ACTIVIDAD ENZIMÁTICA EXTRACELULAR DE BACTERIAS
Resultados y discusiones
Agar almidón
Medio de cultivo
Sustrato
Enzima a evaluar
Sustancia para revelado
Agar almidón
almidón
amilasa
lugol
Reacción de revelado Halo de hidrólisis
Zona no hidrolizada
transparente
azul oscuro
Técnica de cultivo: Estriado sobre la superficie de agar Luego de la incubación
Aquí se evaluó la actividad enzimática con tres bacterias: Escherichia coli Staphylococcus aureus Bacillus cereus Luego de la incubación, y después de cubrir la superficie de la placa con solución de lugol, se obtuvo los siguientes resultados:
El halo de hidrólisis era transparente en el cuadrante que correspondía a la bacteria Bacillus cereus, los demás cuadrantes y el cuadrante control estaban de color oscuro, lo que correspondía con zonas no hidrolizadas.
El diámetro del halo de hidrólisis fue de 1 cm
La molécula del almidón es muy compleja y para su asimilación por las bacterias, estas deben descomponerla (hidrolizarla) en sustancias más simples y fácilmente asimilables. Un gran número de bacterias son capaces de elaborar una enzima amilasa que hidroliza el almidón con formación de maltosa. La maltosa puede ingresar a la célula para ser utilizada. La enzima amilasa es también una enzima extracelular, por lo tanto la demostración de la hidrólisis del almidón puede hacerse tanto en medio líquido como en medio sólido. El almidón reacciona químicamente con iodo para producir un color azul oscuro cuando las moléculas de Iodo se insertan en los huecos de la molécula espiralada del almidón. Este resultado es debido a que la molécula absorbe más luz visible excepto el azul, y si el al midón se rompe en maltosa y glucosa, no se desarrolla ningún colo r debido a que desaparece la espiral y no quedan los huecos para que entre el lodo, esta ausencia de color es asociada con la hidrólisis de almidón. (Bailey; Scott, 2007) La producción de amilasa es útil para diferenciar especies de Bacillus, de Streptococcus y de Lactobacillus. De igual forma, se aplica a esquemas de diferenciación de algunas bacterias aerobias y anaerobias como Actinomyces, Bacteroides, Clostridium y fusobacterium (Rodríguez .
et al., 2012) Todos los miembros del grupo de Bacillus cereus producen leciticinasa en agar yema de huevo e hidrolizan la caseína, el almidón y la gelatina. (Koneman, 2008) Entonces con lo expuesto lineas arriba, concluímos que la evaluación de bacterias en el agar almidon fue satisfactorio, comprobándose que solo la bacteria Bacillus cereus fue capaz de hidrolizar el almidón
Recomendaciones:
Usar en todo momento mascarilla, bata, guantes y gorro.
Lavar las manos con agua y jabón antes de realizar las actividades programadas, antes de salir del laboratorio y siempre después de manejar materiales que se sabe o se sospecha que pueden estar contaminados.
Tener un adecuado uso de los materiales y sobre todo cuando se hace el cultivo en las placas petri, evitando la contaminación con el ambiente, cogiendo con una sola mano la placa petri y con la otra el estilete o asa de kôlle
Bibliografía (2007). En Bailey, & Scott, Diagnóstico Microbiológico (págs. 690-691). Madrid: Editorial Médica Panamericana S.A. (2008). En E. Koneman, Diagnóstico Microbiológico (págs. 743-744). Buenos Aires: Editorial Médica Panamerica. (2012). En E. Rodríguez Caballini, M. Gamboa Coronado, & F. Hernández Chavarría, Bacteriología General (págs. 194-195). Costa Rica: Editorial Universidad de Costa Rica.
