DETERMINACIÓN DE AMINOÁCIDOS TERMINALES CON GRUPO ALFA AMINO LIBRE MÉTODO DE SANGER
20M1
Sección 1
INTRODUCCION Las proteínas están conformadas por cadenas de aminoác aminoácidos idos !"e son mo#$c"#a mo#$c"#as s or%ánic or%ánicas as !"e cont contie iene nen n "n %r"p %r"po o amin amino o & "n car' car'o( o(i# i#o) o) La sec"enc sec"enciació iación n de proteín proteínas as permite permite predeci predecirr #a f"nción de #a proteína c#asificar #as proteínas en fami# fami#ias ias dete detecta ctarr sec"e sec"enc ncias ias de aminoá aminoáci cidos dos re#acionados re#acionados con f"nciones f"nciones importantes así como conocer re#aciones %en$ticas & e*o#"ti*as entre otros) otros) +(ist +(isten en tres tres import important antes es t$cni t$cnica cas s para para sec"enc sec"enciar iar #os p$ptido p$ptidos s de aminos aminos termina termina#es, #es, San%er +dman & Dans C-#orid) La más anti%"a es #a "ti#i.ada por e# científico /rederic San%er desde desde 13) 13) +ste +ste m$tod m$todo o "ti#i "ti#i.a .a e# comp" comp"est esto o 245dini 245dinitrof trof#"or #"oro'en o'encen ceno o 6DN/78 6DN/78 !"e reaccio reacciona na con con e# resi resid" d"o o N5te N5terrmina mina## 'a9o 'a9o con condici dicion ones es a#ca a#ca#i #ina nas s !"e !"e 9"nt 9"nto o con con otro otros s proc proces esos os & "na "na cromato cromato%raf %rafía ía en pape# pape# permite permite #a identif identificac icación ión de# aminoácido N5termina#) O7:+TI;O Determinar e identificar e# aminoácido a#fa5amino termina# de #as cadenas de #a mo#$c"#a de #a -emo%#o'ina mediante e# m$todo de San%er)
R+SULT
Distancia de Distancia de #a marca a #a marca a recorrido #ínea sonrisa <#anina 20)cm E4)Bcm ;a#ina 22)4cm E4)Bcm /eni#a#anina 1)2cm E4)Bcm DN/7 1)3cm E4)Bcm @ro'#ema 21)3cm E4)Bcm retención8 cromato%rafía 1=2
Rf
0)B 0)B3 0)33 0)3E 0)B2
/i% 1) Cromato%rafía de# amino >5termina# de #a -emo%#o'ina & s" esca#a a 1,2 DISCUSION La -emo%#o'ina es "na mo#$c"#a formada por 2 cadenas > & 2 ? cada cadena 'eta 6@eAa et. al 20048 %racias a #a práctica se p"do determinar s" amino a#fa termina# teniendo como res"#tado a #a *a#in *a#ina a siend siendo o e# Rf 0)B3 0)B3 es decir decir e# e# más cercano a 1) +sto se p"ede corro'orar %racias a !"e en 'ase a# @rotein Data 7an se enc"entra !"e e# a#fa amino termina# de #a -emo%#o'ina de 'o*ino es #a -emo%#o'ina 6ca'e mencionar !"e #a -emo%#o'ina !"e se mane9a en #a'oratorio es proporcionada por "n pro*eedor !"e mane9a a este %r"po de *erte'rados8) @or otra parte en e# cromato% cromato%rama rama p"ede p"ede o'ser* o'ser*arse arse "na manc-a manc-a !"e p"ede compararse con e# DN/7 !"e además con con e# Rf m"es m"estr tra a !"e !"e en n"es n"estr tro o pro' pro'#e #ema ma e(ist e(iste e pres presenc encia ia de este este react reacti*o i*o esto esto p"ede p"ede de'erse a !"e no se desec-ó por comp#eto #a fase et$rea !"edando rastros de# dinitrofeni#ado tam'i$n p"ede mencionarse !"e e# cromatro%rama p"do presentar ciertos pro'#emas en e# momento de desarro##arse de'ido a !"e #a
cámara se a'ría & cerra'a constantemente @eAa < et al. 2004) 7io!"ímica) +ditoria# Lim"sa, M$(ico) afectando e# res"#tado) @)p), 4) Lippicott G) 2000) @r"e'as 'io!"ímicas para #a identificación de 'acterias de importancia c#ínica) E< ed) +ditoria# CONCLUSION @anamericana) +spaAa) 1351 pp) Se identificó a# a #a ;a#ina como e# aminoácido a#fa5termina# de #as cadenas de #a mo#$c"#a de -emo%#o'ina) Hemo%#o'ina) @rotein Data 7an) Disponi'#e en #ínea en, -ttp,pd'101)rcs')or%motm41 ) Cons"#tado e# 24505201B 7I7LIOFR