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UNIVERSIDAD INCA GARCILAZO DE LA VEGA FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y BIOQUIMICAS

Asignatura: Farmacognosia Farmacognosia Grupo: 1A – G1 Mesa: Numero 2 Preparación de la muestra para análisis fotoquímico Integrantes: -Takahashi Mayo Carolina -Pérez Vanesa Patricia -Gutiérrez Eqlein Juliana -Jonel Lima -Peru 2018 - I

Informe de laboratorio de farmacognosia

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Índice: I. II. III. IV. V.

Caratula Índice Introducción Competencia Marco teórico V.I. Antecedente V.II.Base teórica

VI.

Resultados VI.I. Resultado general VI.II. Resultado especifico

VII. VIII. IX.

X.

XI. XII.

Discusión Conclusión VIII.I. conclusión general VIII.II. Conclusión especifico Método IX.I. Ensayo 1 IX.II. Ensayo 2 IX.III. Ensayo 3 IX.IV. Ensayo 4 IX.V. Ensayo 5 IX.VI. Ensayo 6 Resultado , discusión y conclusión X.I. Ensayo 1 X.II. Ensayo 2 X.III. Ensayo 3 X.IV. Ensayo 4 X.V. Ensayo 5 X.VI. Ensayo 6 Anexo Referencias bibliográficas


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Introducción Hablemos de nuestra biodiversidad en la flora peruana, hay hasta la actualidad un gran porcentaje de sus especies de plantas que carecen de investigación científica así como así ves hay muchas especies que poseen grandes informes de investigación realizadas. A lo largo de nuestras vidas solemos escuchar nombres de especies de plantas que nos sonaran nuevas, y que al trascurrir los años al escucharlo mencionar por por boca de otras personas nos sonara conocido, pero que tanto conoces sobre aquellas plantas? En partículas nos enfocaremos en una planta trepadora que pertenece a la familia de las rubiáceas que tiene un origen en la selva peruana, es un tronco leñoso que llega a crecer hasta 15 metros de alto. Es conocido conocido de forma vulgar como” uña de gato” debido que tiene espinas en forma curvada como una uña de par en par a todo lo largo. Pues en este informe nos concentraremos a realizar distintos procesos y a analizar a la planta “Uncaria tomentosa” que es el nombre taxonómico de la uña de gato. Vamos a estudiar a la droga vegetal , la corteza de la uña de gato, pasando desde el recolectar su muestra, limpiar extraer secar fraccionar y realizar un control de calidad para así finalmente enfrascarlo para conservar esta droga vegetal y así más adelante poder elaborar medicamentos a base de esta droga.


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Competencias -

Investigar acerca de la uña de gato – “ Uncaria tomentosa” Selecciona y recolecta la muestra para el reconocimiento de los metabolitos secundarios. Conocer la plata que me toco como tema de investigación.

Marco Teórico: La uña de gato o conocida también como Uncaria tormentosa es una planta originaria de la selva peruana a la cual se le atribuye muchos usas gracias a todas las propiedades que posee, se tiene entendido que desde tiempos remotos las culturas antiguas lo usaban también de distintas formas rusticas de uso dermatológico uso externo o consumida directamente como en pequeñas virutas. No obstante no se tiene la seguridad o la veracidad de su función adecuado ya que faltan investigaciones más profundas con respecto al uso y dosis correcta dependiendo del organismo, se ha registrado varios casos en los cuales han presentado contradicciones, mostrando alergias o sintomatologías alarmantes. Hematosamuntor es una solución cutánea que está hecho mayoritariamente por la Uncaria tomentosa con otros excipientes su venta comercial es en Madrid hasta la actualidad por el laboratorio Miguez. Se cuestiona la efectividad de muchos preparados a base de la planta uña de gato. Antecedentes: La DIGEMID dio a relucir los resultados de una investigación que realizo en los mercados para poder constatar el buen estado de los productos. Entonces al azar escogió 34 preparados a base de uña de gato vendidos de forma informal en los mercados, quienes intervinieron fueron el cuerpo que forma la DIGEMID. Se determinó el contenido de alcaloides de las preparaciones seleccionadas utilizando el método descrito en la marcha analítica de Wattiez-Sternon (2). En conclusión tenía una desviación estándar promedio. Base teórica Cabieses (1) aquí están publicados actualisadamente todo o la mayoría de información que se tiene sobre la Uncaria tomentosa. Cuando uno va a un mercado o a una herborería o una curandera mayormente si se pregunta se encuentra con preparados informales a base de la Uncaria tomentosa que frecuentemente no cuenta con algún reglamento de cuanto debería ser la dosis exacta por producto como reafirmo es algo informal. Informe de laboratorio de farmacognosia

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Resultados: Arrojaron que no hay un único resultado al comparar la cantidad de alcaloides que poseen distintos preparados a base de uña de gato. Todos tienen una desviación estándar particular. Discusión: El no haberse determinado cuales son los principios activos de las supuestas acciones de la "uña de gato" impide definir un criterio racional para el control de calidad, aparte de las pruebas bacteriológicas que si bien pueden detectar la ausencia o presencia de contaminantes por bacterias u hongos no dicen nada acerca de la efectividad terapéutica. Conclusión: Aún falta profundizar y establecer la dosis correcta de uso para los preparados hechos a base de uña de gato o llamada también Uncaria tomentosa .


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Método Ensayo 1: Preparación de la muestra para el análisis fitoquímico Materiales y equipos Estufa con recirculación de aire Beaker x 1 L Bagueta Probeta x 100 mL Espátula Balanza analítica + 80 gr de corteza de la uña de gato Papel craft (min. 4 pliegos) Cúter Mascara para gases Reactivos Primero Solución de NaClO de 10 ppm Agua destilada Solución de ácido cítrico al 1% Proceso Seleccionamos la mejor parte de nuestra muestra de Uncaria tomentosa para ello nos ayudamos con el cúter y lo vamos deshilachando en tiras delgadas y lo pasamos a trozar en porciones pequeñas. Una vez seleccionada la muestra pesamos el papel craft y encima colocamos nuestra muestra, pasamos por este procedimiento hasta l ograr los 80 gramos. Seguidamente pasamos al lavado respectivo con H2O potable. Colocando la muestra dentro del vaso precipitado procedemos al lavado respectivo. Después lo desinfectaremos con Hipoclorito de sodio (NaClO) respectando las normas de bioseguridad del laboratorio colocamos la mitad del contenido del beaker en este caso 500ml y lo dejamos reposar 10 min y pasamos a escurrir nuestra muestra. Para escurrir nos apoyamos con el papel craft tratamos de secarlo lo más posible y los dispersamos sobre una bandeja hecha con papel craft. Inmediatamente lo colocamos en la estufa Binder a 60ºC que es lo que corresponde para la uña de gato, se deja unas 2 horas. Una vez seca la muestra procedemos a molerla con la mano. Luego la pesamos, notamos si hay alguna diferencia y procedemos a apuntarla.


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Posteriormente la envasamos en un frasco y le colocamos su etiqueta respectiva. Ensayo 2: Métodos de extracción de drogas vegetales Mediante el proceso de percolación: Materiales Beaker Pipeta Bagueta Pera de decantación Soporte universal Probeta Frasco ámbar de 1lt Frasco ámbar 250ml Placa Petri Reactivos HCl 5% Agua destilada Equipos Cocinilla Estufa con circulación de aire Balanza analítica. Proceso -Pesamos la muestra seca y molida -En el tubo estrecho de la pera de decantación colocamos una torunda para poder realizar un -buen filtrado y no dejar pasar residuos sólidos de Uncaria tomentosa -Colocamos la muestra en el percolador -Colocamos HCl 50 - H2o 50= 1lt en la probeta


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-Agregamos el líquido de la probeta a la muestra en el percolador dejar reposar 20 minutos -Recolectamos el percollado poco a poco en un beaker -Renovamos el disolvente dejar 20 minutos en el percolador -Reunimos los dos percollados en el frasco ámbar de 1Lt -Ponemos el percollado en un beaker y lo llevamos a la cocinilla a 40 ºC hasta obtener un -extracto casi sólido. -Pesamos el extracto y calculamos el rendimiento de la extracción. -Ponemos 10 ml como máximo en una placa Petri y lo llevamos a la estufa -El extracto seco en la placa Petri se empleará en el tamizaje fotoquímico.


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Ensayo 3: Marcha de solubilidad del extracto crudo


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Ensayo 4: Tamizaje Fitoquímica Materiales: Tubo de ensayo Bagueta Gradilla Probeta Pipeta graduada Vaso de precipitación Reactivos: Shinoda Gelatina Legal Molish Fecl3 Proceso Vamos a emplear para esta práctica el uso de cuatro tipos de soluciones distintas -solución acida -solución acuosa -solución metanolica -solución con cloroformo Primero colocamos un poco nuestra muestra solida de nuestra petri seco en un tubo de ensayo al cual le añadimos sesenta gotas de agua destilada y lo dividimos en ocho tubos de ensayo. Se ira empleando la cantidad de tubos necesarios para detectar los metabolitos secundarios primarios, se estima se usara dos tubos de ensayo para cada uno de los tipos de solución.


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Ensayo 5: Técnicas de fraccionamiento y purificación Parte 1: reparto – fraccionamiento Materiales y equipos Muestra Agua destilada Pera de percolación Beaker Reactivos Cloroformo Sulfato de sodio anhidro (NaSO4) Ácido clorhídrico Método Primero dispersamos la muestra de la placa Petri con agua, vertiendo 5ml x 4 veces (20mL). Lugo lo colocamos en el beaker y le añadimos 1,000 gr. de NaCO3 y lo agitamos con una bagueta. Seguidamente medimos el PH, el cual nos dio 5. Ahora lo colocamos en la pera de decantación y añadimos 20mL de CHCL3 y lo agitamos por 3 min, repetimos este procedimiento 3 veces. Notaremos que la muestra se separa entre F.acuosa y la F. CHCL3. Se precipita la F.CHCL3, a la cual añadiremos NaSO4 anhidro y lo dejamos reposar por 24 horas. Pasadas las 24 horas filtramos la solución de cloroformo. Lo colocamos en la estufa hasta obtener el mínimo de soluto. Una vez concentrado nuestra muestra lo colocamos en una placa Petri, y lo llevamos a una estufa a 40ºC. Después lo pasamos a un desecador y obtenemos el peso del E.CHCL3 concentrado. Informe de laboratorio de farmacognosia

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Parte 2: cromatografía en columna Materiales y equipos Una gradilla Tubos de ensayo Beaker Soporte universal Probeta x 100 ml - columna cromatografía Reactivos Silicagel para cc Acetona Cloroformo Agua destilada

Proceso Con la muestra desecada de cloroformo le añadimos unas gotas de cloroformo y agitamos un poco con la bagueta y le añadimos silicagel y lo unificamos. Lo llevamos a la estufa a 70C hasta que forme un polvo fino. Ahora elaboramos la columna que contiene silicagel + cloroformo que viene a ser nuestro eluyente. Luego vertimos muestra ya pulverizada sobre la columna. Y se forma F. estacionaria + solvente polar. Vamos a eluir: 1ero CHCL3 10 mL CHCL3 – MeCO2 9

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5

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8

1

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10mL


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2do MeCO2 10mL 9

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1

8

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2

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3

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5

2

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8

1

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3ero MeCHOH 10mL 9

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1

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3

5

:

5

3

:

7

1

:

9

Luego agregamos finalmente ETOH 10 mL Tuvimos 23 eluatos que colocamos cada 1 en un frasco ambar de 8 mL.


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Resultados Ensayo 1. Obtuvimos nuestra muestra seca en trozos pequeños luego de haber pasado por un proceso de desecación. Nombre de la Planta medicinal

Droga vegetal

Uncaria tomentosa

raíz

Peso muestra fresca

Peso muestra seca, en polvo

Método de secado

Ensayo 2 Obtuvimos 80 gramos de Uncaria tomentosa seca y lo sometimos a una extracción con método de la percolación de la cual se obtuvo un extracto crudo de color muy intenso.

Resultado Droga s Planta vegetal Medicinal

Técnica de extracción

Disolvente (s)

Peso del extracto seco

Ensayo 3 De la mezcla en un tubo de ensayo de nuestra muestra con un solvente polar que es el agua se obtuvo una pequeña precipitación.

Pruebas de solubilidad Disolventes Disolventes activos Informe de laboratorio de farmacognosia

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No activos ndiclor propa aceta meta hexa omet nona to nol no ano etilo

butan agua ol

Soluc . NaO H 5%

Soluc Soluc . .HCl NaH 5% CO3 5%

Leyenda: +++ Muy soluble ++ Soluble + Poco soluble – Insoluble Ensayo 4 Hemos comparado nuestros resultados con un cuadro comparativo el cual nos indica a que color debe virar para poder discernir si existe o no la presencia de metabolitos primarios y secundarios, ahora mencionare solo algunos de nuestros resultados: Al usar la espuma mezclado con la muestra se observó poca presencia de saponina. Al usar la gelatina se observó presencia muy poca de taninos. Al usar Shinoda se obserbo que no hubo presencia de flavonoides. Al usar Lieberman se obserbo que no hay presencia de glúcidos ni Triterpenos.

EXTRACTO CLOROFORMO

EXTRACTO EXTRACTO METANÓLIC ACUOSO O ÁCIDO

Espuma Gelatina Cloruro Férrico Con hidróxido de amonio Shinoda Liebermann-B Bornträger Rosenheim Mayer Dragendorff Wagner Sonneschein Baljet Legal Molish Fehling


EXTRACTO ACUOSO

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Leyenda: Poco + Medio ++ Regular +++ Bastante ++++ Ensayo 5 Luego de haber realizado el fraccionamiento múltiple se obtiene en la pera de extracción dos fases la fase acuosa que es el cloroformo y la fase orgánica que es nuestra muestra.

Técnica cromatográ fica Muestra 1

Rf

Fase móvil

Muestra 2 Muestra 3

Discusiones Informe de laboratorio de farmacognosia

Fase estacionari a

Revelador cromatográ fico

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Ensayo 1 El haber tenido la muestra por poco tiempo en el desecador en 60 grados hizo que el agua agua no saliera por completo y tuvimos que solucionarlo dejándolo en sombra al aire libre, usamos el secado natural aproximadamente por tres días completos hasta ver cambios a simple vista y al tacto un color más suave de marrón y la textura más parecida a un polvo. Ensayo 2 Nosotros por falta de tiempo reducimos el tiempo en la cual debía estar en inmersión nuestra muestra con el solvente en el percolador en vez de emplear 30 minutos empleamos hasta 20 minutos fueron tres veces consecutivas para obtener el extracto crudo Ensayo 3 Porque el agua al estar en contacto con la muestra no se disuelven, creemos se debe a su polaridad del agua. Ensayo 4 Influye o no el someter a una muestra con un disolvente dentro de un tubo de ensayo a baño maría para reconocer metabolitos. Ensayo 5 Realmente se puede separar los componentes de mi muestra de Uncaria tomentosa empleando este tipo de fraccionamiento.

Conclusiones Informe de laboratorio de farmacognosia

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Ensayo 1 Comparando dos métodos de secado que nosotros empleamos que fueron, el primero la estufa de secado a 60 grados centígrados y la exposición al aire libre ambos dan igual resultado la diferencia es la duración para obtener el resultado. Ensayo 2 Podemos concluir que el color que se obtuvo en el extracto crudo tiene relación con el tiempo que estuvo en contacto el solvente y nuestra muestra seca de Uncaria tomentosa ya que el solvente ayuda a disolver y soltar los metabolitos secundarios y primarios. Ensayo 3 Hemos concluido de que la nuestra de la Uncaria tomentosa en la placa Petri tiene una gran repulsión no existe una fuerza intermolecular. Ensayo 4 Observar el color el resultado inmediato del contacto del disolvente con la muestra dentro del tubo de ensayo no nos da la certeza de que si hay no hay presencia de un metabolito primario o secundario ya que comprobamos que al someterlo a un baño maría el resultado cambio ya que si vimos presencia de un metabolito. Ensayo 5 Si se pudo separar los componentes ya que por repartición múltiple hay un mayor contacto del disolvente con la muestra con los analitos de la muestra.


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Anexos: Ensayo 1.

2

3 4 5 6


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Anexo 3:

Cuestionario Ensayo 1 1-¿En qué consiste el escaldado de una muestra y cuál es su importancia? Consiste en colocar la muestra en 500ml de solución en hipoclorito de sodio (NaClO) por 10 minutos y luego se drena, secar a ambiente o estufa con circulación. La importancia es porque permite asegurar la calidad de la muestra y la inactivación de enzimas microbianas que podría atentar con nuestra muestra. 2-¿Cómo se realiza el blanqueo de una droga vegetal? ¿Cuál su importancia? Consiste en coloca la muestra en agua hirviendo durante 30 segundos. Su importancia permite limpiarlos y ablandar e inhibir la acción de las enzimas responsables a la oxidación. 3- ¿Qué tipos de secados existen? Explíquelos Secado por convección: son utilizados para secar partículas y alimentos en forma laminar o en pasta. el calor se suministra a través del aire caliente o gas en el cual fluye sobre la superficie del sólido. Secado por conducción: son utilizados para productos de poco espesor o para sólidos con alto grado de humedad. El calor para evaporación se suministra a través de superficies calientes. Secado por radiación: se lleva a cabo mediante la radiación electromagnética cuya longitud de onda se encuentra dentro el rango de espectro solar y microondas. 4- ¿Cómo se realiza la desinfección de una droga vegetal? Lavar los trozos de Uncaria tomentosa (hojas, flores, corteza) Desinfectar con solución NaClO de ppm Secar en una estufa con recirculación de aire a temperatura 40 c a 60 c durante 24 horas. 5- ¿Cuál es la regla general del secado con las drogas vegetales? Como regla general de Ocampo y Valverde (2000) se recomienda una temperatura de 30 a 60c para el secado de ribosomas y cortezas y raíces estas deben tener una humedad final de 12% para hojas y flores se recomienda a una temperatura entre 20 y 40c y humedad final de 5 a 10%. Informe de laboratorio de farmacognosia

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Ensayo 2 1 -¿Qué características debe reunir un disolvente extractor? - ser inmiscible con el agua, teniendo en cuenta que a mayor n° de disminuye la hidrofilia y es más inmiscible. - disolver mejor que el agua a la sustancia a extraer. - no reaccionar con el producto a extraer. - no ser inflamable ni tóxico (en lo posible). Los solventes muy polares no sirven para la extracción, ya que serán miscibles con el agua. La polaridad del solvente extractor dependerá de las características del compuesto a extraer 2-¿Cuál es el fundamento físico químico de la extracción por reparto? Es extraer entre dos fases inmiscibles El coeficiente de reparto de una sustancia es un cociente o proporción entre las concentraciones de un compuesto no-ionizado entre los dos disolventes. Para medir el coeficiente de reparto de solutos ionizables, el pH de la fase acuosa se ajusta de tal modo que la forma predominante del compuesto esté en la forma no-ionizada. El logaritmo del cociente entre las concentraciones del soluto noionizado en los disolventes se llama log P y se presenta en forma logarítmica porque el rango de valores que puede tomar es muy amplio:




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3 -¿Cuál es fundamento físico químico de la extracción por percolación? Es un método que consiste en que la muestra (generalmente alcohólico o mezcla hidroalcohólica) atraviesa la masa de droga pulverizada siempre en un solo sentido, alcanzando concentraciones crecientes de tal modo que el equilibrio entre el solvente dentro y fuera del marco nunca se alcanza, por lo que la droga bañada siempre por nuevas proporciones de menstruo acaba por ceder todos sus componentes solubles de manera progresiva. Éste tipo de extracción se realiza en recipientes (percoladores) cilíndricos o cónicos que poseen dispositivos de carga y descarga, lográndose una extracción total de los principios activos (prácticamente se obtiene hasta el 95% de sustancias extraíbles); se debe tomar en cuenta que el tiempo en el que la droga permanece en contacto con la muestra y la relación existente entre la droga y el líquido extractivo (cantidad de disolvente), son dos factores decisivos dentro de la percolación. “La percolación es el método extractivo menos adecuado en

el caso de gran gelificación o si las drogas son muy voluminosas Cabe recalcar que previo a la extracción es necesario humectar la droga con el disolvente, permitiendo su esponjamiento con el fin de facilitar la entrada en las membranas celulares


durante la percolación

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4 -¿Qué se entiende por maceración dinámica? Es un proceso de extracción sólido-líquido. El producto sólido (materia prima) posee una serie de compuestos solubles en el líquido extractante que son los que se pretende extraer. Maceración: La maceración consiste principalmente en dejar la planta sumergida en un disolvente durante un lapso más o menos largo. 5-¿Puede realizarse una extracción con soxhlet con mezclas de disolventes? ¿Por qué? Se define como la acción de separar con un líquido una fracción específica de una muestra, dejando el resto lo más íntegro posible. Se pueden realizar desde los tres estados de la materia, y se llaman de la siguiente manera: 1) Extracción sólido – líquido 2) extracción líquida – líquido 3) extracción gas – líquido. La primera es la más utilizada y es sobre la que trata este escrito de la extracción con el equipo Soxhlet. La experiencia que se posee es que hay una temperatura máxima y mínima de ebullición en la que el equipo funciona adecuadamente. En el extremo inferior se encuentra el diclorometano (cloruro de metilo) que se utiliza para la extracción de grasas y resinas de manera selectiva. Este solvente tiene un punto de ebullición de 40º muy cercano a la temperatura ambiente particularmente en los climas cálidos. Cuando se efectúa una extracción con el agua de refrigeración a 26ºC, se pierde más de la mitad del solvente. Con Informe de laboratorio de farmacognosia

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respecto al extremo superior hay que decir que para la cantidad de energía limitada que generan los calentadores eléctricos comunes, a medida que aumenta el punto de ebullición disminuye significativamente el caudal de solvente que se evapora y por ende la velocidad de extracción.

6-¿Qué función cumplen los agentes desecantes? El agente desecante se utiliza para eliminar partículas de humedad que se encuentra en el ambiente los típicos desecantes está formado por anhídridos y sales hidratadas que mediante su aplicación estas se hidratan al absorber la humedad 7-¿puede realizarse una destilación por arrastre con vapor de etanol? Es una técnica aplicada en la separación de sustancias poco solubles en agua. La destilación por arrastre de vapor se emplea para separar una sustancia de una mezcla que posee un punto de ebullición muy alto y que no se descomponen al destilar. También se emplea para purificar sustancias contaminadas por grandes cantidades de impurezas resinosas y para separar disolventes de alto punto de ebullición de sólidos que no se arrastran.


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Ensayo 3 1 ¿Qué entiende por solubilidad? Es la cualidad de soluble que se puede disolver se trata de una medida de una cierta sustancia para disolver en otra. La solubilidad puede ser expresada en porcentaje de soluto o en unidades cm moles por litro o gramos por litro. 2. Represente la serie eluotropica de los disolventes La serie eluotrópica es la ordenación de los disolventes de acuerdo con su capacidad relativa para desplazar solutos de un determinado adsorbente. La fuerza eluyente es una medida de la energía de adsorción del disolvente, supuesto el valor cero para el sistema pentano/sílice pura. La tabla 25.1 ordena una serie de disolventes de acuerdo con su fuerza eluyente respecto a la sílice en cromatografía de adsorción. Cuanto más polar es el disolvente, mayor es su fuerza eluyente respecto a la sílice en cromatografía de adsorción. Cuanto mayor es la fuerza eluyente del disolvente, tanto más rápidamente se eluirán los solutos de la columna.


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3. ¿Porque es importante conocer la solubilidad del extracto crudo en el fraccionamiento y purificación del mismo? Es importante porque vamos a observar si es soluble o insoluble ya que en la cromatografía la separación de los componentes de la mezcla se debe a la afinidad relativa (solubilidad) de los componentes de la mezcla, por la fase estacionaria o a la fase móvil seleccionada en la cromatografía. 4- ¿De acuerdo a las pruebas de la solubilidad?, ¿Cuáles el grado de polaridad de los compuestos presentes en el extracto crudo analizado?

El etanol Es polar. La presencia del enlace C-OH dota de polaridad a la molécula. Eso hace que el etanol, entre otras propiedades importantes sea soluble en agua, ya que puede formar uniones puente de hidrógeno con las moléculas del agua.


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Ensayo 4 1. ¿Realice los cálculos correspondientes necesarios en la preparación de los reactivos a emplear en la práctica? Limpia dos portaobjetos (25 x 75 mm) con disolución de mezcla crómica o disolución jabonosa enjuagar minuciosamente con agua destilada y secar. Preparar una pasta formada por 15 g de gel de sílice G y 37ml de agua agitando bien con una varilla. Coger por sus extremos dos portaobjetos, juntos por sus caras más extensas y sumergirlos en la pasta separándolos a continuación. Debe quedar una capa fina y homogénea sobre cada porta objetos. Luego secar al aire.

2. ¿Menciona los pasos a seguir en la preparación de soluciones valoradas? Informe de laboratorio de farmacognosia

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Son soluciones donde se expresa cuantitativamente la relación del soluto y solvente. Soluciones Valoradas o Soluciones Tituladas, su concentración está referida, por regla general, al "peso equivalente", "gamo equivalente" o simplemente "equivalente", la cantidad en gramos de la sustancia, que corresponde a un átomo gramo de hidrogeno. Una solución que contiene por litro el peso equivalente gramo de cualquier compuesto o elemento recibe la designación de solución "normal". 3. Escriba las ecuaciones químicas de las reacciones que ocurre en el tamizaje fitoquímico Shinoda Mg + 2HCl

MgCl2 + H2

4. ¿Qué criterios debe considerarse al analizar los resultados del tamizaje fotoquímico? Es una de las etapas iniciales de la investigación fitoquímica, que permite determinar cualitativamente los principales grupos químicos presentes en una planta y a partir de allí, orientar la extracción y/o fraccionamiento de los extractos para el aislamiento de los grupos de mayor interés. El tamizaje fitoquímico consiste en la extracción de la planta con solventes apropiados y la aplicación de reacción de color y precipitación. Debe de permitir la evaluación rápida, con reacciones sensibles, reproducibles y de bajo costo. Los resultados del tamizaje fitoquímico constituyen únicamente en una orientación y debe de interpretarse en conjunto con los resultados. 5. ¿En que se fundamenta la prueba a la gota? Está cimentada en aspectos fotográficos perfectamente sólidos. De hecho, lo que estamos más o menos haciendo es determinar el tiempo mínimo de revelado necesario para “las luces”, esto es, para las partes totalmente

expuestas de la película.


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Ensayo 5 1. ¿Al realizar una TLC qué criterios utiliza en la elección de la fase móvil y la fase estacionaria? Los criterios es elegir bien la fase móvil y la fase estacionaria ya que los componentes que se debe separar deben ser solubles en la fase móvil y capaz de interaccionar con la fase estacionaria en esta se utilizó la silicagel. 2. ¿Qué se entiende por RF? Rf = distancia recorrida por el soluto / distancia recorrida por el solvente El valor de Rf depende del tipo de solvente empleado, del soporte utilizado y otros

factores

más.

Conocer este valor permite saber que tan rápido se mueve el soluto que se analiza respecto al sistema cromatográfico. 3. ¿Qué etapas comprende el empaque de una columna cromatografía? La cromatografía en columna utiliza una columna de vidrio vertical que se llena con un soporte sólido adsorbente (fase estacionaria: los más utilizados son gel de sílice (SiO2) La muestra que se quiere separar se deposita en la parte superior de este soporte. El resto de la columna se llena con el eluyente (disolvente que constituye la fase móvil etanol y diclorometano) que, por efecto de la gravedad, hace mover la muestra a través de la columna. Se establece un equilibrio entre el soluto adsorbido en la fase estacionaria y el disolvente eluyente que fluye por la columna. Debido a que cada uno de los componentes de una mezcla establecerá interacciones diferentes con la fase estacionaria y la móvil, serán transportados a diferentes velocidades y se conseguirá su separación. Así, de manera similar a otros tipos de cromatografía, las diferencias en las velocidades de desplazamiento a través del medio sólido se corresponden con diferencias en los tiempos de elución por la parte inferior de Informe de laboratorio de farmacognosia

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la columna para cada uno de los componentes de la muestra original, que se recogerán en fracciones diferentes. La polaridad del eluyente afecta las velocidades relativas con las que los diferentes componentes de la mezcla se mueven en la columna. Los disolventes polares compiten más eficientemente con las moléculas polares de una mezcla por los lugares polares del adsorbente. Por lo tanto, un disolvente polar desplazará las moléculas, incluyendo las más polares, rápidamente a través de la columna. Si el disolvente es muy polar la elución será muy rápida y generalmente habrá poca separación de los componentes de la mezcla. Si por el contrario el disolvente es muy apolar, no eluirán los compuestos de la columna. 4. ¿Cuáles son las diferencias en HPTLC y TLC?

HPTLC Separaciones dos veces más rápidas a la mitad de contrapresión de la



columna con las columnas

de 5 μm

Mayor rendimiento de la muestra – separaciones hasta nueves veces



más rápidas si son necesarias Reequilibrado rápido de la columna entre análisis



TLC Normalización y control de calidad extraordinarios





Adherencia, dureza y homogeneidad de superficie excepcionales



Análisis de muestras con elevada carga de matriz sin preparación de la muestra



Múltiples muestras analizadas en paralelo



Gran rentabilidad, rapidez y economía

5- ¿Explique el mecanismo de absorción en la separación cromatografía? La separación se basa fundamentalmente en las distintas afinidades de adsorción de los componentes de la muestra hacia la superficie de un sólido activo. Informe de laboratorio de farmacognosia

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Cromatografía de reparto La separación se basa fundamentalmente en las diferencias de solubilidad de los componentes de la muestra en la fase estacionaria (cromatografía de gases) o en las diferencias de solubilidad de los componentes en la fase móvil y en la fase estacionaria (cromatografía de líquidos) 6- ¿Cómo se identifica los componentes no coloreados e luidos de una columna cromatografía? Elución: proceso por el cual todos los solutos terminan por abandonar la columna.


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