%] 21.5 [%]

(células segmentadas +)

Observaciones

El límite confuso entre entre las áreas áreas de linfocitos linfo citos y monocitos en en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la aparición de células linfoides anormales segmentadas, las cuales fueron encontradas en el frotis.

18



95.4 95.2 95.2 90.9 97.5 1.4

Células B

CD10 <1.0 CD19 1.8 CD20 1.9 HLA-DR 5.9


Células NK

CD16

CD56 8.1

7.8

Observaciones

El alto índice de positividad (por encima del 90%) para CD2, CD3, CD4, CD5 y CD7 sugiere un incremento significativo en células T.


Tinción May-Giemsa

Tinción May-Giemsa

(x 1000) (x 1000) (x 1000)

Observaciones

Se encontró un importante número de células anormales linfocíticas con cúmulos burdos en la cromatina y nucléolos claros y poco claros. Los hallazgos por los cuales este paciente fue diagnosticado con leucemia prolinfocítica fueron leucocitosis, nódulos linfáticos y bazo inflamados, así como por los resultados de la citometría de flujo y el análisis del frotis de la sangre periférica.

19


Reincidencia deleucemia linfocítica aguda tipoT(LLA-T) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & 3.16 [109/L] RBC 2.82 [1012/L] HGB 86 [g/L] HCT 25.3 - [%] M CV 89.7 [fL] M CH 30.5 [pg] MCHC 340 [g/L] PLT & 21 - [109/L] RDW-SD 51.3 [fL] RDW-CV 15.9 [%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] P-LCR ---- [%] PCT ---- [%] NEUT 1.44* [109/L] 45.6 * [%] LYMPH & 0.77* [109/L] 24.4 * [%] MONO 0.94* [109/L] 29.7 * [%] EO 0.00* [109/L] 0.0 * [%] BASO 0.01* [109/L] 0.3 * [%] NRBC 0.16 [109/L] 5.0 [/100WBC] RET 0.50 [%] 14.1 [109/L] IRF 16.2 [%] LFR 83.8 [%] MFR 13.7 [%] HFR 2.5 [%]

WBC IP Messages


Lymphopenia NRBC present

Anemia

Blasts? Immature Gran?

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

IMI

SSC

NRBC

F R

C S F

DC

SFL

Diferencial manual

PLT IP M essages

PLT Abn Distribution Thrombocytopenia

Banda Segmentados Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos Mielocitos Metamielocitos Linfocitos atípicos Blastos

9.0 [%] 30.5 [%] 9.0 [%] 26.0 [%] 0.0 [%] 0.0 [%] 2.5 [%] 1.5 [%] 0.5 [%] 21.0 [%]

(Células segmentadas grandes) monocitos grandes +

Hematíes nucleados 4/100 leucocitos

Observaciones

El espacio ocupado por los monocitos es más grande de lo normal en el dispersograma DIFF y se extiende al área de fluorescencia lateral alta. Se puede concluir que los blastos grandes y segmentados se encuentran localizados en esta área (indicado por ). Los blastos constituyeron el 21% en el diferencial manual.

20


CD2 CD3 CD4 CD7 CD8

99.7 97.0 1.7 79.9 6.9

Células B

CD10 CD19 CD20 HLA-DR

0.6 0.2 0.5 1.8


CD13 CD15 CD33 CD34

3.5 2.2 0.7 0.6

Células NK

CD56

43.2

Moléculas deadhesión celular

CD11b CD41

61.7 0.5

Observaciones

Se concluyó que este caso era una leucemia aguda tipo T. Fue positiva para CD3 y negativa para CD4 y CD8.

Otros

CD25

0.6


(x 1000)

Tinción May-Giemsa

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones

Esta es una leucemia aguda tipo T recurrente. Los blastos (21% en el frotis) tienen una elevada relación núcleo/citoplasma (N/C), un solo núcleo por célula y cromatina burda.

21


Leucemia linfocítica aguda tipo B (LLA-B) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & 152.26@ [109/L] RBC 2.02 - [1012/L] HGB 58 - [g/L] HCT 17.8 - [%] MCV 88.1 [fL] MCH 28.7 [pg] MCHC 326 [g/L] PLT & 45 * [109/L] RDW-SD 51.2 [fL] RDW-CV 17.9 + [%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] P-LCR ---- [%] PCT ---- [%] NEUT ---- [109/L] ---- [%] LYMPH ---- [109/L] ---- [%] M ONO ---- [109/L] ---- [%] EO 0.03 * [109/L] 0.0* [%] BASO 0.29 * [109/L] 0.2* [%] NRBC 0.13 * [109/L] 0.1* [/100WBC] RET 0.86 [%] 17.4 [109/L] IRF 21.4 [%] LFR 78.6 [%] MFR 14.8 [%] HFR 6.6 [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

SSC

IMI

NRBC

F R

C S F

SFL

DC



WBC Abn Scattergram Basophilia Leukocytosis

Anemia


PLT IP Messages

PLT Abn Distribution Trombocytopenia PLT Clumps?

Banda Segmentados Linfocitos M onocitos Eosinófilos Basófilos Blastos

0.0 [%] 0.5 [%] 6.0 [%] 0.0 [%] 0.5 [%] 0.0 [%] 93.0 [%]

(pocas células hendidas y células segmentadas)

Observaciones

Los blastos (90% en el frotis) aparecen en el área de linfocitos y monocitos del dispersograma DIFF (indicado por ), pero muestran menos fluorescencia lateral que en el caso de LLA-T ilustrado en las páginas 20 y 21.

22



5.6 3.5 3.6 4.2 5.3 3.6

Plaquetas

Células B

CD10 CD19 CD20 CD23 CD38 HLA-DR

94.5 92.7 0.2 1.4 53.4 93.9

Células NK

CD36 66.0 CD56 CD42 2.7

2.3



56.3 0.6 0.8 2.7 44.8 92.7


CD11a CD11b CD18 CD41

Otros

CD25

81.5 72.0 90.9 0.5

Observaciones

CD10 y CD19 positivos, así como CD20 negativo, sugieren una proliferación neoplásica de células pre-B. A estas células se les ha considerado bifenotípicas, ya que fueron positivas para CD13 y CD33.

80.4

Información obtenida del análisis del frotis

Tinción May-Giemsa

Tinción peroxidasa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones

Predominan blastos pequeños con una elevada relación núcleo/citoplasma (N/C). Se observó la presencia de algunas células segmentadas o con cisuras.

23

Por: Ken-ichi Anami, MT, Gerente del laboratorio clínico del Hospital Nacional Miyakonojo, J apón.

24

´ LAS INMADURAS DE TIPOMIELOIDE CASOS DE CELU Síndrome mielodisplásico (SMD)-AR

26

LMC crisis blástica-1

28

LMC crisis blástica-2

30

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M2

32

Leucemia mieloide aguda (LMA) variante forma-M3

34

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M4(1)

36

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M4(2)

40

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M5b

42

25


Síndromemielodisplásico(SMD)-AR Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & 4.29 [109/L] RBC 3.62 [1012/L] HGB 122 [g/L] HCT 38.0 [%] MCV 105.0 [fL] M CH 33.7 [pg] MCHC 321 [g/L] PLT & 27 - [109/L] (PLT-I : 13) RDW-SD 66.2 +[fL] RDW-CV 17.3 +[%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] P-LCR ---- [%] PCT ---- [%] NEUT 2.92 * [109/L] 68.0 * [%] LYMPH & 0.66 * [109/L] 15.4 * [%] MONO 0.17 * [109/L] 4.0* [%] EO 0.44 * [109/L] 10.3 * [%] BASO 0.10 * [109/L] 2.3* [%] NRBC 0.14 [109/L] 3.2 [/100WBC] RET 2.75 [%] 99.6 [109/L] IRF 20.8 [%] LFR 79.2 [%] MFR 14.8 [%] HFR 6.0 [%] WBC IP Messages

Lymphopenia NRBC Present RBC/RET IP M essages

Anisocytosis PLT IP Messages

PLT Abn Distribution Trombocytopenia

DIFF

WBC/BASO

L F S

IMI

C S F

SSC

F R

PLT F R

NRBC

SSC

C S F

DC

PLT-O

SFL

C S F

Diferencial manual Banda 2.5 [%] Segmentados 66.5 [%] Linfocitos 15.0 [%] Monocitos 3.5 [%] Eosinófilos 6.5 [%] Basófilos 5.0 [%] Blastos 1.0 [%] Hematíes nucleados 2.5/100leucocitos

SFL

Observaciones

Este caso es una variante del síndrome mielodisplásico con anemia refractoria. La agrupación de neutrófilos en el dispersograma DIFF es anormal y se extiende desde el área de los fantasmas (indicado por ), lo que sugiere una dispersión lateral reducida y por lo tanto un menor contenido de gránulos. Esto fue confirmado en el examen de sangre periférica. Las plaquetas gigantes encontradas en el frotis fueron identificadas con una fluorescencia alta en el dispersograma PLT-O (indicado por ) y aparecen por encima de los 20fL en el histograma PLT (indicado por ). Debido a ello, la información obtenida en el dispersograma PLT-O fue usada para el reporte. 26


Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

Observaciones

Están presentes neutrófilos hipersegmentados, plaquetas gigantes y eritroblastos con nucléolos bilobulados, todos característicos del síndrome mielodisplásico. Se encontraron blastos en una proporción del 1%.

(x 1000)

27


LMCcrisis blástica-1 Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 DIFF WBC & 26.87 * [109/L] L F RBC 2.72 [1012/L] S HGB 84 [g/L] HCT 25.2 - [%] * Parámetros de investigación MCV 92.6 [fL] 9 MCH 30.9 [pg] Otros 9.71 [10 /L] 36.1 [%] MCHC 333 [g/L] PLT & 31 * [109/L] RDW-SD 51.2 [fL] RDW-CV 17.8 +[%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] P-LCR ---- [%] IMI PCT ---- [%] F R NEUT ---- [109/L] ---- [%] LYMPH ---- [109/L] ---- [%] MONO ---- [109/L] ---- [%] EO 0.18 * [109/L] 0.7 * [%] BASO 0.13 * [109/L] 0.5 * [%] NRBC 0.29 * [109/L] 1.1 * [/100WBC] RET 3.67 [%] 99.8 [109/L] IRF 22.6 [%] LFR 77.4 [%] MFR 17.8 [%] HFR 4.8 [%]

WBC/BASO C S F

SSC

SSC

NRBC C S F

SFL

DC

Diferencial manual

WBC IP M essages


WBC Abn Scattergram Leukocytosis

Anemia

Blasts? Immature Gran? Left Shift?

PLT IP Messages

PLT Abn Distribution Thombocytopenia PLT Clumps?

* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

Banda 14.0 [%] Segmentados 22.5 [%] Linfocitos 2.5 [%] Monocitos 5.0 [%] Eosinófilos 1.0 [%] Basófilos 1.0 [%] Blastos 38.5 [%] Mielocitos 9.5 [%] Metamielocitos 6.0 [%] Hematíes nucleados 1.0 /100 leucocitos

Observaciones

En el dispersograma DIFF se puede observar en el área de monocitos una agrupación grande de puntos, la cual se extiende en la dirección de mayor fluorescencia lateral (indicado por ). Esto concuerda con la presencia de blastos encontrados en la sangre periférica.

28

Información obtenida por el método de citometría de flujo Datos examen inicial (sangre periférica) Células T

Células B

CD2 2.0 CD10 CD3 5.2 CD19 CD4 88.0 CD20 CD5 1.9 CD38 CD7 3.4 HLA-DR CD8 4.0 Plaquetas

6.1 1.2 1.2 96.0 15.3



Células NK

CD36 94.2 CD56

93.2

99.8 76.2 81.8 67.8 99.3 0.7



97.7 92.2 98.0 6.1

Observaciones

A la izquierda se muestran los marcadores de superficie en el examen inicial. CD4, CD11b, CD14 y CD36, marcadores conocidos de la serie monocítica, son todos positivos.

Otros

CD25 16.2

Información obtenida del análisis del frotis

Tinción May-Giemsa

Observaciones

Este es un paciente con LMC en crisis blástica. Se identificó en el frotis un gran número de blastos con núcleos hendidos y citoplasma altamente basofílico. También fueron identificadas células inmaduras de la serie monocítica. Se encontró una reacción débilmente positiva a la esterasa α-naftol butirato sensitiva al fluoruro de sodio (NaF). (x 1000) Prueba de inhibición de NaF

Tinción esterasa

(x 400)

(x 1000)

29


LMC crisis blástica (2) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 DIFF WBC & 10.03* [109/L] L 12 F RBC 2.26 - [10 /L] S HGB 69 - [g/L] HCT 20.2 - [%] * Parámetros de investigación MCV 89.4 [fL] Otros 3.67 [109/L] 36.6 [%] MCH 30.5 [pg] MCHC 342 [g/L] PLT & 12* [109/L] RDW-SD 57.6+[fL] RDW-CV 18.1+[%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] P-LCR ---- [%] IMI F PCT ---- [%] R NEUT ---- [109/L] ---- [%] LYMPH ---- [109/L] ---- [%] MONO 1.02* [109/L] 10.2 * [%] EO 0.01* [109/L] 0.1 * [%] BASO 0.26* [109/L] 2.6 * [%] NRBC 0.17* [109/L] 1.7 * [/100WBC] RET 0.35 [%] 7.9 [109/L] IRF 22.8 [%] LFR 77.2 [%] MFR 17.4 [%] HFR 5.4 [%]

WBC IP Messages


WBC Abn Scattergram Monocytosis Basophilia

Anemia


PLT IP Messages

PLT Abn Distribution Thrombocytopenia PLT Clumps?


WBC/BASO C S F

SSC

SSC

NRBC C S F

SFL

DC

Diferencial manual Banda 2.0 [%] Segmentados 4.5 [%] Linfocitos 15.5 [%] Monocitos 5.0 [%] Eosinófilos 0.5 [%] Basófilos 0.0 [%] Blastos 68.0 [%] Promielocitos 0.5 [%] Mielocitos 2.0 [%] M etamielocitos 2.0 [%] Hematíes nucleados 2.0/100 leucocitos

Observaciones

Este es el mismo paciente mencionado en las páginas 28 y 29 después de tres semanas de tratamiento. Aun cuando el mismo grupo de puntos en el área de fluorescencia lateral fuerte todavía está presente en el dispersograma DIFF (indicado por ), otro grupo pequeño aparece en el área de monocitos (indicado por ). Esto sugiere una reducción en las células con alto contenido de ácido nucleico en comparación con los exámenes previos.

30


Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Observaciones

Apariencia del frotis de sangre periférica después de tres semanas de tratamiento. Los blastos eran grandes con vacuolas numerosas y de citoplasma profundamente basofílicos. Se encontraron células con apotosis por todo el frotis.

31


Leucemia mieloide aguda (LMA)-M2 Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC 45.57 RBC 2.76 HGB 90 HCT 26.1 MCV 94.6 MCH 32.6 MCHC 345 PLT & 11 RDW-SD 56.3 RDW-CV 16.4 PDW ---MPV ---P-LCR ---PCT ---NEUT ---LYMPH ---M ONO ---EO 0.00 BASO 0.02 NRBC 0.00 RET 0.25 IRF 10.2 LFR 89.8 MFR 8.9 HFR 1.3

* [109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] * [109/L] +[fL] +[%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] ---- [%] [109/L] ---- [%] [109/L] ---- [%] * [109/L] 0.0 * [%] * [109/L] 0.0 * [%] * [109/L] 0.0 * [/100WBC] [%] 6.9 [109/L] [%] [%] [%] [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

IMI

C S F

SSC

SSC

NRBC

F R

C S F

DC

SFL

Diferencial manual

WBC IP M essages



Anemia


PLT IP M essages


Banda 0.0 [%] Segmentados 0.0 [%] Linfocitos 2.5 [%] M onocitos 0.0 [%] Eosinófilos 0.0 [%] Basófilos 0.0 [%] Blastos 97.5 [%] Cuerpos de Auer+

Observaciones

Este caso es una leucemia mieloide aguda ( (LMA)-M 2 ) en recaída. Se pensó que los blastos (97.5% en el frotis) estaban localizados en el área de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ). Los puntos rojos que aparecen en el dispersograma IMI (indicado por ) sugieren la presencia de células inmaduras de la serie neutrofílica.

32

Información obtenida por el método de citometría de flujo Datos (médula ósea) Células T

Células B



4.2 0.3 4.4 4.3 6.0 2.1

CD10 1.2 CD19 39.9 CD20 0.7 CD23 1.9 CD38 79.0 HLA-DR 75.8

CD13 64.7 CD14 0.5 CD15 8.2 CD16 2.0 CD34 75.0


Plaquetas

Células NK


CD36 10.9 CD56 CD42 0.4

17.8 7.4 27.3 1.6

Observaciones

El marcador CD13 fue positivo, mientras que CD14 y CD36 fueron negativos, lo que sugiere la presencia de blastos de tipo mieloide.

75.9


Observaciones

Se observan blastos con nucléolos bastante evidentes y citoplasmas ligeramente turbios, algunos de los cuales contienen cuerpos de Auer. La tinción de peroxidasa es fuertemente positiva.


(x 1000)

Tinción peroxidasa

(x 1000)

33


Leucemiamieloideaguda(LMA)varianteforma-M3 Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & 66.08* [109/L] RBC 2.18* [1012/L] HGB 55 - [g/L] HCT 17.5* [%] M CV 80.3* [fL] M CH 25.2* [pg] MCHC 314* [g/L] PLT & 30* [109/L] RDW-SD ---- [fL] RDW-CV ---- [%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] P-LCR ---- [%] PCT ---- [%] NEUT ---- [109/L] ---- [%] LYMPH ---- [109/L] ---- [%] MONO ---- [109/L] ---- [%] EO 0.03* [109/L] 0.0 * [%] BASO 0.08* [109/L] 0.1 * [%] NRBC 0.09* [109/L] 0.1 * [/100WBC] RET 1.71* [%] 37.3 * [109/L] IRF 51.4* [%] LFR 48.6* [%] M FR 31.4* [%] HFR 20.2* [%]

DIFF

IMI

SSC

NRBC

F R

C S F

DC

SFL

Diferencial manual



RBC Abn Distribution PLT Abn Distribution Dimorphic Population Thrombocytopenia RET Abn Scattergram Anemia PLT Clumps? Fragments?

C S F

SSC

WBC IP Messages


WBC/BASO

L F S

PLT IP Messages

Banda Segmentados Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos Blastos Promielocitos Mielocitos Metamielocitos

0.0 [%] 0.5 [%] 1.0 [%] 0.0 [%] 0.0 [%] 0.0 [%] 3.0 [%] 91.5 [%] 3.5 [%] 0.5 [%]

Observaciones

Un grupo de puntos localizado en el área de linfocitos y monocitos que se extiende en dirección del sitio de mayor fluorescencia (indicado por ), sugiere que los promielocitos (91.5% en el frotis de sangre periférica) aparecen aquí. También se observan pequeños puntos en áreas usualmente ocupadas por neutrófilos y eosinófilos, lo que concuerda con las observaciones del recuento microscópico. La gran cantidad de puntos rojos que aparecen en el dispersograma IMI sugieren células inmaduras de la serie mieloide (indicado por ).

34

Información obtenida por el método de citometría de flujo Datos examen inicial (sangre periférica) Células T

CD2 24.5 CD3 0.5 CD4 0.7 CD5 0.4 CD7 3.1 CD8 0.1 Plaquetas

CD36 13.9

Células B


CD10 0.2 CD19 0.1 CD20 0.0 CD38 71.0 HLA-DR 1.1


98.3 0.9 0.3 0.4 98.9 7.9

Observaciones


Los marcadores mieloides CD13 y CD33 fueron positivos, mientras que los marcadores CD14 y CD36, a los cuales se conoce como reacción de células monocíticas, fueron negativos. Esto sugiere leucemia mieloide.

CD41 0.3

Células NK

CD56

0.5


Tinción May-Giemsa

Tinción May-Giemsa

(x 1000) (x 1000) (x 1000) Tinción May-Giemsa

Tinción peroxidasa

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000) (x 1000) Observaciones

Se observan muchas células bilobuladas, otras exhiben clivaje o núcleos hendidos. El citoplasma presentó variaciones de color, que fueron de azul profundo a gris con algunas vacuolas y pequeña cantidad de gránulos azurófilos y fardos de cuerpos de Auer (células de Faggot). Se observó una reacción fuertemente positiva a la tinción de peroxidasa en la mayoría de las células. Todos estos datos indican variante forma-M3. En la mayoría de casos de esta variante el recuento periférico de leucocitos es bajo, pero en el presente caso es elevado.

35


Leucemia mieloide aguda (LMA)-M4(1) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 DIFF WBC 256.74 @ [109/L] L F RBC 3.47 [1012/L] S HGB 106 [g/L] HCT 31.2 [%] * Parámetros de investigación MCV 89.9 [fL] IG 38.46 [109/L] 15.0 [%] MCH 30.5 [pg] MCHC 340 [g/L] PLT & 48 * [109/L] RDW-SD 50.2 [fL] RDW-CV 15.4 [%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] SSC P-LCR ---- [%] x PCT ---- [%] DIFF L NEUT ---- [109/L] ---- [%] F S LYMPH ---- [109/L] ---- [%] MONO ---- [109/L] ---- [%] EO 0.69 * [109/L] 0.3 * [%] BASO ---- [109/L] ---- [%] NRBC 0.00 * [109/L] 0.0 * [/100WBC] RET 0.44 * [%] 15.3 * [109/L] IRF 47.8 * [%] LFR 52.2 * [%] MFR 21.1 * [%] SSC HFR 26.7 * [%] * Parámetros de investigación IG

5.07 [109/L] 20.2 [%]

WBC IP M essages



RET Abn Scattergram PLT Abn Distribution Thrombocytopenia


PLT IP Messages

PLT Clumps?


IMI F R

DC

10 IMI F R

DC

Diferencial manual Banda 0.5 [%] Segmentados 0.0 [%] Linfocitos 3.5 [%] Monocitos 20.0 [%] Eosinófilos 0.5 [%] Basófilos 0.0 [%] Promielocitos 4.0 [%] Mielocitos 15.5 [%] Metamielocitos 3.5 [%] Blastos 52.5 [%]

Observaciones

Presentación de un caso de LMA-M4. Aparecen muchos puntos rojos en el dispersograma IMI, lo que sugiere la presencia de granulocitos precursores. En el dispersograma DIFF, la fusión de puntos en el área de linfocitos y monocitos y su extensión dentro del área de alta fluorescencia (indicado por ), sugiere la presencia de blastos (52.5% de la preparación). Los datos de los parámetros de investigación del XE-2100 indican 15% de blastos, nivel ligeramente diferente del diferencial manual (promielocitos: 4.0% + mielocitos: 15.5% + metamielocitos: 3.5% = 23%). Sin embargo, el recuento original de leucocitos rebasó el límite de linearidad, se repitió el análisis en una dilución de 1 a 10 (indicado por la flecha ) dando como resultado un recuento de granulocitos inmaduros (IG) del 20%, el cual fue más cercano al conseguido por el método visual. La proporción de IMI obtenida de los datos de la pantalla de servicio fue de 73.6% (indicado por ), lo que se acerca al 75.5% obtenido por el método visual. 36


CD2 2.8 CD7 4.6

Células B

CD19 9.0 HLA-DR 76.2


CD13 CD14 CD15 CD33 CD34

73.0 41.6 59.9 99.2 3.4


CD11b CD 41

49.8 14.7

Células NK

CD56

25.7

Observaciones

Los marcadores CD11b, CD13, CD14, CD15, CD33 y HLA-DR fueron positivos, mientras que CD14 estuvo cercano al 40%. Esto sugiere hiperplasia de las dos líneas celulares: mielocítica y monocítica.

Información obtenida del análisis del frotis (1) Tinción peroxidasa

Tinción May-Giemsa


(x 1000)

(x 1000) Observaciones

Se aprecia un incremento de células mieloides inmaduras (en el rango de promielocitos y metamielocitos) y también de monocitos (incluyendo promonocitos). La tinción de peroxidasa va desde positiva o débilmente positiva a negativa.

37

Información obtenida del análisis del frotis (2) Prueba de inhibición de Naf

Tinción esterasa

(x 400)

(x 1000)

Observaciones

En la tinción de esterasa se encontraron células positivas para butirato y células positivas para naftol-AS-D-cloroacetato.

38

-naftil

α

α α α

α

α

α

α

α

α α

α

µ

8 21

Por: Ken-ichi Anami, MT, gerente del laboratorio clínico del Hospital Nacional Miyakonojo, J apón.

39


Leucemia mieloideaguda (LMA)-M4(2) Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & 4.08 * [109/L] DIFF L 12 F RBC 2.55 [10 /L] S HGB 78 - [g/L] HCT 23.8 - [%] MCV 93.3 [fL] * Parámetros de investigación Otros 0.06 [109/L] 1.5 [%] MCH 30.6 [pg] MCHC 328 [g/L] PLT & 25 * [109/L] RDW-SD 48.0 [fL] RDW-CV 15.7 [%] PDW ---- [fL] MPV ---- [fL] P-LCR ---- [%] IMI PCT ---- [%] F R NEUT 1.00 * [109/L] 24.6 * [%] LYMPH & 1.22 * [109/L] 29.9 * [%] MONO 1.82 * [109/L] 44.6 * [%] EO 0.01 * [109/L] 0.2 * [%] BASO 0.03 * [109/L] 0.7 * [%] NRBC 0.05 * [109/L] 1.2 * [/100WBC] RET 1.31 [%] 33.4 [109/L] IRF 12.5 [%] LFR 87.5 [%] MFR 10.9 [%] HFR 1.6 [%]

WBC IP M essages


Monocytosis

Anemia


PLT IP Messages



WBC/BASO C S F

SSC

SSC

NRBC C S F

DC

SFL

Diferencial manual Banda 14.0 [%] Segmentados 17.5 [%] Linfocitos 24.0 [%] Monocitos 33.0 [%] Eosinófilos 0.0 [%] Basófilos 0.0 [%] Linfocitos atípicos 1.0 [%] Blastos 10.0 [%] M ielocitos 0.5 [%] Hematíes nucleados 1/100 leucocitos

Observaciones

Los monocitos se extienden verticalmente en el área del dispersograma DIFF (indicado por ), lo que sugiere la presencia de blastos (10% de la preparación de sangre periférica). La lectura de “Otros” (“Other”), los cuales proveen información acerca de células con alto contenido de ácido nucleico, fue 1.5% (indicado por ). Esta área corresponde a los linfocitos atípicos. El recuento obtenido por el método visual concuerda con el de linfocitos atípicos del 1%. La nube de neutrófilos está anormalmente localizada, contigua al área de células fantasmas (indicado por ). Esto sugiere que los neutrófilos son hipogranulares y bajos en contenido de ácido nucleico. 40

Información obtenida por el método de citometría de flujo Datos examen inicial (médula ósea) Células T

CD2 1.0 CD3 1.0 CD4 0.0 CD5 2.0 CD7 1.0 CD8 0.0

Células B

CD10 29.0 CD19 0.0 CD20 2.0 HLA-DR 63.0


CD13 CD14 CD33 CD34

43.0 43.0 96.0 5.0


CD41 8.0

Observaciones

Los resultados iniciales de los marcadores. CD13, CD14, CD33 y HLA-DR fueron positivos, lo que indica la presencia de blastos de línea mieloide y monocítica.

Células NK

CD56 1.0

Información obtenida del análisis del frotis Tinción May-Giemsa (sangre periférica)

Tinción esterasa (médula ósea)

(x 1000) Tinción peroxidasa (sangre periférica)

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones

Este caso fue diagnosticado como LMA-M4 a partir del análisis de la médula ósea. En sangre periférica se observó incremento de células inmaduras de las líneas mieloide y monocítica. La mayoría de los monocitos mostraron una reacción negativa a la peroxidasa. Las células mieloides mostraron reacción positiva con las tinciones de esterasa, α-naftol butirato o naftol-AS-D-cloroacetato.

41


Leucemiamieloideaguda(LMA)-M5b Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC 66.90 * RBC 3.09 HGB 113 HCT 33.6 MCV 108.7 MCH 36.6 MCHC 336 PLT 60 * RDW-SD 50.7 RDW-CV 12.9 PDW 11.0 * MPV 11.3 * P-LCR 31.4 * PCT 0.07 * NEUT ---LYMPH ---M ONO ---EO 0.11 * BASO 0.20 * NRBC 0.00 * RET 1.15 IRF 14.6 LFR 85.4 MFR 12.3 HFR 2.3

[109/L] [1012/L] [g/L] [%] [fL] [pg] [g/L] [109/L] [fL] [%] [fL] [fL] [%] [%] [109/L] ---- [%] [109/L] ---- [%] [109/L] ---- [%] [109/L] 0.2 * [%] [109/L] 0.3 * [%] [109/L] 0.0 * [/100WBC] [%] 35.5 [109/L] [%] [%] [%] [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

SSC

IMI

NRBC

F R

C S F

DC

SFL


WBC Abn Scattergram Leukocytosis Blasts? Immature Gran? Left Shift?


PLT IP M essages

PLT Clumps?

Banda 1.5 [%] Segmentados 1.5 [%] Linfocitos 12.5 [%] Monocitos 24.5 [%] Eosinófilos 0.5 [%] Basófilos 0.0 [%] Promielocitos 0.5 [%] Blastos 59.0 [%] Hematíes nucleados 0.5/100 leucocitos

Observaciones

Este caso fue diagnosticado como LM A-M 5b. Aparecen muchos puntos rojos en el dispersograma IMI, lo que sugiere la presencia de células mieloides inmaduras. La fusión de linfocitos y monocitos en el área del dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la localización de los blastos encontrados en el frotis de sangre periférica (59%).

42


Células B

CD2 28.9 CD10 10.6 CD3 0.6 CD19 1.2 CD4 84.5 CD20 0.2 CD5 0.6 HLA-DR 87.9 CD7 1.5 CD8 0.4


CD13 CD14 CD15 CD33 CD34

63.5 31.3 82.9 99.6 64.7

Células NK

CD56

1.5


CD11b

82.4

Observaciones

El marcador CD14 fue positivo, lo que indica la presencia de células monocíticas. El alto índice de positividad para CD4 sugiere hiperplasia de blastos, en su mayoría monocitos.

Otros

CD25 CD95

1.5 58.8

Información obtenida del análisis del frotis (1) Tinción peroxidasa

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones

Se observó en el frotis un gran número de blastos hendidos con una relación núcleo/citoplasma (N/C) elevada y con citoplasma basófilo. Los monocitos, incluyendo los promonocitos, están elevados. La tinción de peroxidasa varió de débilmente positiva a negativa, mientras que se hallaron células positivas para α-naftol butirato esterasa inhibidas por el NaF (ver página siguiente).

43

Información obtenida del análisis del frotis (2) Prueba de inhibición de Naf

Tinción esterasa

(x 1000)

(x 1000) Tinción PAS

(x 1000)

44

´ ICA ´LULAS DEAPARIENCIA ESPECIF CASOS DE CE Caso de cuerpos de Howell-J olly

46

Caso de linfocitos segmentados

48

Caso de células linfoides anormales

50

Caso de granulocitos inmaduros

52

Caso de esquizocitos

54

Neutrófilos sin granulación

56

45


CasodecuerposdeHowell-Jolly Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & 4.26 * [109/L] RBC 2.57 [1012/L] HGB 67 - [g/L] HCT 22.9 - [%] M CV 89.1 [fL] MCH 26.1 [pg] MCHC 293 - [g/L] PLT 435 * [109/L] RDW-SD 68.9 + [fL] RDW-CV 22.3 + [%] PDW 12.9 * [fL] MPV 11.5 * [fL] P-LCR 36.9 * [%] PCT 0.50 * [%] NEUT 2.25 * [109/L] 52.8 * LYMPH & 0.92 * [109/L] 21.6 * MONO 0.89 * [109/L] 20.9 * EO 0.13 * [109/L] 3.1 * BASO 0.07 * [109/L] 1.6 * NRBC 1.15 * [109/L] 27.0 * RET 1.52 [%] 39.1 IRF 22.1 [%] LFR 77.9 [%] M FR 16.6 [%] HFR 5.5 [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

SSC

IMI [%] [%] [%] [%] [%] [/100WBC] [109/L]

C S F

DC

SFL

Diferencial manual

WBC IP Messages


PLT IP Messages

NRBC Present

Anisocytosis Anemia

PLT Clumps?

Fragments?

NRBC

F R

Banda 2.0 [%] Segmentados 27.5 [%] Linfocitos 42.0 [%] Monocitos 23.0 [%] Eosinófilos 4.0 [%] Basófilos 1.0 [%] Mielocitos 0.5 [%] Hematíes nucleados 26/100 leucocitos

Observaciones

En el dispersograma NRBC aparecen muchos puntos azules entre el área normal de células fantasmas y el área de normoblastos (indicado por ), lo que sugiere la presencia de cuerpos de Howell-J olly. Estos puntos fueron incluidos en la fracción de células fantasmas sin tener influencia en los datos de hematíes nucleados. Los puntos rosados (indicado por ) representan hematíes nucleados, cuyo recuento concuerda muy cercanamente con el diferencial manual. En el dispersograma WBC/BASO, esos normoblastos aparecen en el eje de alta dispersión (indicado por ). Esto demuestra que el XE2100 provee información verdadera después de descontar los hematíes nucleados que aparecen en el área de leucocitos (indicado por “WBC &”).

46

Información obtenida del análisis del frotis TinciónMay-Giemsa (hematíes nucleados)

(x 1000)

TinciónMay-Giemsa (cuerpo Howell-J olly)

(x 1000)

TinciónMay-Giemsa (hematíes nucleados)

(x 1000)


(x 1000)

TinciónMay-Giemsa (hematíes nucleados)

(x 1000)


(x 1000)

Observaciones

Los cuerpos de Howell-J olly son normalmente de 2 µm o menores y se pueden diferenciar fácilmente de los hematíes nucleados. Sin embargo, este caso presenta gran cantidad de normoblastos con núcleos pequeños y eritrocitos con cuerpos de Howell-J olly de gran tamaño.

47


Casodelinfocitossegmentados Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

1.87 - [109/L] 2.16 - [1012/L] 91* [g/L] 24.6 - [%] 113.9+[fL] 42.1* [pg] 370* [g/L] 20 - [109/L] 54.3+[fL] 13.2 [%] 13.8 [fL] 12.6 [fL] 43.2+[%] 0.02 - [%] 0.07* [109/L] 3.8* [%] 1.62* [109/L] 86.6 * [%] 0.17* [109/L] 9.1* [%] 0.00 [109/L] 0.0 [%] 0.01 [109/L] 0.5 [%] 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] 0.29 [%] 6.3 [109/L] 0.0 [%] 100.0 [%] 0.0 [%] 0.0 [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

SSC

IMI

F R

C S F

NRBC

SFL

DC



Neutropenia Leukocytopenia

Macrocytosis Anemia

Abn Lympho/L_Blasts? Turbidity/HGB Interf?

PLT IP M essages

Thrombocytopenia

Banda 0.0 [%] Segmentados 0.0 [%] Linfocitos 43.0 [%] M onocitos 0.0 [%] Eosinófilos 0.0 [%] Basófilos 0.0 [%] Células anormales 57.0 [%] (células segmentadas +)

Observaciones

Este es un caso de LMA-M2 bajo tratamiento. Únicamente se hallaron linfocitos en el frotis de sangre periférica y la mayoría estaban segmentados. Se cree que estas células se detectaron en el área de linfocitos/monocitos del dispersograma DIFF (indicado por ). Debido al muy bajo recuento de leucocitos, aparece la alarma de “Abn Lympho/L_Blasts?”, lo que sugiere un problema con los linfocitos.

48


CD2 100.0 CD3 99.7 CD4 95.4 CD5 99.6 CD7 80.9 CD8 6.2

Células B

CD10 0.7 CD19 0.7 CD23 1.5 HLA-DR 86.1


CD13 CD33 CD34

3.4 4.1 1.9

Otros

CD25 66.8

Observaciones

Los marcadores CD2, CD3 y CD4 fueron positivos, lo que indica un incremento en la relación cooperador/supresor de las células T. Como el CD25 y el HLA-DR también fueron positivos, se consideró que estas células estaban activadas.


Tinción May-Giemsa

Observaciones

(x 1000)

(x 1000)

Este caso es una M2 en tratamiento. Se encontró un bajo recuento de leucocitos. La mayoría de las células eran linfocitos. Cerca del 50% de ellos fueron pequeños linfocitos anormales segmentados.

49


Casode células linfoides anormales Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC 10.93 [109/L] RBC 3.26 [1012/L] HGB 103 [g/L] HCT 31.6 [%] MCV 96.9 [fL] MCH 31.6 [pg] MCHC 326 [g/L] PLT 161 [109/L] RDW-SD 47.3 [fL] RDW-CV 13.7 [%] PDW 10.4 [fL] MPV 9.8 [fL] P-LCR 22.9 [%] PCT 0.16 - [%] NEUT 5.03* [109/L] 45.9 * [%] LYMPH 5.31* [109/L] 48.6 * [%] MONO 0.50* [109/L] 4.6 * [%] EO 0.05 [109/L] 0.5 [%] BASO 0.04 [109/L] 0.4 [%] NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] RET 1.60 [%] 52.2 [109/L] IRF 13.0 [%] LFR 87.0 [%] MFR 11.4 [%] HFR 1.6 [%]

DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

SSC

IMI

NRBC

F R

C S F

SFL

DC


Lymphocytosis Abn Lympho/L_Blasts?


PLT IP Messages

Banda 4.5 [%] Segmentados 51.0 [%] Linfocitos 31.0 [%] Monocitos 5.5 [%] Eosinófilos 1.0 [%] Basófilos 0.0 [%] Células anormales 7.0 [%] (células segmentadas +)

Observaciones

El límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la presencia de células linfoides anormales. En el frotis se observaron células linfoides segmentadas anormales.

50


Observaciones

Se encontraron pequeñas células linfoides segmentadas anormales con alta relación núcleo/ citoplasma (N/C) en sangre periférica (7%).


(x 1000)

51


Casodegranulocitosinmaduros Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 DIFF WBC 8.69 [109/L] L F RBC 4.05 [1012/L] S HGB 128 [g/L] HCT 38.4 [%] * Parámetros de investigación MCV 94.8 [fL] IG 1.66 [109/L] 19.1 [%] MCH 31.6 [pg] MCHC 333 [g/L] PLT 105 [109/L] RDW-SD 47.9 [fL] RDW-CV 14.0 [%] PDW 11.2 [fL] MPV 10.1 [fL] P-LCR 26.5 [%] IMI F PCT 0.11 - [%] R NEUT &5.25* [109/L] 60.4 * [%] LYMPH 0.91 - [109/L] 10.5 - [%] MONO 0.63 [109/L] 7.2 [%] EO 0.13 * [109/L] 1.5 * [%] BASO 0.11 * [109/L] 1.3 * [%] NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] RET 2.14 [%] 86.7 [109/L] IRF 24.0 [%] LFR 76.0 [%] MFR 20.5 [%] HFR 3.5 [%] WBC IP Messages


PLT IP Messages

Immature Gran? Left Shift?


WBC/BASO C S F

SSC

SSC

NRBC C S F

SFL

DC

Diferencial manual Banda 17.0 [%] Segmentados 38.5[%] Linfocitos 6.0 [%] Monocitos 10.0[%] Eosinófilos 2.0[%] Basófilos 0.5 [%] Mielocitos 17.0 [%] Metamielocitos 8.5[%] Linfocitos atípicos 0.5 [%]

Observaciones

En el dispersograma DIFF, un grupo de puntos se extiende desde el área de neutrófilos hacia el área de fluorescencia alta (indicado por ), lo que sugiere la presencia de granulocitos inmaduros. El XE-2100 ofrece un parámetro de investigación, el IG o granulocitos inmaduros, que reportó un valor de 19.1%, el cual corresponde cercanamente al 17% de mielocitos obtenidos por el diferencial manual. La presencia de granulocitos inmaduros también fue sugerida por la gran cantidad de puntos rojos en el dispersograma IMI (indicado por ). Además, la determinación del porcentaje de células mieloides inmaduras desde el menú de datos de servicio fue del 28.0%, lo que corresponde a la suma de los mielocitos (17%) + metamielocitos (8.5%) = 25.5%, obtenido en el frotis.

52


Observaciones

Se aprecia un gran número de células mieloides en sangre periférica (incluyendo mielocitos inmaduros y metamielocitos).

(x 1000)

53


Casodeesquizocitos Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC RBC HGB HCT M CV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR

5.82 [109/L] 4.44 [1012/L] 86 [g/L] 31.3 [%] 70.5 - [fL] 19.4 - [pg] 275 - [g/L] 342 [109/L] (PLT-I : 379) 49.7 [fL] 19.3+[%] 11.9 * [fL] 9.7 * [fL] 23.5 * [%] 0.37 * [%] 3.88 [109/L] 66.7 [%] 1.51 [109/L] 25.9 [%] 0.33 [109/L] 5.7 [%] 0.08 [109/L] 1.4 [%] 0.02 [109/L] 0.3 [%] 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] 0.93 [%] 41.3 [109/L] 14.9 [%] 85.1 [%] 13.5 [%] 1.4 [%]

WBC IP M essages

RET

PLT-O

C S F

RBC

C S F

SFL

SFL

PLT

Diferencial manual (Método Fonio) PLT


PLT IP Messages

Hypochromia Anemia

PLT Abn Distribution

344 [109/L]

Iron Deficiency? Fragments?

Observaciones

El frotis de sangre periférica muestra muchos esquizocitos. Sin embargo, aun cuando en el dispersograma RET los esquizocitos se extienden desde el área de hematíes hacia las plaquetas (indicado por ), en el dispersograma PLT-O se observa una clara distinción entre las dos poblaciones (indicado por ). Ello indica que no hubo influencia de los esquizocitos en el recuento óptico de plaquetas. La alarma “PLT Abn Distribution” se generó debido a que los esquizocitos están presentes en el umbral de 30 fL en el histograma PLT (indicado por ), por lo que los datos del dispersograma PLT-O fueron usados para el recuento. Este resultado concuerda con los resultados obtenidos en el diferencial manual (344 vs. 342 x 109/L).

54


Observaciones

Se observó un gran número de esquizocitos, tal como lo indican las flechas.

(x 400)

55


Neutrófilossingranulación Información del XE-2100 Información medida por el XE-2100 WBC & 8.17 [109/L] RBC 2.85 [1012/L] HGB 102 [g/L] HCT 29.7 [%] MCV 104.2 [fL] MCH 35.8 [pg] MCHC 343 [g/L] PLT 200 [109/L] RDW-SD 49.1 [fL] RDW-CV 12.9 [%] PDW 10.2 [fL] MPV 10.3 [fL] P-LCR 24.8 [%] PCT 0.21 [%] NEUT ---- [109/L] ---- [%] LYMPH ---- [109/L] ---- [%] MONO 0.09 [109/L] 1.1 [%] EO 0.00 [109/L] 0.0 [%] BASO 0.01 [109/L] 0.1 [%] NRBC 0.04 [109/L] 0.5 [/100WBC] RET 1.39 [%] 39.6 [109/L] IRF 13.4 [%] LFR 86.6 [%] MFR 12.1 [%] HFR 1.3 [%]

WBC IP Messages

WBC Abn Scattergram


DIFF

WBC/BASO

L F S

C S F

SSC

SSC

IMI

NRBC

F R

C S F

SFL

DC

Diferencial manual

PLT IP Messages

Banda 1.0 [%] Segmentados 57.5 [%] Linfocitos 19.0 [%] Monocitos 1.5 [%] Eosinófilos 1.5 [%] Basófilos 0.0 [%] Promielocitos 0.5 [%] Mielocitos 0.5 [%] Células sin clasificación 18.5 [%] (sospecha de basófilos)

Observaciones

Este paciente tiene SMD (AREB). En el dispersograma DIFF aparece sólo un pequeño número de puntos en el área normal de neutrófilos (indicado por ). Sin embargo, aparece un grupo grande entre el área de linfocitos y células fantasmas (indicado por ). Se considera que este grupo de puntos corresponde a los neutrófilos con ausencia o reducción en la granulación. El eje de las X del dispersograma DIFF corresponde a la intensidad de dispersión que indica el contenido celular.

56

Información obtenida del análisis del frotis (1) Tinción May-Giemsa (¿Basófilo?)

Tinción May-Giemsa

(x 1000) Tinción May-Giemsa (Eosinófilo)

(x 1000) (x 1000) Tinción peroxidasa

Tinción peroxidasa

¿Basófilo?

(x 1000)

(x 1000) Tinción peroxidasa (Eosinófilo)

Tinción peroxidasa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones

En el frotis se encontro un gran número de neutrófilos con reducción o ausencia de gránulos secundarios. La tinción de peroxidasa estuvo ausente en más del 90% de los neutrófilos maduros. Los gránulos de los eosinófilos fueron muy finos y en los basófilos no se pudieron distinguir. Además, en el 18.5% de las células fue difícil la diferenciación porque tienen núcleos semejantes a los basófilos, pero con ausencia de gránulos. 57

Información obtenida del análisis del frotis (2) Tinción fosfatasa alcalina

Tinción PAS

(x 1000) Tinción PAS

(x 1000) (x 1000) Tinción esterasa

Tinción esterasa

(x 1000)

(x 1000)

Observaciones

Los neutrófilos se clasificaron como clase III ó IV en la coloración de fosfatasa alcalina. Algunas células mostraron reacción PAS difusa. En tinción de esterasa, naftol-AS-D-cloroacetato fue negativa o débilmente positiva en la mayoría de los neutrófilos; sólo muy pocos mostraron reacción fuertemente positiva.

58

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