616.995 1 Ind
DAFTAR PUSTAKA
s
Depkes, 2006, Pemeriksaan Miroskopis Tuberkulosis, Panduan Bagi Petugas Laboratorium Kemenkes, 2011, Modul Pelatihan Pemeriksaan Mikroskopis TB WHO, 1998, Laboratory Services in Tuberculosis Control Part 2, Microscopy, WHO, 1998 WHO, 2002, External Quality Assessment for AFB Smear Microscopy, APHL, CDC, IUATLD,KNCV, IUATLD,KNC V, RIT, WHO
Standar Prosedur Operasional
Pemeriksaan Mikroskopis TB
RIT, 2007, Mikroskopis TB untuk Program Tuberkulosis Nasional, A. Fujiki Depkes, 2009, Penjaminan Mutu Eksternal untuk Mikroskopi AFB pada level Operasional, Kelompok Inti Nasional Pelatihan Mikroskopi TB RIT, 2009, Preparasi Sediaan Dahak BTA Yang Baik, A.Fujiki
KEMENTERIAN KESEHATAN RI DIREKTORAT JENDERAL JE NDERAL BINA UP U PAY AYA A KESEHAT KE SEHATAN AN DIREKTORAT JENDERAL PENGENDALIAN PENYAKIT DAN PENYEHATAN LINGKUNGAN 2012 38
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
FORMULIR HASIL PEMANTAPAN MUTU INTERNAL LABORATORIUM MIKROSKOPIS TB
Nama Laboratori um Kabupaten / Kota
: ………………………………………………………... : …………………………………………………………
Provinsi
: …………………………………………………………
Tanggal Uji Fungsi
Nomor Batch Reagen
Kontrol Negatif
Kontrol Positif (1+)
Keterangan
Tanda Tangan
Katalog Dalam Terbitan. Kementerian Kesehatan RI 616.995 1 Ind s
Indonesia. Kementerian Kesehatan RI. Direktorat Jenderal Bina Upaya Kesehatan Standar prosedur operasional pemeriksaan mikroskopis TB,-- Jakarta : Kementerian Kesehatan RI. 20121 ISBN 978-602-235-147-4
Penanggungjawab Penanggungjawa b PMI
(Nama Jelas)
1. Judul I. TUBERCULOSIS - DIAGNOSIS II. TUBERCULOSIS - LABORATORY MANUALS III. MICROSCOPY - LABORATORY MANUALS Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
37
Jangan sekali-sekali menyentuh permukaan bola lampu dengan tangan telan-
KATA PENGANTAR
jang, karena lemak kulit yang tertinggal akan mengurangi terangnya sinar.
Gunakan kertas tissue/ kertas lensa/ pembungkus lampu untuk memegang bola lampu saat memasangnya ke mikroskop.
Sebaiknya selalu tersedia cadangan lampu dan sekering. Pastikan voltase yang digunakan sesuai, 110V atau 220V, dan bilamana perlu gunakan stabilisator
Program
pengendalian
tuberkulosis
(TB)
di
Indonesia
telah
terlihat
keberhasilannya dengan menurunnya jumlah penderita di peringkat dunia, namun untuk mencapai target MDG’s pada tahun 2015 diperlukan penguatan program
voltase.
penanggulangan TB dengan strategi Directly Observed Treatment Shortcourse
Harus ada ventilasi yang cukup agar panas yang dihasilkan lampu dapat
(DOTS), di mana salah satu komponennya adalah pemeriksaan mikroskopis TB yang
diatasi. Sebelum menyalakan lampu, putarlah regulator voltase ke minimum.
bermutu. Standar Prosedur Operasional (SPO) merupakan bagian dari komponen mutu laboratorium TB yang disusun sebagai acuan bagi petugas laboratorium dalam melakukan pemeriksaan mikroskopis TB di berbagai tingkat pelayanan, sehingga diharapkan kualitas pemeriksaan laboratorium TB terjamin. Kami mengucapkan terima kasih kepada Kelompok Kerja Laboratorium TB dan semua pihak yang telah bekerja sama untuk menyusun Prosedur Tetap Pemeriksaan
Pengembus udara
Jangan menyentuh bola lampu saat memasang, gunakan kertas tissue
Kotak penyimpan mikroskop, harus selalu menyala walaupun mikroskop sedang dipakai
Mikroskopis TB. Harapan kami semoga buku ini bermanfaat bagi semua laboratorium khususnya laboratorium yang melakukan pemeriksaan TB dalam menjamin mutu pemeriksaannya.
Okuler harus tetap pada tempatnya, jamur atau debu dapat masuk melalui lubang kosong tempat objektif bila lensa tidak terpasang. Bila lensa ada yang hilang, tutup rapat dengan penutup yang tersedia.
Bila
Direktur Jenderal Bina Upaya Kesehatan
gambar terlihat buram atau ada bintik hitam, periksa adanya debu atau
kotoran pada lensa objektif, okuler, kondensor, dan kaca sumber cahaya. Bintik hitam bergerak bila okuler diputar, berarti debu pada okuler. Bintik hitam bila sediaan digerakkan, berarti debu pada kaca sediaan. Debu
pada lensa dapat dihilangkan dengan menggunakan sikat halus atau
Dr. Supriyantoro, SpP, MARS
dengan meniupkan udara dengan penghembus udara di atas permukaan lensa.
36
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
i
7.
Fokuskan gambar dengan mata kanan dengan cara melihat ke dalam okuler kanan dan sesuaikan dengan tombol pengatur focus halus. 8. Fokuskan gambar dengan mata kiri dengan cara melihat ke dalam okuler kiri dan putar. cincin penyesuai diopter sampai didapatkan gambar yang paling jelas, baik untuk mata kiri maupun mata kanan. 9. Buka iris/diafr agma sampai 70 – 80%, hingga lapangan pandang terang dengan merata. 10. Teteskan minyak imersi di atas sediaan (aplikator jangan menyentuh sediaan) dan putar lensa objektif 100 x ke tempatnya sampai berbunyi “klik”. 11. Fokuskan dengan menggunakan tombol pengatur fokus halus, bukan dengan pengatur fokus kasar sampai didapatkan gambar yang paling jelas. 12. Begitu sediaan selesai dibaca, putar objektif 100 x menjauhi kaca sediaan, tempatkan objektif 10 x di atas sediaan, lalu sediaan diambil. 13. Bila telah selesai, atur kembali pengatur intensitas cahaya ke minimum dan matikan mikroskop dengan menekan tombol OFF. 14. Setiap selesai menggunakan mikroskop, bersihkan dengan hati-hati minyak emersi dari lensa objektif 100 x dengan menggunakan kertas lensa, kondensor diturunkan, lensa pada posisi lensa objektif terpendek. Simpan mikroskop dalam kotak mikroskop/ lemari yang dijaga kelembabannya dengan menempatkan lampu 5 watt yang selalu menyala
Perawatan mikroskop
Jangan sekali-kali membongkar bagian dalam mikroskop.
Membersihkan lensa
Untuk membersihkan lensa sebaiknya gunakan Ethyl ether atau pembersih lensa yang sesuai anjuran pabrik. Beberapa bahan pembersih dapat merusak permukaan lensa atau melarutkan perekat lensa setelah digunakan beberapa waktu. Bahan Pembersih Rekomendasi pabrik Ethyl ether/ethanol Alkohol Bensin Aseton/ keton Xylol
ii
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Penggunaan Jangka Panjang v v x x x x
Penggunaan sekali-sekali v v v v v x
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
35
Lampiran 8
KATA SAMBUTAN
PENGGUNAAN DAN PEMELIHARAAN MIKROSKOP Tuberkulosis atau TB masih merupakan masalah kesehatan masyarakat yang Prinsip kerja mikroskop Cahaya yang berasal dari sumber cahaya (cermin atau sinar lampu) diteruskan ke diafragma, kondensor dan kaca sediaan yang diperiksa. Cahaya dari lensa objektif diteruskan melalui tabung mikroskop ke lensa okuler dan selanjutnya diterima oleh mata sehingga objek terlihat.
menjadi tantangan global. Laboratorium TB merupakan komponen utama dalam pengendalian penyakit TB karena menjadi penentu diagnosis TB dan sebagai sarana pemantauan pengobatan pasien TB. Pemeriksaan Mikroskopis TB tetap menjadi alat diagnosis utama TB di Indonesia. Kegiatan pemeriksaan mikroskopis TB dimulai dari penjaringan suspek TB, pengumpulan contoh uji dahak, pemeriksaan mikroskopis, pencatatan pelaporan dan pemantapan mutu yang harus dilaksanakan oleh semua
Cara menggunakan mikroskop untuk pemeriksaan dahak 1. Letakkan mikroskop di meja yang permukaannya datar, tidak licin dan dekat sumber cahaya. 2. Bila menggunakan sumber cahaya lampu : a. Atur tegangan lampu ke minimum. b. Nyalakan mikroskop memakai tombol ON. c. Sesuaikan dengan pelan-pelan sampai intensitas cahaya yang diinginkan tercapai.
komponen yang terlibat sesuai dengan prosedur standar. Dokumen Standar Prosedur Operasional ini ditujukan kepada seluruh petugas laboratorium TB di fasyankes yaitu PS, PRM, PPM, RS dan Laboratorium Swasta yang menjalankan strategi DOTS agar dijadikan sebagai acuan dalam melaksanakan pemeriksaan Mikroskopis TB sesuai standar. Akhirnya kami mengucapkan terima kasih kepada semua pihak terkait yang telah ikut berkontribusi dalam menyelesaikan Standar Prosedur Operasional ini. Semoga buku ini dapat bermanfaat bagi semua pihak terkait, khususnya dalam upaya meningkatkan kualitas pemeriksaan mikroskopis TB untuk kepentingan Program Nasional Pengendalian TB.
Selalu gunakan tombol pengatur fokus untuk menurunkan meja sediaan menjauhi lensa! 3. Letakkan sediaan yang telah diwarnai ke atas meja sediaan. 4. Putar lempeng objektif ke objektif 10 x. 5. Atur dengan tombol pengatur fokus kasar dan pengatur fokus halus sampai sediaan terlihat jelas. 6. Sesuaikan jarak antar pupil sampai gambar kiri dan gambar kanan menyatu dengan cara menggesergeser kedua lensa okuler karena setiap orang mempunyai jarak antar pupil yang berbeda-beda).
34
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Jakarta, Agustus 2012 Direktur Jenderal PP dan PL
Prof Dr. Tjandra Yoga Aditama NIP. 195509031980121001
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
iii
Sebelum diolah limbah cair harus dikumpulkan dalam wadah khusus yang terbuat dari plastik. Tidak dibenarkan menggunakan wadah dari gelas karena dapat pecah. Jika limbah mengandung pelarut organik, wadah harus terbuat dari bahan baja anti karat. 2. Limbah padat harus dikumpulkan dalam kotak limbah yang tutupnya dapat dibuka dengan kaki dan sebelah dalamnya dilapisi kantong plastik khusus. Kantong harus diikat sebelum diangkat dari dalam kotak. Lakukan insinerasi jika limbah dapat dibakar (misalnya: kain, kertas). Setelah dekontaminasi dan sterilisasi limbah padat di bakar atau dikubur dengan kedalaman 1,5 meter
3. Limbah Cair Melalui system IPAL/ waste water treatment
iv
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
33
otoklaf secara berkala sebaikn a dengan sebagai indikator.
emakai sp ra B thermophilus
TIM PENYUSUN
ika menggu akan pemanasan kering, lakukan pada suhu
1600C selama minimal 30 menit. Jika belu
ada otoklaf, dapat dig nakan
pressu e cooker pa a suhu didih selama mini al 30 menit.
Dr. Sri Widyastuti
Subdit BP Mikrobiologi dan Imunologi, Dit BPPM & SK
Dra. Siti Sumartini, M.Kes
Subdit BP Mikrobiologi dan Imunologi, Dit BPPM & SK
Drg. Dyah Erty Mustikawati, MPH
Subdit TB, Dit P2ML
Dr. Nani Rizkiyani, M.Kes
Subdit TB, Dit P2ML
6. Tersediia “spill box” yang ber isi semua peralatan un uk menang ulangi kecele aan kerja berupa tumpa an bahan infeksius (terdiri atas : tissue, lap tebal, desinfectant, sapu kecil de gan skop sa pah ). 7. Tersediia kotak PPK yang berisi kapas, antiseptik, plester dll
B. Penanganan peralatan Laboratorium
Prof. Agus Sjahrurrachman, Sp.MK Kelompok Kerja Laboratorium TB
-
Persiapan bahan d n alat untuk pemeriksaan
-
Prose dekontaminasi limbah sebelum dibuang atau dicuci
Direnda dalam disinfektan selama 12 jam
Direbus sampai mendidih 10 menit
Dibakar sampai hangus
Dr. Harini Janiar, Sp.PK
Kelompok Kerja Laboratorium TB
Dr. Koesprijanti, Sp.PK
Kelompok Kerja Laboratorium TB
Drs. Isak Solihin, M.Kes
Kelompok Kerja Laboratorium TB
Dra. Ning Rintiswati, M.Kes
Kelompok Kerja Laboratorium TB
Dr. Wiwi Ambarwati
Subdit BP Mikrobiologi dan Imunologi, Dit BPPM & SK
Agus Susanto, SKM, M.Kes
Subdit BP Mikrobiologi dan Imunologi, Dit BPPM & SK
Dr. Irfan Ediyanto
Subdit TB, Dit P2ML
Dr. Retno Kusuma Dewi
Subdit TB, Dit P2ML
Roni Chandra, S.Si, M.Biomedik
KNCV
C. Penanganan Limbah L aboratorium 1.
Limba benda taja Limbah benda tajam langsun tusukan
untuk
dimasukkan dalam wadah khusus tahan
dimusnahkan di incenerator. Bila tidak mengg nakan
incenerator harus d idekontaminasi sebelum dimusnahkan.
32
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
v
Lampiran 7 INSTRUKSI KERJA PENGELOLAAN LIMBAH LABORATORIUM TB A. Pemusnahan sisa contoh uji 1. Limbah infeksius dan tidak infeksius, baik padat maupun cair harus dikumpulkan pada tempat terpisah dalam wadah yang tidak bocor. Wadah untuk limbah tajam harus kuat terhadap tusukan. 2. Wadah contoh uji dan tutupnya, kaca sediaan yang sudah tak terpakai dan limbah padat lain harus direndam dalam larutan lysol 5% atau desinfektan lain yang cocok untuk desinfeksi M.tuberculosis selama minimal 12 jam. 3. Limbah cair bekas pewarnaan ditampung dalam wadah yang mengandung lysol sebelum dibuang ke saluran limbah. Limbah zat pewarna hanya dibuang ke saluran air kotor yang tak akan mencemari badan air/ sungai untuk konsumsi. Informasi lebih lanjut dapat ditanyakan kepada Badan Pengendalian Dampak Lingkungan (Bapedal) daerah masing-masing. 4. Insenerasi merupakan cara mengolah limbah sebelum atau setelah diotoklaf. Insenerasi idealnya dilakukan pada alat dengan dua ruang bakar, di mana pada ruang bakar pertama suhu mencapai 800 0C dan pada ruang bakar kedua mencapai 10000C. Waktu retensi gas dalam ruang bakar kedua minimal 0,5 detik. Insenerator yang hanya memiliki satu ruang bakar kurang efektif untuk menangani bahan infektif. Jika memakai carbonizer pakailah sesuai petunjuk pemakaian. 5. Untuk sterilisasi dengan otoklaf dibutuhkan suhu 1210C dengan tekanan udara 1,5 sampai 2 atmosfer selama minimal 20 menit (perhitungan waktu dimulai saat suhu dan tekanan udara tersebut tercapai; jangan membuka otoklaf jika belum dingin benar dan jangan mengisi air berlebihan). Jika jumlah yang di otoklaf banyak, dianjurkan minimal 30 menit. Pastikan bahwa ada ruang kosong diantara barang yang di otoklaf. Pada saat melakukan otoklaf, pastikan bahwa tidak ada wadah yang tertutup rapat. Wadah harus sedikit dilonggarkan agar uap air dalam mudah masuk ke dalam wadah. Dianjurkan melakukan uji fungsi vi
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
31
Cara mengisi bagian bawah: (diisi oleh petugas lab yang membaca sediaan). No. Register Lab
:
DAFTAR ISI
Tulis nomor yang sesuai dengan di buku register lab (TB.04).
KATA PENGANTAR........................................................................................................i KATA SAMBUTAN..........................................................................................................ii i
Tanggal pemeriksaan
:
Tulis tanggal sediaan tsb diperiksa
Spesimen dahak
:
Tulis kode huruf sesuai waktu pengambilan dahak
TIM PENYUSUN............................................................................................................. v
yang dikirim :
Penegakan diagnosis:
I.
Tujuan dan Ruang Lingkup ................................................................................. 1
Follow up Akhir fase intensif:
II.
Tanggung jawab .................................................................................................. 1
III.
Pra Kualifikasi Tenaga ........................................................................................ 1
IV.
Rujukan ............................................................................................................... 1
Follow up AP :
V.
Pengertian-pengertian ......................................................................................... 2
Sesuai waktu dan urutan specimen (H) & (I)
VI.
Dokumen ............................................................................................................. 2
Setelah sisipan :
VII. Prosedur .............................................................................................................. 2
Follow up bila 1 bulan sebelum AP : Sesuai waktu dan urutan specimen (F) & (G)
Sesuai waktu dan urutan specimen (J) & (K) Hasil
:
Beri tanda rumput () pada kotak yang sesuai untuk tiap sediaan yang diperiksa. Untuk kolom 1-
Diperiksa oleh
:
Standar Prosedur Operasional Pemeriksaan Mikroskopis TB ........................................ 1
Sewaktu (A), Pagi (B), Sewaktu (C)
Sesuai waktu dan urutan specimen (D) & (E)
DAFTAR ISI ...................................................................................................................vii
VIII. Instruksi Kerja ...................................................................................................... 4 IX.
Alasan Perubahan Versi SOP ............................................................................. 4
9 bta, tulis jumlah kuman yang ditemukan dalam
Lampiran 1. INSTRUKSI KERJA PENGUMPULAN DAHAK .......................................... 5
100 lp
Lampiran 2 INSTRUKSI KERJA PEMBERIAN IDENTITAS SEDIAAN...........................9
Bubuhi tanda tangan dan tulis nama lengkap
Lampiran 3 INSTRUKSI KERJA PEMBUATAN SEDIAAN ........................................... 11
petugas
Lampiran 4 INSTRUKSI KERJA PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS .............................. 16
pemeriksa Lampiran 5 INSTRUKSI KERJA PEMANTAPAN MUTU INTERNAL ........................... 18 Lampiran 6 INSTRUKSI KERJA PENCATATAN PELAPORAN ................................... 24 Lampiran 7 INSTRUKSI KERJA PENGELOLAAN LIMBAH LABORATORIUM TB ...... 31 Lampiran 8 PENGGUNAAN DAN PEMELIHARAAN MIKROSKOP ............................. 34 DAFTAR PUSTAKA......................................................................................................38
30
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
vii
Petunjuk formulir TB.05 (Permohonan Lab untuk pemeriksaan dahak) Formulir ini diisi: • Bagian atas oleh petugas yang meminta pemeriksaan dahak • Bagian bawah oleh petugas yang membaca sediaan dahak. Satu penderita menggunakan satu formulir. Satu formulir digunakan untuk 3 spesimen (untuk diagnosis) atau untuk 2 spesimen (untuk follow-up pengobatan).
Cara mengisi bagian atas Nama Unit Yankes
:
Tulis nama unit pengirim.
Nama suspek/pasien
:
Tulis nama lengkap dari suspek/pasien
Umur
:
Jenis kelamin
:
Tulis umur dalam tahun. Beri tanda pada kotak yang sesuai.
Alamat lengkap
:
Tulis alamat pasien secara lengkap.
Kabupaten/Kota Klasifikasi Penyakit
: :
Tulis nama kabupaten / kota. Beri tanda pada kotak yang sesuai
Alasan pemeriksaan
:
Beri tanda pada kotak yang sesuai
No. Reg Kab/Kota
:
Tulis no register Kab/Kota (pasien)
Nomor identitas sediaan
:
Tulis sesuai dengan nomer yang ada pada kaca sediaan,
dengan
tidak
mencantumkan
waktu
pengambilan dahak (SPS). Tanggal pengambilan dahak
:
Tulis tanggal pengambilan dahak terakhir.
:
Tulis tanggal sediaan tsb dikirim ke Lab.
:
Bubuhi tanda tangan dari pengambil/pembuat
:
Beri tanda pada kotak yang sesuai
terakhir Tanggal pengiriman sediaan Tanda tangan pengambil sediaan Secara visual dahak
sediaan
tampak
viii
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
29
Petunjuk register TB.04 (Register Laboratorium TB)
Nama Laboratorium : Alamat :
Buku ini untuk mencatat setiap melakukan pemeriksaan dahak dari seorang penderita
Penanggung jawab :
Standar Prosedur Operasional Pemeriksaan Mikroskopis TB
Kode : Versi : No. Tanggal : Halaman : 1 dari 3
(baik untuk penderita suspek maupun untuk follow-up pengobatan). Buku ini diisi oleh petugas laboratorium yang melakukan pewarnaan dan pembacaan
I.
sediaan dahak di fasilitas pelayanan kesehatan. Nomor Reg. Lab
:
Tujuan dan Ruang Lingkup Prosedur tetap ini ditujukan untuk menjadi pedoman baku dalam pelayanan
Tulis nomor register Lab. dengan 3 digit, mulai dengan 001 pada setiap permulaan tahun anggaran dan tulis berurutan berdasarkan tanggal pemeriksaan. Tulis sesuai dengan nomor yang ada pada kaca sediaan yang diperiksa
pemeriksaan mikroskopis TB Ruang lingkup dibatasi pada pelayanan pemeriksaan Mikroskopis TB paru di fasyankes ; dilaksanakan oleh Tim DOTS yang terdiri dari :
Nomor Identitas Sediaan
:
Tanggal sediaan diterima Tanggal Pemeriksaan
: :
Tulis tanggal sediaan tersebut diterima Tulis tanggal pemeriksaan sediaan dahak tersebut
Rangkaian kegiatan pelayanan pemeriksaan Mikroskopis TB dimulai dari
Nama Lengkap Pasien Umur L / P
: :
pemeriksaan
Alamat Nama UPK
: :
Alasan Pemeriksaan
:
Tulis nama lengkap Tulis umur dalam tahun pada kolom jenis kelamin yang sesuai. Tulis alamat lengkap. Tulis nama unit pengobatan yang meminta dilakukannya pemeriksaan laboratorium ini. Tulis kode huruf sesuai identitas slide/ waktu pengambilan dahak di kolom diagnosis atau follow up
Hasil Pemeriksaan
:
(3 kolom: S, P, dan S) Tulis hasil pemeriksaan dengan lengkap sesuai dengan tingkat positifnya yaitu 1+, 2+, atau 3+ atau Neg pada kolom yang sesuai. Kolom S untuk dahak sewaktu pertama, Kolom P untuk dahak pagi, dan kolom S untuk dahak sewaktu kedua.
- Poliklinik DOTS: dokter dan perawat - Laboratorium: petugas laboratorium
penjaringan suspek, pencatatan dalam buku register TB 06, permintaan laboratorium
(formulir
TB
05),
pelaksanaan
pemeriksaan
laboratorium (buku register TB 04 dan formulir TB 05) sampai PME (formulir TB 12) II.
Tanggung jawab Prosedur ini berada di bawah tanggung jawab Manajer Mutu
III.
Pra Kualifikasi Tenaga A.
Medical fitness Berbadan sehat
B.
Pendidikan dan Pelatihan Dokter yang telah mengikuti pelatihan TB DOTS Pemegang program TB yang telah mengikuti pelatihan TB DOTS
Tanda tangan
:
Bubuhi tanda tangan dari petugas yang melakukan pemeriksaan.
Keterangan
:
Disediakan untuk hal-hal lain yang diperlukan.
Petugas laboratorium yang telah mengikuti pelatihan laboratorium mikroskopis TB IV.
Rujukan - Pedoman Nasional Pengendalian Tuberkulosis, 2011
28
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
1
- Modul Pelatihan Mikroskopis TB, 2011 - Pedoman Jejaring Laboratoriu TB dan Pemantapan Mutu (Quality Assurance) Pemeriksaan Mikroskopis TB V.
VI.
Pengertian-pengertian IK
:
Instruksi Kerja yang bersifat teknis
Tuberkulosis (TB)
:
Suspek
:
Penyakit menular yang dapat menyerang organ tubuh manusia (paru-paru, tulang, selaput otak, usus, dan lain-lain) yang disebabkan oleh kuman Mycobacterium tuberculosis Tersangka TB
PMI
:
Pemantapan Mutu Internal
PME
:
Pemantapan Mutu Eksternal
Dokumen TB.06
: Register Suspek TB TB.05
TB 05
: Formulir permintaan pemeriksaan dahak mikroskopis
TB.04
: Register Laboratorium
TB 12
: Formulir untuk mengirimkan sediaan untuk keperluan uji silang
VII. Prosedur A.
Penjaringan suspek Penemuan kasus TB dilakukan melalui serangkaian kegiatan mulai dari penjaringan terhadap suspek TB, pemeriksaan fisik dan laboratorium, menegakkan diagnosis dan penatalaksanaannya. Penemuan pasien TB, secara umum dilakukan secara pasif dengan promosi aktif kecuali pada kelompok khusus yang beresiko tinggi sakit TB seperti pada pasien dengan HIV, kelompok yang rentan tertular TB seperti di rutan, LP; yang hidup pada daerah kumuh, kontak dengan pasien TB BTA positif terutama anak di bawah 5 tahun dan kontak dengan pasien TB resistan obat Gejala utama pasien TB paru adalah batuk berdahak selama 2-3 minggu atau lebih. Batuk dapat diikuti dengan gejala tambahan yaitu dahak
2
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
27
bercampur darah, batuk darah, sesak nafas, badan lemas, nafsu makan menurun, berat badan menurun, malaise, berkeringat malam hari tanpa kegiatan fisik, demam meriang lebih dari satu bulan. B.
Pencatatan dalam register TB 06 Semua suspek dicatat dalam buku register TB 06 dan diberi nomor identitas yang kemudian digunakan sebagai nomor identitas sediaan.
C. Permintaan Pemeriksaan Laboratorium (TB 05) Berdasarkan buku register TB 06, semua suspek dirujuk ke laboratorium. Petugas poli DOTS mengisi formulir TB 05 dengan lengkap sebagai pengantar pemeriksaan mikroskopis dahak. D. Pelaksanaan pemeriksaan laboratorium (TB 04 dan TB 05)
Nomor identitas sediaan dari formulir TB 05 dituliskan pada pot dahak, kaca sediaan dan buku register TB 04
Hasil pemeriksaan segera dicatat pada formulir TB 05 dan buku
Formulir TB 05 diserahkan kepada petugas poli DOTS; hasil
register TB 04
laboratorium merupakan rahasia jabatan.
Poli DOTS
TB 05
TB 06 TB 05
E.
Laboratorium TB 04
TB 05
Petugas poli DOTS segera mencatat hasil pemeriksaan laboratorium dalam buku register TB 06
F.
Kualitas pelayanan pemeriksaan laboratorium mikroskopis TB dipantau melalui kegiatan Pemantapan Mutu Internal dan Pemantapan Mutu Eksternal.
Pemantapan Mutu Eksternal dilaksanakan melalui kegiatan uji
silang, supervisi/ bimbingan teknis dan tes panel. Sediaan uji silang dikirimkan ke laboratorium rujukan uji silang menggunakan formulir TB 12 yang diisi oleh pengelola program TB Kabupaten/ Kota. 26
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
3
VIII. Instruksi Kerja
Pelapora disampaikan secepatn a pada dokt er pengirim, petugas har us
A.
Pengumpulan dahak
menj ga kerahasiaan hasil laboratorium.
B.
Pemberian Identitas
Jangan men liskan hasil pemeriksaa pada sedia an karena s diaan dibut hkan
C.
Pembuatan Sediaan
untuk cr ss check/uji silang pem ntapan mut u.
D.
Pemeriksaan Mikroskopis
E.
PMI
F.
Pencatatan Pelaporan terkait laboratorium TB
Dalam rangka menjaga kualitas pemeriksaan lab ratorium mikroskopis T , juga
G.
Pengelolaan Limbah Laboratorium TB
dilaksanakan Pemantapan Mutu Eksternal berupa Uji Silang.
H.
penggunaan dan pemeliharaan mikroskop
diperiksa oleh laboratoriu , secara periodik akan diambil sampel oleh pe gelola
Dari formulir
B.05 yang telah berisi hasil pemeriksaan, dokter / petugas T
p ogram kab/ kota untuk diperiksa IX.
akan
melengkapi re ister suspek (TB.06)
Alasan Perubahan Versi SOP Dikompilasi oleh
ediaan yan
telah
lang di laboratorium Rujukan Uji Silang.
Pengiriman ulang sediaan untuk uji silan menggunakan formulir TB.12 Ditelaah oleh
Disetujui oleh
Nama
Perubahan Versi Baru Kode:
Kode:
Tanggal Tanda tangan Area Laboratorium :
Jumlah copy:
Alasan perubahan :
Pada akhir periode uji silang, pengelola program kab/ kota akan memberikan umpan b lik ke laboratorium mikro kopis. Hasil umpan balik ini harus digunakan oleh petugas laboratorium mikroskopis untuk meningk tkan kinerjanya (Peningk tan Mutu)
4
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
25
Lampiran 6
Lampiran 1.
INSTRUKSI KERJA PENCATATAN PELAPORAN
INSTRUKSI KERJA PENGUMPULAN DAHAK
1. WAKTU PENGUMPULAN CONTOH UJI DAHAK Untuk menegakkan diagnosis TB secara mikroskopis dibutuhkan tiga contoh uji dahak. Pengumpulan spesimen dahak dilakukan dalam waktu 2 hari
yaitu
Sewaktu – Pagi – Sewaktu (SPS)
Dahak Sewaktu hari -1 (A)
Dahak pertama diambil SEWAKTU pada saat pasien berkunjung ke fasyankes
Beri pot dahak pada saat pasien pulang untuk keperluan pengumpulan dahak pagi hari berikutnya.
Dahak Pagi (B)
Pasien mengeluarkan dahak kedua pada PAGI hari setelah bangun tidur dan membawa contoh uji dahak ke laboratorium.
Dahak Sewaktu hari -2 (C)
Kumpulkan dahak ketiga (dahak SEWAKTU) di laboratorium pada saat pasien kembali ke laboratorium pada hari kedua saat membawa dahak pagi (B).
2. TEMPAT PENGUMPULAN DAHAK Dahak adalah bahan yang infeksius, pada saat berdahak aerosol/percikan dapat menulari orang yang ada disekitarnya, karena itu tempat berdahak harus berada 1. Tuliskan identitas sediaan sesuai dengan formulir permohonan lab (TB.05). Identitas sediaan ini sesuai dengan nomor urut dalam TB.06 2. Catat identitas pasien sesuai TB 05 dalam Register TB.04. 3. Tulis Nomor Register Laboratorium. Salin Nomor Register Laboratorium dalam TB 05 4. Catat hasil pemeriksaan dalam buku registerTB.04 5. Salin hasil pemeriksaan di bagian bawah TB.05. 6. Beri tanggal dan tandatangani Formulir Permohonan Laboratorium (TB 05) 7. Kembalikan Formulir Permohonan Laboratorium TB 05 kepada dokter atau UPK yang mengirimkan
24
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
ditempat
yang
jauh
dari
kerumunan
orang,
misalnya
didepan
ruang
pendaftaran,ruang pemeriksaan ,ruang obat dll. Harus diperhatikan pula arah angin pada saat berdahak, agar droplet/ percikan dahak tidak mengenai petugas.
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
5
Pengumpulan dahak dilakukan di ruang terbuka dan mendapat sinar matahari langsung atau di ruangan dengan ventilasi yang baik, untuk mengurangi kemungkinan penularan akibat percikan dahak yang infeksius. Tempat pengumpulan dahak dilengkapi dengan prosedur mengeluarkan dahak, tempat cuci tangan dengan air mengalir dan sabun. Jangan mengeluarkan dahak di ruangan tertutup dengan ventilasi yang buruk, misalnya: Kamar kecil / toilet Ru ang kerja (ruang pendaftaran, ruang pengumpulan sampel, laboratorium) Ruang tunggu, ruang umum lainnya.
6) Penyimpanan sediaan Dilakukan pengecekan ulang apakah penyimpanan sediaan sudah sesuai dengan prosedur c. Tahap Pasca Analisis Menjamin bahwa pelaksanaan tahap pasca analisis sesuai protap yaitu pelaksanaan dekontaminasi alat dan bahan infeksius; pengelolaan limbah infeksius dan non infeksius; dan pemeliharaan mikroskop. Periksa kembali pencatatan dan pelaporan sesuai dengan standar. Petugas tidak diperkenankan menuliskan laporan dengan tanda atau simbol yang tidak sesuai skala IUATLD. Contoh tidak ditemukan BTA dituliskan sebagai ” –”,
3. CARA PENGUMPULAN DAHAK Persiapan Pengumpulan contoh uji dahak a.
Persiapan pasien
Pasien diberitahu bahwa contoh uji dahak sangat bernilai untuk menentukan status penyakitnya, karena itu anjuran pemeriksaan SPS untuk pasien baru
seharusnya : ”neg”; ditemukan 1-9 BTA/ 100 LPB dituliskan ”BTA jarang” atau ”±” seharusnya ”dituliskan jumlah BTA yang ditemukan” . Apabila ditemukan BTA harus dilaporkan dengan simbol 1+, 2+ atau 3+ sesuai dengan skala IUATLD. Tidak diperbolehkan menuliskan hasil pemeriksaan diatas kaca sediaan. Penulisan hasil positif dituliskan dengan tinta merah.
dan SP untuk pasien dalam pemantauan pengobatan harus dipenuhi.
Dahak yang baik adalah yang berasal dari saluran nafas bagian bawah, berupa lendir yang berwarna kuning kehijauan (mukopurulen). Pasien berdahak dalam keadaan perut kosong, sebelum makan/minum dan membersihkan rongga mulut terlebih dahulu dengan berkumur air bersih.
Bila ada kesulitan berdahak pasien harus diberi obat ekspektoran yang dapat merangsang pengeluaran dahak dan diminum pada malam sebelum mengeluarkan dahak. Olahraga ringan sebelum berdahak juga dapat merangsang dahak keluar.
Dahak adalah bahan infeksius sehingga pasien harus berhati-hati saat berdahak dan mencucu tangan.
Pasien dianjurkan membaca prosedur tetap pengumpulan dahak yang tersedia di tempat/lokasi berdahak.
6
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
23
b.
Persiapan Alat
Pot dahak bersih dan kering, diameter mulut pot 4-5 cm,
transparan,
bening, bertutup ulir. Pot tidak boleh bocor. Sebelum diserahkan kepada pasien, pot
dahak harus sudah diberi identitas sesuai identitas/nomor
register pada form TB 05.
Contoh sediaan apus dahak yang baik
Hasil pewarnaan apusan dengan hasil yang kurang baik
c.
Formulir Permohonan Pemeriksaan Laboratorium (TB 05)
Label, pensil, spidol
Cara Berdahak Beri petunjuk pada pasien untuk:
Kumur dengan air sebelum mengeluarkan dahak
Bila memakai gigi palsu, lepaskan sebelum berkumur
Tarik nafas dalam 2 – 3 kali dan setiap kali hembuskan nafas dengan kuat
Buka tutup pot, dekatkan ke mulut, berdahak dengan kuat dan masukan ke
Tutup pot dengan rapat dengan cara memutar tutupnya
Pasien harus mencuci tangan dengan air dan sabun
Bila perlu hal di atas dapat diulang sampai mendapatkan dahak yang
Bila dahak sulit dikeluarkan, dapat dilakukan hal sebagai berikut:
dalam pot dahak Terlalu tebal
Terlalu tipis
berkualitas baik dan volume yang cukup (3-5 ml)
-
Lakukan olah raga ringan kemudian menarik nafas dalam beberapa kali. Bila terasa akan batuk, nafas ditahan selama mungkin lalu
Kurang di tengah, terlalu tipis dan
Pewarnaan tidak merata, ukuran
kurang dekolorisasi
terlalu besar
disuruh batuk. -
gliseril guayakolat 200 mg.
5) Pembacaan mikroskopis
Pembacaan dilakukan sesuai prosedur tetap. Bila di fasyankes terdapat 2
Malam hari sebelum tidur, banyak minum air atau menelan 1 tablet
Pot berisi dahak diserahkan kepada petugas laboratorium, dengan menempatkan pot dahak di tempat yang telah disediakan
atau lebih petugas mikroskopis, maka dilakukan inter-observer blinded yaitu pembacaan sediaan dilakukan oleh 2 orang secara blinded dan dicatat.
22
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
7
4. PENILAIAN KUALITAS CONTOH UJI DAHAK SECARA MAKROSKOPIS
Petugas laboratorium harus melakukan penilaian terhadap dahak pasien. Tanpa membuka tutup pot, petugas laboratorium melihat dahak melalui dinding pot yang transparan Hal-hal yang perlu diamati adalah : -
Vol 3,5 - 5 ml
-
Kekentalan : mukoid
-
Warna : Hijau kekuningan (purulen)
Bila ternyata contoh uji yang diserahkan adalah air liur, petugas harus meminta
Contoh sediaan yang benar, tulisan di koran masih terbaca secara samar
Contoh sediaan yang terlalu tebal, tulisan di koran tidak terbaca
Contoh sediaan yang terlalu tipis, tulisan di koran terbaca dengan mudah
pasien berdahak kembali, sebaiknya dengan pendampingan.
Apabila sediaan terlalu tipis, sediaan dapat ditambahi
Perhatian : pada saat mendampingi pasien berdahak, petugas harus berada di
dengan dahak, dengan catatan sediaan belum kering,
belakang pasien dan hindari arah angin menuju petugas.
sehingga tidak menimbulkan aerosol
Apabila sediaan trelalu tebal, sediaan harus dibuang dan diganti dengan membuat sediaan baru.
Penilaian sediaan yang telah diwarnai Evaluasi kualitas sediaan dahak dilakukan dengan penilaian terhadap 6 unsur dengan mempergunakan skala sarang laba-laba. Sediaan yang baik harus memperlihatkan sarang laba-laba yang penuh
Bila dahak yang diperoleh tetap tidak memenuhi syarat, petugas lab tetap harus melakukan pemeriksaan dengan memilih bagian yang paling kental dan beri catatan bahwa ”spesimen tidak memenuhi syarat / air liur”
8
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
21
a) Endapan metilen biru atau kristal carbol fuchsin maka reagen harus disaring langsung pada saat melakukan pewarnaan.
Lampiran 2 INSTRUKSI KERJA PEMBERIAN IDENTITAS SEDIAAN
b) Dekolorisasi yang tidak sempurna maka mengganti larutan
Pemberian identitas sediaan dilakukan dengan ketentuan sebagai berikut:
asam alkohol dengan larutan yang baik
Kumpulan sediaan dahak kontrol yang belum diwarnai harus disimpan dalam kotak khusus.
b. Tahap analisis 1) Memastikan prosedur tetap di l aksanakan dengan baik pada setiap pemeriksaan.
Prosedur
tetap
yang
harus
tersedia
di
laboratorium
mikroskopis TB adalah : a)
Prosedur tetap pengumpulan dahak
b)
Prosedur tetap pembuatan sediaan
c)
Prosedur tetap fiksasi
d)
Prosedur tetap pewarnaan.
e)
Prosedur tetap pembacaan mikroskopis
f)
Prosedur tetap pencatatan & pelaporan
g)
Prosedur tetap pengolahan limbah
Pemberian kode huruf dengan ketentuan sebagai berikut:
2) Menggunakan alat sesuai standar. Kelengkapan alat dapat dibuat dalam bentuk daftar tilik. 3) Pemberian identitas sesuai dengan standar dan dilakukan pengecekan ulang. 4) Pembuatan sediaan harus sesuai prosedur tetap. Penilaian sediaan yang belum diwarnai Sebelum melakukan pewarnaan , sediaan dapat dinilai ketebalannya dengan
A,B,C : SPS dahak pasien pada pertama kali datang
D,E: SP dahak pasien pada akhir minggu ke 5/masa intensif pengobatan
J,K : SP dahak pasien pada akhir pemberian obat sisipan
F,G: SP dahak pasien pada akhir bulan ke lima masa pengobatan
H,I : SP dahak pasien pada akhir masa pengobatan
meletakkan sediaan yg kering 4-5 cm di atas kertas koran. Sediaan yang baik apabila kita masih dapat melihat tulisan secara samar.
20
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
9
Identitas sediaan dituliskan pada:
b) Spidol dan label untuk pemberian identitas sesuai dengan nomor identitas yang tertera pada form TB 04, TB 05 , TB 06 dan kaca sediaan.
1. Pot Dahak Beri label yang jelas pada dinding pot dahak sesuai dengan nomor identitas sediaan dahak (TB 06)
Label ditempelkan pada dinding pot, jangan pada tutupnya
Pot dahak sekali pakai, bersih dan kering
4)
Uji kualitas contoh uji dahak Dahak yang diperiksa harus mukopurulen yaitu dahak yang mukoid berwarna kuning kehijauan. Petugas harus dapat memotivasi pasien agar dapat mengeluarkan dahak yang baik. Bila dahak yang diperoleh tetap tidak memenuhi syarat, petugas lab tetap harus melakukan pemeriksaan dengan memilih bagian yang paling kental dan beri catatan bahwa ”spesimen tidak
2. Kaca Sediaan
memenuhi syarat / air liur”
Sebaiknya gunakan frosted end slide (kaca sediaan dengan salah satu ujung buram) Tulis identitas sediaan dengan pensil 2B di atas bagian yang buram (frosted) Nomor identitas sesuai dengan TB.05
Uji kualitas dahak dilakukan dengan cara melihat warna dan kekentalan dahak tanpa membuka tutup pot dahak, karena itu pot dahak harus terbuat dari bahan yang transparan dan bening. 5)
Uji fungsi reagen Ziehl Neelsen
Uji ini diperlukan untuk memastikan reagen Ziehl Neelsen yang tersedia dapat mewarnai M.tuberculosis dengan baik.
Petugas harus membuat sediaan dahak kontrol yaitu beberapa sediaan dahak dari dahak BTA negatif dan dahak BTA 1 + yang telah difiksasi. Ketika akan menggunakan reagen Ziehl Neelsen kemasan baru maka dilakukan pewarnaan terhadap satu sediaan dahak BTA negatif dan satu sediaan dahak BTA 1+. Pewarnaan yang baik BTA tampak berwarna merah cerah dengan latar belakang biru yang terang, inti lekosit tampak jelas dan tidak ada endapan merah atau biru.
Hasil uji fungsi harus dicatat dalam buku khusus yang menuliskan tanggal pelaksanaan uji fungsi, nomor batch botol reagen dan hasil pewarnaan (lihat formulir hasil PMI)
Bila hasil pewarnaan dinilai baik maka reagen dapat dipakai sebaliknya bila memberikan hasil pewarnaan yang tidak baik :
10
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
19
Lampiran 5
Lampiran 3
INSTRUKSI KERJA PEMANTAPAN MUTU INTERNAL
INSTRUKSI KERJA PEMBUATAN SEDIAAN
Pemantapan Mutu Internal laboratorium mikroskopis TB terdiri dari: a. Tahap Pra analisis 1)
Prosedur tetap cara pengumpulan dahak.
2)
Persiapan pasien
ALAT-ALAT DAN REAGEN YANG DIBUTUHKAN
Kaca sediaan yang baru, bersih, jangan memakai kaca sediaan bekas
-
-
Memberikan bimbingan kepada pasien tentang cara pengumpulan dahak,
Lidi/batang bambu dengan ujung berserabut (raughend) Lidi/batang bamboo dengan ujung runcing
waktu pengumpulan dahak dan lokasi pengumpulan dahak. 3)
Persiapan alat dan bahan. a) Pot dahak sesuai standar :
bersih dan kering, bermulut lebar (diameter 4-5 cm) transparan, bening, bahan kuat, tidak mudah bocor, bertutup ulir minimal 3 dan dapat menutup rapat
Lampu spiritus/ bunsen
Wadah pembuangan berisi disinfektan (misalnya lisol 5%)
Wadah pembuangan untuk aplikator. Wadah pembuangan harus tahan bocor
Jas lab bagian depan tertutup berlengan panjang dengan tangan diberi manset elastic, panjang melewati lutut.
18
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Reagen ZN dengan label botol warna berlainan, tutup botol dari plastik, kotak reagen dari karton corrugated
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
11
1. Periksa data pasien di pot dahak dan cocokkan dengan yang ada di formulir
Lakukan pembacaan sediaan apus sepanjang garis tengah dari ujung kiri ke kanan atau sebaliknya.
permohonan laboratorium TB (Formulir TB 05) 2. Pindahkan data pasien dari formulir permohonan laboratorium TB (TB 05) ke register laboratorium TB (Formulir TB 04) 3. Tulis nomor identitas sediaan pada kaca sediaan 4. Tulis nomor register laboratorium pada formulir TB 04. 5. Tulis nomor register laboratorium pada formulir permohonan laboratorium TB (TB 05) 6. Berilah tanda pada kolom yang sesuai di TB 04 mengenai alasan pemeriksaan dahak
Laporkan hasil pemeriksaan mikroskopis dengan mengacu kepada skala International
sesuai formulir ermohonan laboratorium TB.
Union Against To Lung Disease (IUATLD) CARA MEMBUAT SEDIAAN DAHAK
B
A Spesimen dahak dengan bagian yang purulen (A) di dalam air liur
Apa yang terlihat
Apa yang dituliskan
Hasil
Ambil contoh uji dahak pada bagian yang purulen
tidak ditemukan BTA dalam 100 lapang pandang
Negatif
Neg
ditemukan 1-9 BTA dalam 100 lapang
Scanty
Tulis jumlah
dengan lidi
ditemukan 10 – 99 BTA dlm 100 lapang pandang
1+
1+
ditemukan 1 – 10 BTA setiap 1 lapang
2+
2+
3+
3+
pandang(tuliskan jml BTA yang ditemukan)
BTA
pandang(periksa minimal 50 lapang pandang)
C
Apuskan dahak di atas kaca sediaan pada permukaan yang sama dengan nomor identitas. Apusan bentuk oval 2x3 cm kemudian ratakan dengan gerakan spiral kecil-kecil. Jangan membuat gerakan spiral bila sediaan dahak sudah kering karena akan menyebabkan aerosol. Keringkan di dalam suhu kamar
D lidi langsung dibuang ke dalam botol berisi disinfektan.
12
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
ditemukan 10 BTA dalam 1 lapang pandang(periksa minimal 20 lapang pandang)
Setelah selesai pembacaan, bersihkan minyak dari sediaan apus dengan meletakkan bagian yang berminyak di atas tissue atau kertas penyerap. Sebelum menguji sediaan apus selanjutnya, bersihkan lensa objektif dengan menggunakan kertas lensa. Setelah menyelesaikan pembacaan semua sediaan bersihkan lensa objektif dengan kertas lensa yang dibasahi eter alcohol (3:7)
Sediaan harus disimpan dalam kotak sediaan dengan urutan sesuai TB 04 untuk uji silang.
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
17
Lampiran 4
E
INSTRUKSI KERJA PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS
.Lakukan fiksasi. Gunakan pinset atau penjepit kayu untuk memegang kaca . Pastikan apusan menghadap ke atas Lewatkan 3 x melalui api dari lampu spiritus. Pemanasan yang berlebihan akan merusak hasil.
Sediaan apus harus diperiksa secara sistematis untuk memastikan bahwa hasil yang
dilaporkan telah mewakili seluruh bagian sediaan. Jangan memeriksa sediaan sebelum kering.
Untuk fasyankes yang hanya melakukan fiksasi (tidak melakukan pewarnaan dan pembacaan mikroskopis) maka kirimkan sediaan yang telah difiksasi ke laboratorium rujukan dengan cara : Bungkus sediaan dengan kertas tissue kemudian digulung beberapa kali agar tidak pecah atau kirimkan dalam kotak sediaan bersama Form TB 05.
Letakkan sediaan di atas meja mikroskop, permukaan sediaan menghadap ke atas. Gunakan lensa objektif 10 x untuk menetapkan fokus dan menemukan lapang pandang. Periksa sediaan untuk menentukan kualitas sediaan. Pada sediaan dahak umumnya ditemukan lebih banyak sel lekosit atau sel radang
Teteskan satu tetes minyak emersi, aplikator minyak emersi tidak boleh menyentuh kaca objek. Tetesan harus jatuh bebas ke permukaan sediaan apus agar aplikator minyak emersi tidak terkontaminasi dengan sediaan.
Cara penanganan dahak yang bercampur darah 1. Dahak dengan darah sedikit: Pilih bagian dahak yang tidak mengandung darah, dan buat sediaan seperti biasa 2. Dahak dengan darah sedang Buat sediaan, kemudian fiksasi, genangi dengan air bersih/aquades lalu digoyanggoyang sampai warna merah darah hilang. Lalu air dibuang dan bilas lagi dengan air Putarlah lensa objektif 100x dengan hatihati ke atas sediaan apus. Jangan sekali-kali lensa menyentuh kaca sediaan.
16
kemudian warnai dengan Ziehl-Neelsen. Sesuaikan fokus dengan hati-hati sampai sel terlihat jelas
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
13
PEWARNAAN METODE ZIEHL NEELSEN 1
7
6 2
Letakkan sediaan dengan bagian apusan menghadap ke atas pada rak yang ditempatkan di atas bak cuci atau baskom, antara satu sediaan dengan sediaan lainnya masingmasingberjarak kurang lebih 1 jari.
3
Miringkan sediaan menggunakan penjepit kayu atau pinset untuk membuang air
Genangi seluruh permukaan sediaan dengan carbol fuchsin. Saring zat warna setiap kali akan melakukan pewarnaan sediaan.
Genangi dengan asam alcohol sampai tidak tampak warna merah carbol fuchsin. Jangan sampai ada percikan ke sediaan lain
8
9
4
Panasi dari bawah dengan menggunakan sulut api setiap sediaan sampai keluar uap, jangan sampai mendidih
Genangi permukaan sediaan dengan methylene blue selama 20-30 detik
Dinginkan selama minimal 5 menit.
Bilas sediaan dengan air mengalir. Jangan ada percikan ke sediaan lain
11
10
5
Bilas sediaan dengan air mengalir secara hati-hati dari ujung kaca sediaan
14
Jangan ada percikan ke sediaan lain
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
Miringkan sediaan untuk mengalirkan sisa methylene blue
Keringkan sediaan pada rak pengering. Jangan keringkan dengan kertas tissue
Standar Prosedur Operasional Mikroskopis TB
15