Universidad Nacional Mayor de San Marcos (Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)
Facultad de Farmacia y Bioquímica Escuela Académico Académico Profesional de Farmacia y Bioquímica LABORATORIO D TO!I"OLO#$A % &U$MI"A L#AL '(()* I
Determinacin de Bar!ituricos ASI#NATURA
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%uenca Alfaro &'udit' ernimo Pe* +iomara alda-a .ucc'in$ .aricielo antos /lvaro 0eslie + &esús 0i*ano utiérre*
"o#icolo$ía o#icolo $ía y química quími ca le$al
F",A D LA -R."TI"A RALI/ADA+ &ueves 12 de mayo 23 am a 4 5m
2017
DETERMINACIÓN DE BARBITÚRICOS
I0* INTRODU""I1N 0os !ar!itúricos son un $ru5o relativamente 'omo$éneo de dro$as sintéticas6 "ienen usos tera5éuticos como sedantes, 'i5nticos, anestésicos y anticonvulsivos en dosis relativamente altas6 En relacin con muc'os de sus usos 'an sido sustituidos 5or !en*odia*e5inas en muc'os de los 5aíses desarrollados6 e estima que se 'an sinteti*ado ms de 46733 !ar!itúricos6 .s de 73 se comerciali*an actualmente 5ara usos clínicos en todo el mundo6 0os !ar!itúricos suelen encontrarse como me*clas con otros !ar!itúricos (amo!ar!ital, seco!ar!ital), así como con otras sustancias (cafeína, acetil salicilato, efedrina, teofi lina, codeína)6 El uso inde!ido y el uso incorrecto de los !ar!itúricos estn difundidos en el 5lano internacional, lo que si$nifi ca que cualquier la!oratorio forense 5uede encontrar una diversidad de estos com5uestos6 Prcticamente todos los !ar!itúricos en el mercado ilícito 5rovienen de la desviacin de fuentes le$ítimas, y no 'ay 5rue!as de fa!ricacin clandestina6 De los !ar!itúricos que se comerciali*an actualmente, todos estn su8etos a fi scali*acin internacional en virtud del %onvenio so!re ustancias icotr5icas de 29:26 2
TOXICOLOGÍA Y QUÍMICA LEGAL
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DETERMINACIÓN DE BARBITÚRICOS
II0 MAR"O T1RI"O ;istricamente fueron Fisc'er y von .erin$ quienes, en 2931 o!tuvieron la malonilurea o cido !ar!itúrico, de donde 5roceden los derivados !ar!itúricos, siendo los ms em5leados, los si$uientes, a las dosis consi$nadas< =eronal, dosis usual de 3623 a 3673 $ramos y m#ima de 2 $r6 en las, 4> 'oras? ardenal o 0uminal, a las dosis de 3637 a 3643 $r6 y m#ima 36>3 a 36@3 $r6? utonal, a dosis do!le del 5recedente? Dial, a las de 3623 a 3643 $r6? umal, que com!inado con el 5iramidn, se utili*a !a8o el nom!re de Allonal? omnifene6 en dosis de 43 a @3 $otas 5er os y de 4 a > cm6 cú!icos 5or inyeccin6 e requieren ensayos tanto de determinacin como de confirmacin6 El ensayo de determinacin de!e 5ermitir la identificacin de 5osi!les resultados 5ositivos con un alto $rado de fia!ilidad y de!e ser sensi!le, r5ido y de !a8o costo6 0os inmunoensayos en $eneral satisfacen estos criterios6 A'ora !ien, los anticuer5os utili*ados en los inmunoensayos tienen una es5ecificidad relativamente !a8a y 5ueden dar lu$ar a reacciones cru*adas6 "odos los resultados 5ositivos o!tenidos en un inmunoensayo de determinacin de!en ser confirmados 5or un se$undo ensayo !asado en 5rinci5ios químicos diferentes6 0a cromato$rafía de ca5a del$ada (%%D) tam!ién se 5uede utili*ar como ensayo de determinacin6 0os ensayos de confirmacin de!en ser 5or lo menos tan sensi!les como los ensayos de determinacin, 5ero de!en ser ms es5ecífi cos6 En $eneral com5renden técnicas cromato$rficas y 5ueden incluir %%D, cromato$rafía en fase $aseosa (%), cromato$rafía líquida de $ran rendimiento (%0), y cromato$rafía en fase $aseosaCes5ectrometría de masas (%CE.)62
III0 -ART !-RIMNTAL A2 OB3TI4O D LA -RA"TI"A Determinar 5resencia de com5uestos !ar!itúricos
B2 FUNDAMNTO DL M5TODO
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"2 MATRIALS6 RA"TI4OS % &UI-OS Materiales y reactivos+ Materiales
"u!os de ensayo
%ocinilla
"ermmetro
%romato5laca
%mara de cromato$rafía
Pi5etas
Bom!illa de 8e!e
%a5ilares
Beacer
%5sulas de 5orcelana
Reactivos
Etanol
;%l @
a4 3,2
ulfamato de amonio 3,7
Cnaftiletilendiamino clor'idrato 3,2
.etanol
Acetona
"rietanolamina
vo6 Dra$endorff
itrato co!altoso 2 en met;
Fi$626 eactivos em5leados
Amoniaco
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ulfato cu5rico6
Piridina 7 en cloroformo6
%loroformo
itrato de 5lata 2
Difenilcar!a*ona
qui7os
Fi$646 Estndares em5leados
%am5ana e#tractora
Muestra anali8ada + esiduos 4 y > de la muestra de orina
D2 -RO"DIMINTO Identi9icaci:n ; Reacci:n de -arry*
Fundamento+ 0as sales de metales 5esados como el co!alto (nitrato co!altoso), se unen a los enlaces del $ru5o amida de los !ar!itúricos, dando lu$ar a la formacin del com5le8o !ar!itúricoCdiaminoco!altoso que lue$o se revela con amoniaco dando como resultado un coloracin a*ul6
M=todo o7eratorio+
En una c5sula de 5orcelana se coloc 7 $otas del 4 y se eva5or el e#ceso de etanol6
R2
e a-adi 4 $otas de nitrato co!altoso y lue$o se e#5uso a va5ores de amoniaco Reacci:n 7ositiva .anc'as a*ules TOXICOLOGÍA Y QUÍMICA LEGAL
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Identi9icaci:n ; Reacci:n de />i??er+ Fundamento+ 0os !ar!itúricos en 5resencia de sales de co!re forman com5le8os coloreados 5iridinCcu5ricos muy 5oco solu!les en 5iridina a$ua y francamente solu!les en solventes or$nicos6 En esta reaccin el !ar!itúrico actúa como reductor del co!re transformndolo de cú5rico a cu5roso6 En el caso de los tio!ar!ituricos es el a*ufre del %4 el a$ente reductor, en los o#i!ar!ituricos el reductor es el 4, dando en am!os casos como resultado, una coloracin que de5ende del ti5o de !ar!itúrico 5resente6 En el caso de los o#i!ar!ituricos ser violetaCrosado y 5ara los tio!ar!ituricos ser verde6 De esta manera dic'a reaccin es usada 5ara diferenciar los o#i!ar!ituricos de los tio!ar!iuricos6
M=todo o7eratorio+
En tu!o de ensayo se coloc 7 $otas del 4 y se eva5or el e#ceso de etanol6
R2
e a-adi 2m0 de sulfato cu5rico, se a$it y se a-adio 2m0 de 5iridina al 7 en cloroformo finalmente se a$it enér$icamente de8ando re5osar 5ara o!servar la se5aracion de las fases6 Reacci:n 7ositiva olucin clorofrmica color a*ul, rosado o verde amarillento
"romato@ra9ía en ca7a 9ina+ o
stndar + !ar!itúrico
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o
Fase estacionaria+ ilica $el
o
Fase m:vil+ %loroformo< : Acetona< 1
o
Revelador+
itrato de 5lata al 2 ori$ina manc'as !lancas6
A-adiendo Difenilcar!a*ona se forman manc'as a*ules6
RSULTADOS
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DETERMINACIÓN DE BARBITÚRICOS
2 RSULTADOS III0 DIS"USI1N
I40 "ON"LUSIONS
40 RFRN"IAS BIBLIO#R.FI"AS+ 26 U6 Mé!"!# $%&!'%(")"!# *)$) +) "%%&&,-( . %+ %(#).! "% /)$/,$,&!# %( %#*%&'%(%# /,!+-,&!# N%) Y!$ 2007
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