El presente informe consiste en el procedimiento a llevar a cabo dentro de un laboratorio para “la extracción e identificación de los flavonoides en drogas vegetales”, la droga vegetal usada es el llantén y el proceso de extracción se
realizó bajo el método metanolico en caliente.
Una vez extraída LOS FLAVONOIDES se someterán al proceso de identificación en un equipo denominado lámpara de U.V. y además por otro lado se ara la identificación con el Hcl y cinta de magnesio.
Por otro lado se aran mención de algunos conceptos previos al tema a cerca de los flavonoides, sus usos y aplicaciones en las industrias y que drogas especificas contienen este tipo de componentes.
La extracción e identificación de los flavonoides dentro del laboratorio consiste en un procedimiento sencillo y practico llevado a cabo dentro de un laboratorio. Para su extracción se emplean drogas vegetales que presentan este tipo de componentes como son la malva ,el llantén ,membrillo, manzanilla y otros ,para este caso se empleó como muestra el llantén A este tipo de drogas se le somete en primer lugar al proceso de extracción que consiste en llevar 10g de la droga vegetal previamente triturada y con metanol aun baño maría por 40min aprox .Posteriormente se someterá al proceso de identificación para la cual se requiere decantar la muestra y mezclar con una mínima cantidad de carbón activado con la finalidad de decolorar los pigmentos como la clorofila .seguido se separa en dos tubos en cantidades iguales los cuales uno se podrá someter a su identificación con la lámpara U.V y, el segundo método de identificación se dará con el ácido clorhídrico y cinta de magnesio . Nuestros resultados obtenidos fueron positivas para ambos métodos de identificación pero se pudo extraer una mínima cantidad de flavonoides en el llantén, mientras que los resultados en otras drogas vegetales como es el caso de la malva se pudo identificar gran cantidad de flavonoides.
3.1 GENERALIDADES:
os glucosidos flavonoides son los pigmentos responsables del color otoñal de las hojas y de muchas gamas del amarillo, naranja, rojo y azul en flores. Se pueden encontrar en forma libre o unidas a azúcares formando heterósidos. Las geninas son insolubles en agua pero en forma de heterósido se vuelven hidrosolubles. En el grupo flavonoides se incluyen todos los compuestos fenólicos cuyo esqueleto está formado por quince carbonos, distribuidos en tres anillos.
Clasificación de los flavonoi flavonoides des los flavonoides consisten principalmente en flavonoles, flavonas, catequinas, y flavanonas. las investigaciones de la distribución de los principales flavonoides en los alimentos de naturaleza vegetal han sido publicadas por investigadores importantes. de acuerdo con la nomenclatura de la unión internacional de química pura y aplicada pueden clasificarse, según su esqueleto y vía metabólica,en: flavonoides: Se reconocen 6 y quizás 7 clases principales, según los grupos funcionales que posean: chalconas flavonas flavonoles flavandioles antocianinas, taninos condensados y algunos autores consideran también a las auronas, que otros integran a las chalconas. isoflavonoides.: los dos más conocidos son la genisteína y la daidzeina cuya función es defender a las plantas del ataque de patógenos. neoflavonoides.
Aplicaciones terapéutica terapéuticas s:
Se conoce que los flavonoides con un esqueleto difenilpropano (C6-C3-C6) es antimutagénico y anticancerígeno. Los flavonoides consumidos por el hombre lo protegen del daño de los oxidantes, como los rayos UV e inhiben la oxidación de las lipoproteínas de baja densidad (LDL); también tienen efectos antiinflamatorios y antialérgicos; la contaminación ambiental (minerales tóxicos como el plomo y el mercurio); algunas sustancias químicas presentes en los alimentos (colorantes, conservadores, etc). Como el organismo humano no tiene la capacidad de sintetizar estas sustancias químicas, las obtiene enteramente de los alimentos que ingiere. Los flavonoides no son considerados vitaminas. Al limitar la acción de los radicales libres (q ue son oxidantes), los flavonoides reducen el riesgo de cáncer, , mejoran los síntomas alérgicos y de artritis, aumentan la actividad de la vitamina C, bloquean la progresión de las cataratas y la degeneración macular, evitan los bochornos en la menopausia y combaten otros síntomas. En general el sabor es amargo, llegando incluso a provocar sensaciones de astringencia dependiendo de lo condensados que sean los taninos taninos.. El sabor puede variar dependiendo de las sustituciones presentadas en el esqueleto llegando incluso a usarse como edulcorantes cientos de veces más dulces que la glucosa. Los tomates y los productos a base de tomate contienen principalmente quercetina, campferol, y el flavonol menor miricetina. El contenido total de aglicona de flavonol de diversas variedades de tomate varia de 3.1 a 10.0 mg por kilogramo del peso fresco. El jugo de tomate y la salsa de tomate son ricos en flavonoles, conteniendo 19.8 mg/L y 10.5-13.2 mg/Kg, respectivamente.
Clasificación según su acción : Sus efectos en los humanos pueden clasificarse en:
Propiedades anticancerosas: muchos han demostrado ser eficaces en el tratamiento del cáncer. Se sabe que muchos inhiben el crecimiento de las células cancerosas. Se ha probado contra el cáner de hígado .
Propiedades cardiotónicas: tienen un efecto tónico sobre el corazón, potenciando el músculo cardíaco y mejorando la circulación. Atribuidas fundamentalmente al flavonoide quercetina aunque aparece en menor intensidad en otros como la genisteína y la luteolina. Se ha estudiado que los flavonoides reducen el riesgo de enfermedades cardíacas .
Fragilidad capilar: mejoran la resistencia de los capilares y favorecen el que éstos no se rompan, por lo que resultan adecuados para prevenir el sangrado. Los flavonoides con mejores resultados en este campo son la hesperidina, la rutina y la quercetina.
Propiedades antitrombóticas: la capacidad de estos componentes para impedir la formación de trombos en los vasos sanguíneos posibilita una mejor circulación y una prevención de muchas enfermedades cardiovasculares.
Disminución del colesterol: poseen la capacidad de disminuir la concentración de colesterol y de triglicéridos.
Protección del hígado: algunos flavonoides han demostrado disminuir la probabilidad de enfermedades en el hígado. Fue probado en laboratorio que la silimarina protege y regenera el hígado durante la hepatitis. Junto con la apigenina y la quercetina, son muy útiles para eliminar ciertas dolencias digestivas relacionadas con el hígado, como la sensación de plenitud o los vómitos.
Protección del estómago: ciertos flavonoides, como la quercetina, la rutina y el kaempferol kaempferol,, tienen propiedades antiulcéricas al proteger la mucosa gástrica.
Antiinflamatorios y analgésicos: la hesperidina por sus propiedades antiinflamatorias y analgésicas, se ha utilizado para el tratamiento de ciertas enfermedades como la artritis. Los taninos tienen propiedades astringentes, vasoconstrictoras y antiinflamatorias, pudiéndose utilizar en el tratamiento de las hemorroides
Antimicrobianos: isoflavonoides, furanocumarinas y estilbenos han demostrado tener propiedades antibacterianas, antivirales y antifúngicas.
Propiedades antioxidantes: En las plantas los flavonoides actúan como antioxidantes, especialmente lascatequinas las catequinas del té verde. verde. Durante años se estudió su efecto en el hombre, y recientemente se ha concluido que tienen un efecto mínimo o nulo en el organismo humano como antioxidantes.
Por esas causas son prescritas las dietas ricas en flavonoides, se encuentran en todas las verduras pero las concentraciones más importantes se pueden encontrar en el brócoli , la soja, el té verde y negro, el vino, y también se pueden ingerir en algunos suplementos nutricionales, junto con ciertas vitaminas y minerales. En los frutos, las mayores concentraciones se encuentran en la piel, por lo que es mejor comerlos sin pelar, debidamente lavados previamente. También es importante destacar que muchos de estos compuestos se encuentran en proporciones variables en los diferentes tipos de vinos, siendo responsables del efecto preventivo que tiene el consumo moderado de vino sobre las enfermedades cardiovasculares, cáncer y otras enfermedades degenerativas . Las mayores concentraciones en el tomate están presentes en el de tipo "cherry", y en la lechuga, en la del tipo "Lollo Rosso".
3.2 .Fundamento de los reactivos
EL CARBÓN ACTIVADO: Posee la virtud de adherir o retener en su superficie uno o más componentes (átomos, moléculas, iones) del líquido que está en contacto con él. Este fenómeno se denomina poder adsorbente. La adsorción es la responsable de purificar, desodorizar y decolorar el agua u otos sólidos, líquidos o gases que entren en contacto con el elemento adsorbente. Excelente para remoción de residuales de Cloro y materia orgánica, causantes del olor, sabor y color en el agua.
ETANOL : El compuesto químico etanol, conocido como alcohol etílico, es un alcohol que se presenta en condiciones normales de presión y temperatura como un líquido incoloro e inflamable con un punto de ebullición de 78 °C. El etanol a temperatura y presión ambientes es un líquido incoloro y volátil que está presente en diversas bebidas fermentadas.
ACIDO CLORHÍDRICO : El ácido clorhídrico, ácido muriático o sal fumante es una disolución acuosa del gas cloruro de hidrógeno (HCL). Esta disolución resulta un líquido transparente o ligeramente amarillo, que en estado concentrado produce emanaciones de cloruro de hidrógeno las que combinadas con el vapor de agua del aire son muy caústicas y corrosivas de color blanquecino y muy irritantes a las vías respiratorias. El ácido clorhídrico reacciona con los metales activos o sus sales de ácidos mas débiles para formar cloruros, casi todos los cloruros son solubles en agua por eso el aćido clorhídrico encuentra aplicación como eliminador de los sedimentos, carbonatos de calcio, magnesio, hierro etc .
3.3MATERIALES EN EL LABORATORIO: (USOS)
TUBO DE ENSAYO: El tubo de ensayo es utilizado en la contención de muestras líquidas , como también para disolver o calentar directamente sobre rejillas o planchas de calentamiento o mediante el sujetamiento de pinzas por sustancias corrosivas.
PINZAS: El uso de las pinzas es para sujetar Las pinzas de laboratorio son un tipo de sujeción ajustable, generalmente de metal, que forma parte del equipamiento de laboratorio, mediante la cual se pueden sustentar diferentes objetos de vidrio (tubos,de ensayo ,etc...).
GRADILLA : Una gradilla es una herramienta utilizada para dar soporte a los tubos de ensayos o tubos de muestras. Normalmente es utilizado para sostener y almacenar este material, se encuentra hecho de madera, plástico o metal
VASO PRECIPITADO: Se usan para preparar, disolver o calentar directamente sobre rejillas o planchas de calentamiento. Es recomendable no utilizarlo para medir volúmenes de sustancias, ya que es un material que se somete a cambios bruscos de temperatura, lo que lo descalibra y en consecuencia nos entrega una medida errónea de la sustancia.
MECHERO: MECHERO: Su uso es para proporcionar el calor directo ,son utilizados para proporcionar un nivel de calor moderado una fuente de calor, de baja intensidad, que funciona con alcohol etílico. Como un accesorio de seguridad se utiliza una pieza que en caso de accidente, cubre la entrada de oxígeno, de manera que el fuego se sofoca. Se utiliza en laboratorio para hacer combustión
PROPIPETA: Herramienta de goma, creada especialmente para asegurar la transferencia de líquidos de todo tipo especialmeninte los que poseen propiedades especificas (infecciosos, corrosivos, tóxicos, oloríferos, radiactivos o estériles)
PIPETA: Las pipetas son aparatos de medición de d e volúmenes de líquidos con bastante precisión. Son de cristal y están formadas por un tubo transparente con una graduación (ya sea una o más marcas) y termina en uno de sus extremos en forma cónicas. Hay dos tipos de pipeta, la graduada y la volumétrica:
PROBETA GRADUADA : La probeta es un instrumento volumétrico, que permite medir volúmenes superiores y más rápidamente que las pipetas, aunque con menor precisión. Las probetas suelen ser graduadas, es decir, llevan grabada una escala (por la parte exterior) que permite medir un un determinado volumen, aunque sin mucha exactitud.
MATRAZ: Es utilizado para la preparación de soluciones.Se emplea en el laboratorio para calentar líquidos cuando hay peligro de pérdida de vaporización ,o para titular en el análisis cuantitativo Tiene varios usos pero suele utilizarse para valoraciones, para contener líquidos y para cualquier trabajo en general que no necesite mucha precisión.
BAÑO DE MARÍA: El baño de María es un equipo que se utiliza en el laboratorio para realizar pruebas y procedimientos de incubación,aglutinación, inactivación, biomédicos, farmacéuticos y hasta industriales. Por lo general,se utilizan con agua, pero también permitentrabajar con aceite.. También se pueden seleccionar temperaturas de 100 °C, utilizandouna tapa de características especiales
CAMPANA EXTRACTORA : Las campanas extractoras capturan, contienen y expulsan las emisiones generadas por sustancias químicas peligrosas. El propósito de las campanas extractoras de gases es prevenir el vertido de contaminantes en el laboratorio. Ello se consigue extrayendo el aire del laboratorio hacia el interior de la campana, pasando por el operador. Este es un equipo de protección en laboratorios para aquellos trabajos en los que puedan producirse emanaciones de gases, vapores, aerosoles o polvo en cantidades ca ntidades o concentraciones peligrosas.
CAMPANA DE LUZ UV: En la campana también podemos utilizar la luz ultra violeta para mantener el área estéril hay que mantenerla encendida por 30 minutos, por recomendación no hay que acercarse al la luz por que puede causar quemaduras severas.
IV.PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL: EXTRACCIÓN DE FLAVONOIDES: MUESTRA: Flores de llantén
TÉCNICA OPERATIVA:
1.Pesar 10g de las flores de llantén en un beacker.
2.Triturar las flores de llantén en un mortero.
3. En un matr matraz az con las flores de llantén
4.Llevar a baño maría a 70 grados centígrados or 40 minu minuto tos s a itar itar..
5.Decantar en una robeta.
6.Después de haber decantado, agregar 0.1g de
7.Finalmente filtrar y dividir en dos partes iguales.
IDENTIFICACIÓN DE FLAVONOIDES
Para su identificación empleamos reactivos tal y como se indica .
Ambos tubos contiene los mismos reacctivos
TUUBO B:
TUBO A :
CARBON ACTIVADO
CINTA DE MG ACIDO CLORHIDRICO (HCL)
TUBO A:
Aquí se muestra la identificación de lo flavonoides en la lámpara U.V. donde se observa un color verde fosforescente ligero mostrándonos la poca presencia de flavonoides en el llantén.
TUBO B:
Esta imagen nos muestra la identificación de flavonoides con el HCL mas la cinta de magnesio se observa una coloración rojisa ligera indicando la presencia de flavonoides en poca proporción.
Se puede afirmar que los procesos de extracción e identificación de los flavonoides presentes en las drogas vegetales son muy sencillos y prácticos. Estos componentes se encuentran en las drogas vegetales en cantidades diferenciadas tal y como se mostró con la malva y el llantén puesto que en la malva se obtuvo mayor cantidad de estos. Los flavonoides son pigmentos naturales son venotonicos mejoran la circulación de la sangre y tienen la propiedad en poca proporción de ser laxantes.
Con respecto a los procedimientos operacionales para la extracción e identificación de flovonoides de las drogas vegetales se pueden se pueden plantear las siguientes recomendaciones:
Los equipos utilizados deben ser construidos de materiales que no reaccionen con los reactivos empleados en el proceso, deben ser de acero metálico y los materiales de vidrio perfectamente bien lavados para que no suceda ninguna reacción.
Una vez obtenido los flavonoides de las D.V .y para llevarlo al proceso de identificación identificaci ón debe asegurarse que se haya adicionado el carbón activado que servirá para decolorar los pigmentos (clorofila) ,esto nos servirá para su fácil identificación ya que la presencia de coloraciones de los pigmentos no permitiría su identificación .
el proceso de identificación con HCL se debe llevar acabo con sumo cuidado mas que nada con la manipulación del reactivo por ser altamente corrosivo (uso de la campana estractora ).
durante la extracción de flavonoides de las D.V. se debe tener en cuenta la correcta y constante agitación para lograr su extracción total tomando en cuenta en tiempo necesario y establecido en la guía de practicas
1. ¿Qué drogas drogas ricas ricas en flavonoides flavonoides existen?
LA RUTINA
LA HESPERIDINA
LA QUERCETINA
LA PLANTA DE MANZANILLA
BOLSA DE PASTOR
EL SERPOL
EL SAÚCO
LA PLANTA DE LA BORRAJA
2. Investigar los fundamentos de las reacciones quimicas
FUNDAMENTO DE LAS REACCIONES Se encuentran muchas veces acompañados de enzimas capaces de hidrolizarlos. Para evitar esto deben inactivarse previamente a la extracción, lo cual se logra mediante: a. Tratamiento de la planta con vapor de agua. b. Poniendo el material fresco o seco hirviéndolo en metanol al baño maria por 35 minutos. c. Tratando el material vegetal con ácido clorhídrico. d. Realizando la extracción inicial a temperatura muy baja.
METANOL
Los glucosidos flavonoides son solubles en en metanol ,etanol y otros solventes organicos ,es por ello que es utilizado para su extracción, y la solubilidad depende de su forma.
CARBÓN ACTIVADO:
Carbón activado es utilizado para decolorar los pigmentos que tiene la droga vegetal y darnos un color característico .
HCL Y CINTA DE MG :
En la reacción al poner en contacto la muestra con el acido clorhídrico y la cinta de magnesio se genera hidrogeno ,este ultimo reduce flavonoides desarrollando coloraciones que van de rojo a rosado r osado .
http:www.biomoleculas.com http:www.wikipedia.com
es.wikipedia.org/wiki/Glucósido
