UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS SECCIÓN DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR
Laboratorio N° 1: Extracción del ADN en guisantes ( Pisum sativum) Temas a estudia • •
T!"#i"as de e$ta""i%# & 'ui(i"a"i%# de )"id*s #u"+ei"*s, A'+i"a"i*#es "+-#i"as de+ ADN
O./eti0*s1 • • • •
I#di"a +as (u#"i*#es .i*+%2i"as de+ ADN, Dem*sta +a 'ese#"ia de ADN e# te/id*s .i*+%2i"*s, E$'+i"a +*s 'i#"i'i*s (-si"*34u-mi"*s e# 4ue se .asa +a e$ta""i%# & 'ui(i"a"i%# de+ ADN, I#di"a +*s us*s de+ ADN 2e#%mi"* 5uma#* e# e+ dia2#%sti"* m*+e"u+a6 e# 2e#!ti"a (*e#se e i#2e#ie-a 2e#!ti"a,
Introducción E+ )"id* des*$ii.*#u"+ei"* 7ADN8 es +a m*+!"u+a m*+!"u+a 4ue 2uada +a i#(*ma"i%# 2e#!ti"a de +a i#me#sa ma&*-a ma&*-a de +*s *2a#ism*s, La e$ta""i%# de ADN es u# '*"es* 0ita+ "*# mu"5as a'+i"a"i*#es "ie#t-(i"as, E# +a i#0esti2a"i%# & +a medi"i#a6 sus us*s i#"+u&e# se"ue#"ia"i%# de+ ADN6 +a dete""i%# de +*s 0ius6 +as .a"teias6 i#0esti2a"i%# de e#(emedades & tast*#*s "*# .ase 2e#!ti"a, E# e+ "am'* de +a "ie#"ia (*e#se6 es uti+i9ad* 'aa +a ide#ti(i"a"i%# de +*s muet*s muet*s as- "*m* e+ a#)+isis de +a +a es"e#a de "ime#, La e$ta""i%# de ADN es +a .ase 'aa +a a'+i"a"i%# de "ua+4uie t!"#i"a e# Bi*+*2-a M*+e"u+a, Dad* 4ue t*d*s +*s *2a#ism*s 0i0*s "*#tie#e# ADN6 +as *'"i*#es dis'*#i.+es 'aa +a muesta s*# ')"ti"ame#te i#(i#itas6 & +a e+e""i%# '* +* 2e#ea+ se e+a"i*#a die"tame#te "*# e+ tema de+ *./et* de estudi*,
Metodología :e0ia +a ea+i9a"i%# de+ +a.*at*i* se +es +es e"*mie#da a +*s & +as estudia#tes +ee & a#a+i9a +a 2u-a6 e# e# '* de +*2a u# a'e#di9a/e si2#i(i"ati0*, E# este +a.*at*i* se 5a) +a e$ta""i%# de+ ADN de +*s 2uisa#tes, A+ (i#a+i9a +a ')"ti"a se s*"ia+i9a) +*s esu+tad*s & se dis"uti)# +*s mism*s 'aa "*#s*+ida +*s "*#*"imie#t*s te%i"*s e+a"i*#ad*s "*# esta a"ti0idad, Materiales Guisa#tes Ba+a#9a de "*m'e#sa"i%# NaC+ A2ua desti+ada Li"uad*a Bea;e de <=> m+
C*+ad* '+)sti"*6 * Fi+t* 'aa "a(etea ?a.%# +-4uid* Re+*/ Tu.*s de e#sa&* @ $ @>> mm Gadi++as
A.+a#dad* 'aa "a#e A+"*5*+ a+ >
Re+*/ :i#"5*s de madea 'aa "a#e,
Procediientos: Extracción de ADN de guisantes Procediientos
:esa @>> 2am*s de 2uisa#tes,
A2e2a @ 2am* de NaC+, A2e2a <>> m+ de a2ua desti+ada .ie# (-a 7e#te > & >C8, Li"a t*d* a +a m)s a+ta 0e+*"idad '* @= se2u#d*s
E# u# Bea;e "ue+a +a s*'a esu+ta#te 7usa u# "*+ad* de '+)sti"* * 'a'e+ (i+t* 'aa "a(etea8 E+imi#a +* 4ue 4ued% e# e+ "*+ad*,
A2e2a > m+ de /a.%# +-4uid* a+ (i+tad*, Me9"+a sua0eme#te, Es'ea @> mi#ut*s,
T*ma @3< tu.*s de e#sa&* & ++!#a+*s 5asta u# te"i* de +a a+tua "*# +a s*+u"i%# esu+ta#te, A2e2a @ 2am* de a.+a#dad* de "a#e6 & m!9"+a+* sua0eme#te u#*s = se2u#d*s,
I#"+i#a e+ tu.* de e#sa&* & a2e2a sua0eme#te a+"*5*+ a+ >3> s*.e +a 'aed de+ tu.* 5asta a+"a#9a e+ d*.+e de+ 0*+ume# de +a s*+u"i%# de a0e/as, NO MEHCLES O ECARAS A :ERDER EL EJ:ERIMENTO De/a e'*sa @> mi#ut*s, O.se0a & 0eas 4ue se '*du"e u#a 'ati"i%# de +a s*+u"i%# a"u*sa & e+ a+"*5*+, EL ADN SE ENCUENTRA EN EL LIMITE DE ESA :ARTICIKN, T*ma u# 'i#"5* +im'i* de madea 7usted +* tae8 & "*# mu"5* "uidad* +* i#t*du"es 5asta e+ siti* d*#de se 'ate# am.*s s*+0e#tes6 2-a+* e# se#tid* 5*ai* "*# sua0idad, E+ ADN se 'e2a) a+ e$tem* de+ 'i#"5*, E$tae e+ ADN, Dis"ute +*s esu+tad*s "*# tu d*"e#te,
Preguntas !ara orientar el autoestudio @, <, , , =, , , , , @>, @@, @<, @, @, @=,
Des"i.a +*s 'i#"i'i*s 2e#ea+es de e$ta""i%# de ADN, Di2a usted 'aa 4u! uti+i9am*s dete2e#te e# e+ '*"edimie#t*, Di2a usted 'aa 4u! uti+i9am*s a+"*5*+ e# e+ '*"edimie#t*, Di2a usted 4u! ti'* de e#9imas "*#tie#e# +*s sua0i9ad*es de "a#e & e+ /u2* de 'ia & 'aa 4u! +*s uti+i9am*s e# este e$'eime#t*, Di2a usted "u)#t*s us*s se +e 'uede da a+ ADN u#a 0e9 e$ta-d*, Di2a usted 4ue e+e0a#"ia tie#e e+ ADN e# e+ dia2#%sti"* "+-#i"*, Di2a usted "u)+es s*# +as (u#"i*#es .i*+%2i"as de+ ADN, Di2a usted "u)+es s*# +as di(ee#"ias e# "ua#t* a +a e$ta""i%# de ADN & ARN, Di2a usted "u)+es s*# +as di(ee#"ias e#te +*s '*"edimie#t*s de e$ta""i%# de ADN a#ima+ & ADN 0e2eta+, Di2a usted 4u! 'i#"i'i* de e$ta""i%# se usa 'aa ADN '+asm-di"*, E$'+i4ue usted '* 4u! +a "*#"e#ta"i%# de ADN se mide a <> #m, I#di4ue usted 4u! ti'* de "*#tami#a#tes '*dem*s e#"*#ta e# u# e$ta"t* de ADN, E$'+i4ue usted '* 4u! +a medi"i%# de u#a muesta de ADN a <><> #*s da i#(*ma"i%# s*.e +a 'ue9a de +a muesta, Di2a 'aa 4u! (i#es se 'uede uti+i9a e+ ADN 2e#%mi"* 5uma#*, Cua#d* ea+i9am*s u#a e$ta""i%# de ADN6 a'ate de "*#"e#ta"i%# & 'ue9a6 4u! *t*s 'a)met*s de "a+idad de +a e$ta""i%# de ADN se de.e# i#0esti2aP
E"AL#A$I%N Esta a"ti0idad tie#e u# 0a+* de @>> 'u#t*s6 s*.e +a .ase de +*s si2uie#tes "itei*s1 <> 'e'aa"i%# 'e0ia6 > e/e"u"i%# de +a ')"ti"a6 > dis"usi%# de esu+tad*s & "*e+a"i%# te%i"a & <> e#te2a de e'*te,
&ibliogra'ía • • •
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C*#(ee#"ias & 'ese#ta"i*#es de +a asi2#atua, Ve d*"ume#t*s 'eti#e#tes e(eid*s e# +a .i.+i*2a(-a de+ 'ime +a.*at*i*, 5tt'1,md',edu,aa2aias2ad*@I#tBi*te"#*+*2iaa"5i0*sT:@E$ta""i*#ADNVe2eta+ ,'d( 7E$ta""i%# de ADN 0e2eta+8 5tt'1.a"tei*+*2ia"+i#i"a,i;is'a"es,"*m(i+e0ie:RACTICAN*EJTRACCIONDNA:LASMID ICO,'d( 7E$ta""i%# de ADN '+asm-di"*8 5tt'1<,i#e"",2*.,m$'u.+i"a"i*#es+i.*s@>e$ta""i*#,'d( 7Te*-a 2e#ea+ de +a e$ta""i%# de ADN8 5tt'1,.i*t**+s,eues'd*"ume#tsS'eedt**+sDNAE$ta"ti*#it,es',ed>,Ma9*@<,'d( 7E$ta""i%# de ADN 2e#%mi"* 5uma#* uti+i9a#d* mem.a#as de s-+i"e6 e$'+i"ad* 'as* a 'as*,Au#4ue #* es +a misma ma"a de+ ;it 4ue usam*s e# +a e$ta""i%# de ADN6 s*# +*s mism*s 'i#"i'i*s & '*"edimie#t*s8, E# +a 2u-a de +as a"ti0idades e0a+uadas 'uede# e0isa +*s 'as*s de e$ta""i%# de+ ADN 5uma#*, 5tt'1,(.m",("e#,u.a,amateiasi#2e#'a"ti"*sa#"+asesE$ta""i*#<>ARN,'d(0ie 7E$ta""i%# de ARN8
