Mikroskop i preparati

Mikr Mikros osko kops pska ka vi vizu zual aliz izac acij ija a morfoloških i funkcionalnih struktura bakterijske ćelije

Obrada materijala Obrada materijala predstavlja skup različitih tehnika i postupaka koji imaju za cil izolaci u identifikaci u bakteri a i o potrebi ispitivanje osetljivosti izolovanih bakterija na hemioterapijska sredstva.

Obrada materijala Obrada materijala predstavlja skup različitih tehnika i postupaka koji imaju za cil izolaci u identifikaci u bakteri a i o potrebi ispitivanje osetljivosti izolovanih bakterija na hemioterapijska sredstva.

Mikroskop Optički delovi

Mehanički delovi

Okular Makrozavrtanj Mikrozavrtanj Objektivi

Telo mikros m ikroskopa kopa Stočić za pr prep epar arat at

Kondenzor

Zavrtanj za pomeranje kondenzora Izvor svetla

Mikroskop Ukupno uveličanje mikroskopa: proizvod uveličanja okulara i uveličanja objektiva

najmanje rastojanje između dve tačke na kome se one vide odvojeno (za svetlosne mikroskope 200 nm)

nerazdvojene

delimično razdvojene

razdvojene

Vrste preparata

1. Nativni preparat 2. Bojeni preparat

1. Direktni preparat (iz materijala) 2. Preparat iz kulture

Mikroskop Preporuke za mikroskopiranje: koristiti objektive 10× ili 40× za posmatranje bakteri a na nativnom re aratu koristiti imerzioni objektiv (100×) za posmatranje bakterija na bojenom preparatu postaviti preparat tako da razmaz bude okrenut na gore, ka sočivu objektiva

Nativni preparat Nativni preparat omogućava vizualizaciju:

1. Oblika bakterija 2. Veličine bakterija 3. Pokretljivosti bakterija

Osnovni oblici bakterija

Koke (loptast)

Bacili (štapićast)

Kokobacili

Spirohete (spiralan)

Vibrio

Veličina bakterija nekoliko mikrona ali:

Thiomargarita namibia 

Nativni preparat Vrste nativnog preparata:

1. Nativni preparat (u užem smislu) 2. Viseća kap 3. Tamno polje

Nativni preparat

Nativni preparat

Objektiv

Nativni preparat

Nativni preparat - viseća kap

Nativni preparat - viseća kap

Nativni preparat - tamno polje SVETLO POLJE

TAMNO POLJE

u svetlom polju se spirohete ne vide jer je poprečni presek ovih bakterija 0,1 µm (rezolucija svetlosnog mikroskopa je 0,2 µm) tamno polje omogućava posmatranje spiroheta

Nativni preparat - tamno polje

Bojeni preparat Bojeni preparat omogućava vizualizaciju: 1. Oblika bakterija 2. Veličine bakterija 3. Rasporeda bakterija 4. Pojedinih struktura bakterijske ćelije (kapsula, spore, granule...) ne i pokretljivost

Raspored (grupisanje) bakterija Koke

Diplokoke

Streptokoke

Tetrade Sarcine

Bacili

Kokobacil

Diplobacili

Streptobacili

Vibrio

Spirohete Stafilokoke

Bojeni preparat Podela bojenja u bakteriologiji: rosta bo en a složena bojenja: diferencijalna specijalna

Prosto bojenje metilenskim plavim

Diferencijalna bojenja

bojenje po Gram-u bojenje po Ziehl-Neelsen-u

Bojenje po Gram-u Omogućava razlikovanje: Gram-pozitivnih bakterija (plavo-ljubičasto obojene) Gram-negativnih bakterija (crveno obojene) razlika u bojenju je posledica razlika u građi ćelijskog zida

Ćelijski zid Gram pozitivnih bakterija

Ćelijski zid Gram negativnih bakterija

Bojenje po Gram-u Gram pozitivne bakterije Gencijana violet astvor o a Alkohol (etanol) Voda Karbol fuksin / safranin Voda

Gram negativne bakterije

Bojenje po Gram-u

Specijalna bojenja Bojenje intracitoplazmatskih granula (po Neisser-u) Bojenje spora (po Hauser-u) Bojenje kapsule (po Olt-u)

Bojenje intracitoplazmatskih granula

Bojenje kapsule