Óxido - Reducción

Grupo: 4QM2

Sección 4

Gamboa Contreras Alain Pérez Navarro Gabriel

INSI!" P"#I$CNIC" NACI"NA# %SC!%#A NACI"NA# &% CI%NCIAS 'I"#(GICAS #aboratorio )e 'io*u+mica “REACCIONES DE ÓXIDO – REDUCCIÓN” 

Tu! 8 min

Ta-la 2 / Determinaci"n de actividad del cit!cr!m! !#idasa . 2 3 4 5 6 7

Nara Inc!l! Naran Naran Naran n
INTRODUCCIÓN

#as #as célu célula lass re*ui e*uier eren en ener ener,+ ,+a a para para llev llevar ar a cab cabo to) to)as sus sus -un -uncion ciones es vitales. esta ener,+a se obtiene a través )e la o/i)ación )e los alimentos me)iante reacciones )e ó/i)o re)ucción *ue imp implic lican la trans-e s-erenc encia )e electrones o protones )es)e un compuesto )ona)or 0acia un compuesto aceptor1 aceptor1 !n compuesto al )onar electrones se o/i)a1 Al aceptar electrones se re)uce1 #as reacciones )e ó/i)o  re)ucción en la célula son cataliza)as por enzimas *ue act3an como interme)iarios 0asta lle,ar al aceptor nal )e electrones. *ue es el o/+,eno1

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#as

Inc!l! Naran Inc!l! r! n 678 Sin )ecoloración 698 der! la 0D1 
9

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2 0ila Vi!;let ; 2 a3 ; clar! ;

0avan da

enzimas enzimas son molécu moléculas las )e natura naturaleza leza prot protei eicca. *ue cat cataliz alizan an una una ,ama ,ama amplia )e reacciones bioló,icas1 %stas moléculas aumentan cons consi) i)er erab able leme ment nte e la velo veloci ci)a )a) ) )e reacc reacción. ión. )ismin )isminu5e u5en)o n)o la ener, ener,+a +a )e activación 5 -acilitan)o la tran transs-or orma maci ción ón )e sustr sustrat ato o en uno uno o varios pro)uctos1 OBJETIVOS *Determinar la actividad de enzimas que artician en reacci!nes de "#id! reducci"n c!m! la des$idr!%enasa l&ctica' succ(nica ) cit!cr!m! !#idasa *+ani,estar la actividad enzim&tica ac!land! las reacci!nes a la

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reacci"n de reducci"n del azul de metilen! *Discutir la im!rtancia de l!s c!,act!res *O-servar el e,ect! de al%un!s in$i-id!res en la actividad enzim&tica' RESU0T>DOS ?1@

0D1 CIT

Ta-la . / Determinaci"n de actividad de la SD1 Tu. 2 3 4 5 ! 8 9 9 9 9 9 min 2 ; 9 9 9 9 min 5 2; 9 ; 9 ; min 7 2; ; ; 9 2; min .8 3; ; 2; 9 2; min .5 4; ; 2; 9 3; min 25 5; ; 2; 9 3; min 38 5; ; 2; 9 3; min Interpretación 678 Sin )ecoloración 698 Inicio )e )ecoloración 6;98 )ecoloración

SD1

DISCUSIÓN

Gamboa Contreras Alain Pérez Navarro Gabriel

%/perimentalmente. para )eterminar la activi)a) )e la )es0i)ro,enasa lctica. )es0i)ro,enasa succ+nica 5 citocromo o/i)asa se realizarón ;. < 5 = ensa5os respectivamente1 Ca)a tubo prepara)o es un sistema )i-erente1

0D1 #a lactato )es0i)ro,enasa cataliza la conversión )e lactato. utilizan)o nicotinami)a a)enina )inucleóti)o en -orma o/i)a)a como co-actor. para pro)ucir piruvato 5 NA& re)uci)o. pero la reacción es reversible1 &e esta manera se pro)uce lactato a partir )e piruvato utilizan)o NA& re)uci)o como co-actor1 %/perimentalmente se acopló la reacción con >CN1 #a >CN -unciona como )esacoplante )el e*uilibrio )e la reacción. 5a *ue reacciona )e manera irreversible con el piruvato pro)uci)o. permitien)o as+ *ue el NA&?2 se acumule 5 se pue)a poner )e maniesto la activi)a) enzimtica acoplan)o la reacción con la re)ucción )el azul )e metileno1 anto la enzima #&?. como el co-actor NA&9 se obtuvieron a partir )e m3sculo es*uelético1 %n el caso )e la #&? se obtuvieron 2 e/tractos: !no )e #&? 5 otro )e NA&9. )ebi)o a *ue este co-actor es )e unión transitoria1 Tu-! .A %l sistema contiene la enzima 6#&?8 5 el co-actor 6NA& 98. el sustrato 6lactato8. >CN. azul )e metileno 5 aceite ve,etal1 %l sistema est completo 5 la reacción est cataliza)a. este tubo tiene una )ecoloración m/ima 5 se toma como testi,o positivo1 Tu-! 2A %l sistema no contiene la coenzima. por lo *ue la reacción est con)iciona)a a la canti)a) )e NA& 9 *ue se encuentra en el e/tracto cru)o a)iciona)o1 %/iste )ecoloración pero es mu5 poca1

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Tu-! 3A %l sistema no contiene el sustrato. por lo *ue la reacción est con)iciona)a a la canti)a) )e lactato *ue se encuentra en el e/tracto cru)o a)iciona)o1 I,ualmente e/iste una leve )ecoloración1

 ubo 2: %l sistema no contiene S&?1 Al no contener enzima. la reacción no se lleva a cabo 6en el tiempo e/perimental8. no 0a5 )ecoloración 5 este tubo se consi)era el testi,o ne,ativo1

Tu-! 4A %l sistema no contiene la enzima. pero se a,re,ó e/tracto cru)o )e NA&91 %ste e/tracto se 0irvió por ; minutos. por lo *ue precipitaron to)as las prote+nas *ue po)+a contener. entre ellas la #&?1 Al no 0aber enzima no se lleva a cabo la reacción. no 0a5 )ecoloración 5 este tubo se consi)era el testi,o ne,ativo1

 ubo E: %l sistema no contiene al sustrato. por lo *ue la reacción est con)iciona)a a la canti)a) )e succinato en)ó,eno *ue se encuentra en el e/tracto cru)o a)iciona)o1 %/iste )ecoloración pero es mu5 poca1

Tu-! 5A %l sistema no contiene el )esplaza)or )e e*uilibrio )e la reacción1 Al no 0aber )esplaza)or. la reacción se va a llevar a cabo 5 se va a encontrar en e*uilibrio. e/istien)o as+ la misma canti)a) )e NA&9 5 NA&?21. %n este tubo 0a5 una )ecoloración )el ;@ 1

S&? #a )es0i)ro,enasa succ+nica cataliza la conversión )e succinato. utilizan)o Bavin a)enina )inucleóti)o en -orma o/i)a)a como co-actor. para pro)ucir -umarato 5 A& re)uci)o )e manera reversible1 %n el caso )e la S&? se obtuvo un solo e/tracto. )ebi)o a *ue el co-actor A&9 es un ,rupo prostético *ue est uni)o covalentemente al sitio activo )e la enzima1 %/perimentalmente. a través )e la pro)ucción )e A&?2 se puso )e maniesto la activi)a) enzimtica acoplan)o la reacción con la re)ucción )el azul )e metileno1  ubo D: %l sistema contiene a la enzima 6S&?8. el sustrato 6succinato8. azul )e metileno 5 aceite ve,etal1 %l sistema est completo. la reacción est cataliza)a 5 0a5 una re)ucción m/ima1 %ste se consi)era el testi,o positivo1

&el tubo 4 al tubo < se estu)ió el e-ecto )e un in0ibi)or competitivo. *ue es el malonato )e so)io1 !n in0ibi)or competitivo tiene una estructura *u+mica similar a la )el sustrato1 %n el tubo 4 se a)icionó el )oble )e in0ibi)or con respecto al sustrato. en el tubo ; se aFa)ió la misma canti)a). en el tubo  5 < se a)icionó la mita)1 %n el tubo < se observa una ma5or )ecoloración en un menor tiempo 5 esto va )isminu5en)o se,3n aumenta la canti)a) )e in0ibi)or. 5a *ue si se presenta un in0ibi)or. no se lleva a cabo la trans-ormación a -umarato 5 no se pro)uce A&?21 CI"CH"M" "I&ASA &entro )e la ca)ena )e transporte )e electrones. la citocromo o/i)asa cataliza la trans-erencia )e electrones 0asta el o/+,eno. *ue es el aceptor nal. con pro)ucción )e a,ua1 %/perimentalmente se utilizó para-enilen)iamina. *ue al )onar sus electrones a la citocromo o/i)asa 5 o/i)arse a para-enilen)imina pue)e polimerizar en un pi,mento ca-é o reaccionar con al-a na-tol 5 a través )e la citocromo o/i)asa -ormar el compuesto azul )e in)o-enol1 el sistema contiene Tu-! .A para-enilen)iamina 5 citocromo o/i)asa. *ue al o/i)arse -orma

Grupo: 4QM2 para-enilen)imina *ue en ausencia )e al-a na-tol polimeriza -orman)o un pi,mento ca-é oscuro1 #a polimerización est cataliza)a1 Tu-! 2A %l sistema solo contiene para-enilen)iamina 5 a,ua1 #a para-enilen)iamina se o/i)a -orman)o para-enilen)imina. *ue polimeriza -orman)o un color ca-é1 %n este caso la reacción es mu5 lenta )ebi)o a *ue no 0a5 enzima *ue catalize la reacción

%l sistema contiene Tu-! 3A para-enilen)iamina. citocromo o/i)asa 5 >CN. *ue es un in0ibi)or )e la citocromo o/i)asa1 %n este tubo i,ualmente se -orma el pi,mento ca-é. pero tenue1 #a reacción es lenta )ebi)o a la in0ibición1 Tu-! 4A %l sistema solo contiene a,ua 5 citocromo o/i)asa1 Al no e/istir un compuesto *ue )one electrones al compleJo. no se pro)uce la reacción1 %ste tubo se consi)era el testi,o ne,ativo1

%l sistema contiene Tu-! 5A para-enilen)iamina. citocromo o/i)asa 5 al-a na-tol1 #a para-enilen)iamina )ona sus electrones al citrocromo o/i)asa 5 -orma para-enilen)imina. *ue en presencia )e al-a na-tol se con)ensa pro)ucien)o azul )e in)o-enol1 %ste sistema est completo 5 la -ormación )el compuesto est cataliza)a1 Nota: Se utilizó N. N )imetil para-enilen)iamina. *ue en lu,ar )e -ormar un compleJo azul. -orma un compleJo violeta1 %l sistema contiene Tu-! 6A para-enilen)iamina 5 al-a na-tol1 %n este caso se -orma el compleJo. pero al no estar cataliza)o por el citocromo o/i)asa se pro)uce )e manera lenta 5 el compleJo -orma)o es )e color lila1

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%l sistema contiene Tu-! 7A para-enilen)iamina. citocromo o/i)asa. >CN 5 al-a na-tol1 %n este caso 0a5 una in0ibición )el citocromo o/i)asa1 Se -orma el compleJo violeta. pero la reacción ocurre )e manera lenta por la in0ibición enzimtica1 %l sistema contiene Tu-! :A para-enilen)iamina. al-a na-tol 5 >CN1 %n este caso no 0a5 citocromo o/i)asa. por lo *ue el >CN no eJerce un e-ecto )e in0ibición1 #a para-enilen)iamina se o/i)a -orman)o para-enilen)imina *ue con)ensa con el al-a na-tol1 #a reacción no est cataliza)a. ocurre )e manera lenta 5 el compleJo -orma)o es )e un color lavan)a1 CONC0USIÓN •

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#os co-actores poseen un papel mu5 importante. 5a *ue al no estar presentes impi)en *ue se lleve a cabo la reacción enzimtica1 #a activi)a) )e las enzimas )e ó/i)o re)ucción se pue)e )eterminar a través )e uno )e los pro)uctos )e reacción1 #as reacciones enzimticas se pue)en acoplar a la reacción )e re)ucción )el azul )e metileno para mani-estar la activi)a)1 #a ausencia )e enzima en una reacción re)uce consi)erablemente la veloci)a) )e -ormación )e pro)uctos1 %l >CN en la reacción )e la )es0i)ro,enasa lctica act3a como )esplaza)or )el e*uilibrio )e reacción1 %l >CN en la reacción )el citocromo o/i)asa act3a como in0ibi)or no competitivo irreversible1 %l malonato )e so)io en la reacción )e la )es0i)ro,enasa

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succ+nica act3a como in0ibi)or competitivo1 !na reacción enzimtica )e ó/i)o re)ucción re*uiere sustrato. enzima 5 su co-actor1 REERENCI>S

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