NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 4572 2008-06-25
CARNE Y PRODUCTOS CÁRNICOS. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE NITRATOS (MÉTODO DE REFERENCIA)
E:
MEAT AND MEAT PRODUCTS. DETERMINATION OF NITRATE CONTENT (METHOD REFERENCE)
CORRESPONDENCIA:
esta norma es una adopción idéntica por traducción (IDT) de la norma ISO 3091:1975.
DESCRIPTORES:
carne; productos cárnicos; determinación de nitrato; ensayo; método de referencia.
I.C.S.: 67.120.10 Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC) Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. (571) 6078888 - Fax (571) 2221435
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Primera actualización Editada 2008-07-07
PRÓLOGO
El Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación, ICONTEC, ICONTEC, es el organismo nacional de normalización, normalización, según el Decreto 2269 de 1993. ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica está garantizada por los Comités Técnicos y el período de Consulta Pública, este último caracterizado por la participación del público en general. La NTC 4572 (Primera actualización) fue ratificada por el Consejo Directivo el 2008-06-25. Esta norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades necesidades y exigencias actuales. A continuación se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a través de su participación en el Comité Técnico 44 Productos cárnicos. ALIMENTOS LA CALI CALI S.A. ASOCIACIÓN COLOMBIANA DE PORCICULTORES - FONDO NACIONAL DE LA PORCICULTURA BGC ALIMENTOS ESPECIALES BIOCONTROL LTDA. CARULLA VIVERO S.A. CONEJOS COLOMBIA FRIGORÍFICOS GUADALUPE S.A. INDUSTRIAS DE ALIMENTOS ZENÚ S.A. IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA.
LABORATORIO ASBIOQUIM LTDA. NULAB LTDA. POZO ANTIGUO LTDA. PURIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE FLUIDOS LTDA. SALSAMENTARÍA SALSAMENTARÍA VILASECA LTDA. SUIZO S.A. TECNIAGRO S.A. UNIVERSIDAD DE LOS ANDES UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
Además de las anteriores, en Consulta Pública el Proyecto se puso a consideración de las siguientes empresas: ALICO S.A. ALIMENTOS FRIKO FRIKO S.A. ALMACANES ÉXITO S.A. ASINAL LTDA. ASOCIACIÓN COLOMBIANA DE MICROBIOLOGÍA ASOCIACIÓN NACIONAL DE EMPRESAS CÁRNICAS ASOCIACI ASOCIACIÓN ÓN NACIONAL NACIONAL DE INDUST INDUSTRIAL RIALES ES -ANDI AVESCO S.A. AVIDESA MC POLLO POLLO S.A.
BGC ALIMENTOS ESPECIALES BIANÁLISIS BIOQUILAB LTDA. BIOTRENDS LABORATORIO LTDA. CARNES LOS SAUCES LTDA. COMESTIBLES DAN S.A. CONGELADOS AGRÍCOLAS S.A. CHR HANSEN DALBERT INTERNACIONAL COLOMBIA DISPROALQUÍMICOS DISPROALQUÍMICOS S.A. ECOLAB COLOMBIA S.A.
FABRICA DE ESPECIAS Y PRODUCTOS EL REY S.A. FEDERACIÓN NACIONAL DE AVICULTORES -FENAVIFEDERACIÓN NACIONAL DE COMERCIANTES -FENALCOFEDERACIÓN NACIONAL DE GANADEROS -FEDEGANFRIGORÍFICO LA PARISIENNE FRIGORÍFICO SAN MARTÍN LTDA. FRIGORÍFICOS COLOMBIANOS S.A. FUNDACIÓN INTAL FUNDACIÓN UNIVERSIDAD DE LA SABANA FUNDACIÓN UNIVERSIDAD JORGE TADEO LOZANO FUNDACIÓN UNIVERSITARIA AGRARIA DE COLOMBIA GIVAUDAN COLOMBIA S.A. GRIFFITH COLOMBIA S.A. IMS CONSULTING LTDA. INDUNARDI INDUNARDI S.A. INDUSTRIAS ALIMENTICIAS MOSELA LTDA. INDUSTRIAS ALIMENTICIAS SALSAMENTARÍA SAN JUAN INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO -ICAINTERNATIONAL LIFE SCIENCES INSTITUTE ILSI NOR ANDINO INVIMA INST. NACIONAL DE VIGILANCIA DE MEDICAMENTOS Y ALIMENTOS
IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA. JHONSON DIVERSEY COLOMBIA LTDA. KOYOMAD PRODUCTOS CÁRNICOS S.A. LABORATORIO BIOCONTROL LTDA. LUCTA GRANCOLOMBIANA LTDA. MINISTERIO DE LA PROTECCIÓN SOCIAL OLÍMPICA S.A. POLLO ANDINO LTDA. POLLO FIESTA LTDA. POLLO SAVICOL LTDA POLLOS VENCEDOR PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA PROCAMPEÓN PRODUCTOS CÁRNICOS WALKER PROMOTORAS UNIDAS LTDA. PROVEEDORES S.A. PURIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE FLUIDOS LTDA. QUIOS LTDA. SALSAMENTARÍA EL BOHEMIO LTDA. SALSAMENTARÍA INDUCOLCARNES LTDA. SCARCOL SCARCOL E.C. SECRETARÍA DISTRITAL SALUD DE BOGOTÁ SECRETARIA TÉCNICA CONSEJO NACIONAL DE LA CADENA CÁRNICA SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE -SENATECNAS S.A.
ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados normas internacionales, internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados. relacionados. DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 4572 (Primera actualización)
CONTENIDO Página 1.
OBJETO ........................................ ................... .......................................... ......................................... ......................................... ........................................... ......................11
2.
REFERENCIA NORMATIVA ...................................... ................... ....................................... ........................................ .................................. ..............11
3.
DEFINICIÓN ......................................... ..................... ......................................... .......................................... .......................................... ................................... ..............11
4.
PRINCIPIO.........................................................................................................................1
5.
REACTIVOS......................................................................................................................1
5.1
BARRAS DE ZINC ........................................ ................... ......................................... ........................................ ........................................ ............................ ........22
5.2
SOLUCIONES PARA LA PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS ..................................... .................. .....................2 ..2
5.3
SOLUCIÓN DE SULFATO DE CADMIO, 30 g/L.................... g/L ........................................ ....................................... .....................2 ..2
5.4
SOLUCIÓN DE ÁCIDO CLORHÍDRICO, APROXIMADAMENTE 0,1 N ................ ........................ ........22
5.5
SOLUCIÓN REGULADORA DE AMONÍACO, pH 9,6 a 9,7 9,7................... ....................................... ........................2 ....2
5.6
SOLUCIONES NORMALIZADAS DE NITRITO DE SODIO ...................................... ................... ........................2 .....2
5.7
SOLUCIONES NECESARIAS PARA EL DESARROLLO DEL COLOR ................. ....................... ......33
5.8
SOLUCIÓN NORMALIZADA DE NITRATO DE POTASIO ....................................... .................... .......................3 ....3
6.
EQUIPOS...........................................................................................................................3
7.
MUESTRA ......................................... ..................... ......................................... .......................................... .......................................... ...................................... .................44
8.
PROCEDIMIENTO ......................................... ..................... ........................................ ........................................ ........................................ ........................... .......44
8.1
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA PARA ENSAYO................... ENSAYO ...................................... .................................. ...............44
8.2
PREPARACIÓN DE LA COLUMNA DE CADMIO ....................................... .................. ........................................ ...................44
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 4572 (Primera actualización)
Página 8.3
MUESTRA PARA ENSAYO ....................................... .................... ....................................... ........................................ .................................. ..............66
8.4
DESPROTEINIZACIÓN ....................................... .................... ....................................... ........................................ ....................................... .....................6 ..6
8.5
PRETRATAMIENTO DE LA COLUMNA DE CADMIO ...................................... .................. ................................. .............66
8.6
VERIFICACIÓN DE LA CAPACIDAD REDUCTORA DE LA COLUMNA DE CADMIO ......................................... .................... ......................................... ......................................... .......................................... .................................... ...............66
8.7
REDUCCIÓN DE NITRATO A NITRITO .......................................... ..................... .......................................... ................................ ...........77
8.8
MEDICIÓN DEL COLOR ........................................ .................... ....................................... ....................................... ....................................... ...................77
8.9
NÚMERO DE DETERMINACIONES ........................................ .................... ......................................... ........................................ ...................77
8.10
CURVA DE CALIBRACIÓN CALIBRACIÓN .................. .......................... ................. .................. ................. ................. .................. ................. ................. ...............7 ......7
9.
EXPRESIÓN DE RESULTADOS ....................................... ................... ........................................ ....................................... .........................8 ......8
9.1
MÉTODO DE CÁLCULO Y FÓRMULA ........................................ .................... ......................................... ................................... ..............88
9.2
REPETIBILIDAD ...................................... .................. ........................................ ......................................... ......................................... ................................ ............88
10.
INFORME DEL ENSAYO......................................... ENSAYO..................... ........................................ ....................................... ..................................... ..................88
DOCUMENTO DE REFERENCIA ....................................... ................... ......................................... ......................................... .................................... ................99 FIGURA Figura 1. Aparato para la reducción del nitrato ................. ......................... ................. ................. ................. .................. ................. ...........5 ...5
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 4572 (Primera actualización)
CARNE Y PRODUCTOS CÁRNICOS. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE NITRATOS (MÉTODO DE REFERENCIA)
1.
OBJETO
La presente norma especifica un método de referencia para la determinación del contenido de nitrato en la carne y los productos cárnicos. 2.
REFERENCIA NORMATIVA
El siguiente documento normativo referenciado es indispensable para la aplicación de este documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica únicamente la edición citada. Para referencias no fechadas, se aplica la última edición del documento normativo referenciado (incluida cualquier corrección). ISO 3100-1:1991, 3100-1:1991, Meat and Meat Products. Sampling and Preparation of Test Sample. Part 1: Sampling.
3.
DEFINICIÓN
Contenido de nitrato en la carne y los productos cárnicos: el contenido de nitrato determinado de acuerdo con el procedimiento descrito en la presente norma; se expresa en miligramos de nitrato de sodio por kilogramo (partes por millón). 4.
PRINCIPIO
Se reducen los nitratos extractados a nitritos usando cadmio metálico. En presencia de nitrito, se desarrolla un color rojo por la adición de sulfanilamida y de dihidrocloruro de N -1naftiletilendiamina al filtrado. Se hace una medición fotométrica a una longitud de onda de 538 nm. 5.
REACTIVOS
Todos los reactivos deben ser de calidad analítica. El agua usada debe ser agua destilada desgasificada o al menos, agua desgasificada de pureza equivalente.
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NORMA TÉCNICA COLOMBIANA 5.1
NTC 4572 (Primera actualización)
BARRAS DE ZINC
De una longitud aproximada de 15 cm y un diámetro de 5 mm a 7 mm. 5.2
SOLUCIONES PARA LA PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS
5.2.1 Reactivo l Se disuelven 106 g de ferrocianuro potásico trihidratado [K 4Fe (CN)6 • 3H2O] en agua y se diluyen hasta 1 000 ml. 5.2.2 Reactivo ll Se disuelven 220 g de acetato de cinc dihidratado [Zn (CH 3 COO)2 • 2H2O] y 30 ml de ácido acético glacial en agua y se diluye hasta 1 000 ml. 5.2.3 Solución saturada de bórax Se disuelven 50 g de tetraborato sódico decahidratado (Na 2B4O7 •10H2O) en 1 000 ml de agua tibia y se enfría a temperatura ambiente. 5.3
SOLUCIÓN DE SULFATO DE CADMIO, 30 g/L
Se disuelven 37 g de sulfato de cadmio (3 CdSO 4. 8 H2 O) en agua y se diluyen hasta 1 000 ml. 5.4
SOLUCIÓN DE ÁCIDO CLORHÍDRICO, APROXIMADAMENTE 0,1 N
Se diluyen 8 ml de solución de ácido clorhídrico concentrado ( ρ20 1,19 g/ml) en 1 000 ml con agua. 5.5
SOLUCIÓN REGULADORA DE AMONÍACO, pH 9,6 a 9,7
Se diluyen 20 ml de ácido clorhídrico concentrado ( ρ20 1,19 g/ml) con 500 ml de agua. Después del mezclado, se adicionan 10 g de la sal disódica del ácido etilendiamino tetraacético dihidratado y 55 ml de amoníaco concentrado ( ρ20 0,88 g/ml). Se diluyen a 1 000 ml con agua y se mezclan. Se verifica el pH. 5.6
SOLUCIONES NORMALIZADAS DE NITRITO DE SODIO
Se disuelven 1,000 g de solución de nitrito de sodio (NaNO 2 ) en agua y se diluyen hasta 100 ml en un recipiente volumétrico. Se toman 5 ml de la solución con una pipeta y se vierten en un recipiente volumétrico de 1 000 ml. Se diluye con agua hasta la marca. Se prepara una serie de soluciones normalizadas tomando con una pipeta 5 ml, 10 ml y 20 ml de esta solución y vertiendo estas cantidades en matraces volumétricos de 100 ml y diluyendo hasta completar el volumen con agua. Estas soluciones normalizadas contienen respectivamente respectivamente 2,5 µg, 5,0 µg y 10,0 µg de nitrato de sodio por mililitro. Las soluciones normalizadas y la solución de nitrito de sodio diluida (0,05 g/L) de la cual se prepararon se deben elaborar el día en que se usen.
2
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA 5.7
NTC 4572 (Primera actualización)
SOLUCIONES NECESARIAS PARA EL DESARROLLO DEL COLOR
5.7.1 Solución l Mediante calentamiento en un baño de agua se disuelven 2 g de sulfanilamida (NH2C6H4SO2NH2) en 800 ml de agua. Se enfría, se filtra y si es necesario, se adicionan adicionan 100 ml de solución de ácido clorhídrico concentrado ( ρ20 1,19 g/ml), mientras se agita. Se diluye hasta 1 000 ml con agua. 5.7.2 Solución ll Se disuelven 0,25 g de dihidrocloruro de N-1-naftiletilendiamina (C 10 H7NHCH2CH2NH2• 2HCL) en agua. Se diluye hasta 250 ml con agua. La solución se almacena en una botella ámbar bien tapada. Se debe mantener en el refrigerador, por un tiempo máximo de 1 semana. 5.7.3 Solución lll Se diluyen 445 ml de solución de ácido clorhídrico concentrado ( ρ20 1,19 g/ml) hasta 1 000 ml con agua. 5.8
SOLUCIÓN NORMALIZADA DE NITRATO DE POTASIO
Se disuelven 1,465 g de nitrato de potasio (KNO 3 ) en agua y se diluyen hasta la marca en un recipiente volumétrico de 100 ml. Se toman con una pipeta 5 ml de la solución anterior, se vierten en un recipiente volumétrico de 1 000 ml y se diluyen con agua hasta la marca. La solución resultante contiene 73,25 μg/ml de nitrato de potasio. La solución normalizada debe prepararse el mismo día en que se use. 6.
EQUIPOS
El equipo usual de laboratorio y los siguientes elementos: 6.1
Picador de carne mecánico
De tamaño para laboratorio, equipado con una placa perforada con agujeros de máximo 4 mm de diámetro. 6.2
Balanza analítica
6.3
Matraces volumétricos aforados
De 100 ml, 200 ml y 1 000 ml, que cumplan lo establecido en la norma ISO 1042, Clase B. 6.4
Pipetas aforadas
De 10 ml, y 20 ml y si es necesario, con otra capacidad, de acuerdo con la alícuota de filtrado (véase el numeral 8.8.1), que cumplan lo establecido en la norma ISO 648, Clase A. 6.5
Baño de agua hirviendo 3
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA 6.6
NTC 4572 (Primera actualización)
Papel de filtro plegado
Diámetro aproximado aproximado de 15 cm, libre de nitrato y de nitrito. 6.7
Material de vidrio para la reducción de nitrato
Véase la Figura 1. 6.8
Colorímetro fotoeléctrico o espectrofotómetro
Con celdas de 1 cm de longitud de trayectoria óptica. 6.9
Matraz cónico
De 300 ml. 7.
MUESTRA
7.1 Se obtiene de una muestra representativa de 200 g como mínimo. Véase la norma ISO 3100-1. 7.2 Se prepara la muestra de ensayo (véase el numeral 8.1) inmediatamente o, si esto no se puede hacer, se almacena la muestra a una temperatura de 0 °C a 5 °C durante 4 d máximo. 8.
PROCEDIMIENTO
8.1
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA PARA ENSAYO
Se homogeneiza la muestra pasándola al menos dos veces a través de un picador de carne (véase el numeral 6.1) y luego mezclando. Se mantiene bajo refrigeración en un recipiente completamente completamente lleno, hermético y cerrado. La muestra de ensayo se analiza lo más pronto posible, pero siempre dentro de un lapso de 24 h. NOTA
8.2
En el caso de productos crudos, se analizan inmediatamente después de la homogeneización.
PREPARACIÓN DE LA COLUMNA DE CADMIO
8.2.1 Se colocan de 3 a 5 barras de zinc (véase el numeral 5.1) en la solución de sulfato de cadmio (véase el numeral 5.3) contenida en un vaso de precipitado (1 L de solución de sulfato de cadmio es suficiente para preparar una columna de cadmio). 8.2.2 Se remueve el depósito de cadmio metálico esponjoso de las barras de zinc cada 1 h ó 2 h dándole vueltas en la solución. 8.2.3 Finalmente, después de 6 h a 8 h, se decanta la solución y se lava el depósito dos veces con 1 L de agua, teniendo cuidado de que el cadmio esté continuamente cubierto con una capa de líquido. 8.2.4 Se transfiere el depósito de cadmio con 400 ml de solución de ácido clorhídrico (véase el numeral 5.4) a un mezclador de laboratorio y se mezcla durante 10 s. Se retorna el contenido del mezclador al vaso de precipitado. 4
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 4572 (Primera actualización)
8.2.5 Ocasionalmente, Ocasionalmente, se mezcla el depósito de cadmio con una varilla de vidrio. Después de que permanece una noche sumergido en la solución de ácido clorhídrico, se agita una vez más para remover todas las burbujas de gas desde el cadmio. 8.2.6 Se decanta la solución y se lava el lodo de cadmio, cada vez con un litro de agua. 8.2.7 Se tapona con una lana de vidrio la parte superior de la columna que contiene el cadmio (véase la Figura 1). Depósito (capacidad de 40ml a 50 ml)
Solución
Diámetro interior de 1 a 1,5
Tapón de caucho
Columna de cadmio Efluente Diámetro interior de 12 a 14
Diámetro exterior de 7 a 8
Diámetro interior de 0,4 a 0,6
Lana de vidrio Tubería de caucho
NOTA Se puede usar una una conexión conexión flexible flexible entre entre el fondo de la columna y el tubo capilar efluente, efluente, para para permitir permitir el ajuste de la altura del tubo capilar y de esta manera la velocidad del flujo. Figura 1. Aparato para la reducción del nitrato
5
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 4572 (Primera actualización)
8.2.8 Se lava el cadmio en la columna de vidrio con agua hasta que la altura del lecho de cadmio es de 17 cm aproximadamente. Se drena la columna ocasionalmente durante el llenado, teniendo cuidado de no permitir que el nivel de líquido esté por debajo de la parte superior del lecho de cadmio. Se elimina el contenido de gas (por ejemplo con una aguja de tejer). Se recomienda que el líquido fluya a una velocidad que no exceda de 3 ml/min. 8.3
MUESTRA PARA ENSAYO
Se pesan 10 g de la muestra para ensayo con aproximación a 0,001 g. 8.4
DESPROTEINIZACIÓN
8.4.1 Se transfiere la muestra para ensayo cuantitativamente a un matraz cónico (véase el numeral 6.9) y se adicionan sucesivamente 5 ml de solución de bórax saturada (véase el numeral 5.2.3) y 100 ml de agua a una temperatura mínima de 70 °C. 8.4.2 Se calienta el matraz y su contenido durante 15 min en un baño de agua hirviendo (véase el numeral 6.5) y se agita repetidamente. 8.4.3 Se deja enfriar el matraz y su contenido, a temperatura ambiente y se agregan sucesivamente 2 ml de reactivo l (véase el numeral 5.2.1) y 2 ml de reactivo ll (véase el numeral 5.2.2). Se mezcla muy bien después de cada adición. 8.4.4 Se transfiere el contenido a un matraz volumétrico aforado de 200 ml (véase el numeral 6.3). Se diluye con agua hasta completar el volumen y se mezcla. Se deja reposar el matraz durante 30 min a temperatura ambiente. ambiente. 8.4.5 Se decanta cuidadosamente el líquido sobrenadante sobrenadante y se filtra a través de papel de filtro plegado (véase el numeral 6.6) para obtener una solución clara. 8.5
PRETRATAMIENTO DE LA COLUMNA DE CADMIO
Se lava la columna de cadmio sucesivamente con 25 ml de solución de ácido clorhídrico (véase el numeral 5.4), 50 ml de agua y 25 ml de solución reguladora de amoníaco diluida en proporción 1 + 9 (véase el numeral 5.5). No se debe permitir que el nivel de líquido en el canal descienda por debajo de la parte superior del tubo interior capilar de la columna de cadmio. 8.6
VERIFICACIÓN DE LA CAPACIDAD REDUCTORA DE LA COLUMNA DE CADMIO
8.6.1 Se toman con una pipeta 20 ml de solución normalizada de nitrato de potasio (véase el numeral 5.8) y simultáneamente se adicionan 5 ml de solución reguladora de amoníaco (véase el numeral 5.5) en un depósito sobre la parte superior de la columna de cadmio. Se recolecta el efluente en un matraz volumétrico aforado de 100 ml (véase el numeral 6.3). 8.6.2 Cuando el depósito está casi vacío, se lavan las paredes con aproximadamente 15 ml de agua; se repite el mismo tratamiento con otra porción de 15 ml de agua. Después que esta porción ha recorrido la columna al mismo tiempo que se llena completamente el depósito con agua. 8.6.3 Después de que se han recolectado aproximadamente 100 ml del efluente, se remueven del recipiente por la parte inferior de la columna y se diluyen hasta la marca con agua. 6
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8.6.4 Se toman con una pipeta 10 ml del eluido en un matraz volumétrico aforado (véase el numeral 6.3) y se procede como se especificó en los numerales del 8.8.2 al 8.8.4. 8.6.5 Si la concentración de nitrito del eluido como se determinó de la curva de calibración (véase el numeral 8.10), es menor de 0,9 μg de nitrito de sodio por ml (por ejemplo, 90 % del valor teórico), la columna de cadmio se debe rechazar. 8.6.6 Se debe revisar la capacidad reductora del cadmio, cada 10 determinaciones, por lo menos. 8.7
REDUCCIÓN DE NITRATO A NITRITO
8.7.1 Se vierten en el depósito de la parte superior de la columna, 20 ml de filtrado (véase el numeral 8.4.5) y simultáneamente se adicionan 5 ml de solución reguladora de amoníaco (véase el numeral 5.5). Se recolecta el efluente de la columna en un matraz volumétrico aforado (véase el numeral 6.3). 8.7.2 Se procede como se especificó en los numerales 8.6.2 y 8.6.3. 8.8
MEDICIÓN DEL COLOR
8.8.1 Con una pipeta se transfiere una alícuota del filtrado (V ml), pero máximo 25 ml, a un matraz volumétrico aforado de 100 ml (véase el numeral 6.3) y se adiciona agua para obtener un volumen aproximado de 60 ml. 8.8.2 Se adicionan 10 ml de solución l (véase el numeral 5.7.1), seguidos por 6 ml de solución lll (véase el numeral 5.7.3), se mezcla y se deja la solución durante 5 min a temperatura ambiente, en la oscuridad. 8.8.3 Se adicionan 2 ml de la solución ll (véase el numeral 5.7.2), se mezcla y se deja la solución de 3 min a 10 min a temperatura ambiente en la oscuridad. Se diluye con agua hasta completar el volumen. 8.8.4 Se mide la absorbancia de la solución en una celda de 1 cm usando un colorímetro fotoeléctrico o espectrofotómetro (véase el numeral 6.8), a una longitud de onda de aproximadamente 538 nm. NOTA Si la absorbancia de la solución coloreada obtenida de la muestra para ensayo excede la obtenida obtenida para la solución normalizada con la concentración más alta, se repiten las operaciones descritas en el numeral 8.8, reduciendo la cantidad del eluído tomado con la pipeta en el numeral 8.8.1.
8.9
NÚMERO DE DETERMINACIONES
Se llevan a cabo dos determinaciones independientes, comenzando con diferentes porciones de ensayo tomadas de la misma muestra para ensayo. Se debe hacer una determinación en blanco. 8.10
CURVA DE CALIBRACIÓN
8.10.1 Con una pipeta se transfieren 10 ml de agua y 10 ml de cada una de las tres soluciones normalizadas de nitrito de sodio que contienen 2,5 µg, 5,0 µg y 10,0 µg de nitrato por mililitro respectivamente respectivamente (véase el numeral 5.6) a cuatro matraces aforados de 100 ml. 7
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 4572 (Primera actualización)
8.10.2 A cada matraz aforado se le adiciona agua hasta obtener un volumen de aproximadamente aproximadamente 60 ml y se procede como se describió en los numerales 8.8.2 a 8.8.4. 8.10.3 Se dibuja la curva de calibración por la representación gráfica de las absorbancias medidas contra las concentraciones, en microgramos por mililitro, de las soluciones normalizadas normalizadas de nitrito de sodio. 9.
EXPRESIÓN DE RESULTADOS
9.1
MÉTODO DE CÁLCULO Y FÓRMULA
Se calcula el contenido de nitrato de la muestra, expresado como miligramos de nitrato de potasio por kilogramo, usando la fórmula: KNO 3 = 1,465 ( c x 10 000 /(m x V) - NaNO 2 ) )
en donde m
=
es la masa, en g, de la porción de ensayo.
V
=
es el volumen, en ml, de la alícuota del eluído (véase el numeral 8.8.1);
c
=
es la concentración de nitrito de sodio, en μg/ml, leídos de la curva de calibración , que corresponde a la absorbancia de la solución preparada a partir de la muestra para ensayo (véase el numeral 8.8.4);
NaNO 2
=
es el contenido de nitrito de la muestra, expresado como mg de nitrito de sodio/kg y determinados de acuerdo con la norma ISO 2918.
Se toma como resultado el promedio aritmético de las dos determinaciones, con tal que el requerimiento de repetibilidad sea satisfecho (véase el numeral 9.2). Se expresa el resultado con aproximación a 1 mg/kg de producto más cercano. 9.2
REPETIBILIDAD
La diferencia entre los resultados de dos determinaciones llevadas a cabo simultáneamente o en sucesión rápida por el mismo analista no debe ser mayor de 10 % del promedio. 10.
INFORME DEL ENSAYO
El informe del ensayo debe indicar el método usado y el resultado obtenido; debe también mencionar todas las condiciones de operación no especificadas en la presente norma o consideradas como opcionales, así como cualquier circunstancia que pueda haber influido en el resultado. El informe del ensayo debe incluir los detalles necesarios para una completa identificación de la muestra.
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NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 4572 (Primera actualización)
DOCUMENTO DE REFERENCIA INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. Meat and Meat ProductsDetermination of Nitrate Content (Reference Method ). ). Genève: ISO, 1975. 5 p. (ISO 3091).
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