PROSEDUR PENGAMBILAN AIR KENCING, ANALISIS DAN PEREKODAN
PENGENALAN Makmal Dadah & Penyelidikan HKL ditubuhkan 1992 Makmal Rujukan bagi makmal makmal KKM > 120 buah makmal Menawarkan Ujian Dadah Berbahaya a) ATS – Seluruh Semenanjung M‘sia (kecuali P.Pinang) b) DOA (Morphine & THC)- Lembah Klang Sahaja c) Ketamin – Seluruh semenanjung M‘sia
Pengenalan Beban kerja : Anggaran > 100,000 setahun Waktu perkhidmatan a) Isnin- Jumaat : 8am-5pm (kecuali sabtu & ahad serta hari pelepasan pe lepasan umum) ● Turut menawarkan ujian penanda kanser dan protein khas & ujian Therapeutic Drug Monitoring (TDM) bagi kes kes ke s pemindahan transplant transplant organ
Peranan Makmal Dadah & Penyelidikan Hospital Kuala Lumpur
Makmal Rujukan bagi makmal –makmal dibawah KKM Makmal patologi bagi ujian yang di rujuk oleh pihak PDRM , ATM,AADK dan lain lain agensi Memberi khidmat nasihat teknikal kepada agensi seperti khidmat evaluasi test strip bagi kemasukan k emasukan tender Memberi latihan kepada kep ada pegawai-pegawai KKM,agensi –agensi jabatan kerajaan dan juga pelajar-pelajar universiti
DADAH & PENYALAHGUNAAN
Dadah adalah bahan yang apabila di serap kedalam badan akan mengubah fungsi normal badan. Dadah berbahaya di Malaysia adalah disenaraikan dalam Akta Dadah 1952.
dadah
yang
Penyalahgunaan dadah - pengambilan bahan dadah psikoaktif atau dadah perangsang bukan untuk tujuan perubatan. Contoh bahan yang disalahgunakan: alkohol, kumpulan dadah amphetamin, barbiturat, benzodiazepine, kanabis, ketamin and opiate. Penyalahgunaan bahan-bahan ini boleh memberi kesan buruk kepada fizikal dan psikologi. psikologi.
PENGAMBILAN DADAH & PENYERAPAN DALAM BADAN
Sedutan Melalui mulut
Paru-paru Jantung Hati Buah pinggang Perut
Suntikan
Usus
PENYERAPAN DADAH DALAM BADAN
METABOLISMA
Dadah yang diambil akan melalui proses metabolisma dalam badan Metabolisma menukarkan bentuk asal dadah yang diambil kepada bentuk yang lain dan menghasilkan metabolit Kadar metabolisma berbeza dari satu individu ke individu yang lain Kadar metabolisma juga berbeza mengikut dadah yang diambil dan cara pengambilan dadah tersebut Oleh itu masa persampelan adalah penting bagi mengesan penyalahgunaan dadah
METABOLISMA OPIATE
METABOLISMA KANABIS
METABOLISMA AMPHETAMINE
METABOLISMA MDMA
METABOLISMA METHAMPHETAMINE
METABOLISMA METHAMPHETAMINE
50% Methamphetamine akan dikeluarkan dari badan dalam masa masa 12 jam. 44% methamphetamine keluar dalam air kencing dalam bentuk asal, 6-20% sebagai amphetamine dan 10% sebagai 4-hydroxymethamphetamine. Boleh didapati dalam air kencing dalam masa 20 min selepas pengambilan Masa pengesanan: sehingga 48 jam (dalam bentuk asal)
METABOLISMA KETAMINE
Ketamine di metabolisma dalam sistem mikrosom hati (hepatic microsomal system). Pathway utama: N-demethylation
ketamine
norketamine (metabolit utama)
Norketamine Norketamine memberi kesan 20-30% kepada aktiviti ketamine; akan di tukar kepada dehydoxynorketamine, bergabung dengan glucuronate and dikeluarkan dalam air kencing. Norketamine, t1/2(elimination) = 6 jam, memberi memberi kesan analgesia.
FAKTOR YANG MEMBERI KESAN KEPADA TEMPOH DADAH DALAM BADAN Tempoh dadah dapat dikesan dalam air kencing bergantung kepada faktor-faktor faktor-faktor berikut :
Amaun and kekerapan pengambilan: Jika satu dos diambil, dadah dikesan pada kepekatan yang rendah yang hampir dengan nilai ‗cut ‗cut-off. -off. Pengambilan yang berulang / lama akan menghasilkan keputusan positif pada nilai yang lebih tinggi Kadar metabolisma: Dadah dapat dikesan lebih lama dalam individu yang mempunyai kasar metabolisma yang rendah Berat badan: Secara amnya, metabolisma seseorang individu akan lebih rendah apabila berat badan bertambah. Ini akan mengakibatkan dadah lebih lama dapat dikesan terutama bagi dadah PCP dan THC dimana dadah-dadah ini disimpan dalam tisu lemak.
FAKTOR YANG MEMBERI KESAN KEPADA TEMPOH DADAH DALAM BADAN
Umur: Secara amnya, metabolisma akan lebih rendah dengan peningkatan umur dan ini juga akan mengakibatkan dadah boleh dikesan lebih lama
Kesihatan badan: Secara amnya metabolisma seseorang individu akan menurun apabila kesihatan terganggu dan ini menyebabkan dadah dikesan dalam badan lebih lama Toleransi kepada dadah: Metabolisma dadah lebih cepat apabila seseorang individu toleran terhadap sesuatu dadah pH air kencing: pH air kencing memberi impak pada masa pengesanan. Biasanya air kencing yang asidik akan menyebabkan masa pengesanan yang lebih singkat
FAKTOR YANG MEMBERI KESAN PADA KEPUTUSAN UJIAN Fungsi Organ Dos
Perjalanan darah pengaliran air kencing, kencing, pH
Aktiviti Fizikal Fizikal Cara pengambilan
Result
Kadar / Kekerapan pengambilan Tolerens
Perbezaan genetik, metabolisma Pemakanan, diet Masa Persampelan
Interaksi dengan dadah lain
Kaedah analisa
Pencemaran air kencing
SPESIMEN UJIAN DADAH
Spesimen untuk ujian dadah : Air kencing Darah Rambut Air liur.
Air kencing adalah spesimen paling sesuai kerana kepekatan dadah adalah tinggi
Darah, rambut dan air liur jarang digunakan kerana kepekatan dadah dalam spesimen-spesimen ini rendah dan kos analisis adalah lebih tinggi
Walaubagaimanapun kebaikan penggunaan darah dan air liur sebagai spesimen adalah dadah dapat di kesan dalam masa beberapa minit selepas pengambilan manakala dadah dalam rambut dapat dikesan bertahun selepas pengambilan.
JANGKAMASA DADAH DAPAT JANGKAMASA DIKESAN SELEPAS PENGAMBILAN Dadah
Air kencing
Darah
Amphetamine
1 - 3 hari
12 jam
Methamphetamine
3 - 5 hari
1 – 3 hari
4 hari
25 jam
20 – 28 hari
-
3 – 4 hari
6 jam
Codeine
1 hari
12 jam
Morphine
2 hari
6 jam
Ketamine
2 - 4 hari
6 jam
MDMA THC Heroin
PROSEDUR PEMUNGUTAN SPESIMEN AIR KENCING Kawasan pemungutan spesimen:
Kawasan khas yang diasingkan dan terkawal Akses
pada individu individu tertentu sahaja
Tidak mempunyai bekalan air semasa pemungutan spesimen dilakukan
Tiada bekalan sabun dan lain-lain bahan yang boleh digunakan untuk mencemar spesimen
PROSEDUR PEMUNGUTAN SPESIMEN AIR KENCING Prosedur pemungutan spesimen
Pastikan identiti OKT Isi maklumat OKT dalam borang permohonan UPD -1 dalam 2 salinan. Pastikan borang lengkap, ditandatangani dan dicop dengan cop jabatan Minta OKT pilih bekas / botol spesimen dan labelkan (Nama OKT, No Pengenalan, Tarikh. Masa)
Iringi OKT dan pungut spesimen
Sekurang-kurangnya Sekurang-kurangnya 30 ml air kencing diperlukan
PROSEDUR PEMUNGUTAN SPESIMEN AIR KENCING
Sekiranya air kencing tidak mencukupi, minta OKT minum air kosong (240 ml ml setiap 30 minit tetapi tidak tidak melebihi melebihi 720 ml). Air kencing yang dipungut kali kedua dicampurkan dengan air kencing pertama Minta OKT tandatangan pada ‗ Akuan Pemberi‘ Pemberi‘ Lakukan ujian air kencing dihadapan OKT. Pastikan pegawai yang menjalankan ujian telah terlatih t erlatih Metri bekas spesimen sekiranya ujian saringan didapati positif
PROSEDUR PEMUNGUTAN SPESIMEN AIR KENCING
Masukkan spesimen dalam bekas yang sesuai (sebaik-baiknya dengan mengunakan beg berkunci yang diisi dengan pek ais)
Hantar spesimen ke makmal secepat mungkin
Sekiranya spesimen tidak boleh dihantar pada hari yang sama, simpan spesimen dalam peti sejuk. Bekukan spesimen jika spesimen perlu disimpan lebih dari 3 hari
Pastikan ‗chain of custody‘ dilaksanankan bagi setiap spesimen dengan merekodkan merekodkan tarikh, masa dan pegawai pegawai yang terlibat dalam proses pengendalian spesimen
KESTABILAN DADAH DALAM SPESIMEN BIOLOGIKAL Kestabilan dadah dalam spesimen biologikal bergantung kepada: jenis spesimen keadaan penyimpanan – suhu pendedahan kepada cahaya Jangkamasa spesimen di simpan
PROSEDUR PENGHANTARAN & PENERIMAAN SPESIMEN Pegawai penghantar mestilah pegawai yang telah dikenalpasti Pastikan spesimen selamat semasa penghantaran Pastikan nama pegawai penghantar direkodkan dalam rekod ‗chain of custody‘ Pastikan maklumat penerima direkod semasa penyerahan
PENOLAKAN SPESIMEN
Spesimen yang tidak sesuai akan ditolak oleh makmal
Kriteria penolakan:
Kesilapan pada nama, no. pengenalan atau lain-lain maklumat pada label dan /atau borang;
Bekas tidak di metri atau metri rosak/pecah;
Terdapat lebih dari satu label pada bekas;
Bekas tidak berlabel;
PENOLAKAN SPESIMEN
Tiada spesimen dalam bekas atau spesimen bocor,
Borang tidak ditandatangani oleh pemohon;
Borang permohonan tidak dicop
Isipada spesimen tidak mencukupi;
Terdapat kesan ‗tampering‘ Maklumat spesimen yang tidak sesuai direkod dan surat / laporan akan dikeluarkan oleh makmal
PROSEDUR ANALISIS UJIAN DADAH Pemungutan Conthh
Penerimaan contoh
Ujian saringan
Keputusan ujian saringan Negatif
Positif
Laporan
Ujian pengesahan pengesahan
Laporan Penghapusan contoh
UJIAN PENGESANAN DADAH Ujian dadah dilakukan dalam 2 peringkat— peringkat— i)
ii)
Ujian Saringan direkabentuk sebagai ujian yang sensitif untuk mengesan penggunaan dadah. Ujian saringan kurang spesifik dan tidak dapat membezakan dadah-dadah dalam kumpulan sama Ujian biasanya lebih mudah dilakukan dari ujian pengesahan Ujian Pengesahan Direkabentuk untuk lebih spesifik iaitu dapat membezakan dadah tertentu dan metabolitnya Ujian dilakukan apabila ujian saringan adalah positif
NILAI CUTOFF
Digunakan untuk membezakan contoh positif atau negatif Berbeza mengikut dadah yang dikesan dan kaedah yang digunakan Contoh cutoff yang yang digunakan oleh KKM Saringan
Pengesahan
Opiates : 300 ng/ml
Morphine : 200 ng/ml
THC : 50 ng/ml
Cannabis : 25 ng/ml
ATS : 1000 ng/ml
ATS : 500 ng/ml
Ketamine : 1000 ng/ml
Ketamine : 350 ng/ml
UJIAN SARINGAN
Ujian saringan diguna untuk mengasingkan spesimen "negative‖. Spesimen negative adalah specimen yang tidak mengandungi dadah atau kepekatan dadah adalah lebih rendah dari kepekatan ―cutoff‖ Spesimen yang didapati positif dengan ujian saringan hendaklah diuji semula dengan ujian pengesahan
UJIAN SARINGAN
Ujian Pantas (Rapid test) -
Kaedah Dry Chemistry Kaedah Dry Dalam bentuk Urine strip/cassette Sesuai di gunakan sebagai field sebagai field test kit (Point of care) Ujian kualitatif Prisip ujian berdasarkan tindakbalas antibody dan antigen.
UJIAN RAPID TEST / TEST STRIP
Rapid test adalah ujian berprinsipkan ‗lateral flow immunoassay‘. immunoassay‘. Reagen immunoassay bahagian test strip.
terdapat
pada
beberapa
Apabila test strip dicelup kedalam air kencing, spesimen akan bergerak naik dan akan bertindak dengan reagen yang terdapat pada test strip Garisan bewarna merah pada bahagian ujian akan memberi keputuan negatif dan yang tidak membentuk warna akan dilaoporkan sebagai positif.
PROSEDUR UJIAN SARINGAN Ujian Pantas (Rapid test)
Celup test strip dalam air kencing hingga keparas ujian dan tunggu hingga iar kencing naik 1/3 test strip Letak test strip pada permukaan mendatar dan biarkan selama 5 min (ikut prosedur ujian seperti dalam lampiran/arahan yang disertakan oleh pembekal)
Baca keputusan mengikut warna yang terbentuk pada garisan
PROSEDUR MENJALANKAN UJIAN
BEKAS SPESIMEN YANG DIGUNAKAN
BEKAS SPESIMEN YANG DIGUNAKAN
Bekas yang paling sesuai adalah bekas yang tidak mudah pecah dan mempunyai ciri-ciri keselamatan seperti nombor siri / tape keselamatan
BACAAN KEPUTUSAN
KEPUTUSAN RAPID TEST
NEGATIF
NEGATIF
POSITIF
KEBAIKAAN & KELEMAHAN UJIAN RAPID TEST Kebaikan Tidak memerlukan peralatan khas Pantas dan mudah dilaksanakan dilaksanakan Boleh digunakan sebagai ‗field test‘ Kelemahan Tidak dapat membezakan dadah-dadah dalam dalam kumpulan yang sama Mempunyai cross-reactivity dengan dadah-dadah lain Biasanya > 90% adalah tepat Hanya boleh digunakan sebagai ujian saringan.
UJIAN SARINGAN DI MAKMAL Ujian Immunoassay – Wet Chemistry (Ujian di makmal)
Menggunakan prinsip tindakbals antibody and antigen untuk memberi nilai kuantitatif Proses melibatkan penggunaan antibody untuk mengesan dadah dalam contoh Kepekatan dadah dalam contoh dibandingkan dengan kalibrator yang mempunyai kepekatan dadah yang diketahui. Contoh yang mempunyai kepekatan lebih tinggi dari kalibrator akan memberi keputusan positif
ANALISIS DALAM MAKMAL
Specificity & Cross-reactivity
Bahan yang boleh memberi kesan positif dengan ujian Methamphetamine dengan dengan nilai cutoff 1000 ng/ml Kompaun Amphetamine MDMA
Kepekatan 1286 ng/ml 20538 ng/ml
MDA
3537 ng/ml
Ephedrine
2242 ug/ml
Phentermine
21 ug/ml
UJIAN SARINGAN Sensitivity & Specificity CONTOH
Sensitivity dan specificity bergantung kepada reagen yang digunakan.
Amphetamine/Methamphetamine Assay memberi Keputusan positif dengan bahan-bahan berikut: berikut: d-Amphetamine <400ng/ml d,l-Amphetamine 1000ng/ml d-Methamphetamine 1000 ng/ml MDA 1000 ng/ml MDMA 3000 ng/ml
Amphetamine Assay: Assay : Amphetamine 300ng/ml d-Methamphetamine 1000ng/ml d,I-Epherdrine 1000ng/ml tidak dapat mengesan MDA and MDMA
UJIAN SARINGAN Bahan-bahan yang boleh menggangu men ggangu keputusan CONTOH
Bahan atau keadaan yang boleh menyebabkan false positives dengan ujian Marijuana
Ibuprofen; (Advil, Nuprin, Motrin, Excedrin IB etc) Naproxen (Aleve) Ketoprofen (Orudis KT) Promethazine (Phenergan, Promethegan) Riboflavin (B2, Hempseed Oil) Kidney infection (Kidney disease, diabetes) Liver Disease Dronabinol (Marinol )
INTEPRETASI KEPUTUSAN UJIAN INTEPRETASI SARINGAN
Keputusan negatif – negatif – spesimen tidak mengandungi mengandungi dadah yang diuji atau kepekatan dadah adalah lebih rendah dari nilai cut-off Keputuan positif – spesimen mungkin mengandungi dadah yang diuji Hanya keputusan negatif boleh dilapurkan melalui ujian saringan. Contoh yang didapati positif melalui ujian saringan tidak boleh dilapurkan dan perlu diuji semula dengan ujian pengesahan
UJIAN PENGESAHAN
Semua contoh positif dalam ujian saringan mesti diuji semula dengan menggunakan ujian pengesahan Ujian pengesahan hendaklah mempunyai prinsip yang berbeza daripada ujian saringan Ujian pengesahan yang biasa berdasarkan prinsip kromatografi
digunakan
adalah
Ujian pengesahan dapat membezakan satu jenis dadah dari yang lain Contoh Ujian Chromatography - Thin layer chromatography (TLC), gas liquid chromatography (GLC), high performance liquid chromatography(HPLC), gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) dan liquid chromatography mass spectrometry (LCMS).
GAS CHROMATOGRAPHY MASS SPECTOMETRY (GCMS)
ANALYSIS ATS DENGAN DENGAN GCMS GCMS
GAS CHROMATOGRAPHY MASS SPECTROMETRY - CONTOH KEPUTUSAN
Kaedah yang sensitif dan spesifik
KEPUTUSAN GCMS
INTEPRETASI KEPUTUSAN Ujian Pengesahan
Keputusan positif bermaksud dadah terkandung dalam urin pada kepekatan atau lebih dari paras cutoff. Keputusan positif tidak dapat menentukan dos dadah yang diambil atau masa atau cara pengambilan dadah tersebut
INTEPRETASI KEPUTUSAN Ujian Pengesahan
Keputusan Negatif menunjukkan dadah tidak terdapat dalam contoh atau berada pada paras yang lebih rendah dari nilai cutoff pada masa ia diuji Ia tidak dapat menentukan individu pernah atau tidak pernah mengambil dadah
LAPORAN KEPUTUSAN
True Negative (Betul Negatif)– Negatif)– Keputusan yang dilaporkan sebagai NEGATIF apabila seseorang individu tidak mengambil dadah yang diuji. True Positive (Betul Positif) – Keputusan yang dilaporkan sebagai POSITIF apabila seseorang individu mengambil dadah yang diuji
LAPORAN KEPUTUSAN
False Negative (Salah Negatif) – keputusan yang dilaporkan sebagai NEGATIF apabila seseorang individu mengambil dadah yang diuji False Positive (Salah Positif) – keputusan yang dilaporkan sebagai POSITIVE apabila seseorang individu tidak mengambil dadah yang diuji.
INTEPRETASI KEPUTUSAN Contoh masalah dalam intepretasi keputusan
Morfin boleh datang dari pegambilan kas-kas atau ubat batuk yang mengandungi mengandungi kodein. Kepekatan ephedrine yang tinggi boleh menyebabkan spesimen positif untuk Methamphetamine.
PROSEDUR PENYERAHAN LAPORAN
Laporan diserah kepada pembawa sampel Laporan tidak akan diserah kepada donor air kencing
Laporan dimasukkan kedalam sampul surat dan dimetri Pegawai yang mengambil laporan menandatangani menandatangani pada borang ‗Chain of Custody‘ makmal
PROSEDUR PENGAMBILAN SEMULA SAMPEL
Permohonan untuk pengambilan sampel dilakukan secara bertulis
semula
Sampel akan di metri dan diletakkan dalam beg keselamatan Penerima sampel menandatang me nandatangani ani surat penyerahan sampel
