1015

MEDIO  D DE  C CULTIVO Bacteriologí a General _ Catálogo  1 1015 ___________________________________________________ AGAR DE HIERRO Y LISINA (LIA) USO Para diferenciar enterobacterias enterobacterias en base a su su capacidad de descarboxilar descarboxilar o desaminar la lisina lisina y la producción de ácido sulfhídrico, especialmente del Género Salmonella  (excepto Salmonella paratyphi A, que es lisina descarboxilasa negativa).  Edwarsiella, Klebsiella pneumoniae ,  Enterobacter aerogenes, Serratia marcescens , se observa la prueba positiva por arriba del 80%. Presentan  prueba Negativa los Géneros Shigella , Citrobacter , Enterobacter cloacae y el grupo Proteus – Providencia . PRINCIPIO La peptona de gelatina funciona como soporte de crecimiento, el extracto de levadura proporciona la fuente de vitaminas necesarias y la dextrosa es el carbohidrato fermentable. En este medio se observa la fermentación de glucosa, producción de ácido sulfhídrico, la descarboxilación y desaminación de la lisina. Los microorganismos que tienen la enzima descarboxilasa, descarboxilan el aminoácido lisina a cadaverina (amina primaria, liberando CO2), debido a la alcalinidad, el pH se modifica con los siguientes resultados: La prueba se considera POSITIVA si la coloración en el fondo se observa morada o violeta-púrpura. NEGATIVA si la coloración en el fondo es amarilla y la superficie  permanece del color del medio, ya que solo hay fermentación de glucosa. La desaminación de la lisina a ácido alfa cetocarbónico, forma compuestos pardo-rojizos en el pico de flauta del medio con la sal de hierro y por la acción del oxígeno. La formación de ácido sulfhídrico se observa por una coloración negra debida al sulfuro de hierro producido. Las colonias seleccionadas se inoculan estriando el agar inclinado (pico de flauta) y con doble picadura en el centro sin tocar el fondo del medio. Incubar 18 – 24 h a 35ºC. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA 13.5 L-Lisina

Agar Citrato férrico de amonio Dextrosa Extracto de levadura

0.5 1.0 3.0

Peptona de gelatina Púrpura de bromocresol Tiosulfato de sodio  pH 6.7 ± 0.2

10.0 5.0 0.02 0.04

PREPARACION Rehidratar 33 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el  punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Distribuir en tubos de ensayo de 13x1 00 mm, tapar con algodón o tapón de rosca flojo. Esterilizar en autoclave a 121ºC ( 15 lbs de presión) durante 15 minutos. Enfriar en posición inclinada para obtener un fondo de 1.5 a 2.0 cm . Conservar en refrigeración de 2 a 8ºC.

MICROORGANISMO

CONTROL DE ACTIVIDAD CEPA SUPERFICIE Alcalina-Púrpura Alcalina-Púrpura Alcalina-Púrpura Roja Alcalina-Púrpura

ATCC 8090 ATCC 10031 ATCC 14028 ATCC 8427 ATCC 13880

Citrobacter freundii Klebsiella pneumoniae Salmonella typhimurium Proteus vulgaris Serratia marcescens

RESULTADO FONDO Acido-Amarillo Acido-Amarillo Alcalino-Púrpura Acido-Amarillo Alcalino-Púrpura

H 2S + + - (+) -

BIBLIOGRAFIA Edwards and Ewing. Identification of Enterobacteriaceae. Burgess Publishing Co. Minneapolis, Minn. 1962Nac Faddin., Media for isolation-cultivation-identification-maintenance isolation-cultivation-identifica tion-maintenance of medical bacteria, vol. 1 . William & Wilkins, Baltimore. 198 5

PRESENTACION  No. Cat.

1015 1015-E 1015-A

Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g Deshidratado 450 g

No. Cat.

1015-B 1015-TC 1015-TCP

Deshidratado 100 g Preparado tubo 13x100 mm individual Preparado paquete con 10 tubos

DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F.

3