LAPORAN FITOKIMIA “
IDENTIFIKASI KUALITATIF KANDUNGAN
SIMPLISIA TAPAK DARA DAN DAUN SAGA”
Disusun Oleh :
Ola Cornelita
Puji Nurfitriyani
Puput Putriyanti
Regina Dwi Septianti
Rena Oktaviani
Tingkat
: IIB
Semester
: IV (Empat)
AKADEMI FARMASI MUHAMMADIYAH CIREBON Jl. Cideng Indah No. 3 Telp/Fax. 0231-230984 E-mail :
[email protected]
1
PERCOBAAN I IDENTIFIKASI KUALITATIF KANDUNGAN SIMPLISIA
1.1 TUJUAN PERCOBAAN
Mahasiswa mengetahui bahwa didalam simplisia banyak terkandung zatzat kimia yang mungkin berguna dalam pengobatan, serta cara mengidentifikasi zat-zat tersebut 1.2 PENDAHULUAN
Skrining fitokimia atau penapisan kimia adalah tahapan awal untuk mengidentifikasi kandungan kimia yang terkandung dalam tumbuhan, krna pada tahap ini kita bisa mengetahui golongan senyawa kimia yang dikandung tumbuhan yang sedang kita uji/teliti. Metode yang digunakan dalam skrining fitokimia harus memiliki persyaratan : metodenya sederhana dan cepat peralatan yang digunakan sesedikit mungkin selektif dalam mengidentifikasi senyawa-senyawa tertentu dapat memberikan informasi tambahan mengenai keberadaan senyawa tertentu dalam kelompok senyawa yang diteliti. Golongan senyawa kimia dapat ditentukan dengan cara:
uji warna
penentuan kelarutan
bilangan Rf
ciri spektrum UV
namun secara umum penentuan golongan senyawa kimia dilakukan dengan cara uji warna dengan menggunakan pereaksi yang spesifik karena dirasakan lebih sederhana.
Senyawa kimia berdasarkan asal biosintesis, sifat kelarutan, gugus fungsi digolongkan menjadi :
Senyawa fenol, bersifat hidrofil, biosintesisnya berasal dari asam shikimat
terpenoid, berasal dari lipid, biosintesisnya berasal dari isopentenil pirofosfat 2
asam organik, lipid dan sejenisnya, biosintesisnya berasal dari asetat
senyawa nitrogen, bersifat basa dan bereaksi positif terhadap ninhidrin atau dragendorf
gula dan turunannya
makromolekul, umumnya memiliki bobot molekul yang tinggi
Sedangkan berdasarkan biogenesisnya senyawa bahan alam dikelompokkan menjadi :
Asetogenin : flavonoid, lipid, lignan, dan kuinon
karbohidra : monosakarida, oligosakarida, dan polisakarida
isoprenoid : tepenoid, steroid, karotenoid
senyawa mengandung nitrogen : alkaloid, asam amino, protein, dan nukleat Skrining fitokimia umumnya hanya dilakukan pada senyawa:
1. Alkaloid
Alkaloid adalah suatu golongan senyawa organik yang terbanyak ditemukan di alam. Hampir seluruh alkaloid berasal dari tumbuh-tumbuhan dan tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan tingkat tinggi. Sebagian besar alkaloid terdapat pada tumbuhan dikotil sedangkan untuk tumbuhan monokotil dan pteridofita mengandung alkaloid dengan kadar yang sedikit. Pengertian lain Alkaloid adalah senyawa organik yang terdapat di alam bersifat basa atau alkali dan sifat basa ini disebabkan karena adanya atom N (Nitrogen) dalam molekul senyawa tersebut dalam struktur lingkar heterosiklik atau aromatis, dan dalam dosis kecil dapat memberikan efek farmakologis pada manusia dan hewan. Meyer’s Conversation Lexicons tahun 1896 dinyatakan bahwa alkaloid terjadi secara karakteristik di dalam tumbuh- tumbuhan, dan sering dibedakan berdasarkan kereaktifan fisiologi yang khas. Senyawa ini terdiri atas karbon, hidrogen, dan nitrogen, sebagian besar diantaranya mengandung oksigen. Sesuai dengan namanya yang mirip dengan alkali (bersifat basa) dikarenakan adanya sepasang elektron bebas yang dimiliki oleh nitrogen sehingga dapat mendonorkan sepasang elektronnya. 3
Garam alkaloid dan alkaloid bebas biasanya berupa senyawa padat, berbentuk kristal tidak berwarna (berberina dan serpentina berwarna kuning). Alkaloid sering kali optik aktif, dan biasanya hanya satu dari isomer optik yang dijumpai di alam, meskipun dalam beberapa kasus dikenal campuran rasemat, dan pada kasus lain satu tumbuhan mengandung satu isomer sementara tumbuhan lain mengandung enantiomernya. Ada juga alkaloid yang berbentuk cair, seperti konina, nikotina, dan higrina. Fungsi Alkaloid
Sebagai hasil buangan nitrogen seperti urea dan asam urat dalam hewan (salah satu pendapat yang dikemukan pertama kali, sekarang tidak dianut lagi). Pada beberapa kasus, alkaloid dapat melindungi tumbuhan dari serangan parasit atau pemangsa tumbuhan. Sebagai pengatur tumbuh, karena dari segi struktur, beberapa alkaloid menyerupai pengatur tumbuh. Beberapa alkaloid merangasang perkecambahan yang lainnya menghambat. Semula disarankan oleh Liebig bahwa alkaloid, karena sebagian besar bersifat
basa,
dapat
mengganti
basa
mineral
dalam
mempertahankan
kesetimbangan ion dalam tumbuhan Klasifikasi Alkaloid a. Non Heterosiklik Alkaloid
Ini juga kadang-kadang disebut proto-alkaloid atau amina biologis. Ini jarang ditemukan di alam. Molekul-molekul ini memiliki atom nitrogen yang bukan merupakan bagian dari sistem cincin. Nama Ephedrine
Struktur
Kegunaan Adrenergik,asma
dan
demam
4
Colchicine
Meredakan encok
Eritromisin
Antibiotika
Taxol
Digunakan
dalam
(paclitaxel)
pengobatan
kanker
ovarium, kanker payudara dan non-kecil sel kanker paru-paru b. Heterosiklik Alkaloid atau Alkaloid Khas
Struktural ini memiliki nitrogen sebagai bagian dari sistem cincin siklik. Ini lebih umum ditemukan di alam. Alkaloid heterosiklik kemudian dibagi lagi menjadi 14 kelompok berdasarkan struktur cincin yang mengandung nitrogen. HETEROSIKLIK
CONTOH
Pyrrolizidine
5
Tropane (piperidin / N-metil- pyrrolidine)
Quinoline
Isoquinoline
Aporphine (dikurangi isoquinoline / naftalena)
6
Quinolizidine
Indole atau Benzopyrole
Indolizidine
Imidazole atau glyoxaline
Purin (pirimidin / imidazol)
7
Steroid (beberapa digabungkan sebagai glikosida) *
Terpenoid *
2.
Flavonoid
Semua flavonoid, menurut strukturnya, merupakan senyawa induk flavon yang terdapat berupa tepung putih pada tumbuhan Primula, dan semuanya mempunyai sejumlah sifat yang sama. Saat ini dikenal sekitar 20 jenis flavonoid. Flavonoid terutama berupa senyawa yang larut dalam air. Mereka dapat diekstraksi dengan alkohol 70% dan tetap ada pada lapisan air setelah ekstrak dikocok dengan eter minyak bumi. Flavonoid berupa senyawa fenol, karena itu warnanya berubah bila di tambah basa atau amoniak, jadi flavonoid mudah dideteksi pada kromatogram atau dalam larutan. Flavonoid mengandung sistem aromatik yang terkonyugasi dan karena itu menunjukan pita serapan kuat pada spektrum UV dan spektrum tampak. Flavonoid umumnya terdapat dalam
tumbuhan, terikat pada gula sebagai
glikosida dan aglikon flavonoid. Flavonoid terdapat dalam semua tumbuhan berpembuluh tetapi beberapa kelas lebih tersebar daripada yang lainnya. Flavonoid terdapat dalam
tumbuhan sebagai campuran, jarang sekali
dijumpai hanya flavonoid tunggal dalam jaringan tumbuhan. Disamping itu, sering terdapat campuran yang terdiri atas flavonoid yang berbeda kelas.
8
Antosianin berwarna yang terdapat dalam daun bunga hampir selalu disertai oleh flavon dan flavonolol tanwarna. Flavonoid mempunyai rumus umum, C 6C3C6. Aktivitas biologi flavonoid antara lain: - anti kanker
: kuersetin, mirisetin
- anti oksidant
: kuersetin, antosianidin, dan prosianidin
- anti inflamasi
: apigenin, taksifolin, luteolin, kuersetin
- anti alergi
: nobeletin, tangeretin
- anti hipertensi
: prosianidin
- anti virus
: amentiflavum, skutellarein, kuersetin
3. Triterpenoid
Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari 6 satuan isopren dan secara biosintesis diturunkan dari hidrokarbon C30 asilik, yaitu skualen. Senyawa ini berstruktur siklik yang nisbi rumit, kebanyakan berupa alkohol, aldehida, atau asam karboksilat. Mereka berupa senyawa tanwarna, berbentuk kristal, sering kali bertitik leleh tinggi dan aktif optik , yang umumnya sukar dicirikan karena tak ada kerektifan kimianya. Uji yang banyak digunakan ialah reaksi Lieberman-Burchard (anhidrida asetat + H2SO4 pekat) yang dengan kebanyakan triterpena dan sterol memberikan warna hijau-biru. Tersebar luas dalam damar, gabus dan kutin tumbuhan. Triterpenoid yang paling penting dan tersebar luas ialah triterpenoid penta siklik. Struktur kimia triterpenoid terdapat dalam bentuk bebas atau glikosida. 4. Steroid
Steroid adalah senyawa organik lemak sterol tidak terhidrolisis yang dapat dihasil
reaksi
penurunan
dari terpena atau skualena. Steroid
merupakan
kelompok senyawa yang penting dengan struktur dasar sterana jenuh (bahasa Inggris: saturated
tetracyclic
hydrocarbon :
1,2-
cyclopentanoperhydrophenanthrene) dengan 17 atom karbon dan 4 cincin. Senyawa
yang
termasuk
turunan
steroid,
misalnya kolesterol, ergosterol,progesteron, dan estrogen. Pada umunya steroid berfungsi sebagai hormon. Steroid mempunyai struktur dasar yang terdiri dari 17 9
atom karbon yang
membentuk
tiga
cincinsikloheksana dan
satu
cincin siklopentana. Perbedaan jenis steroid yang satu dengan steroid yang lain terletak pada gugus fungsional yang diikat oleh ke-empat cincin ini dan tahap oksidasi tiap-tiap cincin. Beberapa
steroid
bersifat anabolik,
lain testosteron, metandienon, nandrolon
dekanoat, 4-androstena-3
antara 17-dion.
Steroid anabolik dapat mengakibatkan sejumlah efek samping yang berbahaya, seperti menurunkan rasio lipoprotein densitas tinggi, yang berguna bagi jantung, menurunkan
rasio
lipoprotein
kelainan koagulasi dan
densitas
gangguan hati,
rendah,
stimulasi tumor
prostat,
kebotakan,
menebalnya
rambut,
tumbuhnya jerawat dan timbulnya payudara pada pria. Secara fisiologi, steroid anabolik dapat membuat seseorang menjadi agresif.
Struktur Steroid Sifat Steroid
Substitusi oksigen pada atom C-3 yang merupakan sifat khas steroid alam. Subsitusi gugus metil angular pada atom C-10 dan C-13 yang dikenal dengan atom C-18 dan C-19, kecuali pada senyawa steroid dengan cincin A berbentuk benzenoid, seperti pada kelompok esterogen. Manfaat Steroid
Dapat digunakan sebagai obat Secara rinci beberapa manfaat steroid pada tumbuhan adalah sebagai berikut:
menghambat penuaan daun (senescence) mengakibatkan lengkuk pada daun rumput-rumputan menghambat proses gugurnya daun
10
menghambat pertumbuhan akar tumbuhan
meningkatkan resistensi pucuk tumbuhan kepada stress lingkungan
menstimulasi perpanjangan sel di pucuk tumbuhan
merangsang pertumbuhan pucuk tumbuhan
merangsang diferensiasi xylem tumbuhan
menghambat pertumbuhan pucuk pada saat kahat udara dan endogenus karbohidrat.
5. Saponin
Saponin adalah suatu glikosida triterpana dan sterol yang mungkin terdapat pada banyak tanaman. Kata saponin berasal dari bahasa Latin “sapo” yaitu suatu bahan yang akan membentuk busa jika dilarutkan dalam larutan yang encer. Saponin berfungsi sebagai ekspektoran, kemudian emetikum jika dikonsumsi dalam jumlah yang besar. Saponin juga merupakan senyawa kimia yang dapat menyebabkan sel darah merah terganggu akibat dari kerusakan membran sel, menurunkan kolestrol plasma, dan dapat menjaga keseimbangan flora usus, serta sebagai antibakteri (Harbone, 1987).
1.3 MONOGRAFI A. Klasifikasi Tanaman Tapak Dara, yaitu (Plantamor, 2008):
Kingdom
: Plantae (Tumbuhan)
Subkingdom
: Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)
Super Divisi
: Spermatophyta (Menghasilkan biji)
Divisi
: Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas
: Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil)
Sub Kelas
: Asteridae
Ordo
: Gentianales
Famili
: Apocynaceae
Genus
: Catharanthus
Spesies
: Catharanthus roseus (L.) G. Don
Morfologi Tapak Dara (C. roseus)
11
Tapak Dara (C. roseus) banyak dipelihara sebagai tanaman hias, tanaman ini sering dibedakan menurut jenis bunganya, yaitu putih dan merah. Tanaman ini merupakan tanaman semak tegak yang daoat mencapai ketinggian batang sampai 100 cm yang biasa tumbuh subur di padang atay di pedesaan beriklim tropis. Ciriciri tanaman ini yaitu memiliki batang yang berbentuk bulat dengan diameter berukuran kecil, berkayu, beruas dan bercabang serta berambut. Daunnya berbentuk bulat telur, berwarna hijau dan diklasifikasikan berdaun tunggal. Bunganya menyerupai terompet dengan permukaan berbulu halus. Tanaman ini juga memiliki rumah biji yang berbentuk silindris menggantung pada batang. Penyebaran tanaman ini melalui biji (Ahira, 2011). Kandungan Zat dalam Tapak Dara Berikut merupakan senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman tapak dara (Dalimartha, 2007):
Vinblasine, ternyata bisa dimanfaatkan dalam pengobatan penyakit leukemia.
Vincristine, disamping dipakai dalam pengobatan leukemia, juga kanker payudara, dan tumor ganas lainnya.
Vindesine, dipakai dalam pengobatan leukemia pada anak-anak, dan penderita tumor pigmen.
Vinorelbine, seringkali digunakan sebagai bahan pengobatan untuk mencegah pembelahan kelenjar.
B. Klasifikasi Daun Saga
Divisi : Spermatophyta Sub divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledoneae Bangsa : Fabales Suku : Fabaceae Marga : Abrus Jenis : Abrus precatorius L. Nama umum : Saga, Saga Manis
12
Nama daerah : Thaga (Aceh); Seugew(Gayo); Saga (Batak);Parusa (Mentawai);
Kundi
(Minangkabau);
Kanderi
(Lampung);
Kenderi
(Melayu); Piling-piling saga (Sampit); Taning bajang (Dayak); Maat metan (Timor); Walipopo (Gorontalo); Punu no matiti (Buol); Saga (Makasar); Kaca (Bugis); War kamasin (Kai); Mati-mati (Waraka-Seram); Aliweue (Atamona Seram); Pikalo (Amahai Seram); Kaitasi (Muaulu); Ailalu Picar (Ambon); Pikal (Haruku);Pikolo (Saparua); Seklawan (Buru); Idisi ma lako (Loda Halmahera); ldihi ma lako (pagu-Halmahera); ldi-idi malako (Ternate Tidore); Punoi (Arafuru); Kalepip (Kalana).
1.4 METODE : 1. Alat – alat yang digunakan
Mortar dan stamper
Gelas kimia 250ml
Tabung
Lampu spiritus
raknya
Kaki tiga dan kasa
Penjepit tabung reaksi
Cawan penguap
Lempeng tetes / plat tetes
reaksi
dengan
Neraca
2. Bahan-bahan yang digunakan
a. Daun segar : Tapak Dara dan Saga
h. Larutan FeCl3 i.
Pereaksi Mayer
b. Chloroform
j.
Amonia
c. Eter
k. Pasir netral
d. Asam asetat anhidrit
l.
e. H2SO4 pekat
m. Metanol
f. H2SO4 2 M
n. Etanol
g. HCl pekat
o. Logam Mg
Chloroform-amoniak 0,05 M
13
3. Cara Percobaan a. Uji Alkaloid (Metode Culvenor Fitzgerald)
Ambil kira-kira 4 gram sampel segar digerus dengan bantuan pasir netral, kemudian dibasahkan dengan 10 ml chloroform, lalu ditambahkan 10 ml chloroform-amoniak
0,05 M, gerus dan saring kedalam tabung reaksi.
Tambahkan 10 ml H 2SO4 2 M, kocok perlahan dan biarkan sampai terjadi pemisahan. Lapisan H2SO4 diambil dan dipindahkan kedalam tabung reaksi lalu ditambah pereaksi Mayer. Timbulnya warna putih seperti kabut menunjukkan adanya alkaloid.
b. Uji flavonoid (uji sianidin)
Ambil kira-kira 4 gram sampel segar dididihkan denan methanol air (9 :1), disaring dalam keadaan panas, lalu filtratnya dipekatkan sampai volume tinggal sepertiganya, selanjutnya ditambahkan HCl pekat dan logam Mg. Timbulnya warna metal jingga menunjukkan adanya flavonoid.
c. Uji Steroid, triterpenoid, saponin dan senyawa fenolik
Dengan memakai metode Simes Ambil kira – kira 4 gram sampel segar didihkan dengan 25 ml etanol selama 25 menit, disaring dalam keadaan panas. Filtrat yang diperoleh diuapkan diatas penangas air sampai kering. Sisa penguapan di titrasi dengan eter, bagian yang tidak larut dalam eter dikocok dengan air. Lapisan air ditambahkan beberapa tetes FeCl3 untuk menunjukkan adanya senyawa fenolik. Jika terjadi warna biru hitam atau hijau coklat menunjukkan adanya senyawa fenolik. Lapisan air dikocok kuat. Jika timbul busa menunjukkan adanya saponin. Fraksi eter
dikeringkan dalam plat tetes lalu dilakukan reaksi Liebermann-
Burchard. Zat dilarutkan dalam 2 sampai 3 tetes H2SO4 pekat. Jika timbul busa menunjukan adanya saponin. Fraksi eter dikeringkan dalam plat tetes lalu dilakukan reaksi LiebermannBurchard zat dilarutkan dalam 2 sampai 3 ml CHCl 3, tambahkan 10 tetes asam 14
anhidrida asam asetat dan 2 sampai 3 tetes H2SO4 pekat. Jika timbul warna biru sampai hijau menunjukan adanya steroida. Reaksi Liebermann-Burchard spesifik untuk senyawa sterol yang tidak jenuh pada C5-C6. 1.5 HASIL PENGAMATAN DAN DISKUSI Hasil Pengamatan
Dokumentasi : Terlampir
Hasil : Uji / Daun
Tapak Dara
Saga
Alkaloid
Dragendorf
Meitl jingga (+)
Hijau gelap (+)
Mayer
(+)
(-)
Flavonoid
(+)
(+)
Steroid
(+)
(+)
Triterpenoid
(+)
(+)
Saponin
(+)
(+)
Senyawa fenolik
(+)
(+)
Contoh Jurnal : Terlampir Pembahasan
Percobaan yang telah dilakukan yaitu kualitatif kandungan pada daun segar yaitu daun saga dan tapak dara. Percobaan dilakukan untuk mengetahui bagai mana cara mengambil (mengekstraksi) zat-zat tersebut, serta cara mengidentifikasi zatzat tersebut. Pada pengujian Alkaloid Daun Saga dengan perekasi Mayer, menunjukkan hasil yang (-) menandakan tidak terpadat alkaloid, sedangkan dengan perekasi Dragendroff menujukkan hasil yang (+) menandakan terdapat alkaoid, ini dimungkinkan karena daun dipetik pada pagi hari sehingga memungkinkan kadar alkaloid tidak terdeteksi. Kesimpulan :
Berdasarkan hasil percobaan yang telah dilakukan. Didapat hasil sebagai berikut : 1. Uji Alkaloid 15
Pereaksi Dragendroff a. Daun Saga (+) artinya menunjukkan adanya alkaloid b. Tapak Dara (+) artinya menunjukkan adanya alkaloid
Pereaksi Mayer a. Daun Saga (-) artinya tidak menunjukkan adanya alkaloid b. Tapak Dara (+) artinya menunjukkan adanya alkaloid
2. Uji Flavonoid a. Daun Saga (+) artinya menunjukkan adanya flavonoid b. Tapak Dara (+) artinya menunjukkan adanya flavonoid 3. Uji Steroid a. Daun Saga (+) artinya menunjukkan adanya steroid b. Tapak Dara (+) artinya menunjukkan adanya steroid 4. Uji Triterpenoid a. Daun Saga (+) artinya menunjukkan adanya triterpenoid b. Tapak Dara (+) artinya menunjukkan adanya triterpenoid 5. Uji Saponin a. Daun Saga (+) artinya menunjukkan adanya saponin b. Tapak Dara (+) artinya menunjukkan adanya saponin 6. Uji senyawa Fenolik a. Daun Saga (+) artinya menunjukkan adanya senyawa fenolik b. Tapak Dara (+) artinya menunjukkan adanya senyawa fenolik
1.6 Daftar Pustaka
-
Modul Praktikum Fitokimia.Akademi Farmasi Muhammadiyah Cirebon.2016
-
Departemen Kesehatan R I. Materi Medika Indonesia I. Jakarta : 19TI:t-8.
-
http://triwidyaedelwis.blogspot.com/2012/03/metabolit-sekunderterpenoid.html
-
http://cttadriyani.blogspot.com/2012/12/alkaloid.html
-
http://jamu.biologi.ub.ac.id/?page_id=733
16
Lampiran Hasil Pengamatan
Uji Alkaloid : (+) Dragendroff : Jingga (+) Mayer : Kabut putih
Pereaksi Dragendroff, Tapak Dara (+)
Pereaksi Mayer, Tapak Dara (+)
Pereaksi Dragendroff, Daun Saga (+)
Pereaksi Mayer, Daun Saga (-)
Uji Flavonoid : (+) Flavonoid : Warna metil jingga
Tapak Dara (+)
Daun Saga (+)
17
Uji Steroid, Terpenoid :
(+) Steroid, terpenoid : Warna biru sampai hijau
Tapak Dara (+)
Uji Saponin : (+) Saponin :Timbul Busa
Tapak Dara (+)
Daun Saga (+)
Daun Saga (+)
Uji Senyawa fenolik : (+) fenolik : Warna biru hitam atau hijau coklat
Tapak Dara (+)
Daun Saga (+) 18
