(niversidad utónoma del Estado de 78ico Facultad de %u"mica ompendio de pruebas bio%u"micas
Prueba número. 12 Fecha de
rupo 62
emisión. 19 de mayo de 2016
1. Nombre de la bioquímica.
CHROMagar Orientation Medium.
2. Fundamento. Es un medio no selectivo para para el aislamiento, aislamiento, la identiicación identiicación directa, la dierenciación dierenciación y el recuento de pató!eno pató!enos s de las v"as urinarias, urinarias, esto es posible posible mediante mediante la coloración coloración de colonia colonias s y el medio. medio. #ar$ la misma inormación %ue la combinación de las & placas cl$sicas utili'ados para an$lisis de ()* +a!ar san!re, a!ar -E# y acon/ey En # 34a!ar 4rientation edium, peptonas especialmente seleccionadas suministran los nutrientes. -a me'cla de cromó!enos est$ ormada por sustratos artiiciales +cromó!enos +cromó!enos %ue liberan compuestos de colores dierentes al ser de!radados por en'imas microbianas.
3. Composición. 5ar"a de un proveedor a otro, pero la parte caracter"stica de este medio es el %ue contiene una me'cla cromó!ena lo %ue le da la capacidad de dierenciación.
. !rocedimiento de la prueba. M"#$O #" C%&'$(O) 1
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: u s p e n d
er lentamente && ! de base de polvo en 1 l de a!ua puriicada. alentar hasta la ebullición +100 ; a!itando re!ularmente hasta homo!eni'ar. Esterili'ar en autoclave a 121 ; durante 1< min. 5erter en placas de Petri est7riles y de=ar solidiicar.
$NOC%&*C$+N) •
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3eco!er con un asa calibrada +0,01 o 0,001 m- una muestra de orina no diluida, adecuadamente me'clada. :embrar la muestra por estr"as en la placo o en e8tensión. *ncubar en condiciones aerobias a &> ; durante 1?@2A horas. Evitar la e8posición a la lu' durante la incubación, dado %ue as" se podr"an destruir los cromó!enos. (na ve' %ue los colores de las colonias se hayan desarrollado, se pueden e8poner a la lu'.
,. Controles. 2
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*ncubar Facultad de %u"mica las placas ompendio de pruebas bio%u"micas en posición rupo 62 invertida a &< B &> ; en atmósera aerobia durante 20 B 2A h.
-. &ectura de interpretación
Cepas
Resultados del crecimiento
Escherichia coli
recimiento de bueno a e8celenteC colonias de medianas a !randes, de color rosado oscuro a rosa, transparentes recimiento de bueno a e8celenteC colonias de tamaDo mediano, de color a'ul intenso, con o sin halos violetas recimiento de bueno a e8celenteC colonias de tamaDo mediano, de color p$lido a bei!e, rodeadas de un halo de color de $mbar a marrónC en 'onas de crecimiento denso, el medio puede ser de color completamente $mbar a marrón. -a prolieración est$ parcial o completamente inhibida. recimiento de bueno a e8celenteC colonias pe%ueDas, de color a'ul verdoso a a'ul recimiento de re!ular a buenoC colonias de diminutas a pe%ueDas, de color a'ul claro verdoso a a'ul claro, con o sin halos recimiento de bueno a e8celenteC colonias de medianas a pe%ueDas, con su color natural +de blanco a crema recimiento de re!ular a buenoC colonias pe%ueDas, opacas, de color de rosa claro a rosado #e incoloras a $mbar muy claro, transparentes.
Enterobacter cloacae
Proteus mirabilis
Enterococcus faecalis
Streptococcus agalactiae.
Staphylococcus aureus.
Staphylococcus saprophyticus.
in inocular.
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/. ! r u e b a
s adicionales.
0. &imitaciones del procedimiento -as colonias %ue muestran su color natural y no reaccionan con los sustratos cromó!enos deben someterse a dierenciación adicional mediante pruebas bio%u"micas o seroló!icas apropiadas. -os bacilos ram ne!ativos dierentes de los pertenecientes al !rupo E: pueden producir colonias !randes de color a'ul y, por tanto, re%uerir pruebas bio%u"micas adicionales para su identiicación. 34a!ar 4rientation edium no avorece el crecimiento de or!anismos e8i!entes tales como eisseria, aemophiluso ycoplasma spp. o se ha validado el uso de este medio para muestras cl"nicas o no cl"nicas dierentes de la orina.
. ibliograía
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