F A C U L TA D D E C I E N C I A S D E L A S A L U D CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
RED NACIONAL UNIVERSITARIA UNIDAD ACADÉMICA DE SANTA CRUZ
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
BIOQUÍMICA Y FARMACIA CUARTO SEMESTRE
GUIA DE PRACTICAS DE LA ASIGNATURA DE FARMACOGNOSIA
Elaborado por Dra! V"#$or"a Mor%&La'ar$( G()$"%& A#ad*+"#a II ,-./0
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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA 1 GIP 2 / LABOATORIO 2 / TITULO Nor+a) d( B"o)(34r"dad FEC5A DE ENTREGA -6 )(+a&a d( #la)() PERIODO DE EVALUACI7N EVALUACI7N 86 )(+a&a d( #la)()
No entrar en el laboratorio sin que esté presente el profesor o responsable. Seguir las instrucciones del profesor o persona responsable, no se arriesgue, si no sabe pregunte al profesor. Estudiar cada experiencia antes de llevarla a cabo. Mantener una actitud responsable, no se deben gastar bromas, correr ni gritar. Comprobar la ubicación de todos los materiales, reactivos e insumos de laboratorio bserve atentamente las etiquetas de los reactivos antes de utili!arlos "resuma que todos los reactivos son venenosos, no los pruebe, toque o #uela a menos que reciba instrucciones espec$ficas de #acerlo. %otular debidamente todos los materiales de traba&o para evitar confusiones. No contaminar los reactivos, en especial los que se encuentran en su envase original. No se debe mantener reactivos inflamables cerca del fuego. 'l calentar un tubo de ensa(o ensa(o nunca diri&a la boca #acia el cuerpo cuerpo de otra persona. No distraiga a sus compa)eros de traba&o. 'l botar residuos al desag*e de&e caer abundante agua. +avar profusamente todos aquellos materiales que #an estado en contacto con sustancias corrosivas o toxicas. Nunca ec#e agua sobre un cido concentrado. No pipetee los reactivos con la boca. En caso de sufrir alg-n accidente o quemadura informe inmediatamente al profesor. No comer, beber o fumar en el laboratorio de prcticas No usar lentes de contacto. No debe usar pulseras colgantes o prendas sue ltas ued ueda a comp comple leta tame ment nte e pro# pro#ib ibid ido o la me!c me!cla la de cualq cualqui uier er sust sustan anci cia a que que no este este debidamente indicada en su gu$a de laboratorio.
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El mesón de traba&o ( los materiales utili!ados deben quedar limpios al finali!ar la prctica
0lavar con agua ( detergente. +avar las manos antes de abandonar el laboratorio.
INSTRUCCIONES GENERALES DEL LABORATORIO 1. El ingreso ingreso a laborator laboratorio io es puntual puntual ( de forma forma ordenada ordenada.. /. El estudia estudiante nte que no ingrese ingrese a labora laborator torio io no puede puede present presentar ar su inform informe e de labora laborator torio io porque no estuvo presente en la prctica. 2. "ara poder poder ingresa ingresarr a laborator laboratorio io el estudiant estudiante e deber deber estar provisto provisto de3 a 4na 4na bata bata bla blanc nca a mang manga a larg larga a b "antal "antalón ón ( !apa !apatos tos cerrad cerrados. os. c Cuaderno Cuaderno de anotaciones anotaciones 0libreta 0libreta peque)a peque)a de bolsill bolsillo o d 4n toalla toalla peque) peque)a a para para limpie! limpie!a a e "apel "apel absor absorben bente te 0#igi 0#igiéni énico co o 5leene 5leenex x f
4na 4na ca& ca&a a de de fós fósfo forros
g 4n lapi lapice cero ro ( un un lpi lpi!! # 4n marc marcad ador or de vidr vidrio io i
El pelo recogido ido
&
4n relo& en la mu)eca de la mano mano
6. Se tomara tomara un examen examen previo oral oral antes de iniciar iniciar cada prctic prctica a de laboratorio laboratorio para para verificar verificar si el estudi estudiant ante e conoce conoce el desarr desarrollo ollo completo completo de la prcti prctica ca as$ como tambié también n su fundamentación teórica, esto buscando un desarrollo seguro de la prctica ( garanti!ar que se reali!a un aprendi!a&e significativo ( no una mera repetición de lo escrito. 7. +os mesones mesones de traba&o traba&o deben deben estar limpios limpios ( libres libres de cualquier cualquier ob&eto ob&eto a&eno a la prctic prctica, a, no se puede colocar sobre ellos bolsos, moc#ilas, ropa, cuadernos, maquilla&e, celulares, etc. 8. "ara "ara el traba& traba&o o en labora laborator torio io el primer d$a d$a de clases clases se formara formaran n grupos grupos de laborato laboratorio rio,, que que debe deben n mant manten ener erse se #ast #asta a el fina final,l, regis registr tran ando do el doce docent nte e los nomb nombre ress de los los integrantes. 9. +os estudi estudiant antes es deben complet completar ar con todo lo regist registrad rado o durant durante e la prctica prctica,, los :ips, :ips, form ormular ular
la
concl onclus usió ión, n,
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bibl biblio iogr graf af$a $a.% .%EC EC% %;' ;'% % 4 4E E +S +S :<"S <"S SE SE++ SE++'% '%'N 'N EN C';' C';' C+'S C+'SE E ;E +'=% '=%' '>%< %< ? ;E=E ;E=EN N "%E "%ESEN SEN>'%SE %SE '+ %<. A. +os estudiant estudiantes es al recibir recibir los materiales materiales de de laboratorio laboratorio deben deben verificar verificar el estado estado de estos estos ( si #ubiera alguna rotura o deterioro informar al responsable. 'l terminar la prctica los materiales deben ser entregados en las mismas condiciones. Si alguno de los materiales
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se rompiera o de&ara caer el grupo a cargo se #ace responsable de su devolución a la universidad en la siguiente clase ( deber pasar por la &efatura de laboratorio a registrar el nombre. B. 'l recibir sus materiales debe lavarlos con detergente ( cepillo, reali!ar un primer en&uague con agua de grifo, un segundo en&uague con agua destilada ( finalmente con etanol al 9 D, para facilitar el secado. ;e la misma forma se reali!a la limpie!a del mesón. 1. El mesón de traba&o ( los materiales, se deben entregar lavados con detergente ( agua de grifo, ( secos.
CUESTIONARIO 1.- Dibuje una etiqueta de reactivos de laboratorio con las partes que debe tener. R.-
2.- Dibujar los pictogramas de seguridad utilizados en laboratorio R.-
3.- Investigar cuales son los residuos que se eliminan a la bolsa roja, negra y amarilla azul!. R.-
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".- Indique en laboratorio como procede a diluir una acido concentrado en laboratorio. R.-
#.- Investigar que se debe realizar en caso de accidente con un $cido y un $lcali por v%a e&terna y por v%a interna. R.-
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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA 1 GIP 2 LABORATORIO TITULO E)$4d"o d( Pla&$a) +(d"#"&al() FEC5A DE ENTREGA 96 )(+a&a d( #la)() PERIODO DE EVALUACI7N 06 )(+a&a d( #la)() -!/!1 OB:ETIVOS -
;escribir el origen ( distribución de plantas medicinales ms utili!adas en nuestro medio.
-
compuestos qu$micos presentes con la acción farmacológica de la planta. Sociali!ar los usos farmacológicos que tiene l a especie vegetal estudiada.
-!-!1 PARTE E;PERIMENTAL Cada grupo de laboratorio debe reali!ar una investigación de una planta medicinal en base a los siguientes parmetros3 -
Nombre cient$fico ;roga vegetal utili!ada ;escripción botnica de la planta rigen ;istribución Necesidades nutricionales ( climatológicas durante el cultivo Compuestos qu$micos presentes ( su relación con la actividad farmacológica que presenta
-
la especie vegetal ormas farmacéuticas
Cal"<"#a#"%&
"resentación del tema ;ominio del tema "edagog$a de ense)an!a ;roga vegetal Elementos complementarios
PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA 1 GIP 2 9
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LABORATORIO 9 TITULO E=$ra##"%& ( "d(&$"<"#a#"%& d( al+"d%& FEC5A DE ENTREGA 86 )(+a&a d( #la)() PERIODO DE EVALUACI7N 86 )(+a&a d( #la)() 9!/!1 OB:ETIVOS •
Extraer el almidón proveniente de diferentes fuentes naturales 0cereales ( tubérculo ;eterminar el origen vegetal del almidón seg-n sus caracter$sticas microscópicas por
•
comparación con datos bibliogrficos.
•
9!-!1 FUNDAMENTO TEORICO 9!-!/!1 Cara#$(r>)$"#a) ?4>+"#a) El almidón, es un polisacrido de reserva de vegetales. Se trata de un pol$mero de glucosa, formado por dos tipos de moléculas3 amilosa 0/ a 2D, ligadas a través de un enlace F 01 G 6 para formar un pol$mero lineal, que se encuentra enrollado en forma de #élice, ( amilopectina 0A a 9D, formado por enlaces F 01 H 6 ( F 01 H 8 formando un pol$mero altamente ramificado. El almidón da una coloración a!ul intenso con soluciones de (odo. "uede ser #idroli!ado mediante la acción en!imtica 0amilasa o en presencia de soluciones acidas, dando moléculas de glucosa, que fcilmente puede ser identificado con el reactivo de fe#ling, >ollens ( otros.
9!-!-!1 Prop"(dad() <>)"#a) El almidón se presenta en masas irregulares, angulosos, en forma de polvo blanco. Es insoluble en agua fr$a, pero forma una solución coloidal por ebullición, por enfriamiento se forma una &alea trasl-cida conocido como engrudo de almidón. El engrudo de almidón se colorea en a!ul intenso con solución de (odo, color que desaparece por calentamiento a B2 IC, reapareciendo por enfriamiento.
9!-!9!1 Cara#$(r>)$"#a) M"#ro)#%p"#a) El almidón formado en la célula vegetal, se acumula en forma de granos que van creciendo a partir de un punto o #ilo, que puede ser central o excéntrico. +os granos con #ilo excéntricos suelen ser ms largos que anc#os.
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F"34ra - :rnulos de almidón en la celula El grano de almidón se forma a partir de capas sucesivas que giran alrededor del #ilo, pudiendo observarse claramente la presencia de anillos o estriaciones concéntricas, siendo estas importantes para la caracteri!ación e identificación. El aspecto final del grano de almidón es variable ( caracter$stico de un vegetal, como se puede d etallar a continuación3
a@ Al+"d%& d( Papa "roveniente del tubérculo Solanumtuberosum +. 0Solanceas. Son granos aislados de forma ovoide, tama)o variable, #ilo excéntrico situado en la parte ms estrec#a del grano ( estr$as visibles.
b@ Al+"d%& d( Ma>' "roveniente de los frutos del Zea mays +. 0:ram$neas. Son granos aislados o en grupos de / a 2, forma poliédrica, tama)o ms o menos uniforme 017 J, con #ilo central ( sin estr$as visibles.
#@ Al+"d%& d( Arro' "roveniente de Oryza sativa +. 0:ram$neas. Son granos aislados o compuestos, estos granos compuestos se disocian fcilmente frotando ligeramente el cubre sobre el portaob&eto. orma poliédrica, tama)o alrededor de 7 J, # ilo central, sin estr$as visibles.
d@ Al+"d%& d( Tr"3o "roveniente de Triticumsativum +. 0:ram$neas. Son granos aislados de forma ms o menos redondeada, tama)o variable, granos peque)os de / H / J ( granos grandes de alrededor de 2 J, #ilo central, estriaciones concéntricas pero bien débiles.
(@ Al+"d%& d( Y4#a "roveniente del tubérculo Manihot utilísima 0Eurp#orbiaceae. Son granos de / a 9 corp-sculos reunidos. +a superficie de contacto de unos con otros son planas, la ma(or$a son subesféricas o redondasGpoliédricas, presenta #ilo punteado o #endido ( estriaciones concéntricas.
<@ Al+"d%& d( L(34+"&o)a) :ranos de forma generalmente arri)onada ( estratificaciones concéntricas mu( visibles. En el centro presentan una gran #endidura de la cual parten #acia la periferia del grano una serie de ranuras radiales, cortas ( anc#as tomando el aspecto de palo bifurcado, todas las leguminosas tienen el mismo tipo de almidón diferencindose solo en el tama)o.
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F"34ra - :rnulos de almidón ' "apaK = Ma$!K C 'venaK ; >rigo 9!9! PARTE PRCTICA +as muestras vegetales a utili!ar sern proporcionadas por el grupo L 1 de laboratorio, sin ninguna excusa. ' ' ' '
1A 5ilo 'rro! 1A 5ilo Ma$! blanco 1A 5ilo trigo ?uca
' 1 "apa ' 1 Cuc#illo ' 1 %allador
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' NOTA IMPORTANTE Si el grupo asignado no trae las muestras vegetales se queda sin
nota para esta prctica, en informe, examen previo ( examen de laboratorio. ' Cada grupo de laboratorio debe llevar su muestra de almidón extra$do ( traerla todas las
clases #asta finali!ar esta prctica. ' − −
E;PERIENCIA N / E;TRACCION DEL ALMIDON
' −
PROCEDIMIENTO /! Si se parte de cereales, triturar a polvo grueso, si es a partir de tubérculos, primeramente lavar ( rallar para #acer como especie de papilla. -! En primer caso 0polvo triturado, tami!ar. 9! El polvo obtenido, o la papilla, se de&a remo&ar en agua destilada, para que los granos de almidón 0parte solida pase a la fase liquida 0agua destilada. ! ;e&ar en reposo durante media #ora para completar la disolución de los granos de almidón en la fase liquida. 0! +avar con tres aguas, las aguas del lavado se guardan, debido a que los granos se
8! ! ! !
encuentran sobrenadando en este medio. ;e&ar reposar durante media #ora, los granos de almidón sedimentan como polvo blanco. ;ecantar toda el agua. Se recoge todo el polvo blanco obtenido en papel filtro. Se de&a secar.
−
E;PERIENCIA N -
−
IDENTIFICACION MICROSCOPICA
' +os almidones pueden ser caracteri!ados mediante un examen microscópico. +os granos
de almidón tienen un tama)o, forma ( estructura determinada, seg-n su procedencia. "or lo que es posible distinguir los almidones procedentes de especies distintas seg-n sus caracter$sticas.
a@ Se debe observar las siguientes caracter$sticas3 b@ Estado del grano 0aislado o en masas de formas definidas. #@ orma ( dimensión. d@ "resencia o ausencia de #ilo, su forma ( posición. (@ "resencia o ausencia de estr$as. ' −
PROCEDIMIENTO
/! %eali!ar un monta&e con agua -! En un portaob&eto, colocar una gota de agua destilada 9! Suspender en esta gota una peque)a porción de la muestra ! Cubrir con un cubre ob&eto, evitando la formación de burbu&as de aire 0! bservar al microscopio con ob&etivo 6 @
8! ;escribir las caracter$sticas observadas ' −
E;PERIENCIA N 9
' −
CARACTERIZACION QUIMICA
' ' +a amilosa reacciona con el (odo formando un comple&o de color a!ul intenso, mientras
que la amilopectina presenta coloración a!ulGvioleta en presencia de (odo. ' −
5IDR7LISIS ACIDA DEL ALMIDON
' +a #idrólisis acida del almidón tiene lugar utili!ando cidos inorgnicosK esta degradación
acida, da lugar a varios compuestos intermedios, antes de obtener la glucosa. ' ;urante el proceso de la #idrólisis tanto la amilosa como la amilopectina se van
desdoblando o rompiendo los enlaces F 01G6 en el primer caso, ( los enlaces F 01G8 en el segundo caso, dando lugar a la formación de polisacridos de cadena corta pero ramificadas las llamadas dextrina, que seg-n el color que dan al reaccionar con el (odo en solución de +ugol, se denomina3
−
'milodextrina O P %o&o violeta Eritrodextrina O P %o&o 'crodextrina O P 'marillo 0color del lugol
PROCEDIMIENTO
/! >omar 1g de almidón obtenido, preparar una suspensión en 1 ml de agua, obteniéndose una suspensión lec#osa. -! +levar a ebullición / ml de agua, verter los 1 ml de suspensión del almidón, #asta que se torne transparente la suspensión. 9! >omar de esta solución 7 ml ( dividir en dos tubos, en el primer tubo se a)ade 1 gota de lugol, al segundo tubo .7 ml del reactivo de fe#ling 0 e#ling '3 CuS6 disuelto en Q/ ( e#ling =3 NaQ ( tartrato NaGR disueltos en agua , observar las reacciones 0fe#ling reacciona en medio bsico. ! 'l resto de la solución que continua en ebullición se agrega 7 ml de QCl concentrado, pasados 7 minutos se procede a tomar 7 ml. Se divide en dos tubos ( se siguen los mismos pasos indicados en la anterior etapa. 0! Continuar con los pasos (a indicados #asta observar en el tubo con la solución de lugol un color amarillo ( el tubo con el reactivo de fe#ling aparece un precipitado anaran&ado o ro&o ladrillo, que indican que se llevó a cabo la #idrólisis total, dando por consiguiente la siguiente reacción. ' CuS6 O
/NaQ
Cu0Q/
O
Na/S60a!ul
Cu 0Q/ O
%CQ
Cu/
O
%CQOQ/0ro&o ladrillo
8! Esta reacción indica la presencia de moléculas de glucosaK dando lugar por consiguiente a la reacción de óxido reducción. ' −
9!! DESARROLLO DE LA PRCTICA
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
− 9!0!1 CONCLUSION
' ' ' ' ' ' ' ' ' − 9!8!1 CUESTIONARIO
' ' 1.G %ealice un flu&ograma de la extracción del almidón ' %.G ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' /.G +a #idrolisis del almidón, se reali!a mediante cidos fuertes ( en!imas, indique cul de
ellas produce una #idrolisis parcial ( cul de ellas produce una #idrolisis total, explique el proceso. ' %.G ' ' ' ' ' ' '
' ' 2.G
durante su identificación por fe#ling ' %.G ' ' ' ' ' ' ' 6.G "uede usarse QN2 como medio acido para la reacción de fe#lingT ' %.G ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' −
9!!1 BIBLIOGRAFIA
' ' ' ' '
' ' ' ' ' ' ' ' '
' ' ' ' ' ' ' ' ' '
− PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD −
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' −
LABORATORIO
' − −
TITULO Fa#$or() ?4( "&
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PERIODO DE EVALUACI7N /-6 )(+a&a d( #la)()
' −
!/! OB:ETIVO
' Evaluar el proceso de extracción de los productos naturales a partir de fuentes vegetales
en función de factores tales como3 tipo de solvente, tiempo de extracción, numero de extracciones, pQ del medio ( estado de a gregación de la muestra. ' −
!-! FUNDAMENTO TEORICO
' El termino extracción significa retirar de la forma ms selectiva ( lo ms completamente
posible las sustancias o fracciones activas contenidas en una muestra vegetal. ' −
!9! FACTORES QUE INFLUYEN EN EL PROCESO DE E;TRACCION
' Existen muc#os factores que influ(en en el proceso de extracción, entre ellos tenemos3 −
!9!/! SolH(&$(
' El solvente utili!ado debe ser eficiente ( selectivo, gracias a la selectividad se puede
extraer la sustancia deseada 0principios activos, la selectividad depende de la polaridad del solvente, por lo tanto, conociendo la polaridad de las sustancia a extraer, se determina el tipo de solvente a utili!ar en la extracción. Cuando no se conoce la polaridad de la sustancia a extraer, sometemos la muestra vegetal a varias extracciones consecutivas con solventes de polaridad creciente, obteniendo as$ una extracción fraccionada, donde cada fracción contiene también compuesto de polaridad creciente. −
!9!-! E)$ado d( d"H")"%& d( la dro3a
' Cuanto menor sea el tama)o de las part$culas, ma(or la superficie de contacto entre la
sustancia a extraer ( el solvente extractor. −
!9!9! A3"$a#"%&
' +a eficiencia de extracción, es función del equilibrio de saturación del solvente en las
proximidades de la membrana celular, por lo tanto, es evidente la a(uda de agitación en el cambio de solvente extractor, para alcan!ar nuevo equilibrio de saturación. −
!9!! T(+p(ra$4ra
' :eneralmente el aumento de temperatura, aumenta la solubilidad de las sustancias, por lo
tanto, la eficiencia de extracción. −
!9!0! p5
' Muc#as sustancias contenida en las células vegetales, tienen propiedades acidas o
bsicas, consecuentemente es recomendable su extracción en solventes en medio acido o bsico. −
!9!8! O$ro)
' Entre otros factores tenemos3 el tiempo de extracción, numero de extracciones, etc. ' −
!! PARTE E;PERIMENTAL
' +as muestras vegetales que se utili!aran en esta prctica deben ser tra$das a laboratorio
por el grupo L /. ' +as muestras vegetales a utili!ar3 ' S(+"lla) d( 4r4# 0Bixa Orellana ' 5oJa) d( #o#a 0Erithroxylum coca ' +os metabolitos a extraer ( su correspondiente prueba de reconocimiento son3 pigmentos
carotenoides del uruc- mediante colorimetr$a visual ( alcaloides de la coca mediante reactivo cidos. ' NOTA IMPORTANTE Si el grupo asignado no trae las muestras vegetales se queda sin
nota para esta prctica en informe de laboratorio, examen previo ( examen de laboratorio. −
!!/! E;PERIENCIA No /
−
E=$ra##"%& (& <4"%& d(l $"po d( )olH(&$(
Colocar 7 semillas de uruc- en cada uno de 2 tubos de ensa(o. 'gregar al primero / ml de agua destilada 0agitar 'gregar al segundo tubo / ml de etanol al B8I 0agitar 'gregar al tercer tubo / ml de 'cetona 0agitar bservar en que solvente se reali!a la ma(or e xtracción de carotenoide
−
!!-! E;PERIENCIA No -
−
E=$ra##"%& (& <4"%& d(l $"(+po d( (=$ra##"%&
Colocar 7 semillas de uruc- en 2 tubos de ensa(o 'gregar a cada tubo / ml de etanol al B8D
;e&ar macerar el primer tubo por 1 minuto ( luego separa el sobrenadante ;e&ar macera el segundo tubo por 2 mi nutos ( luego separar el sobrenadante ;e&ar macerar el tercer tubo por 8 minutos ( luego separar el sobrenadante
−
!!9! E;PERIENCIA No 9
−
E=$ra##"%& (& <4"%& d(l &+(ro d( (=$ra##"%&
− −
!!! E;PERIENCIA No E=$ra##"%& (& <4"%& d(l p5 d(l +(d"o ubo 1, >ubo / ( >ubo 2 Colocar 7 semillas de uruc- en cada uno de los tres tubos de ensa(o 'l >ubo 1 agregar / ml de Q/ 0d 'l >ubo / agregar / ml de solución acuosa de QCl 'l tubo 2 agregar / ml de solución acuosa diluida de NaQ ;e&ar extraer durante 7 minutos con agitación ocasional bservar e interpretar los resultados obtenidos
' %epetir este mismo procedimiento utili!ando #o&a de coca triturada en lugar de semillas de
uruc-. − !!0! E;PERIENCIA No 0 − E=$ra##"%& (& <4"%& d(l ()$ado d( a3r(3a#"%& d( la +4()$ra ubo 1 ( >ubo / En el >ubo 1 colocar una #o&a de coca entera 'gregar / ml de NaQ diluido ;e&ar extraer por 7 minutos con agitación ocasional 'l >ubo / colocar un #o&a de coca triturada 'gregar a este tubo / ml de NaQ diluido ;e&ar extraer por 7 minutos con agitación ocasional bservar e interpretar los resultados obtenidos comparando los tubos ' −
' ' ' ' ' ' ' ' ' '
!0! DESARROLLO DE LA PRACTICA
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
' ' ' ' ' ' ' −
!8! CONCLUSION
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' −
!! CUESTIONARIO
'
1. Explique cul es el medio de me&or extracción para alcaloides. ' %. ' ' ' ' '
/. Explique porque al agitar se logra me&or extracción de la muestra vegetal ' %. ' ' ' ' ' '
2. +a Bixa Orellana, es acida o bsica, explique cómo #a llegado a esta conclusión ' %. ' ' ' ' '
6. %ealice los clculos para preparar 1/7 ml de solución ,/ N en Q/S6, a partir de un cido concentrado de laboratorio con un BAD de pure!a ( 1,A6 gml de densidad. ' %. ' ' ' ' ' ' '
' ' ' ' ' ' '
7. %ealice los clculos para preparar 97 ml de solución ,// M de RQ ' %. ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' −
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
!! BIBLIOGRAFIA
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TITULO E=$ra##"%& d( #a<(>&a
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FEC5A DE ENTREGA /. )(+a&a d( #la)()
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PERIODO DE EVALUACI7N /- )(+a&a d( #la)()
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0!/!1 OB:ETIVOS
Extraer la cafe$na a partir de té negro, utili!ando d iferentes métodos. Caracteri!ar microscópicamente los cristales de cafe$na.
− 0!-!1 FUNDAMENTO TEORICO
' +a cafe$na es un alcaloide identificado casi simultneamente por %unge 01A/, %obiquet
01A/1 en el café. +uego, unos a)os después Mulder ( Wobstl demostraron que la cafe$na era idéntica a la te$na obtenida del té. ')os después, se reconoció que la guaranina obtenida de la pasta de guaran no era ms que cafe$na, es as$, que la cafe$na est presente en diferentes especies como el mate, té, nue! de cola, semillas de cacao. El porcenta&e de cafe$na en diferentes especies vegetales se muestra en el siguiente cuadro3 ' −
E)p(#"( V(3($al ' >é com-n
−
K d( #a<(>&a ' /.6 H 2.7
' >é perla
' 6
' >é Qimala(a
' 6
' Semillas de guaran ' Semillas de café
' 2./ ' /
' Mate ' Nue! de cola ' Semilla de cacao ' −
0!-!/!1 PROPIEDADES FISICAS
' +a cafe$na se presenta como un polvo incoloro o agu&as resplandecientes, flexibles, sabor
amargo, es soluble en agua ( muc#o ms soluble en presencia de compuestos como cido c$trico, ben!oatos, silicatos ( bromuros. Sometida al calentamiento sublima sin descomponerse. ' −
0!-!-!1 PROPIEDADES QUIMICAS
' +a cafe$na es conocida sistemticamente como 1, 2, 9 G trimetilxantina, es un
alcaloide, esto quiere decir que es un producto natural que contiene nitrógeno ( que presenta propiedades bsicas 0o alcalinas ' +a cafe$na pertenece a una familia de productos naturales llamados @'N>
que son estimulantes que excitan al sistema nervioso central ( los m-sculos esqueléticos, despe&ando la mente ( disminu(e la sensación del sue)o. ' +a cafe$na se #a extra$do principalmente del té, #o&as de arbusto Camelia sinensis
0theasinensis) , de la familia de las teceas. Es originaria de los altos valles del sudeste de 'sia ( se cultiva en la
0!-!9!1 METODOS DE E;TRACCION
' Existen dos métodos de extracción.
a@ Por #o#"+"(&$o pr(#"p"$a#"o&() )4#()"Ha) ' Esta técnica se basa en la extracción de la cafe$na utili!ando un solvente a la
temperatura de ebullición del solvente durante 7 H 1 minutos. +uego el extracto se purifica para eliminación de impure!as por precipitaciones sucesivas.
b@ Por )4bl"+a#"%&
' .7 H 1 ' /.6 ' >ra!as
' Esta técnica se basa en una de las propiedades que posee la cafe$na, que al ser
calentada sublima, es decir pasa al estado de vapor, el cual se solidifica al ponerse en contacto con una superficie fr$a. ' +' S4=+
cantidad determinada de energ$a por unidad de masa ( pasa directamente al estado vapor. ' El calor de sublimación de una sustancia, es la cantidad de calor necesaria para
pasar a la fase vapor una unidad de masa de dic#a sustancia a una determinada temperatura que es igual a la suma de sus calores de fusión ( vapori!ación a esta temperatura. ' +a sublimación es usualmente una propiedad de sustancias relativamente no
polares ( las cuales tienen también una estructura altamente simétrica. ' −
0!9!1 DESARROLLO DE LA PRCTICA
' +as muestras vegetales que se utili!aran en esta prctica deben ser tra$das a laboratorio
por el grupo L 2. ' +as muestras vegetales a utili!ar3 ' 5oJa) d( $* &(3ro #oop(r#o$a / #aJa@4 o$ro $* &(3ro. ' NOTA IMPORTANTE Si el grupo asignado no trae las muestras vegetales se queda sin
nota para esta prctica en informe de laboratorio, examen previo ( examen de laboratorio. −
E;PERIENCIA 2 /
−
E;TRACCION LIQUIDO1LIQUIDO DE CAFEINA En un vaso precipitado colocar aproximadamente 2g de té negro ( 1 ml de agua destilada caliente, llevar a ebullición. En una probeta colocar / ml del filtrado ( agregar 1 ml de acetato de plomo para precipitar los taninos. iltrar o centrifugar para separar el precipitado, luego se vuelve a agregar el acetato de plomo ( filtrar, esta operación se repite #asta que no apare!ca ms el precipitado. En un tubo de ensa(o tomar .7 ml de sobrenadante ( agregar el reactivo de Ma(er. "ara identificar la cafe$na como alcaloide. El resto del sobrenadante se coloca en un embudo de separación para reali!ar tres extracciones o lavados l$quidoHl$quido con 7 ml de cloroformo cada una. El cloroformo posee una densidad ma(or que la del agua por ello estar en la parte de inferior del embudo. +a cafe$na se encuentra disuelta en cloroformo. Se recoge la fase orgnica en un vaso precipitado ( de&ar que evapore todo el solvente a temperatura ambiente, donde la cafe$na cristali!ar en forma de agu&as.
−
E;PERIENCIA 2 -
− • • • •
SUBLIMACION DE LA CAFEINA Colocar / a 2 gr de té 0C"E% C><' en una vaso de precipitado de /7 ml Cubrir la boca del vaso precipitado con un vidrio de relo&. Encima del vidrio de relo& colocar #ielo Calentar el vaso suavemente, la cafe$na sublimar ( quedara ad#erida en la superficie inferior del vidrio de relo&o en las paredes del vaso precipitado en forma de agu&as,
•
observar. 0tener cuidado de que no caiga agua a las paredes del vaso. Colocar los cristales de cafe$na formados en un portaob&eto ( observar en el microscopio
•
con los ob&etivos 1@ ? 6@ Esquemati!ar la forma de los cristales
− E;PERIENCIA 2 9 − PRUEBA DE LA MURE;IDA •
En una capsula de porcelana se coloca una peque)a cantidad de cafe$na muestra ( 1 ml de QN 20c, ( se pone a calentar por encima de una malla con amianto en un mec#ero de bunsen #asta que est me!cla se seque, se obtendr un residuo amarillomosta!a en la capsula.
•
Se de&a enfriar la capsula #asta temperatura ambiente.
•
posteriormente se le agregan unas gotas de NQ 20c, ( observar. +a prueba confirma la presencia de cafe$na si aparece un color ro&o p-rpura.
−
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
0!!1 DESARROLLO DE LA PRCTICA
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
' ' −
0!0!1 CONCLUSION
' ' ' ' ' ' ' ' −
0!8!1 CUESTIONARIO
1. Cul es la fórmula qu$mica desarrollada de la cafe$naT ' %. ' ' ' ' ' '
/. %ealice un flu&ograma de la extracción de cafe$na por ambos métodos de extracción. ' %. ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
2. ué actividad biológica tiene la cafe$naT ' %. ' ' ' ' ' '
6. ué actividad farmacológica tiene la cafe$naT ' %.
' ' ' ' ' ' '
7. Cules son sus principales usosT ' %. ' ' ' ' ' ' −
0!!1 BIBLIOGRAFIA
' ' ' ' ' ' ' '
' ' ' ' ' ' ' ' − PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD −
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA 1 GIP 2 8
' −
UNDAD VII Labora$or"o No 8
−
TITULO E=$ra##"%& d( a#("$() ()("al()
−
FEC5A DE ENTREGA //6 )(+a&a d( #la)()
−
PERIODO DE EVALUACI7N /- )(+a&a d( #la)()
' −
8!/! OBETIVO
-
%eali!ar una extracción adecuada de aceite esencial de una muestra vegetal determinada.
-
Comparar el porcenta&e de extracción experimental con el porcenta&e de extracción teórica. 'nali!ar las causas por las que pudieron darse las diferencias experimentales ( el valor teórico.
−
8!-!1 FUNDAMENTO TEORICO
' +os aceites esenciales son productos qu$micos generalmente olorosos, encontrados en
diversas partes dela planta 0#o&as, flores, frutos, semillas, etc.. ;ebido a que se evaporan por exposición al aire a temperatura ambienteK se llaman aceites voltiles. Cuantitativamente, los contenidos de aceites esenciales en las plantas, son mu( ba&os, o inferiores al 1D, con excepción de los botones floreales del clavo que contiene # asta 17D. ' +as esencias se utili!an por su acción terapéutica 0por E&. Eucalipto, man!anilla, #ino&o,
tomillo, etc., como aromati!antes 0esencia de limón ( menta, en perfumer$a 0esencia de rosas o como materias primas de partida para s$ntesis de otras esencias 0esencia de trementina. ' −
8!-!/!1 F4"%& d( lo) a#("$() ()("al() (& la pla&$a
' +a volatilidad ( el marcado olor de los aceites esenciales constitu(en un medio de defensa
de las plantas contra depredadores, cumple un papel como atra(entes de insectos con fines de polini!ación ( en fenómenos de alelopat$a. −
8!-!-!1 Prop"(dad() <>)"#a)
' +os aceites esenciales son l$quidos a temperatura ambiente, son incoloros o ligeramente
amarillentos, generalmente su densidad es inferior a la del agua, tiene un $ndice de refracción elevado, son solubles en alco#ol ( en disolventes orgnicos, mu( poco solubles en agua. −
8!-!9!1 Co+po)"#"%& ?4>+"#a
' +os compuestos qu$micos ms frecuentes encontrados en los aceites esenciales son3 los
monoterpenos C1Q18 0cerca del BD de los aceites esenciales, sesquiterpenos C17Q/6 ( los compuestos fenilpropanoides. Estas sustancias constitu(en un importante grupo de #idrocarburos, alco#oles, cetonas ( esteres. −
8!-!!1 M*$odo) d( (=$ra##"%&
' El método de extracción a utili!ar depende de muc#os factores3 de la composición qu$mica
de la esencia a obtener, de la parte del vegetal de donde se va a extraer, de la cantidad de esencia que contiene la droga ( de su valor económico. +os métodos ms comunes son3
a@ Arra)$r( #o& Hapor d( a34a ' "ueden existir tres variantes seg-n la textura ( la fragilidad de la materia prima a tratar3 -
;estilación con agua3 Se utili!a cuando el material es seco ( no se altera por ebullición, consiste en sumergir directamente el material vegetal a tratar 0intacto o pulveri!ado en
agua, luego se somete a ebullición. +os principios voltiles son arrastrados con el vapor ( -
luego es condensado el destilado, finalmente separado por d ecantación. ;estilación con agua ( vapor de agua3 Se usa para las sustancias secas o frescas, consiste en sumergir la muestra en agua, seguidamente los compuestos voltiles son
-
arrastrados por el vapor de agua producido por un generador. ;estilación directa con vapor de agua3 se utili!a para material fresco, consiste en pasar directamente una corriente de vapor de agua a través dela muestra vegetal, sin
maceración previa. b@ Por (=pr()"%& o$ro) pro#()o) +(#&"#o) ' 'lgunos aceites esenciales, no pueden ser destilados, porque se descomponen por el
efecto térmico, por lo que se extrae por expresión o por otros procesos mecnicos. Existen distintas variantes en la aplicación de e ste principio. -
%allado de las pieles en corriente de agua, luego separar la fase acuosa del aceite esencial
-
por centrifugación o decantación. 'plastamiento de los frutos enteros entre dos cilindros metlicos, se eliminan los desec#os
sólidos, se separa por centrifugación el !umo de fruto ( el aceite esencial. - "resión directa de los frutos partidos privados de su !umo. #@ E=$ra##"%& #o& )olH(&$( ' +os aceites son extra$dos preferencialmente con solventes apolares con éter de petróleo (
diclorometano, que entre tanto extraen otros compuestos lipófilos adems de los aceites esenciales, por eso los productos as$ obtenidos raramente poseen valor comercial.
d@ E&
extiende sobre una placa de vidrio o bande&a cubierta de una capa de grasa, ( se de&a por unas #oras o d$as. 4na ve! saturada la grasa con la esencia se procede a un extracción con alco#ol. Se utili!a para obteneresencias de &a!m$n ( de otras flores, que contienen poca esencia pero que son mu( valiosas en la industria. −
8!9! PARTE E;PERIMENTAL
' +as muestras vegetales que se utili!aran en esta prctica son aquellas que #an sido
estudiadas para el traba&o de investigación, cada grupo debe aplicar los conocimientos de la materia ( muestrear su droga vegetal. ' ' NOTA IMPORTANTE Si el grupo no trae la muestra vegetales queda suspendido de la
investigación. ' −
E;PERIENCIA 2 /
−
E;TRACCION DEL ACEITE ESENCIAL DE CANELA
' ;ependiendo, si la muestra a procesar es fresca o seca, se debe utili!ar método adecuado
seg-n el caso. En este caso se traba&ara con una muestra vegetal fresca, la corte!a de la canela, mediante la extracción con vapor de agua directo, llamado también extracción por arrastre con vapor de agua. Se debe cuantificar en porcenta&e el contenido del aceite esencial respecto a la muestra. ' −
PROCEDIMIENTO
-
'rmar un equipo de destilación por arrastre de vapor con dos balones, un balón '
-
0generador de vapor ( un balón = 0que contiene la muestra. Colocar una cantidad determinada de agua en el balón ' ( algunos n-cleos de ebullición, este balón debe estar provisto de un tubo de vidrio en 4 que conduce el vapor generado al otro balón = que contiene la muestra 0pesar la muestra ( es sumergido en esta, el balón = se conecta a un tubo refrigerante mediante un codo de cuello corto 0para evitar la
-
condensación prematura del agua. %ecibir el destilado en una probeta. ;estilar #asta obtener unos 17 a / ml del destilado. En la probeta se observaran dos fases, una acuosa ( otra aceitosa. Cuantificar ( separar el aceite obtenido. Colocar en un envase oscuro protegido de la lu! ( con cierre #ermético, para su posterior valoración.
' ' ' −
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
8!!1 DESARROLLO DE LA PRCTICA
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' −
8!0!1 CONCLUSION
−
8!8!1 CUESTIONARIO
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
1.
'
/.
2.
6. %eali!ar los clculos correspondientes para determinar el porcenta&e de aceite esencial que extra&o en laboratorio, comparar con el valor teórico, ( finalmente evaluar todos los aspectos que pudieron #acer variar el valor experimental del valor teórico. ' %. ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' −
8!!1 BIBILIOGRAFIA
'
' ' ' ' ' ' ' '
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
− PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD −
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA 1 GIP 2
' −
UNDAD VII Labora$or"o No
−
TITULO Valora#"%& d( a#("$() ()("al()
−
FEC5A DE ENTREGA /6 )(+a&a d( #la)()
−
PERIODO DE EVALUACI7N /6 )(+a&a d( #la)()
' −
−
!/!1 OB:ETIVOS -
;eterminar los parmetros de control de calidad a los aceites esenciales obtenidos en
-
la anterior prctica de laboratorio. Evaluar los parmetros obtenidos comparando con los valores teóricos.
!-!1 PARTE E;PERIMENTAL
' +as muestras vegetales sern proporcionadas por el grupo L 63 'ceite esencial, quita
esmalte comercial. ' NOTA IMPORTANTE Si el grupo asignado no trae las muestras vegetales se queda sin
nota para esta prctica en informe de laboratorio, examen previo ( examen de laboratorio. −
E;PERIENCIA No /
−
DETERMINACION DE LA SOLUBILIDAD
' Se determina la solubilidad del aceite tomando en cuenta la capacidad que tiene una
sustancia denominada solvente para formar una masa #omogénea con otra sustancia denominada soluto. − PROCEDIMIENTO
-
Marcar tres tubos de ensa(o ', = C. Coloca 1 gotas de aceite esencial a cada uno. 'l tubo ', se agrega / ml de agua destilada, se agita ( se observa la solubilidad. "osteriormente se lleva a calentar a fuego directo #asta llegar a ebullición para observar la solubilidad de la me!cla.
-
'l tubo =, se agrega / ml de alco#ol, se agita ( se observa la solubilidad, luego se
-
calienta a ba)o mar$a ( se observa la solubilidad. 'l tubo C, se agrega / ml de acetona, se agita ( se observa la solubilidad.
−
E;PERIENCIA No -
−
DETERMINACION DE DENSIDAD
' +a ma(or$a de los aceites esenciales tienen densidad menor a 1, con algunas excepciones. − PROCEDIMIENTO
' "esar 7 ml de aceite esencial en una probeta, registrar el peso, ( determinar la densidad
con la siguiente formula3 ' ' ;P mv
− Dónde:
' D ( )s la densidad, obtenida en gramos sobre ml g*ml! ' m ( )s el peso del aceite esencial, en gramos ' v ( )s el volumen medido, en este caso 1+ ml ' − E;PERIENCIA No 9 − DETERMINACION DEL INDICE DE ACIDEZ
' Son los ml de #idróxido de potasio necesarios para neutrali!ar los cidos libres contenidos
en un g de sustancia dada 0aceite. ;e este n-mero se puede deducir la cantidad de los cidos terpenicos o fenólicos libres contenidos en el aceite. − PROCEDIMIENTO
-
−
"esar 1g de muestra en un Erlenme(er del /7 ml 'gregar /7 ml de etanol neutrali!ado con fenoftalina Calentar en ba)o mar$a lo necesario para #omogenei!ar l a muestra por agitación Se a)ade dos gotas de fenoftaleina >itular con RQ ,1 N #asta obtener color rosado persistente registre Y1 Cálculos:
− Dónde:
' +,+22 ' /0 ( --------------------- 1++ '
' n ( umero de ml de 4 gastados para neutralizar el aceite ' ( eso de la muestra ' /0 ( gramos de $cido por cada 1++ gramos de muestra ' ' ' ' ' ' ' − 7.3.- DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' '
− 7.4.- CONCLSION
' ' '