METODOS PARA LA DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS. INTRODUCCIÓN. Qué son los carboh!ra"os# Al$unos %&%'(los ) al$unos 'é"o!os. Mé"o!os S% !%no'nan carboh!ra"os a a*u%llos *u% r%s(on!%n a la +,r'ula %'(-rca CnH/O0n. En"r% los 'uchos %l%'%n"os !% nu%s"ra al'%n"ac,n los carboh!ra"os conoc!os "a'bén co'o h!ra"os !% carbono# sac1r!os o $l2c!os0 son una !% las sus"ancas (rnc(al%s r%*u%r!as (or nu%s"ro or$ans'o !%b!o a su al"o a(or"% %n%r$é"co# és"os s% %ncu%n"ran %n a32car%s# al'!on%s ) +bra. En "o!os los s%r%s 44os s% %ncu%n"ran (r%s%n"%s los carboh!ra"os %n %l 'a"%ral $%né"co a causa !% la !%so5rrbosa ) la rbosa (r%s%n"%s %n él. Mé"o!os Qu-'cos -Método de Ácido Fenol Sulfúrico: se basa en los productos de reacción y degradación del ácido y del azúcar, en donde el azúcar se torna fundamentalmente idro!imetilfurfural "#MF$ o furfural "F$, leyendo una absorbancia a %&'nm generando colores amarillos y anaran(ados) -Método de Ácido Sulfúrico: sus fundamentos son los mismos del método de Ácido Fenol Sulfúrico, se diferencia en *ue los colores *ue se obser+an son azules y +erdes leyendo una absorbancia de 'nm) ./stos métodos si bien son fáciles, rápidos, no inter0eren con las prote1nas y los resultados son con0ables y reproducibles, si los carboidratos no proporcionan #MF o F en la descomposición ácida, la muestra arro(ará una amplia gama de colores) M23454S 6787 97 5/3/8M;7<=; 5/ 7>?<78/S 8/5@<348/S: Método Volumétrico o Propuesta de Lane-Eynon (1923) /ste método se basa en la determinación determinación del +olumen de una disolución de la muestra, *ue se re*uiere para reducir completamente un +olumen conocido del reacti+o alcalino de cobre) /l punto 0nal se determina por el uso de un indicador interno, azul de metileno, el cual es reducido a blanco de metileno por un e!ceso de azúcar reductor)
/ste método se puede aplicar en productos como lece e+aporada y condensada, productos lácteos, (arabes, mieles, mermeladas, néctares y (ugos, dulces y moles) -8eactantes, procedimiento) Método Fehlin-!o"hlet
/ste es el método *u1mico más aconse(able para utilizar) /l fundamento de éste es *ue precipita el ó!ido cuproso "
calentamiento y la concentración de azúcares en la muestra, además, los azúcares di0eren en su abilidad para reducir la solución cúprica, por tanto, la titulación "o peso o absorbancia$ deben ser con+ertidos en "miligramos de cobre$ y posteriormente se debe recurrir a tablas para determinar la concentración de azúcar presente en la muestra)
Método #a$imétrico o La Propuesta de Munson-%al&er /ste método corresponde a la cantidad de cobre reducido en presencia de azúcares reductores, en donde el peso de los miligramos de
?<78 8/5@<348 <@ A A 7>?<78 G "
G S/ 7P75/ @;7 <7;3575 <4;4<57 5/ S49@<=; 5/ J - A
S/ 33@97 /9 9Q/8754 <4; @;7 S49@<=; /S3Á;578 5/ 34S@9F734 5/ S454 ";aS4D$ S4D-
A -
D -
S%4 - A D R
"3845@84$
S/ @S7 79M5=; <4M4 ;5<7548: 7>?9 ;<49484 5es+enta(as del método: -;4 S/ 6@/5/ 5S3;I@8 /;38/ 94S 5F/8/;3/S 7>?<78/S 8/5@<348/S) -S/ 8/@/8/; M@/S387S 8/973N7M/;3/ I87;5/S "B'' 7 ''mg 5/ I9@<4S7 648 5/3/8M;7<=;) Método 'enedict Método !omoy -elson 7zúcar reductor A ?<78 8/5@<348 6rocedimiento:
8eacti+os para el método de Somogy - ;elson 8eacti+o de Somogy R ;a<4 D -
8eacti+o de ;elson R ";# %$Mo T 4% - Molibdato de amonio R ;a #7s4 TU# 4 R 7rsenato de Sodio R # S4 % R Ácido Sulfúrico R
Método Fluorimétrico /ste método es posible realizarlo cuando los compuestos de la muestra absorben la radiación a una longitud de onda corta y luego emiten radiación a una longitud de onda más larga) 5eterminación de glucosa por medio de este método: V /!tracción con iso-butil metil cetona) V 8eacción con idracida de ácido pRidro!ibenzoico) V 7dición de reacti+o y lectura a una emisión de %T'nm) V /!citación a %L%nm) Método En*im+tico /n este método se re*uiere de un e!tracto neutro o ácido libre de alcooles y metales pesados "ya *ue no se pueden usar sales de plomo para clari0car los e!tractos$) /ste método se puede aplicar a una gran +ariedad de carboidratos o compuestos relacionados como monosacáridos, disacáridos, polisacáridos, ácidos, alocoles y polioles) 8eacciones I9@<4S7 4H57S7
#4 A 4 A I9@<4S7 97<34;7 5/ Á<54 5I9@<=;<4 A #4 <73797S7
#4 #4 A W 4 4 A <84M=I/;4 ;<49484, 8/5@<54 <84M=I/;4 7>?9 4H5754 5/3/8M;7<=; /;>MÁ3<7 5/ S7<784S7XI9@<4S7
-97 <4;MÁ3<7 5/3/8M;7<=; 5/ 97 I9@<4S7 7;3/S 5/ 97 ;N/8S=; -7 @; p# 5/ T) 97 /;>M7 #/H4@;7S7 "#J$ <7379>7 97 F4SF4897<=; 5/ I9@<4S7 M/57;3/ /9 75/;4S; 38F4SF734) /; 68/S/;<7 5/ I9@<4S7 -F4SF734 5/S#584I/;7S7 "I6-5#$ 97 I9@<4S7F4SF734 6845@<57 /S /S6/<F<7M/;3/ 4H5757 648 /9 ;756 7 I9@<4;734F4SF734 <4; 97 F48M7<=; 5/ ;756 8/5@<54)
8eacciones: #J
I9@<4S7 A 736 I6 A 756 I6-5#
I6 A ;756A I9@<4;734-F4SF734 A ;756# A #A /9 ;756# F48M754 /; /S37 8/7<<=; /S /S3/@4M238<4 <4; 97 <7;3575 5/ I9@<4S7 Y S/ M5/ M/57;3/ /9 7@MZ/;34 /; 7Q4S84Q7;<7 7 DD%, D%' = DLnm) ;N/8S=; /;>MÁ3<7 -7 p# 5/ %) 97 S7<784S7 /S #5849>757 648 97 /;>M7 [-F8@<34S57S7 ";N/837S7$ 7 I9@<4S7 Y F8@<34S7:
[-F8@<34S57S7
S7<784S7 A # 4 I9@<4S7 A F8@<34S7 /9 <4;3/;54 5/ I9@<4S7 /S <79<@9754 5/ 97 5F/8/;<7 5/ <4;MÁ3<7
Método ,aderdorn-,ansen Método del cido 3./ 0initrosaliclico (0!)
9os azúcares presentes en una muestra de azúcar comercial o de algún producto azucarado se determinan cuantitati+amente por métodos f1sico "ópticosXpreferentemente$ o por métodos *u1micos) Se basan en lo mismo: @na de las técnicas anal1ticas más potentes consiste en determinar la cantidad de una sustancia disuelta midiendo la cantidad de radiación absorbida por la misma) /sta técnica se llama /spectrofotometr1a) Se puede utilizar el espectrofotómetro para determinar la longitud de onda de radiación necesaria para las determinaciones de la cantidad de azucar en las muestras ba(o estudio, comparándola después con la radiación absorbida por un blanco) 9a regla espec10ca *ue relaciona la cantidad de radiación absorbida por una sustancia con la concentracion de esa misma sustancia, se llama ley de Qeer) Feling, benedict, somogy, agerdorn-ansen V M23454 F9@48M238<4 V M23454S /;>MÁ3<4S V <84M734I87F7 5/ I7S/S V <84M734I87F7 9@57 V M23454S FS<4S
Métodos Fsicos 0ensimetra /ste método proporciona una apro!imación a la cantidad de azúcar presente en soluciones de azúcar relati+amente pura, ya *ue la presencia de otros materiales solubles afecta a la gra+edad espec10ca de una solución) .Ira+edad espec10ca: la gra+edad espec10ca de una solución de azúcar es una función de la concentración de soluto a una temperatura de0nida) 5eterminación de ?<78 /S @;7 M/557 5/ S@ <4;?<78/S 5/ I@79 <4;
PL4ME546 Fundamento: -S S/ 6@/5/ #7757 /; 697;4) /S34 S/ 6@/5/ 94I878 M/57;3/ /9 @S4 5/ @; F9384 64978>7548) V <@7;54 97 9@> 64978>757 Q8997 /; @;7 M492<@97 7SM238<7 "@; <4M6@/S34 @/ ;4 6@/5/ 6845@<8 @;7 M7I/; 79 /S6/Z4$) 97 9@> /S 843757) /S34 /S 997M754 _<4M6@/S34 =63<7M/;3/ 7<3N4` "e)g) I9@<4S7$) V S @; <4M6@/S34 3/;/ SM/387 97 9@> 64978>757 ;4 S/8Á 7F/<3757) V /9 S/I@;54 F9384 /S 843754 M7;@79M/;3/ 6787 <4M67I;78 NS@79M/;3/ 97S S4MQ87S 5/ @; <4948) /S34 8437 79 87Y4 5/ 9@> 64978>757 5/ 8/I8/S4 7 S@ 64S<=; 48I;79) V S/ M5/ /9 I8754 5/ 8437<=; 8/@/854) M7I;3@5 5/ 97 8437<=; 5/6/;5/;3/ 5/: V 97 94;I3@5 5/ 4;57 5/ 97 9@> @39>757) V 94;I3@5 5/ 97 7 5/ 97 S@QS37;<7 7<3N7 Y S@ <4;
64978M/384S +s S7<78M/384S V 64978M/384: @S7 9@> M4;4<84MÁ3<7 Y 9// /; I8754S 7;I@978/S "S/ 5/Q/ 8/97<4;78 <4; 97 <4;?<78$) V S7<78M/384: @S7 9@> Q97;<7 Y 9// 97 <4;?<78 58/<37)
0eterminaci7n de car8ohidratos totales por Espectroometra
