Artículo de revisión
TECNICAS INMUNOLOGICAS Y LA INMUNOCROMATOGRAFIA IMMUNOLOGICAL TECHNIQUES AND IMMUNOCHROMATOGRAPHY
Interno de Tecnología Médica Herrera Espinoza Gustavo Adib 1 1
Hospital Regional Docente Clínico Quirúrgico “Daniel Alcides Carrión”. Junín, Perú.
RESUMEN
La reacción antígeno anticuerpo conocida también como inmunocomplejo o complejo inmune, es resultado del contacto entre un antígeno y un anticuerpo, que se caracteriza por ser rápido, específico y espontáneo. En esta reacción se distinguen dos etapas las cuales son, la interacción primaria no visualizable y la interacción secundaria que sigue después de la primaria, las técnicas inmunológicas que evidencian la interacción Antígeno - Anticuerpo a través de una reacción secundaria como la aglutinación, precipitación o floculación. Mediante estas técnicas inmunológicas se realiza la determinación de enfermedades relacionadas con el agua causada por bacterias y protozoarios patógenos, infección por el virus de la inmunodeficiencia humana, y el uso de pruebas rápidas basadas en el principio de la inmunocromatografia para la detección de leptospirosis humana. PALABRAS CLAVE: Antígeno, anticuerpo, técnicas inmunológicas,
inmunocromatografia.
SUMMARY
The antibody antigen reaction known also as immune complex or immune complex is the result of the contact between an antigen and an antibody, which is characterized by being fast, specific and spontaneous. In this reaction we distinguish two stages which are the non - displayable primary interaction and the secondary interaction that follows after the primary immunological techniques that evidence the antigen - antibody interaction through a secondary reaction such as agglutination, precipitation or flocculation. Immunological techniques are used to determine diseases related to water caused by bacteria and protozoan pathogens, human immunodeficiency virus infection, and the use of rapid tests based on the principle of immunochromatography for the detection of human leptospirosis.
KEYWORDS: Antigen, immunochromatography.
antibody,
immunological
techniques,
INTRODUCCION
Las técnicas inmunológicas basadas en reacciones de aglutinación, precipitación o floculación son las que evidencian la interacción Antígeno – Anticuerpo a través de una reacción secundaria que es visualizable macroscópicamente 1. Las técnicas de aglutinación involucra una interacción Antígeno – Anticuerpo que lleva a la aparición de un aglutinado, esta técnica consiste en hacer reaccionar cantidades equivalentes de Antígeno – Anticuerpo, en esta técnica el antígeno es particulado pero también se pueden emplear antígenos solubles gracias a que se puede emplear distintas partículas inertes como por ejemplo partículas de látex las cuales se usan en técnicas como la PCR , FR Y ASO, y realizar un pegado químico o fisicoquímico del antígeno soluble a dichas partículas para generar un antígeno particulado útil para fines de identificación.
FIGURA N° 01: reacción de aglutinación por la interacción Antígeno – Anticuerpo.
Por otro lado están las técnicas de precipitación que se basan en mezclar cantidades suficientes de un antígeno soluble con anticuerpos específicos, la interacción antígeno - anticuerpo puede dar lugar a una red capaz de ser visualizada como un precipitado, esta estará constituida por grandes complejos inmunes formados por la interacción Antígeno – Anticuerpo, pero para que pueda visualizarse la precipitación tiene que haber cantidades iguales entre antígenos y anticuerpos 1. La técnica de aglutinación ha sido utilizada en la identificación rápida de bacterias y protozoos en agua se han desarrollado con éxito métodos por aglutinación de látex para Salmonella spp., Vibrio cholerae y E. coli 1. Según los estudios sobre la identificación rápida de bacterias y protozoos en agua se pudo llevar a cabo la
técnica de precipitación pero se dio a conocer el principio de esta técnica como una pequeña introducción a lo que son técnicas de aglutinación 1.
FIGURA N° 02: zona de exceso de Anticuerpos, zona de equivalencia y zona de exceso de Antígenos.
También está la técnica inmunocromatografica que es una de las técnicas de inmunodiagnóstico más modernas cuyas principales ventajas son la simplicidad y rapidez de la prueba se presenta en un formato de tira, en el cual la muestra problema fluye a lo largo de un sustrato sólido por medio de una acción capilar. Esta técnica tiene como principio la visualización dela reacción antígeno anticuerpo por la acumulación del conjugado anti – IgM humana con oro coloidal en zonas específicas del papel de nitrocelulosa donde se encuentran absorbidos en una línea el antígeno especifico y sobre otra línea las sustancias controles como son la polo-L-lisina o el anticuerpo complementario al que forma parte del conjugado, en muestras negativas se visualizara solo una línea correspondiente a la retención del conjugado sobre la zona de control y en muestras positivas se visualizaran dos líneas paralelas, las pruebas inmunocromatograficas son una variante muy útil ya que ofrecen resultados entre 15 a 20 minutos. Esta técnica ha sido utilizada para el diagnóstico rápido de leptospirosis humana y hiv 3, 2. FIGURA N° 03: Funcionamiento de una prueba inmunocromatografica.
VENTAJAS Y DESVENTEJAS DE LAS TECNICAS INMUNOLOGICA Y LA INMUNOCROMATOGRAFIA
Las ventajas de las reacciones de aglutinación y precipitación desde el punto de vista de su utilidad en el laboratorio es que son muy sencillas de realizar, no requieren de ningún equipamiento para su lectura, son rápidas y fáciles de implementar. Por otro lado las técnicas de aglutinación presentan mayor sensibilidad que las técnicas por precipitación por lo que las han sustituido en muchos casos, pero sin embargo cabe mencionar que las reacciones de aglutinación y precipitación presentan una menor sensibilidad que las técnicas basadas en la interacción primaria tales como ELISA e Inmunofluorescencia 1,2. Ventajas de la técnica inmunoicromatografica. La metodología para su uso es fácil y se realiza en pocos pasos asimismo la interpretación para su lectura es clara, los resultados se pueden visualizar al cabo de 15 a 20 minutos según la marca que se esté usando, las desventajas de esta técnica se debe a la poca exactitud y especialmente a la baja sensibilidad ya que esta técnica son a veces insatisfactorias, no son pruebas cuantitativas por ese motivo no son pruebas confirmatorias por lo que se tiene que emplear otras pruebas más específicas para la confirmación de un diagnostico 3.
CUADRO N° 01: Cuadro descriptivo de técnicas inmunológicas, su principio,
ventajas y desventajas. CONTROL DE CALIDAD DE LAS PRUEBAS PRECIPITACION E INMUNOCROMATOGRAFICAS TECNICA INMUNOLOGICA PRECIPITACION
PRINCIPIO
Interacción Ag – Ac que lleva a la aparición de un aglutinado. Se usan antígenos solubles
Interacción Ag – Ac que lleva a la aparición de un aglutinado. Se usan Ag particulados.
INMUNOCROMATO GRAFIA
Se basa en la migración de una muestra a través de una membrana de nitrocelulosa.
AGLUTINACION,
VENTAJAS
AGLUTINACION
DE
Sencillas de realizar. No requieren de ningún equipamiento para su lectura Rápidas y fáciles de implementar Sencillas de realizar No requieren de ningún equipamiento para su lectura. Rápidas y fáciles de implementar. Presentan mayor sensibilidad que las técnicas por precipitación. Uso es fácil. Se realiza en pocos pasos. Resultados visualizables al cabo de 15 a 20 minutos
DESVENTAJAS
Presentan una menor sensibilidad que las técnicas basadas en la interacción primaria tales como ELISA e Inmunofluorescencia.
Exactitud y sensibilidad insatisfactorias. No son pruebas cuantitativas.
Para las pruebas basadas en reacción de aglutinación y precipitación se recomienda procesar juntamente con las muestras, sueros control de reactividad conocida para controlar la performance del ensayo. Cada Laboratorio debe diseñar su propio sistema de Control de Calidad Interno y establecer las medidas correctivas si se observan desvíos de calidad. En las pruebas inmunocromatograficas una línea en el control de la prueba del dispositivo sirve como un control interconstruído. Cada prueba válida debe mostrar la línea del control dentro del tiempo de lectura del resultado. La aparición de la línea de control indica que los reactivos de esa prueba están funcionando como está especificado.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. MSc. Hermes Fundora Hernández, MSc. Yamila Puig Peña, MSc. Sergio Chiroles Rubalcaba, MSc. Andrea María Rodríguez Bertheau, MSc. Juan Gallardo Díaz y MSc. Yoslaine Milián Samper. Métodos inmunológicos utilizados en la identificación rápida de bacterias y protozoarios en aguas. Revista Cubana de Higiene y Epidemiología. 2013; 51 (1):84-96. 2. MsC. José Antonio Lamotte Castillo. Infección por VIH/sida en el mundo actual. MEDISAN 2014; 18(7):117. 3. MSc. Yendrys Pérez Elias; MSc. Ana Margarita Obregón Fuentes; MSc. Isabel del Carmen Rodríguez Reyes y Dra. Martha Julia Alfonso González. Actualización en el diagnóstico de la leptospirosis humana. Revista Cubana de Medicina Militar. 2015; 44(4):416-427.
