INTRODUCCIÓN DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA POR EL MÉTODO CIANOMETAHEMOGLOBINA
El funcionamiento de las células de un individuo depende en gran medida de un adec adecua uado do apor aporte te de oxíg oxígen eno. o. Esta Estass func funcio ione ness vita vitale less de tran transp spor orte te de gase gasess dependen de la hemoglobina (Hb), heteroproteína predominante en los eritrocitos(1). Los métod todos para la medici cin de hemoglobina se desarrollaron hace aproximadamente un siglo, ! su cuantificacin est" entre las pruebas diagnsticas disponibles desde el inicio de la ciencia del laboratorio clínico. Ho! en día es una de las pruebas pruebas m"s solicitad solicitadas as al laborato laboratorio, rio, ! es e#ecutad e#ecutada a emplean empleando do tecnologí tecnología a diversa, diversa, $ue va desde desde la determin determinaci acin n manual manual hasta la sofisticad sofisticada a metodolo metodología gía automati%ada. El méto método do reco recome mend ndad ado o inte intern rnac acio iona nalm lmen ente te para para su dete determ rmin inac aci in n es el de cianometahemoglobina(&), cu!o principio consiste en diluir sangre total en reactivo de 'rabin, el cual es una solucin $ue contiene ferricianuro de potasio ( *+e(-) ), ! cianuro de potasio (-). La cianometahemoglobina es un producto coloreado mu! estable, de allí $ue se pueda emplear como est"ndar. En todas las determinaciones determinaciones cuantitativas del laboratorio clínico, es necesario calibrar ! contro controla larr la metod metodolo ología gía para para garan garanti% ti%ar ar la calida calidad d de los los resul resultad tados os emitid emitidos. os. /simismo es conveniente $ue #unto al programa de calibracin ! control, se realice peridicamente una evaluacin o control de calidad instrumental a los e$uipos $ue se emplean para la deteccin ! cuantificacin de analitos, !a $ue aun$ue los aparatos de medicin $ue existen en el mercado son sometidos a controles de calidad por sus fabricantes, el intenso uso ! el desgaste afectan su rendimiento dando lugar a errores analíticos. DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO
El hematocrito es un examen de sangre $ue mide la fraccin $ue comprende a los glbulos ro#os (masa globular), respecto al volumen total de la muestra de sangre venosa venosa o capila capilar. r. Esta medici medicin n depen depende de del n0mero de glbulos ro#os ro#os ! de su tamao. El resultado se expresa en porcenta#e, aun$ue también puede expresarse como valor decimal. El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguíneo completo(hemograma completo (hemograma o hematimetría).2ara la reali%acin de esta prueba, con el macro método, la sangre se extrae típicamente de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. uando se inserta la agu#a para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras $ue otras slo sienten un pincha%o o sensacin de picadura. 2osteriormente, puede haber algo de sensacin puls"til. 3n volumen de sangre se deposita en un tubo de 4introbe, por medio de una pipeta, hasta la marca del 15 ! se centrifuga. /l terminar la prueba, deben de $uedar separados el plasma de la sangre ! las células, deposit"ndose en el fondo ! presentando un color ro#o intenso. 2ara la reali%acin del micrométodo, se utili%an unos tubos de un calibre mu! delgado, llamados capilares, ! pueden ser llenados con la misma sangre venosa o de capilar. Este 0ltimo es el m"s usado, por ser m"s r"pido ! menos riesgoso. 2ara su lectura se usa una escala estandari%ada.
ERITROSEDIMENTACIÓN O VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR
La medicin de la velocidad de sedimentacin globular (678) es una prueba para evaluar la respuesta inflamatoria durante la fase aguda de diversos padecimientos infecciosos ! no infecciosos. 7u historia se remonta a la observacin de +ahraeus en 191:, de una r"pida sedimentacin de los eritrocitos en el plasma de una mu#er gestante $ue no ocurría en otra mu#er no embara%ada.1 7in embargo, fue hasta 19;1 cuando
repelan? entre sí, lo cual da por resultado una velocidad de sedimentacin de menos de 15 milímetros (mm) por hora. 2or el contrario, todas las condiciones asociadas con procesos inflamatorios $ue cambian el potencial %eta favorecen el fenmeno de =ouleaux e incrementan la 678.1 La 678 se incrementa en infecciones agudas ! crnicas, necrosis tisular, lesiones malignas, enfermedades de la col"gena ! reum"ticas, niveles séricos anormales de proteínas ! embara%o, así como en pacientes con falla renal crnica en hemodi"lisis ! pacientes con insuficiencia cardiaca congestiva, entre otras.* 2ara medir la 678 ha! diversos procedimientos@ en 19A;, 4introbe1 describi el método $ue es a0n la regla de oro ! re$uiere 1 ml de sangre venosa anticoagulada con E'B/. La sangre se coloca en el tubo de 4introbe (tubo de vidrio con un di"metro de * mm ! graduado en mm en una escala de 5 a 15 cm) ! se de#a reposar a temperatura ambiente durante una hora en un soporte para mantener la posicin vertical@ al término, se cuantifica la sedimentacin en milímetros desde el borde superior del plasma hasta la base de las células.1 Ctra técnica es la de 4estergreen, validada ! aceptada por el omité Dnternacional de Estandari%acin en Hematología ! descrita en 19::.; sta consiste en extraer sangre venosa ! me%clarla con citrato trisdico al *.:F como anticoagulante. Luego se vierte en un tubo de cristal de *55 G 1. mm de longitud ! &. G 5.1 mm de di"metro, con una escala graduada en mm de 5 a &55, ! se coloca en posicin vertical durante &; horas. Las lecturas en milímetros (a partir del borde superior del plasma ! hasta las células) se reali%an después de una, dos ! &; horas. La técnica en capilares llamada >velocidad de microeritrosedimentacin? se utili%a de manera empírica desde la década de 19*5 hasta nuestros días, como un procedimiento sencillo ! 0til para apo!ar el diagnstico de sepsis. onsiste en tomar una pe$uea muestra sanguínea por puncin venosa o en el taln ! colectada en un capilar heparini%ado para microhematocrito de A mm de largo ! 1.1 mm de di"metro interno@ posteriormente, se coloca en posicin vertical durante una hora. La lectura se reali%a de la misma manera $ue las dos técnicas anteriores ! el resultado se reporta en mmIhora.,A /un$ue los métodos de 4introbe ! 4estergreen est"n validados ! tienen un alto grado de confiabilidad, en ocasiones presentan algunas desventa#asJ 1) re$uieren la toma de un poco m"s de un mililitro de sangre del paciente, lo cual es un problema en algunos recién nacidos pretérmino@ &) se re$uieren tubos diseados específicamente para tal propsito (se carece de ellos en muchos países en vías de desarrollo) ! el resultado con frecuencia demora varias horas@ ! *) es una prueba no disponible las &; horas del día en muchos hospitales de países en vías de desarrollo. La determinacin de la 678 mediante capilares con heparina es un método simple, econmico ! r"pido $ue puede reali%arse en la cabecera del paciente pedi"trico a cual$uier hora. 7in embargo, se necesita la puncin del paciente slo para ese propsito, se utili%a un anticoagulante distinto (heparina) al de la técnica de 4introbe (E'B/) ! a0n no se valida.:, 9,15 Hasta donde sabemos, la 678 no ha sido evaluada por microtécnica con capilares sin anticoagulante a partir de la misma muestra $ue se emplea tanto para la biometría hem"tica, como para la técnica est"ndar de 4introbe (ambas con E'B/). El ob#etivo del presente estudio fue comparar de manera simult"nea la 678, tanto con el uso de un capilar no heparini%ado como con la técnica est"ndar de 4introbe.
Kibliografía 1. /milachari <, Karra 6, 7oriano 8, Karra <, =egalado Bheoretical and practical aspects of globular sedimentation velocit!?. Kiol linical applications of Mreactive protein in pediatrics?. 2ediatr Dnfect 'is N 199A@ 1J A*MA;. *. Happe <=, Kattafarano '+, 'oole! '2 et al. >6alidation of the 'iesse =evised loo at microMer!throc!te sedimentation rate in neonates?. Dndian 2ediatr 1999@ *J A5*MA5.
