Daftar Isi
Daftar Isi
1
Bab I. Pendahuluan 1.1 Latar Belakang 1.2 Tujuan 1.3 Manfaa Man faatt
2 2 2
Bab II. Isi 2.1 Dasar Teori Teori 2.2 Alat dan Bahan 2.3 ara !erja 2." #asil
3 6 6 $
Bab II. Penutu% 3.1 !esi&%ulan
'
Daftar Pustaka
1(
La&%iran
11
1
BAB I P)*DA#+L+A* 1.1 Latar Belakang Mikr Mi krob obio iolo logi gi ad adala alah h sa salah lah sat satu u ,a ,aba bang ng bi biol olog ogii -ang &e &ene nela laah ah &e &eng ngen enai ai organis&e hidu% berukuran &ikrosko%is -ang &eli%uti irus/ bakteri/ ar,haea/ %roto0oa/ alga al gae/ e/
dan da n
fung fu ngi. i.
Mikr Mi krob obio iolo logi gi
&e& &e &%e %ela laja jari ri
tent te ntan ang g
berb be rbag agai ai
hall ha
&en enge gena naii
&ikroorgan &ikro organis&e is&e -ait -aitu u ,iri,i ,iri,iri/ ri/ keker kekerabatan abatan// serta &anfaa &anfaatn-a tn-a.. Mikroo Mikroorgan rganis&e is&e da%at tu&buh dan berke&bang biak di&ana saja asalkan ,uku% nutrien dan ,o,ok &ediu&n-a. Mikroorganis&e ada -ang &enguntungkan ada juga -ang &erugikan. Mikroorganis&e -ang bersifat &enguntungkan da%at &e&bantu &en-elesaikan &asalah &anusia dala& &engolah &eng olah su&ber da-a ala& sedang &ikroorganis& &ikroorganis&ee -an -ang g bersifa bersifatt &erug &erugikan ikan da%at &erusa &er usak k bah bahan anbah bahan an org organi anik/ k/ &e& &e&bua buatt hil hilang angnn-aa ken kenik& ik&atan atan &ak &akana anan n dan da% da%at at &eni&bulkan %en-akit. 1.2 Tujuan
Me&aha&i berbagai &ikroorganis&e %en-ebab infeksi saluran ke&ih. Me&aha&i ,ara %enga&bilan s%e,i&en urin %orsi tengah. Me&aha&i ,ara %engiri&an s%e,i&en urin ke laboratoriu& &ikrobiologi. Me&aha&i %rosedur %e&eriksaan bakteriologik s%esi&en urin. Me&aha&i ,ara %e&biakan bakteri &enggunakan agar &a,on,e- dan agar darah. Meng Me nget etah ahui ui &e &eto tode de hi hitu tung ngan an ,a ,aa an n da dan n %e %eng nghi hitu tung ngan an &i &ikr krob obaa ser serta ta %e %ea arn rnaan aan ra&.
1.1 Manfaat Manfaat Pra Prakti ktiku& ku& Manfaatt %rakt Manfaa %raktiku& iku& ini adalah da%at &enge &engetahui tahui dan &elaku &elakukan kan %roses %enga&bilan %enga&bilan sa&%el/ da%at &e&biakan &ikroba %ada &ediu& agar darah dan M.. da%at &elakukan &etode hitungan ,aan/ dan da%at &elakukan ,ara %earnaan ra&.
2
BAB II I4I
2.1 Dasar Teori 2.1.1 M,onkeMikrobiologi adalah il&u &engenai &ikroorganis&e/ suatu kelo&%ok besar dan beraga& organis&e &ikrosko%is -ang hidu% sebagai selsel tunggal atau kelo&%okkelo&%ok sel5 ter&asuk di dala&n-a irus -ang &ikrosko%is/ teta%i tidak tidak seluler seluler.. Mikroo Mikroorg rgani anis&e s&e &e&ili &e&iliki ki %engar %engaruh uh -ang -ang luar luar biasa biasa terhad terhada% a% selule selulerr kehidu kehidu%an %an dan %e&ben %e&bentuk tukan an bahan bahan ki&ia ki&iaii dan fisik fisik %lanet %lanet kita. kita. Mikroorga Mikroorganis&e nis&e bertanggun bertanggung g jaab &endaur &endaur ele&enele&en ele&enele&en ki&ia ki&ia %enting %enting bagi kehidu%an/ ter&asuk karbon/ nitrogen/ sulfur/ hidrogen/ dan oksigen5 fotosintesis lebih ban-ak dilakukan oleh &ikroorganis&e dari%ada oleh tana&an hijau. Di%erkirakan kurang lebih 7 1( 3( sel &ikrobater da%at di bu&i5 tidak ter&asuk selulosa/ selsel ini &enbentuk sekitar '(8 bio&assa seluruh biosfer. Manusia juga &e&iliki hubungan -ang erat dengan &ikroorganis&e5 lebih dari '(8 di dala& tubuh kita adalah &ikroba. Bakteri da%at digolongkan &enjadi dua kelo&%ok -aitu ra& %ositif dan ra& negatif didasarkan %ada %erbedaan struktur dinging sel. Pada u&u&n-a bakteri gra& negatif lebih tahan terhada% aktiitas anti&ikroba dibandingkan dengan bakteri gra& %ositif. Ma, onke- Agar adalah &ediu& kultur -ang diran,ang untuk tu&buh bakteri gra& negatif dan noda &ereka untuk fer&entasi laktosa. Dala& &edia ini )nteroba,teria,eae dan bakteri gra& negatif dan &e&bedakan &ereka ke dala& fer&entor laktosa dan nonlaktosa fer&entor. !ehadiran gara& e&%edu dan kristal ungu akan &engha&bat %ertu&buhan &ikroorganis&e gra& %ositif. Pengga Penggabun bungan gan laktos laktosaa berfun berfungsi gsi sebaga sebagaii satusat satusatunun-aa su&ber su&ber karboh karbohidr idrat. at. Basil. ra&negatif -ang &enghasilkan laktosa fer&ents &erah tua &enjadi &erah &uda koloni. Persen-aaan uta&a dala& &edia ini adalah laktosa/ gara& e&%edu/ dan &erah &erah netral netral sebagai sebagai iindikat iindikator or
arna. arna. Media Media ini akan &engha &engha&ba &batt
%ertu&buhan bakterri gra& %ositif dengan adan-a gara& e&%edu -ang akan &e&bentuk &e&bentukkristal kristal iolet. Bakteri Bakteri gra& negatie negatie -ang tu&buh da%at dibedakan dibedakan 3
dala& dala& ke&a ke&a&% &%ua uann nn-a -a &e&f &e&fer er&e &ent ntasi asika kan n lakt laktos osa. a. !olo !oloni ni bakt bakteri eri -ang -ang &e&fer& &e&fer&ent entasik asikan an laktos laktosaa berar berarna na &erah &erah bata bata dan da%at da%at dikeli dikelilin lingi gi oleh oleh enda%a enda%an n gara& gara& e&%edu e&%edu.. )nda%a )nda%an n ini diseba disebabka bkan n oleh oleh %engur %enguraia aian n laktos laktosaa &enjadi asa& -ang akan bereaksi dengan gara& e&%edu. Bebera%a ,ontoh %ertu&buhan koloni %ada Ma, onke- Agar 9 •
•
Salmonella dan Salmonella dan Shigella 9 Shigella 9 seru%a &edia Escherichia coli9 coli9 &erah dikelilingin 0ona keruh
•
Enterobacter dan Klebsiella dan Klebsiella 9 9 &erah &uda dan &ukoid
•
Enterococcus dan Enterococcus dan Staphylococcus 9 Staphylococcus 9 ke,il dan tidak terang te&bus
2.1.2 Agar darah Agar darah &eru%akan &edia diferensial/ bukan &edia selektif. Darah agar &e&ungkin &e&ungkinkan kan &e&bedakan &e&bedakan bakteri bakteri berdasarkan berdasarkan ke&a&%uan ke&a&%uan &ereka untuk untuk &elisiskan selsel darah &erah. Tiga jenis he&olisis adalah 9 1. beta beta he& he&olis olisis is// -ang ang &eru% eru%ak akan an lisi lisiss leng lengka ka% % sel sel dara darah h &erah erah dan dan he&oglobin. Darah se,ara lengka% digunakan oleh &ikroba. Media -ang ada kolonin-a &enjadi tidak berarna. 2. alfa he&oli he&olisis sis &enga,u &enga,u %ada lisis lisis %ada %arsial:l %arsial:lisis isis sebagia sebagian n dari sel darah darah &erah dan he&oglobin. #al ini &enghasilkan %erubahan arna disekitar koloni &enjadi abuabu kehijauan 3. ga&&a ga&&a he&olisi he&olisis/ s/ -aitu -aitu tidak tidak terjadi terjadi he&olisi he&olisis/ s/ di&ana di&ana tak ada %erubaha %erubahan n arna dala& &ediu&. Media Media agar agar darah darah disebu disebutt &edia &edia unie uniersal rsal karena karena da%at da%at diguna digunakan kan untuk untuk &enu&b &enu&buhk uhkan an beraga beraga& & jenis jenis bakter bakteri. i. Media Media agar agar darah darah juga juga da%at da%at &e&bedakan bakteri he&olitik dan bakteri non he&olitik/ -ang ditandai oleh adan-a 0ona ;halo< disekitar koloni. Media BAP ;blood agar %late< digunakan sebagai &edia isolasi bakteri ,o,,us gra& ;=<
2.1.3 Di%stik Pe&eriksaan dengan di%stik &eru%akan salah satu alternatif %e&eriksaan leukosit dan bakteri di urin dengan ,e%at. +ntuk &engetahui leukosituri/ di%stik akan akan bereak bereaksi si dengan dengan leu,o, leu,o,-t -tee esteras esterasee ;suatu ;suatu en0i& en0i& -ang -ang terda%a terda%att dala& dala& granul granul %ri&er %ri&er netrof netrofil< il<.4e .4edan dangka gkan n untuk untuk &engeta &engetahui hui bakter bakteri/ i/ di%stik di%stik akan akan bereaksi dengan nitrit ;-ang &eru%akan hasil %erubahan nitrat oleh en0-& 4
nitrate redu,tase %ada bakteri< %e&eriksaan di%stik &eli%uti tes %#/ glukosa/ %rotein/ darah/ bilirubin/ keton/ urobilinogen/ urobilinogen/ nitrit/ dan leukosit. a. %# Test ini ini didas idasar ark kan %ada ada ind indikat ikato or gand gandaa ;&et ;&et-l &erah erah dan dan bro&oth-&ol birueaksi %ositif ditandai dengan %erubahan arna dari kuning lalu hijau dan ke&udian biru kehijauan. d. Bilirubin Pada hasil %e&eriksaan di%stik bilirubin dikatakan nor&al. e. !eton Tes ini ini berd berdasa asark rkan an reaks reaksii asa& asa& a,eto a,etoa,e a,eti ti,, dala& dala& urin urin deng dengan an nitro%russide.?arna -ang dihasilkan berkisar dari ,oklat ketika reaksi tidak terjadi arna ungu untuk reaksi %ositif. f. +rob robilinogen Berd Berdasa asark rkan an %ada %ada reaks reaksii dia0o dia0oti tisat satio ion n dari dari " @ gra& gra& dia0o dia0oni niu& u& Meth Metho7 o7-b -ben en0en 0enee dan dan urob urobil ilin inog ogen en ke&i ke&ih h dala& dala& &edi &ediaa asa& asa& kuat kuat.. +robilinogen sangat tidak stabil bila terkena ,aha-a dan udara. g. *itrit Pada %ereaksi asa& %arsanili, dan nitrit dala& urin untuk &e&bentuk suatu sen-aa dia0oniu& dia0oniu& %ada %asangan giliranngilirann-aa dengan dengan *;lnaftil< *;lnaftil< etilendia&ina dala& &edia asa& dan arna -ang dihasilkan adalah &erah &uda ;%ink< . 4etia% tingkat arna &erah &uda diangga% %ositif. h. Leukosit Tes leukosit &endeteksi kehadiran selsel darah %utih atau sel %arsial dala& urin.
2.2 Alat dan Bahan 5
• • • • • • • •
Alat aru& ose Bunsen aan %etri Tissue Pi%et tetes bjek glass >ak %earnaan Mikrosko%
•
• • • • • •
Bahan Bakteri Salmonella typhi dan typhi dan Escherichia coli *al (/1 * ACuadest Larutan gention iolet Larutan fu,hsin Larutan lugol Alkohol '68
2.3 ara !erja 2.3.1 Penana&an urine %ada agar darah dan Ma, onke- dengan &etode streak %late 1. Ta&% Ta&%ung ung urin urin %ada %ada adah: adah:,u% ,u%.. 2. aru& aru& ose bulat disteri disterilka lkan n di atas a%i hingga hingga &e&bara &e&bara// tunggu tunggu dingin. dingin. Lalu Lalu ,elu%kan kedala& urin dengan ,ara di aduk. 3. aru& ose ose digorekan digorekan %ada %ada %er&ukaan %er&ukaan agar agar darah dan dan Ma, onkeonke- dengan dengan ,ara ,ara lurus dari atas ke baah/ ke&udian gores se,ara 0ig0ag sa&%ai te%i. ". Inkuba Inkubasi si sela&a sela&a 1 1 ja& deng dengan an suhu suhu 3$E 3$E.. . 4etelah 1 ja&/ ja&/ tentukan tentukan jenis jenis koloni koloni dan hitung hitung ju&lah ju&lah koloni. koloni. 2.3.2 Pe&eriksaan di%sti,k 1. 2. 3. ".
Te&% Te&%atk atkan an sa&%el sa&%el urin urin %ada %ada adah adah atau atau ,u%. ,u%. elu%kan elu%kan reagen reagen stri% ke dala& dala& urin urin sela&a sela&a 2 detik. detik. Letakkan Letakkan reagen reagen diatas diatas tissue tissue agar agar urin urin -ang -ang berlebiha berlebihan n tersera%. tersera%. Pega Pegang nggl glah ah reag reagen en stri% stri% se,ara se,ara hori0 hori0on onta tall dan dan band bandin ingk gkan an deng dengan an stan standa dar r
arna -ang terda%at %ada label adah reagen stri%. . atat atat hasil hasil sesuai sesuai reagen reagen stri%. stri%. 2.3.3.Pearnaan gra& ;stain< 1. Buat Buat sedia sediaan an ku&an ku&an dan fiksasi fiksasi.. 2. Diarnai Diarnai bebera%a bebera%a tetes tetes dengan dengan gentian gentian iolet iolet sela&a sela&a 3 &enit/ &enit/ ,u,i dengan dengan air &engalir. 3. Diarnai Diarnai dengan dengan lugol lugol sela&a sela&a 1 &enit/ &enit/ ,u,i dengan dengan airr &engalir &engalir.. ". ena enang ngii deng dengan an alko alkoho holl '68 '68 sa&%ai sa&%ai 0at arn arnaa terla terlaru rut/ t/ ,u,i ,u,i deng dengan an air air &engalir. . Diarnai Diarnai dengan dengan fu,hsin fu,hsin sela&a sela&a 2 &enit/ &enit/ ,u,i dengan dengan air &engalir &engalir.. 6. !e&udian !e&udian a&ati a&ati sediaan dengan dengan &ikrosk &ikrosko% o% ,aha-a. ,aha-a.
2.1 2.1 #asi #asill
6
Adan-a %ertu&buhan &ikroorganis&e dia&ati setelah &edia agar diinkubasi sela&a 1 ja&. Dari hasil %er,obaan dengan &edia agar dida%atkan 9
Agar Darah Dari hasil %er,obaan dida%atkan koloni bakteri -ang digolongkan dala& nilai F=1.
Gang Gang dala& hal ini berarti koloni berada dala& ju&lah F( jika dilihat se,ara kasat &ata. !arakteristik bakteri %ada %er,obaan 9 •
Bentuk
9 bulat
•
Per& Per&u ukaan kaan 9 ,e& ,e&bung bung
•
Te%i
•
?arna
•
!ons !onsis iste tens nsii 9 luna lunak k
•
Mukoid
•
Pearnaan gra&
9 r a ta 9 %utih
9 ; <
9 o
ra& %ositif
o
Batang
Pada hasil %er,obaan/ bakteri %atogen dan tidak %atogen da%at dihitung dgn ru&us 9 2(( H ju&lah koloni bakteri 7 1( " ika ju&lah ju&lah koloni koloni dibaah dibaah ((( &aka &aka bakter bakterii diangg diangga% a% non %atogen/ %atogen/ dari dari ru&us ru&us dida%atkan ju&lah koloni 9 2(( H 3' 7 1( " 2(( H 3/' 7 1( H 1'( berarti bakteri tidak %atogen.
Agar M,onkePada &edia ini tidak dite&ukan adan-a %ertu&buhan bakteri atau%un &ikroorganis&e
lainn-a. #al ini &ungkin terjadi karena ketidaksesuaian keadaan inkubator %e&biakan.
Di%stik %# • lukosa • Protein • Bilirubin • !eton •
9 ?arnan?arnan-aa hijau kebiruan -ang &enunjukan %# $. $. 9 Dala& keadaan nor&al. 9 Protein =1. 9 *egatif H tidak ada arna hijau. 9 *or&al ;hasil negatif<. 7
• • •
+robilinogen *itrit Leukosit
9 *o *or&al 9 *or&al 9 Tidak dite&ukan leukosit.
-
8
BAB III P)*+T+P
3.1 !esi&%ulan Isi di sini -a frai&
9
Daftar Pustaka
1. Melni,k Melni,k// Adelb Adelberg erg// eo J.B. Mikrob Mikrobiol iologi ogi !edokt !edoktera eran n aet0 aet0.. Perke&b Perke&bang angbia biakan kan Mikroorganis&e. In9 Adisti Adisti Adit-a%utri/ Adit-a%utri/ editor. 2th )dition. akarta9 )5 2(12 2. Pratii Pratii 4/T. 4/T. Mikrob Mikrobiolog iologii Jar&asi. Jar&asi. akarta akarta 9 )rlangg )rlangga. a. 2((. 2((.
10
La&%iran
11
