CULTURAS PURAS E CARACTERISTICAS CULTURAIS
Quando microrganismos crescem em meios de laboratórios, dá-se a eles o nome de culturas. Crescendo no mesmo tipo de meio, as diferentes espécies bacterianas podem parecer completamente diferentes, assim o conhecimento do aspecto ou das características culturais de um grupo é útil na identificação da espécie. Antes da avaliação de qualquer característica cultural, é necessária a obtenção de cultura pura. população ão ambien ambiental tal,, com várias várias espécie espéciess crescend crescendoo juntas juntas (ex: pele, Cultura Cultura mista mista: populaç intestino) artificial, obtida em laboratório, laboratório, onde apenas uma espécie espécie esta se Cultura pura : condição artificial, multiplicando no meio de cultura. Obtida após uma seqüência de procedimentos laboratoriais. Para a identificação de uma espécie para fins diagnósticos ou para obtenção de linhagens selecionadas para fermentação ou outra utilização, a primeira condição necessária é a obtenção de cultura pura. Método de isolamento de culturas puras: Semear por esgotamento
Inocular uma suspensão bacteriana desconhecida ou mista na superfície do meio de cultu cultura ra sólid sólidoo para para obten obtenção ção de colô colôni nias as isol isolada adass - consi consist stee em seme semear ar com com a alça alça bacteriológica a superfície do agar espalhando as células bacterianas de maneira a permitir o crescimento crescimento de colônias distantes distantes umas das outras, cada cada uma proveniente proveniente de uma única célula e portanto formando um conjunto de células idênticas, também chamado de Unidade Formadora de Colônia (UFC). Observa-se as características de cada colônia isolada e seleciona-se as desejadas Com uma agulha bacteriológica, toca-se a colônia selecionada e inocula-se em meio líquido adequado, para que esta se multiplique. Após o crescimento no novo meio de cultura líquido, inocula-se por esgotamento, esta suspensão em uma nova placa de meio sólido para verificação da pureza (observar se todas as colônias crescidas isoladamente na placa são iguais). Se ainda forem vistas colôni colônias as com caracte característ rística icass cultur culturais ais diversa diversas, s, repetir repetir o procedi procedimen mento to anteri anterior, or, até a obten obtenção ção da cultu cultura ra pura, pura, onde onde toda todass as colôn colônia iass ou UFC isolad isoladas as tem tem as mesm mesmas as características culturais (são idênticas no meio de cultura escolhido). SEQUENCIA DE PROCEDIMENTOS PARA IDENTIFICAÇÃO BACTERIANA 1o) Cultura de enriquecimento (inocular a amostra que contem os M.Os em meio que favoreça o crescimento) – Nem sempre é necessária. 2o) Isolamento (obtenção da cultura pura) 3o) Coloração de Gram (diferenciação dos dois principais grupos bacterianos) 4o) Seleção dos meios mais adequados a identificação do microrganismo isolado 5o) Identificação através de testes bioquímicos 6o) Antibiograma ( quando tratar-se de amostra de origem infecciosa)
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA Quanto à consistência: Sòlidos ( com acréscimo de Agar- carboidrato obtido de algas marinhas que não é digerido pela maioria dos microrganismos). Utilização: isolamento (obtenção de culturas puras) Crescimento em superfície (aerobiose) Crescimento em profundidade (pour plate) Líquidos: sem acréscimo de Agar Utilização: enriquecimento de culturas, multiplicação Quanto à composição: Meios de composição química definida/ Sintéticos ( p/ tipos específicos de MO – também para identificação) Ex: 1g de glicose 0,5g de NaCL 1g de cisteina 0,5 de hidrolisado de caseína Meios complexos (geralmente ricos, que permitem crescimento de vários tipos de MO) ex: 1 g de extrato de levedura 2 g de extrato de carne 1 g de glicose 0,5 g de NaCl Quanto à função/utilização: Meios enriquecidos: adição de sangue, plasma etc.... Meios seletivos: com substância química que iniba determinado grupo de MO e portanto selecione o crescimento Meios diferenciais: que favoreça o aparecimento de um tipo de crescimento ou modificação que permita ao observador distinguir os tipos de MO. Meios para contagem: padronizados para contagem de MO em leite e água Meios para identificação: composições específicas para determinar as características metabólicas da cultura pura e permitir a identificação da espécie. Meio de estocagem ou manutenção: composição que permita crescimento lento e a manutenção das características metabólicas da espécie.
