HEMOCULTIVO
Un hemocultivo es un cultivo microbiológico de la sangre, es un método diagnóstico en medicin medicinaa emplead empleado o para para detecta detectarr infecc infeccion iones es que se trasmit trasmiten en a través través del torren torrente te sanguíneo, bacteriemia o septicemias.
El hemocu hemoculti ltivo vo o cultiv cultivo o microb microbiol iológi ógico co de la sangre sangre consti constituy tuyee en los casos de septicemia, el único examen que permite su confirmación.
INDICACIONES
Sospecha de bacteriemia en pacientes con o sin foco aparente de infección.
Fiebre mayor a 38.3ºC (38.5 dependiendo de la literatura)
Escalofríos
Cuadros de abdomen agudo
Drogadicción intravenosa.
Infecciones que producen bacteriemias continuas, como la endocarditis infecciosa.
MUESTRA
Colectar en niños 3 ml y en adultos 5 ml aprox.
La relación entre la sangre y el caldo de cultivo es de 1/10
Debe tomarse antes de iniciar el tratamiento con antibióticos
INSTRUCCIONES PARA LA TOMA DE UN HEMOCULTIVO
La muestra de sangre se debería obtener entre 2 horas a 30 minutos antes del pico
febril pero como no es posible determinar este momento preciso se recomienda en forma arbitraria la toma antes del inicio del pico febril que puede ser precedido por escalofríos.
La muestra debe obtenerse por punción periférica venosa o arterial
Destapar el frasco con caldo de hemocultivo, para descubrir el tapón de hule
perforable. Colocar la ligadura en el brazo del paciente, luego palpar la vena y localizar con
precisión el sitio donde se va a puncionar. Lavar con agua y jabón el brazo del paciente, antes de aplicar desinfectante. Limpiar
el sitio correcto con un algodón empapado en tintura de yodo al 3%. Dejar secar y luego limpiar el sitio de punción con un algodón empapado en alcohol, con movimientos circulares en forma de espiral que se inicia en el sitio de punción.
Con aguja y jeringa estériles, puncionar la vena y obtener asépticamente 5 ml. Inyectar exactamente 5 ml de sangre en el frasco que contiene 45 ml de caldo o 10 ml en un frasco con 90 ml de caldo. En los hemocultivo pediátricos, inyectar 3ml de sangre en 25 ml de caldo.
Agitar suavemente las botellas ya inoculadas e incubar a 36°C.
CLASIFICACIÓN DE LOS HEMOCULTIVO
CLASIFICACIÓN SEGÚN LA METODOLOGÍA En general existen 3 tipos de sistemas de hemocultivo: - Manuales o convencionales
- Semi-automatizados: Lisis-centrifugación - Automatizados
SISTEMAS MANUALES O CONVENCIONALES El medio para cultivo manual es el medio de tripticasa de soya el cual debe contener acido polianetol de sodio, que es el anticoagulante además inhibe la actividad bactericida del suero contra muchas bacterias también inactiva el complemento. Luego todo esto lo vertimos en un frasco estéril, en el cual después vamos a verter la sangre venosa del paciente e incubamos a 35ºC.
COMPOSICIÓN DEL MEDIO TRIPTICASA DE SOYA
Formula en gramos por litro Tripteina
17.0
Peptona de soya
3.0
Glucosa
6.0
Cloruro de sodio
2.5
Tioglicolato de sodio
0.5
Agar
0.7
L-cistina
0.25
Sulfito de sodio
0.1
PREPARACIÓN
Suspender 30 g del polvo por litro de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos. Calentar a ebullición hasta disolución total. Distribuir y esterilizar a 121°C por 15 minutos.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS Si se observan signos de positividad como hemólisis, burbujas, presencia de coágulos, sedimento le asemos un seguimiento por 5 días luego una prueba de Gram. y al 5to día un traspaso al agar sangre.
SISTEMAS SEMI-AUTOMATIZADOS O LISIS CENTRIFUGACIÓN
Consiste en un tubo de lisis cuyo contenido es polianetol sulfonato de sodio como anticoagulante, saponina como agente lítico de eritrocitos, leucocitos y macrófagos, polipropilenglicol como antiespumante y un fluoroquímico inerte de alta densidad. Luego se somete a la muestra a una centrifugación a alta velocidad que permite la concentración de microorganismos en el sedimento que se siembra en medios de cultivo específicos. En general, este método permite mejorar en un 25 a 50% la detección de hongos levaduriformes y filamentosos, se considera el método de elección en bacteriemias por
Mico bacterias (pacientes HIV) y permite realizar hemocultivo cuantitativos que son útiles para diagnóstico de bacteriemia relacionada a Catéter Venoso Central.
SISTEMAS AUTOMATIZADOS
Los sistemas automatizados consisten básicamente en botellas con diversos medios de cultivo (aeróbicos, anaeróbicos, hongos, micobacterias y con resinas que captan antibióticos) que se incuban en equipos que agitan constantemente las muestras y que poseen modernos sistemas de detección microbiana. Estos se basan en la detección de productos del metabolismo bacteriano (CO2) mediante técnicas radiométricas, espectrofotométricas, fluorométricas y/o colorimétricas. El computador asociado a los equipos relaciona las mediciones con índices y/o gráficas de crecimiento microbiano que dan un aviso cuando la detección sobrepasa un punto de corte. Las botellas se descargan, se hace una tinción de Gram. y se informan precozmente.
Nota sobre la automatización de los hemocultivo: La automatización ha permitido un aumento de la sensibilidad y por tanto la capacidad diagnóstica, se evita la contaminación, la detección de una amplia gama de microorganismos desde el punto de vista hospitalaria es de suma importancia con las
infecciones nosocomiales y finalmente a nivel global podemos hablar de un abaratamiento de costos.
Las diferencias técnicas entre la metodología convencional y los sistemas automatizados se observan en la figura
IMPACTO DE LA AUTOMATIZACIÓN DE LOS HEMOCULTIVOS
IMPACTO CLÍNICO
La implementación de sistemas automatizados de hemocultivos con monitoreo sensibles y continuos y con agitación constante han llevado a un aumento de la velocidad de detección, con una disminución del tiempo de respuesta y a un aumento de la sensibilidad de los hemocultivos. Esto permite mejorar la capacidad diagnóstica en bacteriemias y un uso más racional de la terapia antimicrobiana
IMPACTO MICROBIOLÓGICO
Ha sido principalmente una disminución de la carga de trabajo con posibilidades de procesar grandes volúmenes de muestras, una disminución de la contaminación cruzada por técnicas de detección no invasivas y un aumento del espectro de microorganismos que se detectan por estos sistemas.
IMPACTO EPIDEMIOLÓGICO
El soporte computacional que poseen estos sistemas permite obtener listados de positividad por pacientes, por muestra, por microorganismo, conocer el rendimiento (% de positividad) y la contaminación de los hemocultivos. Estos datos se pueden evaluar por servicio, por tipos de muestra, diarios, semanales, mensuales y/o anuales, lo que constituyen gran aporte en el control de las bacteriemias intrahospitalarias.
IMPACTO ECONÓMICO
A nivel del laboratorio: aumento del costo por botella (2 a 4 veces el costo de la convencional), disminución de las horas/hombre, disminución de los costos del material de resiembra, disminución del riesgo de cortopunzantes en el operador. Esto conduce a
una disminución del costo global de los hemocultivos negativos siempre y cuando no se considere el costo del equipo. A nivel del hospital: podría conducir a una disminución de los días de uso de antibióticos de amplio espectro (más caros y con mayor toxicidad) y podría significar también una disminución de los días/cama; sin embargo casi no existen publicaciones que avalen estos impactos.
SISTEMAS AUTOMATIZADOS
BACT/ALERT 3D
BacT/ALERT
3D
es
un
perfeccionado
sistema
automatizado
de
detección
microbiológica. Dada su facilidad de uso, BacT/ALERT 3D ahorra tiempo, facilita la formación y previene errores. El Control de Calidad se realiza de forma automática por el sistema. Esto, junto al menor ratio de falsos positivos y un tiempo de detección de organismos más rápido frente a cualquier sistema, permite a los laboratorios hacer más en menos tiempo con una mayor fiabilidad. Además este sistema detecta microorganismos en sangre como también micobacterias y tiene una capacidad para 120 botellas.
FUNDAMENTO
Detecta la reacción del Co2 con material colorimétrico en el fondo cuando vira de verde a amarillo.
BACTEC 900 SERIES FUNDAMENTO Identifica la reacción del CO2 con material fluorescente en el fondo que es proporcional ala luz absorbida. Monitoreada cada 10minutos.
