Facultad de Medicina Universidad de los Andes
Elliot José Barrios Uzcategui CI: 18.779.193
ENSAYO DE METODOS PARA EVALUAR LA RESPUESTA INMUNE
Un joven de 24 años se expone a una situación de riesgo de infección por VIH:
A) Ud. como médico ¿Qué le recomendaría al paciente?
Lo principal es informarle del verdadero riesgo que supone la exposición que ha tenido, luego facilitarle la información para que se realice las pruebas de detección básica de laboratorio y eventualmente prescriba un tratamiento. Si la exposición ha sido realmente de mucho riesgo, le recomendará la realización inmediata de un análisis para ver si el paciente tiene ya anticuerpos, que procederían de una infección contraída previamente. Si el resultado es negativo, el análisis debe repetirse a los tres y a los seis meses, y si continúa siendo negativo se puede estar seguro que no existió contagio. En caso de exposición accidental, por ejemplo tras haber sufrido un pinchazo con una aguja contaminada, o tras haber tenido una relación sexual de alto riesgo, se puede prescribir un tratamiento para intentar prevenir la infección por el VIH. Este tratamiento debe iniciarse cuanto antes, si es posible en las primeras horas después de la exposición. Debe tenerse en cuenta que los medicamentos que se emplean para prevenir la infección por el VIH poseen efectos secundarios que a veces son desagradables. Por ello, su utilización sólo es aconsejable si la exposición ha sido realmente de riesgo. La decisión de tomar este tratamiento o no debe ser compartida entre el médico y la persona afectada.
B) Por otra parte, el individuo decide ir a la semana a un laboratorio a hacerse una prueba de ELISA para evaluarse su estatus serológico, en
el laboratorio le informan que ellos realizarán un ELISA de 4ta generación, dicha prueba resulta positiva. Así mismo, ac ude a un segundo laboratorio donde le realizan un ELISA de segunda generación, que arroja un resultado negativo. Explique cuál es la diferencia entre ambos tipos de ELISA y el porqué de la disparidad de los resultados. Las pruebas ELISA han ido evolucionando (existen cuatro generaciones) y refinándose. Así, mientras que los ensayos de segunda generación solo permitían detectar determinados anticuerpos, los de cuarta generación detectan múltiples anticuerpos e incluso proteínas del propio virus tales como el antígeno p24 –que tiene una concentración elevada en sangre durante la fase primaria de la infección-. De este modo, las pruebas ELISA de cuarta generación permiten detectar infecciones por VIH a las dos semanas de producirse, a diferencia de las de segunda generación, que únicamente podían detectar el virus transcurrido 2 meses desde su entrada al organismo, por esta razones se producen la disparidad de los resultados ya que uno es más susceptible en un corto periodo después de la infección. Si las pruebas rápidas o de detección ofrecen resultados negativos se considerará que la persona no está infectada. En el caso de que arrojen un resultado positivo es preciso llevar a cabo una prueba de confirmación, denominada Western Blot, que permitirá determinar si diagnóstico es correcto, ya que detecta los anticuerpos de forma más precisa. El motivo de que se utilice únicamente como prueba de confirmación es su elevado coste.
C) En vista de los resultados obtenidos se le realiza una carga viral de VIH, la cual da un resultado de 500.000 copias/ml. Explique en que consiste la cuantificación de carga viral por PCR real time, que sistemas de detección fluorescente se pueden emplear para llevar a cabo dicha cuantificación.
La PCR en tiempo real (o PCR cuantitativa) permite cuantificar además de detectar y amplificar secuencias de ADN, se emplean sondas marcadas con fluorocromos. Las sondas de hidrólisis, frecuentemente empleadas en esta técnica, son oligonucleótidos que presentan fluorocromos en ambos extremos y tienen una secuencia complementaria a parte del fragmento de ADN que se quiere amplificar. Uno de los fluorocromos actúa como donador de fluorescencia en el extremo 5’ y el otro como aceptor de esta fluorescencia en el extremo 3’. La ADN polimerasa se desplaza sobre la cadena de ADN sintetizando la cadena complementaria a partir de un fragmento de ADN que sirve de molde (cebador). Al llegar al punto en el que la sonda se ha hibridado, la hidroliza. El fluorocromo del extremo 5’ de la sonda (el donador) es liberado. El fluorocromo aceptor no puede entonces absorber la fluorescencia del donador por estar alejado de él
espacialmente. Un detector realiza la medida de esta emisión de fluorescencia, que es proporcional a la cantidad de ADN presente, y la representa gráficamente. Además de proporcionar información cuantitativa. Son muchas las aplicaciones de esta técnica en el campo de la medicina. Cabe destacar la cuantificación viral, la cuantificación de la expresión de genes, el control de la eficacia de fármacos, la detección de agentes infecciosos, el diagnóstico de tumores y la detección de polimorfismos.
D) Luego de todas estas pruebas, explique cuál es el estado serológico de dicho paciente
Basado en los resultados de la prueba de ELISA de 4ta generación y dicha prueba resulta positiva, lo que quiere decir que hay presencia de p24 antes de que se produzcan los anticuerpos acortándose el periodo de ventana a 2 o 3 semanas en este caso de un positivo por pruebas rápidas, es preciso llevar a cabo una prueba de confirmación, denominada Western Blot, que permitirá determinar si diagnóstico es correcto, ya que detecta los anticuerpos de forma más precisa. La carga viral tampoco es un estudio de rutina ni se usa para evaluar la infección por VIH como tal salvo que la clínica lo amerite pero en este caso con una carga viral de VIH, la cual da un resultado de 500.000 copias/ml, esto indica una tasa alta de progresión de la enfermedad por lo que se recomienda el inicio de tratamiento. Los aumentos de la carga viral VIH-1 se deben valorar con mucha precaución cuando lleven implícito la toma de decisiones terapéuticas que supongan un cambio de tratamiento; decisiones precipitadas pueden conducir a la aparición de resistencias, de resistencias cruzadas y al rápido agotamiento del corto arsenal de antirretrovirales existentes en la actualidad. Todos los estudios que sirven de base para establecer las recomendaciones iniciales que rigen en la actualidad sólo han podido evaluar lo que está aconteciendo en un corto espacio de tiempo y no necesariamente implican que los datos que se obtengan con estudios a más largo plazo respalden las recomendaciones iniciales.
¿Qué estudios adicionales le recomendaría Ud. ha dicho joven?
Ante un caso positivo es necesario hacerse pruebas de diagnóstico más específico como es el caso de Western Blot, que permitirá determinar si diagnóstico es correcto, ya que detecta los anticuerpos de forma más precisa. También sería necesario realizar pruebas de tuberculosis. Usted puede estar infectado con tuberculosis y no saberlo. La tuberculosis no detectada puede
causar una grave enfermedad, pero puede ser tratado con éxito si se detecta temprano Sería también necesario someterse a exámenes médicos para otras enfermedades de transmisión sexual (ETS). Las ETS no detectadas pueden causar problemas de salud graves. También es importante practicar los comportamientos sexuales seguros para que usted pueda evitar contraer las ETS.
