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FUNDAMENTOS TEÓRICOS DE ESTERILIZAÇÃO E DESINFECÇÃO

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Este material é parte integrante da disciplina “Fundamentos Teóricos de Esterilização e Desinfecção” oferecido pela UNINOVE. O acesso às atividades, as leituras interativas, os exercícios, chats, fóruns de discussão e a comunicação com o professor devem ser feitos diretamente no ambiente de aprendizagem online.

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Sumário

AULA 01 • HISTÓRIA DA IMPORTÂNCIA DA ELIMINAÇÃO OU REDUÇÃO MICROBIANA EM ALIMENTOS E EQUIPAMENTOS...................................................................................................5 Exercícios....................................................................................................................................8 AULA 02 • DEFINIÇÕES DE ESTERILIZAÇÃO, DESINFECÇÃO, ANTISÉPTICO E PASTEURIZAÇÃO ........................................................................................................................10 Exercícios..................................................................................................................................14 AULA 03 • APLICABILIDADE DA ESTERILIZAÇÃO E DA DESINFECÇÃO..................................16 Exercícios..................................................................................................................................20 AULA 04 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO FÍSICOS: CALOR SECO E CALOR ÚMIDO...........22 Calor seco .................................................................................................................................22 Incineração................................................................................................................................22 Flambagem ...............................................................................................................................23 Estufas ar quente ....................................................................................................................23 Calor úmido ...............................................................................................................................24 Exercícios..................................................................................................................................25 AULA 05 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO FÍSICOS: PASTEURIZAÇÃO .................................27 Exercícios..................................................................................................................................30 AULA 06 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO FÍSICOS: IRRADIAÇÃO .........................................32 Exercícios..................................................................................................................................36 AULA 07 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO FÍSICOS: FILTRAÇÃO ...........................................38 As membranas filtrantes ............................................................................................................39 Os filtros HEPA..........................................................................................................................41 Exercícios..................................................................................................................................42 AULA 08 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: FORMALDEÍDO (GÁS) E FORMALINA (LÍQUIDO) .....................................................................................................................................43 Exercícios..................................................................................................................................46 AULA 09 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: GLUTARALDEÍDO .............................47 Exercícios..................................................................................................................................50 AULA 10 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: ÓXIDO DE ETILENO..........................52 Exercícios..................................................................................................................................55 AULA 11 • MÉTODOS DE DESINFECÇÃO QUÍMICOS: ÁLCOOIS ..............................................57 Exercícios..................................................................................................................................60 AULA 12 • MÉTODOS DE DESINFECÇÃO QUÍMICOS: PEROXIGÊNIO .....................................62 Ozônio.......................................................................................................................................62 Peróxido de hidrogênio..............................................................................................................64 Ácido peracético........................................................................................................................65 Exercícios..................................................................................................................................66 AULA 13 • MÉTODOS DE DESINFECÇÃO QUÍMICOS: HALOGÊNICOS (HIPOCLORITOS, IODOS, IODÓFOROS)..................................................................................................................68 O cloro.......................................................................................................................................68 O Iodo .......................................................................................................................................70 O Iodóforos................................................................................................................................71 Exercícios..................................................................................................................................71 AULA 14 • MÉTODOS DE DESINFECÇÃO QUÍMICOS: METAIS PESADOS E SEUS COMPOSTOS...............................................................................................................................73 Prata..........................................................................................................................................74 Cobre ........................................................................................................................................74 3


Mercúrio ....................................................................................................................................75 Zinco .........................................................................................................................................76 Exercícios..................................................................................................................................76 AULA 15 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: COMPOSTOS FENÓLICOS E CLOROXILENOIS .........................................................................................................................78 Exercícios..................................................................................................................................83 AULA 16 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: HEXACLOROFENO ...........................85 Exercícios..................................................................................................................................88 AULA 17 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: DIGUANINAS (CLOREXIDINA) ..........90 Exercícios..................................................................................................................................93 AULA 18 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: COMPOSTOS QUATERNÁRIOS DE AMÔNIA (BENZALCÔNIO, CETRIMIDA) ......................................................................................95 Exercícios..................................................................................................................................98 AULA 19 • MONITORAMENTO DA ESTERILIZAÇÃO ................................................................100 Controle mecânico...................................................................................................................100 Controle químico .....................................................................................................................101 Controle Biológico ...................................................................................................................102 Exercícios................................................................................................................................103 AULA 20 • CONTROLE DA DESINFECÇÃO...............................................................................105 Exercícios................................................................................................................................108 BIBLIOGRAFIA ...........................................................................................................................110

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Os microrganismos, assim como as bactérias, somente foram apontados como causa de doenças durante o século XIX graças às descobertas de Louis Pasteur. A partir de então, metodologias foram estabelecidas e são empregadas até hoje, desenvolvendo processos de desinfecção através de diferentes temperaturas e substâncias químicas. Atualmente, a manipulação dos microrganismos em diferentes meios depende dos conhecimentos de destruir, inibir ou removêlos.

AULA 01 • HISTÓRIA DA IMPORTÂNCIA DA ELIMINAÇÃO OU REDUÇÃO MICROBIANA EM ALIMENTOS E EQUIPAMENTOS Desde os primórdios das atividades referentes à saúde, o ser humano tem sido batido com o fator infecção, sendo freqüentemente derrotado. Essas derrotas, porém, vêm através da história, diminuindo em número devido às atenções que gradualmente vêm sendo dispensadas à limpeza, higiene, boa condição ambiental e alimentar, evoluindo para desinfecção e esterilização de materiais hospitalares, entre outros fatores.

Infecção méd. penetração, desenvolvimento e multiplicação de seres inferiores no organismo animal, de quem podem resultar, para este, conseqüências variadas, habitualmente nocivas.

Historicamente, os microrganismos, como as bactérias, somente foram apontados como causa de doenças durante o século XIX. Essa descoberta foi um dos mais importantes passos na medicina, que nessa época avançava com dificuldade. Aristóteles, no século IV a.C, já aconselhava Alexandre a ferver água para evitar doenças. Comentavamse naquela época “às vezes são formados animais na terra putrefeita”. Baseados nessa informação, muitos intelectuais da época aderiram à teoria da geração espontânea, que foi aceita por anos. Muito antes desse feito, aproximadamente 800 anos a.C. foi feita por Homero a primeira referência que se tem notícia sobre substâncias utilizadas para realizar desinfecção. Homero em “A Odisséia”, citava o uso de enxofre na forma de dióxido de enxofre, substância ainda hoje utilizada como desinfetante de frutas secas, sucos de frutas e vinho.

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Antes de 1842 as cirurgias eram realizadas nos períodos de guerras sem muita técnica. A partir deste ano, com a descoberta da anestesia, várias cirurgias eletivas foram sendo executadas no qual levou a um aprimoramento das técnicas e procedimentos cirúrgicos, porém uma alta mortalidade por infecção de ferida era observada. Até 1865 o índice de infecção por amputação durante a guerra era de 25 a 90%. Em 1870, em Paris, essa taxa chegava próxima a 100%. Acreditavase na época, que se tratava de uma gangrena de origem hospitalar que levava os pacientes ao óbito póscirurgia. No século XVI, o livro “De Contagione” de Girolamo Fracastoro sugere a transmissão de doenças através do contato direto da manipulação de pertences de pessoas infectadas ou mesmo à distância. Procedimentos importantes como a limpeza, em particular as lavagens das mãos, começou a ser questionada. Já no final do século XVII, no Hospital de Manchester Lying, dois médicos tentaram implantar controles no que diz respeito à engenharia, limpeza e ventilação adequada para os pacientes. Alguns anos mais tarde, no Hospital de Rotunda, em Dublin, um médico chamado Robert Colin introduziu o tratamento com calor para as roupas de cama, o que resultou em uma diminuição das infecções daquele hospital. Apesar do bom resultado obtido com essa simples atitude, essa não foi aceita e sim, desprezada, devido á grande força da teoria da geração espontânea. Em 1863, o álcool demonstrou ser efetivo nas feridas, diminuindo as taxas de infecções, mas novamente essa idéia revolucionária foi barrada pela sociedade cirúrgica de Paris. Cerca de cem anos mais tarde, o primeiro halógeno descoberto foi o cloro, em seguida o iodo, que foi utilizado como alvejante e mais tarde como desinfetante e desodorizante. Halógeno quim. Qualquer dos elementos (flúor, cloro, bromo, iodo e astatínio) cujos números atômicos são, respectivamente, 9, 17, 35, 53, e 85.

A influência da microbiologia começou a ser sentida em meados do século XVII. Em 1676, um marco importante na historia da microbiologia foi, obviamente, a descoberta da existência de microrganismos feita pelo Holandês Anton Van Leeuwenhoek (1676) um polidor de lentes e o primeiro a observar microorganismos. Foi em 1861, quando Louis Pasteur demonstrou que a fermentação era um processo resultante da produção de microorganismos, e que esse fenômeno tinha a ver com a putrefação que se dava após a amputação dos membros, a doutrina da geração espontânea foi finalmente contestada. Enfim, foi instituída a microbiologia como ciência ao demonstrar finalmente que os 6


microrganismos são, de fato, responsáveis pelas doenças infecciosas. Estabeleceu também metodologias empregadas até hoje, desenvolvendo um processo de desinfecção através de diferentes temperaturas denominado pasteurização, que iremos discutir mais adiante. Em 1867 foi introduzido o uso do fenol como um agente antimicrobiano para a esterilização do ar nas salas de operação e como um curativo de ferida cirúrgica. A mortalidade por amputação caiu de 45 para 15%. A técnica foi aprovada nos Estados Unidos na primeira reunião oficial da Associação Cirúrgica Americana em 1883. No ano de 1977, um físico inglês chamado de Jonh Tyndall, reconheceu a forma calor resistente das bactérias, conhecido até hoje como esporo e desenvolveu métodos de esterilização para lidar com esse tipo de forma bacteriana. É uma estrutura desidratada formada por várias camadas, que protege a bactéria, permitindo que ela permaneça em um estado de “vida suspensa” ou latente encontrada em algumas bactérias grampositivas quando estão em ambientes inóspitos ao seu crescimento (PATRICK MURRAY, 2002, pág. 22)

Um dos colaboradores de Pasteur, Charles Chamberland, construiu o primeiro esterilizador a vapor em 1880, que ficou conhecido como “Autoclave de Chamberland” No mesmo ano, Robert Koch descobriu o uso de culturas sólidas para bactérias, isolando assim colônias puras e as associou com doenças específicas. Finalmente a bacteriologia tinha então se tornado uma ciência propriamente dita. Um dos exemplos mais antigos de controle da população microbiana, juntamente com o cozimento dos alimentos, que é utilizado até hoje é a conservação de alimentos por meio de secagem e salinização Hoje em dia a manipulação efetiva dos microrganismos nos laboratórios, no lar, nos hospitais e nas indústrias depende essencialmente dos conhecimentos de como controlar os microrganismos em seu meio. A escolha de agentes de natureza química ou física depende somente do seu objetivo. Isto significa ter o controle no que diz respeito a destruir, inibir ou remover estes microrganismos. Os agentes antimicrobianos, ou seja, substâncias que matam os microrganismos ou inibem o seu crescimento, são chamados especificamente de agentes antibacterianos, antivirais, antifúngicos e antiprotozoários, dependendo do tipo de microrganismos afetado. Os agentes antimicrobianos que matam os microrganismos são conhecidos como microbicidas. Daí as denominações de bactericida, viricida e fungicida que indicam o tipo de microrganismo destruído.

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Indicação de Sites: Anton Van Leeuwenhoek: http://www.ucmp.berkeley.edu/history/leeuwenhoek.html Louis Pasteur: http://www.answers.com/topic/louispasteur?cat=technology Jonh Tyndall: http://understandingscience.ucc.ie/pages/sci_johntyndall.htm

Exercícios 1. “Historicamente, os microrganismos, como as bactérias, somente foram apontados como causa de doenças durante o século XIX. Antes disso, porém, todo e qualquer processo de fermentação era justificado pela teoria da geração espontânea”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. b) Incorreta 2. “Em 1867 foi introduzido o uso do fenol como um agente antimicrobiano para esterilização do ar nas salas de operação e como um curativo de ferida cirúrgica. A mortalidade por amputação caiu de 45 para 15%. A técnica foi aprovada nos Estados Unidos na primeira reunião oficial da Associação Cirúrgica Americana do mesmo ano”. Podese dizer que esta idéia está: a) Correta b) Incorreta. 3. “Um dos exemplos mais antigos de controle da população microbiana, juntamente com o cozimento dos alimentos, que é utilizado até hoje, é a conservação de alimentos por meio de salinização”. Podese dizer que esta idéia está: a) Correta. b) Incorreta. 4. “Os agentes antimicrobianos que matam os microrganismos são conhecidos como microbicidas. Daí as denominações de bactericida, viricida e fungicida”. Podese dizer que esta idéia está: a) Correta. b) Incorreta.

Respostas dos Exercícios 1. “Historicamente, os microrganismos, como as bactérias, somente foram apontados como causa de doenças durante o século XIX. Antes disso, porém, todo e qualquer processo de fermentação era justificado pela teoria da geração espontânea”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A

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2. “Em 1867 foi introduzido o uso do fenol como um agente antimicrobiano para esterilização do ar nas salas de operação e como um curativo de ferida cirúrgica. A mortalidade por amputação caiu de 45 para 15%. A técnica foi aprovada nos Estados Unidos na primeira reunião oficial da Associação Cirúrgica Americana do mesmo ano”. Podese dizer que esta idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 3. “Um dos exemplos mais antigos de controle da população microbiana, juntamente com o cozimento dos alimentos, que é utilizado até hoje, é a conservação de alimentos por meio de salinização”. Podese dizer que esta idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “Os agentes antimicrobianos que matam os microrganismos são conhecidos como microbicidas. Daí as denominações de bactericida, viricida e fungicida”. Podese dizer que esta idéia está: RESPOSTA CORRETA: A

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A eliminação de todos os microrganismos, incluindo as formas mais resistentes, é conhecida como esterilização. O processo que inclui a destruição ou a remoção da maioria dos microrganismos viáveis é a desinfecção. Os antisépticos são desinfectantes usados para reduzir o número de microrganismos na superfície da pele. Já a pasteurização é uma desinfecção suave por meio de aquecimento em baixas temperaturas.

AULA 02 • DEFINIÇÕES DE ESTERILIZAÇÃO, DESINFECÇÃO, ANTISÉPTICO E PASTEURIZAÇÃO Acabamos de saber o quanto foi difícil, no século XIX, convencer a sociedade cientifica da época a acreditar que as noções de higiene eram extremamente importantes na prevenção de várias doenças causadas por microrganismos. Essas doenças causadas por bactérias, vírus, protozoários, vermes e fungos são conhecidas como “Doenças infecciosas” Para ser considerado um individuo saudável, o homem deve estar, entre outros fatores, isento dessas doenças infecciosas. Dessa forma, a utilização de métodos de eliminação ou ao menos de redução do número desses microrganismos patogênicos são fatores importantes na redução e prevenção da incidência dessas infecções.

Patogênicos. Adj. que gera moléstia

Saber como manusear de forma efetiva esses microrganismos no laboratório ou em qualquer ambiente exige um conhecimento prévio da fisiologia executada por esses seres tão pequenos. Ou seja, exige saber o quanto é sensível ou resistente aos procedimentos que utilizam altas temperaturas, ou seja, calor, baixas temperaturas e substâncias químicas. Quando ocorre, na utilização desses processos, a completa eliminação de todos os microrganismos presentes, como as bactérias, vírus, fungos, protozoários e incluindo também as formas mais resistentes como as micobactérias, vírus nãoenvelopado e esporos bacterianos, dizemos que este processo é de esterilização

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Micobactérias são bactérias tais como a Mycobacterium tuberculosis, que é a bactéria que provoca a maioria dos casos de tuberculose. Esse grupo possui em sua parede um tipo de lípideo, o ácido micólico, que entre outras coisas, favorece maior resistência ao microrganismo a dano e à desidratação por produtos químicos, e impedem a atividade eficaz de antibióticos hidrófobos. Vírus nãoenvelopados São vírus que não possuem na sua estrutura um envelope lípídico, normalmente derivado da membrana celular do hospedeiro anterior, que envolve o capsídeo.

Estéril é um termo absoluto um material está estéril ou não. Não pode ser “parcialmente estéril” ou “quase estéril”. Desta forma, um objeto estéril no sentido microbiológico, está completamente livre de microrganismos vivos e um esterilizante é um composto químico ou físico que realiza uma esterilização. A esterilização pode ser obtida com o uso de esterilizantes físicos e químicos. Os esterilizantes físicos mais comuns são: calor seco e o calor úmido. Estes métodos são amplamente utilizados em hospitais e é indicado para muitos materiais, exceto aqueles sensíveis ao calor, ou que são constituídos de substâncias químicas tóxicas ou voláteis. A filtração também é outro tipo de esterilização física, muito utilizada na remoção de bactérias e fungos do ar (como os filtros HEPA) ou de soluções sensíveis ao calor. No entanto, são inadequados para remover seres menores como os vírus e algumas bactérias. Os filtros do tipo HEPA (high efficiency particulate air) são muito utilizados em ambientes

hospitalares,

principalmente

naqueles

que

mantêm

pacientes

imunossuprimidos. Esses pacientes, por terem suas defesas imunológicas debilitadas, facilmente desenvolvem doenças oportunistas transmitidas por microrganismos presentes no ar. Esses filtros removem as partículas infectantes do ar e são considerados HEPA os filtros que conseguem remover 99,97% das partículas em suspensão com diâmetro > 0,3 µm. Considerando que as partículas infectantes variam de 1 µm a 5 µm de diâmetro, tais filtros podem ser utilizados na sua remoção. Devido ao seu custo elevado, o emprego de filtros HEPA fica restrito a locais onde não é possível fazer a exaustão do ar diretamente para áreas livres, sendo, portanto uma medida importante e indispensável na prevenção de infecções hospitalares de pacientes que se encontram internados em ambientes onde existam essas condições de circulação de ar.

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A esterilização pela radiação ultravioleta ou ionizante (a exemplo das microondas e raios ultravioleta) são exemplos de métodos físicos de esterilização e muito utilizados. Porém, seu uso requer cuidados adicionais devido à necessidade de exposição direta. Por fim, substâncias químicas com poderes esterilizantes são utilizadas com freqüências em materiais, pisos e superfícies. Um agente químico com poder esterilizante “ideal” deve ter características que apresentem eficiência sob todas as condições. Infelizmente, não existe um composto químico que possua todas essas características desejáveis. As especificações ideais de um agente químico podem ser resumidas em: 1) Atividade antimicrobiana: capacidade de matar os microrganismos; 2) Solubilidade: a substância deve ser solúvel em água ou álcool em quantidade necessária ao seu uso efetivo; 3) Estabilidade: perda significativa de sua ação após armazenamento; 4) Ausência de toxidade: não deve prejudicar o homem ou animais; 5) Homogeneidade: a preparação deve ser uniforme em sua composição, de modo que os componentes estejam ativos nas aplicações; 6) Inativação mínima por material estranho: não pode haver inativação do produto esterilizante quando este entra em contato com qualquer substância encontrada no material que está sendo tratado; 7) Atividades em temperatura ambiente: não devem ter alteração da temperatura para que funcione além daquela em que for usado; 8) Poder de penetração: às vezes o local a ser esterilizado não se encontra na superfície; 9) Ausência de poderes corrosivos ou tintoriais: os compostos não podem desfigurar nem corar metais ou tecidos; 10) Poder desodorizante: de preferência inodoro; 11) Capacidade de detergente: remove mecanicamente os microrganismos da superfície do produto que está sendo tratado; 12) Baixo custo disponibilidade: o produto deve ser barato e fácil de ser encontrado.

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Os principais esterilizantes químicos mais utilizados são: derivados de aldeídos, como o formaldeído, fomalina, o glutaraldeído, óxido de etileno, compostos halogenos, entre outros. Estes produtos possuem ação esterilizante pela formação de compostos incompatíveis com as funções celulares vitais. Já o termo desinfecção é um processo que inclui a destruição ou a remoção da maioria, mas não de todos os microrganismos viáveis. O termo é utilizado normalmente a substâncias utilizadas em objetos inanimados. Na prática é sinônimo de germicida; entretanto os microrganismos mortos por germicidas não são necessariamente patogênicos. Por definição, a desinfecção diferencia da esterilização por não eliminar os esporos bacterianos, propriedade inerente da esterilização. A desinfecção é dividida em desinfecção de baixo nível, nível intermediário ou de alto nível. Desinfecção de baixo nível: são destruídas as bactérias de forma vegetativa alguns vírus e alguns fungos. Exemplos: álcool etílico e isopropílico, iodóforo, quaternário de amônia. São utilizados para desinfetar instrumentos nãocríticos como aparelhos de pressão, eletrodos de eletrocardiograma e estestocópios. Forma vegetativa – é a forma das bactérias quando não estão esporuladas, ou seja, é a forma encontrada naturalmente nas bactérias quando estão no seu ambiente natural.

Desinfecção de nível intermediário: além dos microrganismos eliminados na desinfecção de baixo nível, são atingidos o Mycobacterium tuberculosis, vírus da hepatite B e a maioria dos fungos. Mas esporos bacterianos e vírus lentos sobrevivem. Exemplos: álcool etílico e isopropílico (70 a 90%), fenólicos, iodóforos, etc. São utilizados para desinfetar superfície ou instrumentos que têm pouca probabilidade de contaminação com os esporos bacterianos. O vírus da hepatite B (VHB) é um vírus cujo material genético é o DNA. Este vírus é transmitido por sangue (transfusões, agulhas contaminadas, relação sexual, após o parto, instrumentos cirúrgicos ou odontológicos, etc.). Após o contagio com o vírus, este se concentra quase que totalmente nas células do fígado, onde o DNA fará com que as células do fígado, os hepatócitos, construam novos vírus. O vírus da hepatite B é resistente, chegando a sobreviver cerca de uma semana no ambiente externo em condições normais e com risco de se entrar em contato com o sangue via picada de agulha, instrumentos cortantes ou machucados e causar infecção em 5 a 40% das pessoas que não são vacinadas.

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Desinfecção de alto nível: resistem apenas alguns tipos de esporos bacterianos mais resistentes e os vírus lentos. Exemplos: Hipoclorito de sódio, cloro e compostos clorados, ácidos peracético, glutaraldeído, peróxido de hidrogênio, etc. São utilizados para desinfectar objetos envolvidos em procedimentos invasivos que não podem suportar os procedimentos de esterilização como endoscópio, instrumentos cirúrgicos. O processo de desinfecção pode ser afetado por diferentes fatores: a) limpeza prévia do material; b) período de exposição ao germicida; c) concentração do desinfectante; d) temperatura e pH do processo de desinfecção;

Os agentes antisépticos são desinfectantes usados para reduzir o número de microrganismos na superfície da pele. Esses compostos são selecionados em relação à sua segurança e eficiência. O exemplo dos álcoois que embora tendam a secar a superfície da pele devido à remoção dos lipídios, eles não são tóxicos e têm excelente atividade contra os grupos de microrganismos, exceto os esporos. Outros exemplos além dos álcoois incluem: iodóforos (anti séptico cutâneo), clorexidina (com atividade mais prolongada do que o álcool), paraclorometaxilenol (é limitado a alguns grupos de bactérias) e o triclosan ( somente ativo contra bactérias). A pasteurização é uma desinfecção suave por meio de aquecimento em baixas temperaturas, reduzindo dessa forma a contaminação microbiana de alimentos que quando submetidos a altas temperaturas têm efeitos adversos. Esse processo foi utilizado por Pasteur em 1860 para destruir microrganismos indesejáveis que estariam estragando os vinhos franceses.

Exercícios 1. “A completa eliminação de todos os microrganismos presentes, como as bactérias, vírus, fungos, protozoários e também as formas mais resistentes, como as microbactérias, vírus não envelopados e esporos bacterianos, dizemos que este processo é de esterilização” Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. b) Incorreta

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2. “Por definição, a desinfecção diferencia da esterilização por não eliminar os esporos bacterianos, propriedade inerente da esterilização”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta. b) Correta. 3. “Antisépticos são desinfectantes usados para reduzir o número de microrganismos na superfície da pele. O exemplo dos alcoóis, que embora tendam a secar a superfície da pele devido à remoção dos lipídios, não são tóxicos e têm excelente atividade contra os grupos de microrganismos, exceto os esporos”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. b) Incorreta. 4. A pasteurização é um processo de desinfecção utilizado por Pasteur, em 1860, para destruir microrganismos indesejáveis que estariam estragando os vinhos franceses suaves. Este processo trabalha com o aquecimento em baixas temperaturas, reduzindo dessa forma a contaminação microbiana de alimentos. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. b) Incorreta.

Respostas dos Exercícios 1. “A completa eliminação de todos os microrganismos presentes, como as bactérias, vírus, fungos, protozoários e também as formas mais resistentes, como as microbactérias, vírus nãoenvelopados e esporos bacterianos, dizemos que este processo é de esterilização” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 2. “Por definição, a desinfecção diferencia da esterilização por não eliminar os esporos bacterianos, propriedade inerente da esterilização”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 3. “Antisépticos são desinfectantes usados para reduzir o número de microrganismos na superfície da pele. O exemplo dos alcoóis, que embora tendam a secar a superfície da pele devido à remoção dos lipídios, não são tóxicos e têm excelente atividade contra os grupos de microrganismos, exceto os esporos”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. A pasteurização é um processo de desinfecção utilizado por Pasteur, em 1860, para destruir microrganismos indesejáveis que estariam estragando os vinhos franceses suaves. Este processo trabalha com o aquecimento em baixas temperaturas, reduzindo dessa forma a contaminação microbiana de alimentos. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A

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Produtos esterilizantes são aplicados em objetos que desejam ser totalmente isentos de contaminação. Isso ocorre em meios de cultura e purificação do ar e da água e equipamentos cirúrgicos, atingindo camadas superficiais ou profundas, dependendo do produto e da técnica apropriada. Produtos desinfectantes têm seu uso concentrado em superfícies de objetos inanimados, atingindo, inclusive, camadas mais profundas.

AULA 03 • APLICABILIDADE DA ESTERILIZAÇÃO E DA DESINFECÇÃO Após sabermos as diferenças existentes entre esterilização e desinfecção é interessante conhecermos quando são empregados estes dois processos. A esterilização, como já foi visto, é principalmente empregada quando se quer uma eliminação total da vida microbiológica de materiais ou, se possível, do ambiente. Isso não se aplica, por exemplo, ao controle microbiológico dos alimentos quando estes são liberados para a sua comercialização. Nesses casos existem leis que determinam a quantidade de microrganismos que podem conter em uma amostra alimentícia. Já no caso de tesoura cirúrgica, mesmo depois de lavada, ou seja, limpa, precisa ser esterilizada e, portanto, submetida ao calor durante um determinado tempo para eliminar qualquer presença de microrganismos, pois estes podem causar doenças infecciosas no paciente em que será usado o objeto. Um dos tipos de esterilização de origem física é a filtração. Este processo é empregado, por exemplo, em meios de cultura para cultivo de microrganismos. Alguns meios de cultura são preparados da mesma forma, porém, se for necessário utilizar algumas substâncias termolábeis como a uréia ou que reajam com as substâncias dos meios (aminoácidos, açúcares) são esterilizadas por filtração.

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Meios de cultura Destinamse ao cultivo artificial de microrganismos. Estes meios fornecem os princípios nutritivos indispensáveis ao seu crescimento. Entre os principais componentes de um meio de cultura estão as fontes de carbono e energia como os açúcares, as fontes de nitrogênio, fósforo e sais minerais. Substâncias termolábeis São substâncias que não resistem a altas temperaturas, pois sofrem algum dano físico ou químico. Uréia. é um composto orgânico cristalino, incolor, de fórmula CO(NH2)2 (ou CH4N2O), com um ponto de fusão de 132,7 °C. Tóxica, a uréia formase principalmente no fígado, sendo filtrada pelos rins e eliminada na urina ou pelo suor, onde é encontrada abundantemente; constitui o principal produto terminal do metabolismo protéico no ser humano e nos demais mamíferos.

Um dos exemplos de filtros é aquele à base de membrana de nitrocelulose (Figura 2). Este filtro é utilizado em líquidos sensíveis ao calor, incluindo soro, antibióticos e água para utilização em meios de cultura. Outros filtros são aplicados na esterilização de ar em ambientes, como aqueles encontrados em cabine de segurança microbiológica, que são equipamentos destinados a oferecer proteção ao operador, ao produto manipulado e ao meio ambiente. Em hospitais é comum o uso de filtros HEPA que possui várias camadas de filtros com diferentes diâmetros de poros. http://www.uftm.edu.br/pesquisa/cep/AVIpesquisa070223110052.pdf

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A esterilização pela radiação ultravioleta é muito aplicada em superfícies que não necessitam de penetração, ou seja, os comprimentos de ondas dos raios ultravioletas incidem superficialmente e não atravessam tecidos, líquidos, vidros, nem matéria orgânica. A aplicação da luz ultravioleta em hospitais se restringe à destruição de microrganismos do ar ou inativação destes em superfície. Seu efeito bactericida faz com que seja utilizada em dispositivos com o objetivo de manter a assepsia de certos estabelecimentos comerciais. A aplicação de calor com a finalidade de esterilizar objetos é usada há muitos anos. O calor seco baseado em estufas é aplicado principalmente para esterilizar instrumentos de corte, portanto, estes objetos como tesouras e alicates. É pouco utilizado em hospitais e mais utilizado em consultórios médicos e odontológicos. O calor úmido baseado na utilização de autoclave é o tipo de esterilização mais utilizado em laboratórios e é indicado para a maioria dos instrumentos cirúrgicos. Assim como nas estufas, instrumentos que tenham algum componente de material têxtil ou de borracha não podem ser esterilizados pela autoclave. Entre as substâncias químicas com poderes esterilizantes destacase o uso do formaldeído ou formol, que pode ser utilizado na confecção de germicidas e fungicidas agrícolas. O glutaraldeído é um esterilizante que pode ser utilizado para a esterilização de artigos termosensíveis, que não podem ser esterilizados pelos processos físicos, como: enxertos de acrílico, cateteres, drenos e tubos de poliestireno, objetos estes encontrados em ambientes ambulatoriais e hospitalares. O glutaraldeído tem sido muito utilizado em alguns equipamentos como endoscópios, conexões de respiradores, equipamentos de terapia respiratória, dialisadores, tubos de espirometria e outros objetos de uso hospitalar. Para este fim, o tempo de exposição é de 30 minutos. Ele não é utilizado como desinfetante de superfície por seu custo ser elevado e por ser muito tóxico. Outro esterilizante químico utilizado com freqüência é o óxido de etileno, que é empregado em produtos médicohospitalares que não podem ser expostos ao calor ou a agentes esterilizantes líquidos, exemplo: instrumentos de uso intravenoso e de uso cardiopulmonar em anestesiologia, aparelhos de monitorização invasiva, broncoscópios, materiais elétricos (eletrodos, fios elétricos), máquinas (marcapassos, etc.) e muitos outros. Este tipo de esterilização contribui para a reutilização de produtos que inicialmente seriam para uso único, assim, a prática deste tipo de esterilização evidencia vantagens econômicas, porém, a segurança de se reesterilizar estes produtos ainda é questionada.

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Broncoscópios. É um aparelho utilizado para obter imagens do trato respiratório objetivando o diagnóstico de patologias que porventura o acometa.

Já o cloro, um composto halogeno, é utilizado como esterilizante e aplicado com freqüência em processo de purificação de águas, sendo indispensável para a potabilização da água. O agente é o ácido hipocloroso, HClO, que se produz dissolvendo cloro na água e regulando o pH. Este produto é também utilizado na limpeza de superficies de pisos e como tratamento preliminar de material biológico contaminado. Produtos desinfectantes têm seu uso concentrado em superfícies de objetos inanimados, atingindo inclusive camadas mais profundas. Um dos mais utilizados é o álcool etílico, que é considerado um desinfectante de baixo e médio nível, dependendo da sua concentração. O álcool etílico a 70% é empregado em grande escala na desinfecção de bancadas de laboratórios, graças a sua atividade microbicida, pois a desnaturação das proteínas do microrganismo fazse mais rapidamente na presença da água. Estudos mostram a redução de 99% da flora da pele, quando este é utilizado como antiséptico com baixa irritabilidade cutânea, porém é irritante à mucosa. Como antiséptico o iodo é mais utilizado que o álcool etílico, os iodóforos são muito empregados em feridas cirúrgicas. No entanto tem aplicação como desinfetante de materiais também. Seu espectro de ação inclui: bactericida, viruscida e micobactericida. No entanto, requer tempo de contato bastante prolongado para agir sobre formas de microorganismos mais resistentes aos germicidas.

http://www.scielo.br/pdf/reeusp/v42n1/26.pdf

Outros produtos como Gluconato de Clorhexidina, conhecido como clorexidina, é um potente antiséptico utilizado para as mãos. Em altas concentrações devem ser mantidos longe dos olhos (podendo causar úlceras de córnea) e do ouvido médio (podendo provocar surdez), entretanto é utilizado em pequenas concentrações em algumas soluções para lentes de contato. O triclosan é um antiséptico, bactericida, fungicida e viricida, sendo uma preparação a base de fenol. Estas soluções são indicadas para limpeza de ambientes e áreas críticas com pus, sangue, urina, fezes e outras secreções, além de, em contato com a umidade exercerem ação antimicrobiana residual. Problemas relacionados ao seu uso como desinfetante é devido à produção de irritabilidade ou até poder corrosivo (dose dependente) podendo causar lesões de pele a efeitos 19


tóxicos sistêmicos, mas está em diversos produtos de uso diário como cotonetes, cremes femininos (para pele, cabelo, etc...).

Exercícios 1. “A esterilização pela radiação ultravioleta (UV) é muito aplicada em superfícies que não necessitam de penetração, ou seja, os comprimentos de ondas dos raios ultravioletas incidem superficialmente e não atravessam tecidos, líquidos, vidros, nem matéria orgânica”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. b) Incorreta. 2. “Os instrumentos que tenham algum componente de material têxtil ou de borracha não podem ser esterilizados pelo calor seco.” Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta. b) Correta. 3. “O álcool etílico a 70% é empregado em grande escala na desinfecção de bancadas de laboratórios, graças a sua atividade microbicida, pois a desnaturação das proteínas do microrganismo fazse mais rapidamente na presença da água”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. b) Incorreta 4. “Como antiséptico o iodo é mais utilizado que o álcool etílico, o álcool iodado é muito empregado na desinfecção de feridas cirúrgicas, mas jamais pode ser utilizado como desinfetante de objetos. No entanto requer tempo de contato bastante prolongado para agir sobre formas de microorganismos mais resistentes”. a) Correta. b) Incorreta.

Respostas dos Exercícios 1. “A esterilização pela radiação ultravioleta (UV) é muito aplicada em superfícies que não necessitam de penetração, ou seja, os comprimentos de ondas dos raios ultravioletas incidem superficialmente e não atravessam tecidos, líquidos, vidros, nem matéria orgânica”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 2. “Os instrumentos que tenham algum componente de material têxtil ou de borracha não podem ser esterilizados pelo calor seco.” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 3. “O álcool etílico a 70% é empregado em grande escala na desinfecção de bancadas de laboratórios, graças a sua atividade microbicida, pois a desnaturação das proteínas do microrganismo fazse mais rapidamente na presença da água”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A

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4. “Como antiséptico o iodo é mais utilizado que o álcool etílico, o álcool iodado é muito empregado na desinfecção de feridas cirúrgicas, mas jamais pode ser utilizado como desinfetante de objetos. No entanto requer tempo de contato bastante prolongado para agir sobre formas de microorganismos mais resistentes”. RESPOSTA CORRETA: B

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Métodos de esterilização à base de calor são classificados como seco e úmido. Os tipos de calor seco utilizados são: incineração, flambagem e estufas. As duas primeiras utilizamse do contado direto com chama de fogo e são bastante utilizadas em metais. A estufa tem ação esterilizante em vidrarias. A autoclavagem é um tipo de calor úmido, sob vapor saturado, e é indicada para a maioria dos instrumentos cirúrgicos.

AULA 04 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO FÍSICOS: CALOR SECO E CALOR ÚMIDO

Calor seco O calor seco ou ar quente em temperaturas suficientemente altas destroem a maioria dos microrganismos, levando a um estado livre de contaminação microbiana. Porém, existe uma necessidade de temperaturas extremamente elevadas e um tempo maior de exposição para o sucesso da esterilização. A utilização do calor seco é utilizada em: • Incineração • Flambagem • Estufas

Incineração Consiste no contato direto com a chama de fogo. É aplicada na rotina de laboratórios com a esterilização de alças de metal ou agulhas de semeadura bacteriológica, durante os repiques de culturas bacterianas ou fúngicas. Esses materiais são colocados na chama azul produzida pelo bico de Bunsen ou em incineradores próprios levando ao aquecimento do objeto até obter uma coloração incandescente. A incineração de alças bacteriológicas é uma etapa importante na obtenção de colônias isoladas em meios de cultura sólidos, nas inoculações de colônias em meios de cultura líquidos.

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Devese colocar a alça sobre a chama, numa inclinação aproximada de 45º e nunca em posição horizontal para não esterilizar só a porção final e sim toda a alça. Resquícios de colônias ou material contaminado de laboratório podem ser incinerados desde que aquentem a temperatura O cuidado com a incineração diz respeito à produção de aerossóis e gotículas durante o processo de aquecimento de metais, contaminando assim o manipulador. Do ponto de vista sanitário, a destruição integral do lixo hospitalar pela incineração a altas temperaturas é uma das alternativas para o destino final desses tipos de materiais. Porém, a fumaça provocada pela incineração desse lixo hospitalar carrega materiais contendo microrganismos para a atmosfera.

http://lixohospitalar.vilabol.uol.com.br/

Flambagem Consiste no contato direto com a chama azul produzida pelo bico de Bunsen, porém, em um tempo mais reduzido, e propicia um ambiente asséptico ao redor do material que você manuseia. Esta técnica leva a fixação de lâminas de microscópio molhadas com álcool específico e de amostras de microrganismos, sendo a fixação um passo inicial para executar diferentes técnicas de coloração microbiológica. É um método de fácil execução, porém não é seguro, pois pode não esterilizar alguns tipos de bactérias pelo baixo tempo de exposição, além de estragar o material.

Estufas ar quente Podese utilizar ar quente para esterilizar objetos como vidraria e instrumentos com superfícies de corte como as tesouras e alicates. O aparelho para este fim são as estufas de esterilização, que trabalham com temperaturas entre 100 e 180ºC. Sua ação esterilizante resulta em destruição bacteriana, que se dá pela oxidação celular. Materiais a serem esterilizados pelas estufas, em especial os cortantes, devem estar protegidos com invólucros adequados, de forma a permitir que o ar circule livremente na câmera ou em caixas de instrumentos que, além de permitir a ação do agente esterilizante, não altera a qualidade e a capacidade de corte dos mesmos. O tempo de esterilização deve ser contado a partir do instante em que o termômetro acusar a temperatura escolhida.

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Oxidação é o nome do processo quando um elemento químico combina com o oxigênio

A esterilização de placas de Petri e pipetas, que são exemplos de vidrarias, requerem um tempo de 2h de exposição a 160180ºC. Para instrumentos cirúrgicos, o tempo de exposição é de 120 minutos à temperatura de 170ºC. Alguns objetos não podem ser submetidos ao calor úmido, apesar de apresentarem mais vantagens como uma esterilização em menor temperatura e tempo reduzido. Ao invés disso, esses objetos são submetidos a estufas de esterilização.

Calor úmido É alcançado por meio da água fervente ou da autoclavagem. O calor úmido, como já foi dito, é muito mais eficiente que o calor seco para destruir microrganismos. A ação esterilizante do calor úmido se dá pela termocoagulação das proteínas das células microbianas, desnaturandoas, onde a água vai influenciar na destruição das membranas e enzimas, pois destrói as pontes de hidrogênio presentes nessas estruturas, o que vai tornar estes processos mais eficazes e diminuir o tempo de exposição. Um dos exemplos é a destruição de esporos bacterianos. No calor seco, o esporo de Bacillus anthracis é eliminado a 140ºC permanecendo nessa temperatura por mais de 180 minutos. No calor úmido, através da autoclave, esta mesma estrutura é eliminada a 121ºC durante somente 15 minutos.

http://estudmed.com.sapo.pt/microbiologia/bacillus_antracis.htm

A fervura em água por 5,10 ou 20 minutos destrói células vegetativas, mas não necessariamente todos os esporos. Portanto, a fervura onde a água atinge seu ponto de ebulição não é confiável para a esterilização. A autoclavagem é indicada para a maioria dos instrumentos cirúrgicos. Trabalha com vapor saturado sob pressão. A ação esterilizante se dá através do calor mais a umidade saturada, que umidifica o microrganismo, amolecendo até quebrar a cápsula, destruindo os esporos. O aparelho destinado a esterilizar com vapor sob pressão é a autoclave. A autoclave parece uma panela de pressão no sentido em que ambas utilizam vapor sob pressão, porém a temperatura e a pressão interna da autoclave podem ser mais bem controladas. A câmera interna da autoclave é inicialmente constituída de vapor fluente, para remoção de todo o ar. Então, esta

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câmera fica composta por somente vapor puro e mantida sob pressão a uma determinada a temperatura por um período específico. Se o ar estiver presente e não for substituído por vapor, reduzirá a temperatura interna da autoclave. É a temperatura, e não a pressão no interior da câmera, que mata os microrganismos. É importante salientar que se leva mais tempo para o calor penetrar em material viscoso ou sólido do que em material fluido. O tempo necessário depende também do volume do material que está sendo esterilizado. Por exemplo, 1000 tubos contendo 10 mL e meio cada, de um de um meio líquido, podem ser esterilizados em 10 a 15 minutos a 121ºC, enquanto o mesmo volume de meio (10 litros) em um único frasco necessitará de uma hora ou mais, pois mais tempo será requerido para o calor penetrar no centro do material volumoso. A validade de um material autoclavado é de 7 a 15 dias, dependendo de suas condições de armazenamento. O perfeito funcionamento da autoclave deve ser frequentemente confirmado e serem sempre observadas: • Corroção de tubulações usar essencialmente água desmineralizada ou destilada para evitar oxidação (ferrugens); • Distribuição dos instrumentos – os materiais devem ser dispostos em bandejas abertas e forradas; caixas furadas ou cestos aramados em aço inoxidável (que não enferrujam). Deixar espaço entre uma estante e outra para circulação do agente esterilizante; • Fazer revisão de válvulas, manômetros (glossário) e registros; • Evitar abrir prematuramente e de forma rápida a autoclave. Isto leva o surgimento de ar frio no interior do compartimento do esterilizador, resultando em rápida condensação do vapor provocando manchas nos instrumentos; • Evitar exceder a temperatura e o tempo recomendado para a esterilização – o material a ser autoclavado não deve exceder 30 minutos de 121 a 132ºC. O material quando retirado deve não deve ser colocado diretamente em superfícies frias

Exercícios 1. “Materiais a serem esterilizados pelas estufas, em especial os cortantes, devem estar desprovidos de involúcro, de forma a permitir que o ar circule livremente na câmera”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta. b) Correta. 25


2. “O calor úmido é muito mais eficiente que o calor seco para destruir microrganismos. No calor seco, os esporos bacterianos são eliminados a 140ºC, permanecendo nessa temperatura por mais de 180 minutos. No calor úmido, através da autoclave, esta mesma estrutura é eliminada a 121ºC durante somente 15 minutos”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. b) Incorreta. 3. “Em casa, é normal a fervura da água com o objetivo de esterilizála para consumo. No entanto, a fervura onde a água atinge seu ponto de ebulição não é confiável para a esterilização”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. (Muito bem, b) Incorreta. 4. “A incineração é uma técnica utilizada em laboratórios com o objetivo de esterilizar alças bacteriológicas, mas requer alguns cuidados devido à produção de aerossóis” a) Correta. b) Incorreta.

Respostas dos Exercícios 1. “Materiais a serem esterilizados pelas estufas, em especial os cortantes, devem estar desprovidos de involúcro, de forma a permitir que o ar circule livremente na câmera”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 2. “O calor úmido é muito mais eficiente que o calor seco para destruir microrganismos. No calor seco, os esporos bacterianos são eliminados a 140ºC, permanecendo nessa temperatura por mais de 180 minutos. No calor úmido, através da autoclave, esta mesma estrutura é eliminada a 121ºC durante somente 15 minutos”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Em casa, é normal a fervura da água com o objetivo de esterilizála para consumo. No entanto, a fervura onde a água atinge seu ponto de ebulição não é confiável para a esterilização”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “A incineração é uma técnica utilizada em laboratórios com o objetivo de esterilizar alças bacteriológicas, mas requer alguns cuidados devido à produção de aerossóis” RESPOSTA CORRETA: A

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A pasteurização consiste em aquecer o produto a 63ºC por 30 minutos e, em seguida, resfriar bruscamente, reduzindo o número de microrganismos presentes, mas ela não assegura uma esterilização. A pasteurização aumenta a vida do alimento, reduzindo as taxas de alterações microbiológicas e enzimáticas. Existem 3 tipos de pasteurização: a clássica, a HTST e a UTH. Após qualquer um desses processos, o produto deve ser refrigerado.

AULA 05 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO FÍSICOS: PASTEURIZAÇÃO No século XIX, Luis Pasteur iniciou a microbiologia como ciência, desenvolvendo um método de prevenção da perda da qualidade dos vinhos, destruindo, pelo calor, bactérias capazes de deteriorar a bebida, sem alterar seriamente o sabor do produto. Tal método posteriormente aplicado ao tratamento do leite para eliminar possíveis patógenos veiculados, recebeu o nome de Pasteurização

http://www.answers.com/topic/louispasteur?cat=technology

A Pasteurização consiste em aquecer o produto a uma dada temperatura num dado tempo, e a seguir resfriar bruscamente. Até alguns anos atrás, para o leite, a temperatura empregada era 63°C e o tempo de 30 minutos. Atualmente, a pasteurização do leite emprega temperaturas mais elevadas de cerca de 72ºC e um tempo de 15 segundos para produzir o que nós denominamos de

leite pasteurizado ou pasteurização de alta temperatura e curto tempo (HTST: hightemperature, shorttime). Esse processo é aplicado enquanto o leite flui continuadamente por uma serpentina. É importante salientar que a pasteurização, por qualquer que seja o tempo e a temperatura empregados, reduz o número de microrganismos presentes, mas não assegura uma esterilização. Depois de qualquer um desses processos, o líquido deve ser mantido em temperaturas inferiores a 10°C, ou seja, de refrigeração para minimizar o crescimento bacteriano subseqüente. Este fato caracteriza o objetivo secundário da pasteurização, que é aumentar a vida de prateleira do alimento, reduzindo as taxas de alterações microbiológicas e enzimáticas.

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Este processo elimina principalmente microrganismos patogênicos e diminui o número de micróbios, prolongando a qualidade do leite quando mantido sobre refrigeração. Muitas bactérias relativamente resistentes ao calor, as termodúricas sobrevivem à pasteurização, mas essas têm pouca probabilidade de causar doenças ou deteriorizar o leite refrigerado. Termodúricas são bactérias que resistem à pasteurização porque suportam temperaturas mais altas (menos de 100 o C) ou produzem esporos que são formas de resistência contra condições adversas. Exemplos de gêneros com espécies esporuladas são: Clostridium e Bacillus.

Outros produtos como o sorvete, o iogurte e a cerveja possuem seus próprios tempos e temperaturas de pasteurização, que com freqüência diferem consideravelmente. Existem diversas razões para essas variações. O aquecimento, por exemplo, é menos eficiente em alimentos mais viscosos, e as gorduras podem ter um efeito protetor para os microrganismos nos alimentos. A indústria de lacticínios utiliza rotineiramente um teste para determinar se os produtos foram pasteurizados: o teste da fosfatase. Se o produto foi pasteurizado, esta enzima foi inativada. Fosfatase Alcalina é uma hidrolase, isto é, uma enzima capaz de remover grupos fosfatos de um grande número de moléculas diferentes, incluindo nucleotídeos, proteínas e alcalóides; como o próprio nome sugere, essa enzima é mais ativa em soluções alcalinas. O processo de remoção desses grupos fosfatos é conhecido como defosforilação. A fosfatase alcalina é produzida por diversos órgãos e tecidos, exemplo: ossos, fígado e placenta. Um uso comum dela na indústria é como marcador da Pasteurização.

O leite pode ser esterilizado e para isso são empregados processos que levam a temperatura para 74ºC, depois é aquecido de forma super rápida, a 140°C, por 5 segundos e imediatamente resfriado. Este processo é conhecido como tratamento de temperaturas ultra

elevada (UHT: ultrahigh temperature), que é diferente da pasteurização clássica e HSTS. A UHT é aplicada em leites para que possam ser armazenados sem refrigeração. Esse tratamento é mais útil em partes do mundo, onde as condições para refrigeração nem sempre estão disponíveis. Nos Estados Unidos, algumas vezes a esterilização é feita em recipientes pequenos de café. Para evitar dar ao leite um sabor de cozido, é usado o sistema de UHT em que o leite líquido nunca toca uma superfície mais quente que o leite em si enquanto é aquecido por vapor. O leite 28


então cai em uma canaleta fina por uma câmera de vapor superaquecido e atinge 140ºC rapidamente, em menos de um segundo. Em seguida, é mantido por 3 segundos em um tubo de armazenamento e então resfriado em uma câmera de vácuo, onde o vapor é retirado, chegando a 74º C novamente. Essa alternativa de esterilização através do calor define o que é chamado de tratamento equivalente; à medida que a temperatura é aumentada, muito menos tempo, é necessário para matar o mesmo número de microorganismos. A destruição de esporos, por exemplo, que é uma estrutura altamente resistente a altas temperaturas, pode levar 70 minutos a 115ºC, enquanto em apenas 7 minutos poderiam ser necessários a 125ºC pela UHT. As três formas, ou seja, a pasteurização clássica; que trabalha em 63ºC por 30 minutos, a HTST; que funciona a 72ºC por 15 segundos e a UTH; que implica em 140ºC por menos de um segundo, são tipos de pasteurização que podem ter efeitos muito parecidos. Apesar disso, quando desnecessárias, as altas temperaturas são frequentemente evitadas nas indústrias alimentícias, uma vez que existe a possibilidade de alteração do sabor, aspecto ou valor nutritivo dos alimentos como os derivados do leite, sucos, bebidas como a cerveja e vegetais. Um dos exemplos de bebidas pasteurizadas é a cerveja, dependendo o tipo que está sendo fabricado. A cerveja acondicionada em latas e garrafas é esterilizada por pasteurização. A pasteurização da cerveja envasada é realizada em túneis, onde a temperatura é elevada à 60ºC e mantida nessa temperatura até garantir a morte dos microorganismos deterioradores. Em seguida, sofre um drástico resfriamento. A cerveja em barris, denominada chope, não é pasteurizada e, por isso, deve ser armazenada a baixa temperatura em recipiente de aço inoxidável, alumínio ou madeira, de volume variável e ainda assim, tem conservação limitada. Com relação aos sucos, o de laranja quando fresco não sofre nenhum tratamento térmico. Após a extração, ele é colocado em recipiente adequado, onde deve ser mantido refrigerado (8 a 10ºC), distribuído e comercializado. Como não sofre tratamento térmico, ou seja, não sofre pasteurização e o mesmo possui tempo de prateleira curto, aproximadamente dois dias, seu potencial de comercialização fica bem limitado.

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Os fungos da microbiota natural das frutas são capazes de se desenvolver em uma ampla faixa de atividade de água e de pH, tolerando até pH tão baixo quanto zero; são pouco exigentes em nutrientes; fundamentalmente aeróbios e, em geral, apresentam baixa resistência térmica com limite superior para crescimento em torno de 60ºC, de forma que em produtos pasteurizados sua presença é facilmente evitada. As temperaturas em torno de 90°C, normalmente empregadas no tratamento térmico, para a preservação do suco, podem não ser suficientes para inativar fungos termorresistentes. No entanto, os bolores presentes em frutos cítricos não são considerados patogênicos.

Termorresistentes são estruturas resistentes a altas temperaturas, acima de 60ºC, incluem nessa classe alguns fungos filamentosos e esporos bacterianos.

Como foi visto até agora, quando falamos de esterilização de alimentos, estamos nos referindo, na verdade, à esterilização comercial, ou seja, não atingimos a temperatura que tornaria o alimento completamente estéril. Se isso ocorresse, o alimento tratado não se tornaria interessante para o consumo, do ponto de vista nutricional e sensorial. Segundo alguns pesquisadores, a esterilização comercial referese a um tratamento térmico que inativa todos os microorganismos patogênicos e deterioradores que possam crescer sob condições normais de estocagem. Os alimentos comercialmente estéreis podem conter um pequeno número de esporos bacterianos termorresistentes que não se multiplicam no alimento. A maior parte dos alimentos enlatados é comercialmente estéril, tendo uma vida de prateleira de pelo menos dois anos. Mesmo após períodos mais longos de estocagem, sua deterioração geralmente ocorre devido a alterações não microbiológicas.

Exercícios 1. “A Pasteurização é um processo de esterilização comercial de alimentos que trabalha com altas temperaturas e, em seguida, com resfriamento imediato. Ela garante a eliminação de microrganismos patogênicos, mas não de estruturas termoresistentes”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta 30


b) Correta. 2. “A pasteurização é sem dúvida um bom método de redução da população microbiana em alimentos porque, além disso, esta técnica não produz alterações no sabor dos alimentos devido ao menor tempo de exposição a temperaturas mais altas”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “O leite pode passar por processos que levam a temperatura a 72ºC e um tempo de 15 segundos e imediatamente resfriado. Este processo é conhecido como UHT (ultrahigh temperature). A UHT é aplicada em leites para que possam ser armazenados sem refrigeração. Esse tratamento é mais útil em partes do mundo onde as condições para refrigeração nem sempre estão disponíveis”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 4. “Os fungos, conhecidos como bolores, são freqüentemente encontrados na microbiota de frutos que produzem sucos. São pouco exigentes em nutrientes; fundamentalmente aeróbios e, em geral, apresentam baixa resistência térmica com limite superior para crescimento em torno de 60ºC, de forma que em produtos pasteurizados sua presença é facilmente evitada” a) Correta b) Incorreta

Respostas dos Exercícios 1. “A Pasteurização é um processo de esterilização comercial de alimentos que trabalha com altas temperaturas e, em seguida, com resfriamento imediato. Ela garante a eliminação de microrganismos patogênicos, mas não de estruturas termoresistentes”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “A pasteurização é sem dúvida um bom método de redução da população microbiana em alimentos porque, além disso, esta técnica não produz alterações no sabor dos alimentos devido ao menor tempo de exposição a temperaturas mais altas”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “O leite pode passar por processos que levam a temperatura a 72ºC e um tempo de 15 segundos e imediatamente resfriado. Este processo é conhecido como UHT (ultrahigh temperature). A UHT é aplicada em leites para que possam ser armazenados sem refrigeração. Esse tratamento é mais útil em partes do mundo onde as condições para refrigeração nem sempre estão disponíveis”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 4. “Os fungos, conhecidos como bolores, são freqüentemente encontrados na microbiota de frutos que produzem sucos. São pouco exigentes em nutrientes; fundamentalmente aeróbios e, em geral, apresentam baixa resistência térmica com limite superior para crescimento em torno de 60ºC, de forma que em produtos pasteurizados sua presença é facilmente evitada” RESPOSTA CORRETA: A

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As radiações podem ser ionizantes e nãoionizantes. A radiação ionizante tem comprimento de onda de 1nm e concentra mais energia. Divididas em 3 tipos: raios gama, raios X ou feixes de alta energia, são aplicadas na esterilização de produtos farmacêuticos e materiais descartáveis cirúrgicos. A radiação nãoionizante possui comprimento de onda superior a 1nm e é representada pela luz UV que precisa de exposição direta sobre os microrganismos e as microondas.

AULA 06 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO FÍSICOS: IRRADIAÇÃO As radiações têm seus efeitos esterilizantes e dependem do comprimento de onda, da intensidade, da duração e da distância da fonte. A quantidade de energia de uma radiação é inversamente proporcional ao comprimento de onda; a de menor comprimento de onda tem o maior conteúdo energético. As radiações de alta energia incluem os raios gama, raios X e luz ultravioleta. Estas radiações podem matar as células, inclusive microrganismos. Algumas radiações ionizam moléculas e outras não. Portanto, existem dois tipos de radiação eletromagnética empregadas no controle dos microrganismos: ionizante e nãoionizante. A radiação ionizante é aquela em que se utiliza de raios gama, raios X ou feixes de

elétrons de alta energia. Este tipo de radiação possui um comprimento de onda menor que o da radiação nãoionizante, ou seja, menor que 1 nm e carregam mais energia Esta radiação tem energia suficiente para causar ionização de moléculas: conduzem elétrons constantemente e rompem as moléculas em átomos ou grupo de átomos.

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Os raios gama são emitidos de certos isótopos radioativos como o cobalto 90 , podendo emitir as radiações gama que podem ser canalizadas para realizar um processo de esterilização. Os raios X são produzidos por máquinas de modo similar à produção de feixes de elétrons. É de natureza similar aos raios gamas. Os raios gama penetram profundamente, mas podem requerer horas para esterilizar grandes massas. Os feixes de elétrons de alta energia possuem uma potência de penetração muito inferior, mas normalmente requerem apenas alguns segundos de exposição.

Isótopos são átomos de um elemento químico cujos núcleos têm o mesmo número atômico "Z", mas diferentes massas atômicas, "A". A palavra isótopo, que significa "no

mesmo sítio", vem do fato de que os isótopos se situam no mesmo local na tabela periódica.

Além de serem microbicidas, os raios eletrônicos de alta energia, os raios gamas e os raios X têm a vantagem de ser capazes de penetrar em pacotes e produtos até mesmo tecidos e 33


esterilizar seus interiores. Os raios gamas são mais baratos do que os raios X porque são emitidos espontaneamente de certos isótopos radioativos. Como resultado das pesquisas em energia nuclear, grande quantidade de radioisótipos emissores de radiação gama estão disponíveis como produtos da fissão atômica Entretanto, raios gama são difíceis de serem controlados, porque os isótopos emitem seus raios em todas as direções. Além do mais, os isótopos liberam radiações gama constantemente e não podem ser “ligados ou desligados” como uma máquina de raio X. http://www.fcf.usp.br/Ensino/Graduacao/Disciplinas/LinkAula/MyFiles/origem isotopos.htm

Fissão atômica Acontece quando um núcleo pesado sofre fissão e obtêmse átomos de massa mediana e enorme quantidade de energia.

O principal efeito da radiação ionizante é a ionização da água, que forma radicais super reativos como os superóxidos e a hidroxila. Estes radicais reagem com os componentes orgânicos celulares, especialmente o DNA e proteínas, causando mutações algumas delas letais para o microrganismo. A indústria de alimentos recentemente renovou seu interesse no uso de radiação para conservação de alimentos. É possível esterilizar alimentos por radiação completamente, mas esse procedimento provavelmente não irá substituir a esterilização por aquecimento convencional para a maioria dos casos. Embora não torne os alimentos perigosos ou radioativos, ele muda o sabor de alguns. O uso de irradiação em alimentos assemelhase mais à pasteurização do que aos tratamentos com a utilização do calor. Carnes resfriadas e congeladas, especialmente aves, são frequentemente contaminadas por bactérias causadoras de doenças. Bactérias desse tipo são alvos fáceis para irradiação. Um dos poucos alimentos onde a esterilização por radiação está liberada são os temperos, ervas e condimentos, embora exista nesses alimentos poucos patógenos. Este uso limitado devese a incertezas sobre o efeito dos raios gama na qualidade do produto, bem como a compreensão pública sobre alguma correlação com a radioatividade, embora os alimentos irradiados por este tipo de raio não se tornem radioativos.

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http://www.nutriweb.org.br/n0202/irradiados.htm

A irradiação ionizante, especialmente os de feixes de elétrons de alta energia, é usada na esterilização de produtos farmacêuticos e materiais descartáveis dentários e médicos, como: seringas plásticas, luvas cirúrgicas, materiais de sutura e cateteres.

Nos Correios, por conta do bioterrorismo, freqüentemente correspondências suspeitas são submetidas a feixes de elétrons para serem esterilizadas. A radiação nãoionizante possui um comprimento de onda maior que a ionizante, normalmente acima de 1nm. O melhor exemplo de radiação nãoionizante é a luz ultravioleta (UV) e as microondas. A luz UV danifica o DNA das células expostas, produzindo ligações entre as bases nitrogenadas classificadas como pirimidinas, sobretudo as timinas adjacentes, produzindo dímeros de timinas. Estes dímeros inibem a replicação correta do DNA durante a reprodução da célula. O comprimento de onda de 260nm é o mais eficaz para eliminar microrganismos. Ele atinge com facilidade o DNA alvo, onde é absorvido. Este tipo de irradiação também controla a quantidade de microrganismo no ar, sendo bactericida, viruscida e fungicida. Por isso, é comum encontrar lâmpadas UV em ambientes hospitalares e laboratoriais. A grande desvantagem da utilização da UV como agente esterilizante é devido à sua pouca penetração, necessitando de exposição direta com a superfície dos microrganismos a serem eliminados. Ou seja, só é eficaz se os microrganismos estiverem nas superfícies dos materiais a serem esterilizados. Se estes produtos estiverem protegidos por vidro ou tecido, não serão esterilizados. Outro problema diz respeito à lesão causada pela luz UV para os olhos do manipulador e queimaduras e câncer da pele em seres humanos. As microondas não possuem um efeito muito direto sobre os microrganismos, e as bactérias podem ser facilmente isoladas do interior de fornos de microondas recémusados. Quando submetemos um alimento rico em água ao aquecimento pelas microondas, a maioria dos patógenos será eliminada pelo calor. No entanto, quando o alimento é sólido, a distribuição do calor será desigual devido à distribuição heterogênea da umidade. Por essa razão, vários surtos de triquinose na população foram resultados do cozimento de carne de por em microondas.

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Triquinose é uma doença causada pelos parasitas nemátodes do gênero Trichinella.

Exercícios 1. “Além de serem microbicidas, os raios eletrônicos de alta energia, os raios gama e os raios X têm a vantagem de ser capazes de penetrar em pacotes e produtos, até mesmo tecidos, e esterilizar seus interiores”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta. b) Correta. 2. “O principal efeito da radiação ionizante é a ionização da água. No mercado, existe a venda de produtos que oferecem água deionizada para serem usados domesticamente. Essa água tornase isenta de contaminação de microrganismos devido à formação de radicais super reativos como os superóxidos e a hidroxila. Estes radicais são conhecidos como radicais livres e reagem com os componentes orgânicos celulares, membranas e, especialmente o DNA, causando mutações na sua maioria letais para o microrganismo”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta. b) Incorreta. 3. “Apesar de eficiente, ainda existe um uso limitado da esterilização de alimentos, utilizando radiações ionizantes, principalmente os raios gama. Existe uma incerteza por parte do consumidor sobre a qualidade final do produto no que diz respeito a resquícios de radioatividade, embora os alimentos irradiados por este tipo de raio não se tornem radioativos”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta. b) Correta. 4. “A luz UV é um exemplo de radiação nãoionizante. Ela danifica o DNA das células expostas, produzindo dímeros de timinas. Estes dímeros inibem a replicação correta do DNA durante a reprodução da célula. A grande desvantagem da utilização da UV como agente esterilizante é devido a sua pouca penetração, necessitando de exposição direta com a superfície dos microrganismos para ser eliminado.” a) Correta. b) Incorreta.

Respostas dos Exercícios 1. “Além de serem microbicidas, os raios eletrônicos de alta energia, os raios gama e os raios X têm a vantagem de ser capazes de penetrar em pacotes e produtos, até mesmo tecidos, e esterilizar seus interiores”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B

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2. “O principal efeito da radiação ionizante é a ionização da água. No mercado, existe a venda de produtos que oferecem água deionizada para serem usados domesticamente. Essa água tornase isenta de contaminação de microrganismos devido à formação de radicais superreativos como os superóxidos e a hidroxila. Estes radicais são conhecidos como radicais livres e reagem com os componentes orgânicos celulares, membranas e, especialmente o DNA, causando mutações na sua maioria letais para o microrganismo”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Apesar de eficiente, ainda existe um uso limitado da esterilização de alimentos, utilizando radiações ionizantes, principalmente os raios gama. Existe uma incerteza por parte do consumidor sobre a qualidade final do produto no que diz respeito a resquícios de radioatividade, embora os alimentos irradiados por este tipo de raio não se tornem radioativos”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 4. “A luz UV é um exemplo de radiação nãoionizante. Ela danifica o DNA das células expostas, produzindo dímeros de timinas. Estes dímeros inibem a replicação correta do DNA durante a reprodução da célula. A grande desvantagem da utilização da UV como agente esterilizante é devido a sua pouca penetração, necessitando de exposição direta com a superfície dos microrganismos para ser eliminado.” RESPOSTA CORRETA: A

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Filtração consiste em fazer passar um fluido por um dispositivo (filtro) constituído por camada porosa, visando obter um produto livre de possíveis agentes contaminantes. A filtração é utilizada para esterilizar os materiais sensíveis ao calor, como alguns meios de cultura, enzimas, vacinas, soluções antibióticas e para retirada de microrganismos indesejáveis do ar. Atualmente existem processos que utilizam membranas filtrantes e filtros HEPA.

AULA 07 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO FÍSICOS: FILTRAÇÃO A filtração é um processo de esterilização utilizado para realizar a separação do líquido de uma mistura sólidolíquido ou sólidogasoso.

Este processo consiste basicamente em fazer passar um fluido, que pode ser líquido ou gás, por um dispositivo (filtro) formado por uma camada conhecida como “membrana filtrante” ou mais camadas de materiais diversos, conhecidos conjuntamente como o “meio filtrante”, ambos constituídos por poros. Essa operação visa obter um produto livre de possíveis agentes contaminantes (físicos, químicos e biológicos). 38


Historicamente a utilização do filtro tem sido citada desde 1884, quando Charles Chamberland, o mesmo que desenvolveu a autoclave, descreveu o uso de um filtro para remover bactérias da água potável. Para purificar água, ele utilizou de porcelana porosa na forma de um funil, uma técnica utilizada no laboratório de Pasteur para separar microrganismos de meios de cultura.

http://www.pasteur.fr/infosci/archives/chb0.html

Anos depois, velas porosas de porcelana nãoesmaltada, asbestos e vidros sintetizados foram muito utilizados na filtragem da água e outros líquidos. Nesses filtros, em especial os de porcelana nãoesmaltada, as passagens longas e indiretas da água através das paredes levava a adsorção das bactérias. Na época, alguns vírus já ultrapassavam esta barreira e disseminava algumas doenças como a raiva. A filtração é utilizada para esterilizar os materiais sensíveis ao calor, os chamados termosensíveis, como alguns meios de cultura, enzimas, vacinas, soluções antibióticas e para retirada de microrganismos indesejáveis do ar. No entanto, a maioria dos vírus e mycoplasmas (glossário) não é filtrada. Apesar disso, a filtração é um método de esterilização bastante empregada nos dias de hoje. Mycoplasmas: os mycoplasmas são os menores microorganismos de vida livre, com o diâmetro variando entre 100 e 300 nanômetros e comumente encontrados, tanto em plantas, como em animais, inclusive o humano.

Atualmente são empregadas técnicas de filtragem com membranas filtrantes para substituir os filtros mais antigos com o mesmo propósito e filtros de alta purificação conhecidos como filtros HEPA.

As membranas filtrantes As membranas filtrantes (Figura 2) são discos de ésteres de celulose extremamente finos (cerca de 150µm), com poros pequenos o suficiente para impedir a passagem de microorganismos.

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As membranas filtrantes são compostas ésteres de celulose ou polímeros plásticos. Esses filtros possuem apenas 0,1mm de espessura. Os poros de um filtro de membrana incluem, por exemplo, tamanho de 0,22 µm e 0,45 µm, que são destinados a bactérias. Porém, algumas bactérias muito flexíveis, como as espiroquetas ou os mycolplasmas sem parede, algumas vezes passam através desses filtros. Existem filtros com poros tão pequenos quanto 0,01µm, um tamanho que retém os vírus e mesmo algumas moléculas grandes como as proteínas. Estes filtros apresentam algumas vantagens com relação aos filtros tradicionais, tais como: • Poros com diâmetro conhecidos e uniformes; • Fabricação dos filtros com variação do tamanho do filtro e dos poros; • Absorvem pouco o fluido que está sendo filtrado; • Filtração rápida; • São descartáveis. As membranas filtrantes são utilizadas para separar diferentes tipos de microrganismos, como também alguns componentes celulares e para coletar amostras microbianas, através do uso de membranas com poros menores. O uso de membranas filtrantes está largamente disseminado na indústria e nas empresas de saneamento básico. Na indústria, as membranas são utilizadas em linhas de produção, para, por exemplo, clarificar cerveja, sucos ou separar as proteínas do leite.

Outra aplicação de membranas que está crescendo muito na indústria é a produção de água de processo de alta qualidade e o emprego de sistemas de membrana para tratamento e reuso de águas residuárias. No saneamento básico as membranas são empregadas principalmente para a produção de água potável, dessalinização de águas salobras, remoção de cor e dureza da água e para o tratamento e reuso de esgotos. Águas residuais ou residuárias são todas as águas descartadas que resultam da utilização para diversos processos. Exemplos destas águas são: águas residuais domésticas, águas residuais industriais, águas de infiltração, águas urbanas, águas que resultam de chuvas e lavagem de pavimentos.

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Os filtros HEPA Em determinados ambientes como laboratórios de pesquisa, salas de cirurgias ou de produção vacinas, quartos com pacientes queimados ou imunossuprimidos o controle do ambiente é extremamente importante no que diz respeito à questão da esterilidade. Imunossuprimidos: é um quadro dado aos pacientes que possuem o sistema imunológico bastante debilitado, sendo alvos fáceis de doenças oportunistas.

A nãoobservância deste requisito pode dar origem a contaminações por bactérias e fungos, que determinam o descarte do produto no caso dos laboratórios, ou podem causar doenças oportunistas nesse grupo de paciente. Portanto, medidas de precaução devem ser tomadas para evitar a contaminação do ambiente. Para tanto, estes recebem ar filtrado para reduzir a quantidade de microrganismo presentes no ar. Os filtros de partículas de ar de alta eficiência os chamados filtros HEPA (high efficiency particulate air) (Figura 3) conseguem remover quase todos os microrganismos maiores que 0,3 µm de diâmetro. Um filtro HEPA é constituído de acetato de celulose aderido a uma folha de alumínio; retém 99% das partículas presentes no ar. O uso mais simples desses filtros é a sua aplicação em cabine de segurança biológica (Figura 4A e B). Esta câmera tem uma abertura frontal por meio da qual o ar é aspirado para dentro e sempre a partir do manipulador. Este ar sai então da cabine por meio de um filtro HEPA, que retém partículas como microrganimos. Outra aplicação freqüente dos filtros HEPA diz respeito à sua redução de microrganismos presentes no ar, principalmente em ambientes onde existe uma necessidade muito grande de condições estéreis, como determinadas unidades hospitalares. Estes filtros nessas salas se posicionam na entrada de cada unidade, onde é possível filtrar os microrganismos indesejáveis. Reduzem o risco de aquisição de doenças infecciosas oportunistas e são constantemente monitorizados.

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Exercícios 1. “A filtração é um processo de esterilização que elimina a maioria da comunidade microbiana, dependendo do sistema de filtração empregado. Consiste da passagem de um fluido por um meio filtrante, poroso, onde ficaram retidas nessa malha porosa as partículas maiores.” Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “A filtração é aplicada como método de esterilização em materiais sensíveis ao calor, os chamados termosensíveis, como alguns meios de cultura, enzimas, vacinas, soluções antibióticas e para retirada de microrganismos indesejáveis do ar“. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “Apesar de eficiente, a filtração utilizando filtros com poros com 0,01µm não conseguem reter microrganismos de tamanhos reduzidos como alguns vírus, tendo seu uso restrito a alguns produtos”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 4 “Os filtros HEPA (high efficiency particulate air) conseguem remover quase todos os microrganismos maiores que 0,3 µm de diâmetro. Portanto, são menos eficientes que os filtros de membranas com poros extremamente pequenos. Mesmo assim, conseguem reter cerca de 99% das partículas presentes no ar”. a) Correta b) Incorreta

Respostas dos Exercícios 1. “A filtração é um processo de esterilização que elimina a maioria da comunidade microbiana, dependendo do sistema de filtração empregado. Consiste da passagem de um fluido por um meio filtrante, poroso, onde ficaram retidas nessa malha porosa as partículas maiores.” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “A filtração é aplicada como método de esterilização em materiais sensíveis ao calor, os chamados termosensíveis, como alguns meios de cultura, enzimas, vacinas, soluções antibióticas e para retirada de microrganismos indesejáveis do ar“. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Apesar de eficiente, a filtração utilizando filtros com poros com 0,01µm não conseguem reter microrganismos de tamanhos reduzidos como alguns vírus, tendo seu uso restrito a alguns produtos”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4 “Os filtros HEPA ( high efficiency particulate air) conseguem remover quase todos os microrganismos maiores que 0,3 µm de diâmetro. Portanto, são menos eficientes que os filtros de membranas com poros extremamente pequenos. Mesmo assim, conseguem reter cerca de 99% das partículas presentes no ar”. RESPOSTA CORRETA: A

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O formaldeído, ou formol, é um gás com poder esterilizante, que se torna estável em altas temperaturas e altas concentrações. Tem ação microbicida e esporocida. Era utilizado para esterilizar quartos com doenças infecciosas. Seu uso é restrito a esterilização de cabines microbiológicas, materiais hospitalares, e limpeza de filtros. O formaldeído provoca irritabilidade nas mucosas sendo até cancerígeno. Pode ser encontrado na forma líquida como formalina (37%).

AULA 08 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: FORMALDEÍDO (GÁS) E FORMALINA (LÍQUIDO) O formaldeído, ou formol, é um gás com poder esterilizante, que se comporta de maneira estável em altas temperaturas e concentrações. O formaldeído tem função fungicida, viruscida e bactericida. Se agir por 18 horas, elimina as formas mais resistentes como os esporos. O formaldeído é uma molécula simples com CHO (carbono, hidrogênio e oxigênio). É tóxico quando ingerido, inalado ou quando entra em contato com a pele, por via intravenosa, intraperitoneal ou subcutânea. Em concentrações baixas em torno de 1,5 ppm (partes por milhão) no ar já pode causar rapidamente irritação nos olhos e sob a forma de gás oferece mais risco do que em estado de vapor, além de ter um aroma extremamente desagradável. Em temperaturas ambiente, o formaldeído gasoso polimerizase, formando uma substância sólida incolor chamada de paraformaldeído, que rapidamente libera formaldeído pelo aquecimento.

Polimerizase: Já descrita

A esterilização pelo formaldeído é praticamente desconhecida no Brasil, porém é muito difundida em alguns países da Europa, como a Suécia. É chamada de LTSF (Low Temperature

Steam and Formaldehyde Sterilization). A esterilização por este método ocorre através de formaldeído gasoso na presença de vapor saturado, é preciso que essa mistura seja distribuída de forma uniforme em ambientes fechados como as autoclaves.

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O processo de esterilização se resume na entrada do formaldeído na forma de vapor e gás na autoclave, logo em seguida há um período de manutenção da esterilização onde essa mistura se difunde entre o material a ser esterilizado. Ocorre então o período de retirada do gás da câmara da autoclave, que acontece por evacuações e jatos de vapor ou ar. Em seguida, o material esterilizado passa por um processo de secagem. No total esse processo dura em média 2 horas a 65 o C, se a temperatura for mais elevada, o tempo de duração do processo diminui. Os derivados do formaldeído são útieis na confecção de seda artificial, celulose, tintas e corantes, soluções de uréia, tiouréia, resinas, vidros, espelhos e explosivos. O formol também pode ser utilizado para dar firmeza nos tecidos, na confecção de germicidas, fungicidas agrícolas, na confecção de borracha sintética e na coagulação da borracha natural. É empregado no endurecimento de gelatinas, albuminas e caseínas. É também usado na fabricação de drogas e pesticidas.

http://www.copenor.com.br/webcopenor/formol_aplicacoes.htm

Antigamente era utilizado ocasionalmente para esterilizar quartos depois da saída de pacientes com doenças extremamente infecciosas. Seu uso é restrito inicialmente a esterilização de cabines microbiológicas e limpeza de filtros HEPA. A aplicação mais conhecida do formol é sem dúvida no embalsamento de peças de cadáveres e animais em laboratório da área da saúde. O vapor de formaldeído frequentemente percebido nesses ambientes irrita todas as partes do sistema respiratório superior e também afeta outras mucosas, como nariz e olhos. A maioria dos indivíduos pode detectar o formol em concentrações tão baixas como 0.5 ppm e, conforme for aumentando a concentração até o atual limite de exposição máxima, a irritação se dá mais pronunciada. Medições das concentrações de formaldeído no ar em laboratórios de anatomia têm apontado níveis entre 0,07 e 2,94 ppm (partes por milhão) que já causa irritação nos olhos, garganta e nariz. Umidade e temperatura têm influência direta sobre a ação microbicida do formaldeído. Quando se programa esterilizar uma área fechada, a temperatura deve estar próxima de 22°C e a umidade relativa do ar em torno de 5580%. O formaldeído é um composto químico extremamente reativo e sua atividade microbicida parece estar relacionada com a sua capacidade de inativar constituintes celulares, como proteínas e ácidos nucléicos. As células vegetativas são mais rapidamente destruídas com o formaldeído do que as formas esporuladas que necessitam de um tempo maior de exposição.

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Vegetativas: Já descritas

É um método barato, eficiente e rápido. Uma das desvantagens do processo de esterilização com o formaldeído é a capacidade limitada de penetração dos vapores em superfícies cobertas. Outras desvantagens dizem respeito a: • Perda de atividade com a presença de matéria orgânica; • Odor forte e irritante; • A formulação alcoólica corrói metais, danifica lentes, instrumentos ópticos, artigos plásticos e de borracha; • Deixa resíduos tóxicos em equipamentos; • Possui alta toxicidade. No ar, sua concentração máxima permitida é de 1ppm por 30 minutos, podendo após esse limite provocar irritação de mucosas, dermatite, asma, bronquite e pneumonite; • É considerado carcinogênico pelo National Institute of Occupational Safety Health (NIOSH). O formaldeído é comercializado na forma líquida como formalina. A Formalina é uma mistura de gás formol com água. Formalina, por definição, é uma concentração a 37% a 40% da substância. O metanol é usualmente adicionado (10 a 15%) para prevenir a polimerização do formaldeído. A formalina a frio tem ação esterilizante quando em veículo aquoso a 10% e alcoólico a 8%. Os artigos deverão ficar em completa imersão por 18 horas. Antigamente existia na forma de pastinha e era utilizada em consultórios odontológicos, mas teve seu uso proibido devido aos efeitos cancerígenos. É utilizado para a esterilização de certos instrumentos, como por exemplo: • Cateteres, drenos e tubos de borracha, náilon, teflon, PVC e poliestireno em ambas as formulações (gasosa e aquosa); • Laparoscopias, artroscópios e ventriloscópios, enxertos de acrílico apenas na formulação aquosa.

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Exercícios 1. “O formol é considerado um excelente esterilizante, aplicado em grande escala nos laboratórios de análises clinicas, destruindo células vegetativas e esporuladas de microrganimos.”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “A esterilização pelo formaldeído é praticamente desconhecida no Brasil, porém é muito difundida em alguns países da Europa, como a Suécia. É chamada de LTSF (Low Temperature Steam and Formaldehyde Sterilization), pois trabalha com temperaturas de 65°C por 2 horas para eliminar formas vivas“. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “Para eliminar esporos bacterianos, uma forma bacteriana de resistência ao meio ambiente, a esterilização utilizando formaldeído necessita de apenas 2h a 65°C”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 4. “Uma entre outras desvantagens do processo de esterilização com o formaldeído é a capacidade limitada de penetração dos vapores em superfícies cobertas”. a) Correta b) Incorreta

Respostas dos Exercícios 1. “O formol é considerado um excelente esterilizante, aplicado em grande escala nos laboratórios de análises clinicas, destruindo células vegetativas e esporuladas de microrganimos.”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 2. “A esterilização pelo formaldeído é praticamente desconhecida no Brasil, porém é muito difundida em alguns países da Europa, como a Suécia. É chamada de LTSF ( Low Temperature Steam and Formaldehyde Sterilization), pois trabalha com temperaturas de 65°C por 2 horas para eliminar formas vivas“. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Para eliminar esporos bacterianos, uma forma bacteriana de resistência ao meio ambiente, a esterilização utilizando formaldeído necessita de apenas 2h a 65°C”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “Uma entre outras desvantagens do processo de esterilização com o formaldeído é a capacidade limitada de penetração dos vapores em superfícies cobertas”. RESPOSTA CORRETA: A

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O glutaraldeído é um esterilizante químico utilizado para esterilizações a frio de materiais hospitalares termosensíveis. Quando usado em uma solução a 2%, apresenta rápida e efetiva ação antimicrobiana e é lentamente efetivo contra esporos. Seu uso necessita de precauções como imersão de todo o material por um determinado tempo e seguidas lavagens, necessitando de proteção do manipulador por apresentar toxicidade.

AULA 09 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: GLUTARALDEÍDO Com bons resultados, os aldeídos fórmicos (formaldeído) têm sido substituídos pelo aldeído glutárico (glutaraldeído) em soluções aquosas alcalinas. O glutaraldeído é um dos poucos desinfetantes químicos, considerado um agente esterilizante. O glutaraldeído é um liquido oleoso, incolor e com uma utilidade semelhante ao formaldeído. Porém, é menos irritante e mais eficiente que o formol.

O glutaraldeído é uma substância comumente utilizada para esterilização a frio nos hospitais e afins da rede pública e privada no Brasil. Quando usado em uma solução a 2%, apresenta rápida e efetiva ação contra bactérias grampositivas e gramnegativas. É eficaz contra

Mycobacterium tuberculosis e alguns fungos e vírus, incluindo os da hepatite B e HIV durante apenas 10 minutos. É lentamente efetivo contra esporos. Entretanto, o tempo máximo estipulado para a eliminação de um esporicida é de 30 minutos, um critério que esta substância não contempla, pois

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somente atinge essa atividade após 3 a 10 horas. As formulações que são utilizadas possuem outros componentes para que a solução passe a ter esta ação. As formulações encontradas são: • Solução ativada: é adicionado o bicarbonato de sódio, uma substância ativadora, que torna a solução alcalina com o pH variando de 7,5 a 8,5, com atividade esporicida. • Solução potencializada: emprega uma mistura isomérica contendo alcoóis, constituindo um pH mais ácido de 3,4 a 3,5. Aplicado à temperatura ambiente, essa mistura tem ação esporicida de baixo nível e, se aquecida a 60 o C tornase esporicida em exposição por apenas 6 horas. Isomeria é o fenômeno caracterizado pela existência de duas ou mais substâncias que apresentam fórmulas moleculares idênticas, mas que diferem em suas fórmulas estruturais. Por exemplo: Etanol e Éter dimetílico possuem a mesma fórmula (C2H6O).

A ação antimicrobiana é devido à alquilação de grupos químicos importantes presentes nos microrganimos como hidroxila, sulfidrilas, amino e carboxila, alterando ácidos nucléicos (DNA, RNA), resultando também em alterações de proteínas desses seres. Alquilação é a transferência de um grupo alquila de uma molécula para outra. O grupo alquila pode ser transferido como um carbocátion alquídico, um radical livre, um carbânion ou um carbeno (ou seus equivalentes).

Nas formas mais resistentes como as bactérias esporuladas, o glutaraldeído reage com a superfície do esporo, provocando sua morte. O glutaraldeído é utilizado para esterilizar instrumentos hospitalares termosensíveis que não podem sofrer esterilização pelos processos físicos como: enxertos de acrílico, cateteres, drenos e tubos de poliestireno, incluindo também equipamentos de terapia respiratória, instrumentos urológicos, lentes de instrumentos e outros equipamentos específicos . Necessitando, porém, de um enxágüe abundante após imersão desses materiais. Também é usado por agentes funerários para embalsamar. Ele não é utilizado em superfície por seu custo elevado e por ser muito tóxico.

http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/controle/Alertas

O material a ser esterilizado pelo glutaraldeído deve ser previamente lavado com produtos desinfetantes e secos logo em seguida, principalmente se este estiver contaminado por

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microrganismos. Em seguida, todo o material pode então ser colocado na solução de glutaraldeído tomandose algumas precauções: • Todo material a ser esterilizado pelo glutaraldeído deve ser imerso cobrindo toda a sua superfície; • Quando imergir o material a ser esterilizado, devese ter cuidado para não formar bolhas, que, por sua vez, poderão estourar, liberando o glutaraldeído para o ar. O recipiente onde será colocada esta solução deve ser esterilizado antes de ser usado para este fim e, de preferência, que seja feito de vidro ou plástico; • O tempo de esterilização deve ser contado assim que o recipiente com glutaraldeído for tampado; • Manusear os materiais com uso EPIs (Equipamentos de proteção individual, como pinças ou luvas, máscara e óculos); • Enxaguar por, no mínimo três vezes, os materiais após a esterilização, utilizar para isso água esterilizada ou soro fisiológico estéril; • Tomar sempre cuidado para se evitar contaminação externa desses materiais; O tempo de esterilização é preconizado pelo fabricante e varia de 8 a 10 horas. É imprescindível para a garantia da qualidade da esterilização que o material seja utilizado de forma imediata.

A utilização do glutaraldeído apresenta as seguintes vantagens: • Não produz corrosão de instrumentais; • Não altera componentes de borracha ou plástico; • Não se torna inativo na presença de matéria orgânica, podendo ser utilizado como desinfetante de produtos infectados antes de serem esterilizados; • Não dissolve o cimento de lentes de instrumentos ópticos; • Não interfere na condutividade elétrica de equipamentos de anestesia gasosa, pois possui em sua formulação antioxidantes; • Não descolora os materiais esterilizados; • É estável a temperatura ambiente; • Não possui odor forte; 49


• Libera menos vapores irritantes para peles e mucosas. Apesar de ser menos agressivos que o formaldeído, os níveis de glutaraldeído no ambiente devem ser avaliados pelo Serviço de Segurança do Trabalho, visto que o limite máximo aceitável da solução no ar é de 0,2 ppm. Acima desta concentração pode ocorrer irritação das mucosas como nariz, garganta e olhos. A manutenção de um fechamento adequado do recipiente contendo o agente esterilizante, além de uma boa ventilação no local onde foi utilizado o produto, pode reduzir esses efeitos irritantes. Para evitar reações aos pacientes em função de resíduos deixados pelo glutaraldeído é necessária a realização de lavagens rigorosas como já foi mencionado. As desvantagens do uso do glutaraldeído se resumem: • Pode ser retido por materiais porosos; • Irritante de vias aéreas, oculares e cutâneas, juntamente com cefaléias, sonolências e tonturas. Cefaléia é o termo médico para dor de cabeça. É um dos sintomas mais comuns na medicina, é uma das queixas mais freqüentes de consultas a clínicos, ginecologistas, pediatras e neurologistas, e também um dos motivos mais comuns de falta ao trabalho. A cefaléia é um sintoma universal no ser humano. Estimase que 90 a 100% das pessoas terão algum tipo de dor de cabeça ao longo da vida.

É importante destacar que os profissionais de saúde (auxiliares de enfermaria, enfermeiros, pessoal de limpeza, entre outros), e, possivelmente os pacientes em regime de internação, podem estar sendo expostos em razão do emprego do glutaraldeído em expurgos e processos de desinfecção. Possivelmente também o glutaraldeído pode estar causando um problema de saúde pública e danos ao meio ambiente que não são notificados, o que requer estudo a respeito.

Exercícios 1. “O glutaraldeído é lentamente efetivo contra esporos, mas pode ter essa atividade ativada e mais rápida adicionando bicarbonato de sódio, que torna a solução alcalina” Podese dizer que essa idéia está: 50


a) Incorreta b) Correta. 2. “O glutaraldeído é utilizado para esterilizar instrumentos hospitalares termosensíveis. Necessitando, porém, de enxágües sucessivos e abundantes após imersão desses materiais”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “O glutaraldeído é menos agressivo que outras substâncias químicas esterilizantes, não existindo um controle rigoroso de sua disposição no ar pelo Serviço de Segurança do Trabalho” Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 4. “O glutaraldeído possui algumas desvantagens como sua retenção em artigos porosos e efeitos tóxicos em determinadas concentrações”. a) Incorreta b) Correta

Respostas dos Exercícios 1. “O glutaraldeído é lentamente efetivo contra esporos, mas pode ter essa atividade ativada e mais rápida adicionando bicarbonato de sódio, que torna a solução alcalina” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “O glutaraldeído é utilizado para esterilizar instrumentos hospitalares termosensíveis. Necessitando, porém, de enxágües sucessivos e abundantes após imersão desses materiais”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “O glutaraldeído é menos agressivo que outras substâncias químicas esterilizantes, não existindo um controle rigoroso de sua disposição no ar pelo Serviço de Segurança do Trabalho” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “O glutaraldeído possui algumas desvantagens como sua retenção em artigos porosos e efeitos tóxicos em determinadas concentrações”. RESPOSTA CORRETA: B

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O óxido de etileno é um composto orgânico, líquido a temperaturas abaixo de 10,8°C, mas acima dessa temperatura tornase gasoso e explosivo. O óxido de etileno tem ação bactericida, viruscida, fungicida e esporicida. É utilizado em câmeras fechadas como autoclaves. A efetividade do processo depende da concentração do gás, temperatura, umidade relativa e do tempo de exposição do objeto a ser esterilizado. Apresenta alto custo e é tóxico.

AULA 10 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: ÓXIDO DE ETILENO Devido à capacidade de esterilizar sem calor, os gases como o óxido de etileno também são amplamente usados em suprimentos e equipamentos médicos. Para realização da esterilização, assim como o formaldeído gasoso, o óxido de etileno necessita de uma câmera fechada semelhante a uma autoclave. Muitos hospitais possuem estas câmaras até mesmo em um tamanho suficientes para esterilizar colchões. O óxido de etileno é um composto orgânico, de consistência líquida a temperaturas inferiores a 10,8°C. Acima dessa temperatura tornase gasoso e explosivo. É solúvel em água, acetona, éter e em solventes orgânicos comuns e é utilizado para esterilizar objetos termo sensíveis.

Os vapores emitidos pelo óxido de etileno são altamente irritantes aos olhos e mucosas e são inflamáveis mesmo a baixas concentrações. A redução dessa característica explosiva, sem alterar a atividade microbicida, tem sido minimizada com a mistura de dióxido de carbono ou Clorofluorocarbonado e Freon, gases não inflamáveis. Nas seguintes combinações:

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• 90% de dióxido de carbono e 10% de óxido de etileno; • 88% de diclorofluormetano (freon) em peso e 12% de óxido de etileno; • 80% de dióxido de carbono em peso e volume de gás e 20% de óxido de etileno; • 70% de dióxido de carbono em peso e volume de gás e 30% de óxido de etileno.

O óxido de etileno tem ação bactericida, viruscida, fungicida e esporicida por inativar enzimas e outras proteínas necessárias para muitos processos metabólicos, como também DNA e RNA. Isso ocorre através da alcalinização dessas moléculas, num processo de alquilação dos grupos hidroxila, carboxila e sulfidrilas terminais, similar ao dos aldeídos. A efetividade do processo depende da concentração do gás, da temperatura, da umidade relativa e do tempo de exposição do objeto a ser esterilizado. Algumas autoclaves mais modernas são equipadas para manter condições ótimas para a utilização desse gás. O tempo de exposição é reduzido à metade a cada duplicação da concentração de óxido de etileno. O mesmo acontece quando dobra a cada aumento de 10 °C na temperatura. A umidade relativa é de suma importância na esterilização por óxido de etileno. Alguns enfoques são dados a esta importância da umidade na esterilização por óxido de etileno. Um deles é o fato de o aumento da umidade relativa aumentar o poder de esterilização do óxido de etileno. A esterilização do óxido de etileno é ótima em uma umidade relativa de aproximadamente 30%, com um decréscimo de atividade em umidades maiores ou menores. Isso se torna um problema na esterilização de microrganismos que estão secos em uma superfície ou liofilizados. Outro aspecto da importância da umidade neste tipo de esterilização é o fato de a água e o agente esterilizante promoverem reciprocamente a permeabilidade através de embalagens de filme plástico, dependendo de sua característica polar ou apolar. O óxido de etileno funciona como transportador através de filmes não polares e hidrófobos já a água favorece a passagem de óxido de etileno através de filmes polares (celofane e poliamida, por exemplo). Polares : Com duas extremidades de cargas opostas. Hidrófobo: O mesmo que imiscível com água.

Além de sua aplicação em equipamentos médicos, o óxido de etileno tem sido utilizado na descontaminação dos componentes das naves espaciais.

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Tendo em vista que o óxido de etileno pode danificar tecidos viáveis, o gás deve ser eliminado antes de o objeto ser utilizado. Este período é necessário para que o óxido de etileno residual possa ser reduzido a níveis seguros para a utilização dos artigos nos pacientes. Para o manuseio pela equipe, é realizado utilizando ar quente em um compartimento fechado específico para esse fim. O tempo desse período depende da composição e tamanho dos artigos, do sistema de aeração, da forma de penetração de temperatura na câmara, do preparo e empacotamento dos artigos e do tipo de esterilização por óxido de etileno. Este período pode variar de 6 horas a 7 dias. A esterilização do óxido de etileno é empregada em produtos médicohospitalares que não podem ser expostos ao calor ou a agentes esterilizantes líquidos: instrumentos de uso intravenoso e de uso cardiopulmonar em anestesiologia, aparelhos de monitorização invasiva, instrumentos telescópios (citoscópios, broncoscópios, etc.), materiais elétricos (eletrodos, fios elétricos), máquinas (marcapassos, etc.), motores e bombas, e muitos outros. Este tipo de esterilização contribui para a reutilização de produtos que inicialmente seriam para uso único, assim a prática deste tipo de esterilização evidencia vantagens econômicas, porém a segurança de se reesterilizar estes produtos ainda é questionada. Este gás apresenta várias vantagens, destacando: • Diferentes dos outros gases esterilizantes, o óxido de etileno possui uma grande capacidade de penetração, conseguindo atravessar e esterilizar grandes pacotes com objetos, roupas e plásticos; • Aplicação em materiais sem danificálos. As desvantagens para sua aplicação são as seguintes: • Necessidade de longo tempo para efetivar o processo (5 estágios, incluindo preparo e umidificação, introdução do gás, exposição, evacuação do gás e injeções de ar, que requerem aproximadamente duas horas e meia excluindo o período de aeração; • Alto custo operacional; • Possíveis riscos aos pacientes e aos profissionais envolvidos; • Apresenta potencial carcinogênico e mutagênico, genotoxicidade, podendo alterar sistema reprodutor e nervoso e, ainda, causar sensibilização aos profissionais envolvidos no processo, devendo haver supervisão médica constante nos mesmos.

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No Brasil existe legislação específica sobre o funcionamento de centrais de esterilização por Óxido de Etileno. No entanto, as questões relacionadas aos ciclos, tipo de gás e aeração não estão contempladas, embora constem os limites máximos de resíduos aceitáveis para os diferentes tipos de materiais.

http://elegis.anvisa.gov.br/leisref/public/showAct.php?id=7817

Exercícios 1. “Apesar de ser amplamente utilizado no Brasil, o óxido de etileno oferece alguns riscos para aqueles que permanecem em contato com esta substância. Um dos riscos é seu poder de explosão em contato com a temperatura ambiente, ou acima de 10°C” Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “Os vapores emitidos pelo óxido de etileno são altamente irritantes aos olhos e mucosas, e são inflamáveis mesmo a baixas concentrações. A redução dessa característica explosiva, sem alterar a atividade microbicida, tem sido minimizada com a mistura de dióxido de carbono ou Clorofluorocarbonado e Freon, gases não inflamáveis”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “A umidade relativa é de suma importância na esterilização por óxido de etileno. O aumento da umidade relativa aumenta o poder de esterilização do óxido de etileno. A esterilização do óxido de etileno é ótima em uma umidade relativa de aproximadamente 30%. Isso torna importante um rigoroso controle da umidade da autoclave” Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 4. “O óxido de etileno possui uma grande capacidade de penetração, conseguindo atravessar e esterilizar grandes pacotes com objetos, roupas e plásticos. Porém, tendo em vista que o óxido de etileno pode danificar tecidos viáveis, o gás deve ser eliminado antes de o objeto ser utilizado. Para isso é realizada a retirada do óxido de etileno residual utilizando ar quente em um compartimento fechado”. a) Correta b) Incorreta

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Respostas dos Exercícios 1. “Apesar de ser amplamente utilizado no Brasil, o óxido de etileno oferece alguns riscos para aqueles que permanecem em contato com esta substância. Um dos riscos é seu poder de explosão em contato com a temperatura ambiente, ou acima de 10°C” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “Os vapores emitidos pelo óxido de etileno são altamente irritantes aos olhos e mucosas, e são inflamáveis mesmo a baixas concentrações. A redução dessa característica explosiva, sem alterar a atividade microbicida, tem sido minimizada com a mistura de dióxido de carbono ou Clorofluorocarbonado e Freon, gases não inflamáveis”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “A umidade relativa é de suma importância na esterilização por óxido de etileno. O aumento da umidade relativa aumenta o poder de esterilização do óxido de etileno. A esterilização do óxido de etileno é ótima em uma umidade relativa de aproximadamente 30%. Isso torna importante um rigoroso controle da umidade da autoclave” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “O óxido de etileno possui uma grande capacidade de penetração, conseguindo atravessar e esterilizar grandes pacotes com objetos, roupas e plásticos. Porém, tendo em vista que o óxido de etileno pode danificar tecidos viáveis, o gás deve ser eliminado antes de o objeto ser utilizado. Para isso é realizada a retirada do óxido de etileno residual utilizando ar quente em um compartimento fechado”. RESPOSTA CORRETA: A

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O álcool etílico (70%) e o isopropílico (90%) são considerados bactericidas, fungicida e viruscida. No entanto, não são capazes de eliminar esporos bacterianos, alguns fungos e os vírus sem envelope. Suas ações antimicrobianas devemse principalmente a sua capacidade de desnaturar proteínas. São utilizados como antisépticos de pele e como desinfetantes de instrumentos médicos e superfície de bancadas. Porém, evaporam rápido.

AULA 11 • MÉTODOS DE DESINFECÇÃO QUÍMICOS: ÁLCOOIS Os álcoois (etílico e o isopropílico) são considerados bactericidas, incluindo micobactérias, fungicida e viruscida. No entanto, não são capazes de eliminar formas mais resistentes desses microrganismos como os esporos bacterianos, alguns fungos desprovidos de lipídios e os vírus sem envelope. Um exemplo claro dessa característica é o esporo Bacillus anthacis, agente causador do carbúnculo, que pode sobreviver no álcool durante 20 anos. Essa característica é o que garante que estas substâncias sejam qualificadas como desinfetantes. Os mecanismos de ação, pelos quais os álcoois exercem sua ação antimicrobiana, devem se principalmente à capacidade de desnaturar proteínas. São solventes de lipídios, lesando dessa forma estruturas lipídicas presentes na membrana das células microbianas, rompendo membranas, e nos vírus envelopados que perdem a partir disso, seu poder de infectividade. Com alguns vírus, o etanol reage com algumas proteínas, impedindo a ação sobre as proteínas virais. Poder de infectividade é o poder dado à capacidade de infectar ativamente outra célula hospedeira.

Nas concentrações de 70% (etanol) e 90% (isopropílico), as soluções de álcoois são eficientes contra as formas vegetativas sendo que abaixo de 50% suas atividades diminuem bastante. Nessas concentrações essas substâncias são utilizadas como antisépticos de pele, principalmente previamente à coleta de sangue, ruptura da integridade da pele e como desinfetante de instrumentos médicoscirúrgicos, produtos odontológicos , superfície de bancadas e outras superfícies. Na desinfecção de termômetros de uso oral, a exposição durante cinco minutos em álcool 70% inativa todas as formas vegetativas, desde que sejam limpos previamente com detergentes, 57


e retirados mecanicamente com a ajuda de esponja para retirada da matriz de polissacarídeos. Essa matriz ou muco ajuda na adesão do microrganismo a superfícies de plástico e de vidro e que dificulta a penetração do álcool. O isopropilico a 100%, ou seja, puro, apresenta ação germicida superior ao álcool etílico e ainda é menos corrosivo para os instrumentos, porém não é ativo contra vírus hidrofílicos. Quanto maior for a cadeia de carbono, maior será a propriedade bactericida. O álcool metílico ou metanol, por exemplo, tem uma cadeia curta de carbono e necessita de uma concentração maior para eliminar microrganismos do que o isopropílico, que tem uma cadeia de carbono mais extensa (máximo de 5 a 8 carbonos).

• Álcool métilco ou metanol; CH3OH • Álcool etílico ou etanol: CH3CH2OH • Álcool npropilico: CH3CH2CH2OH • Álcool isopropílico: CH3CHOHCH3 • Álcool nbutílico: CH3CHCH2CH2OH • Álcool namílico: CH3CH2CH2CH2CH2OH. Apesar de possuir cadeias extensas de carbono, os álcoois nbutílico e namílico teoricamente lhe garantiriam um melhor poder antimicrobiano. Estas duas substâncias são menos solúveis em água do que o álcool etílico e são pouco utilizados como desinfetante. Em concentrações menores que o do álcool etílico de 40 a 80%, os álcoois propílico e isopropílico têm excelente ação bactericida e são comumente utilizados substituindo o etanol. É curioso observar que o etanol diluído em água é mais efetivo que na sua formulação pura. Isso é justificado porque a desnaturação das proteínas depende da água e, além disso, a

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água evita a evaporação rápida do produto. Sendo assim, o álcool a 70% é mais efetivo que aquele diluído a 95% Os álcoois apresentam vantagens com relação ao seu uso: • Baixo custo; • Dissolve em água; • Agem e evaporam sem, contudo deixar resíduos; • Fácil acesso; • Ação rápida. Contudo, algumas desvantagens são reconhecidas, tais como: • Apesar de bom desinfetante, não é apropriado com antiséptico de feridas, pois causam coagulação de uma camada de proteínas, dificultando o acesso do álcool as camadas mais profundas da lesão, facilitando nessa região a proliferação bacteriana; • Embora utilizado como secante em instrumentos óticos, pode danificar o cimento das lentes; • Resseca plásticos e borrachas quando utilizado repetidas vezes ao longo do tempo; • Opacifica material acrílico; • Como evapora rapidamente, sua ação é limitada, havendo necessidade de submersão de objetos para uma ação mais ampla; • Necessitam de boa vedação para garantir a concentração, do contrário, evaporam com o tempo alterando a concentração; • Requer contato mínimo de 5 minutos; • Não é esporocida e não tem ação residual; • Inativado por matéria orgânica; • Fixa matéria orgânica quando não são removidas por limpeza. O isopropanol ou isopropílico, vendido para limpeza, é um pouco mais efetivo que o etanol como antiséptico e desinfetantes, ainda evapora menos, prolongando a ação microbicida e mais barato.

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Algumas soluções têm sua ação potencializada com a adição de etanol ou isopropanol a exemplo da solução de Zephiran que elimina cerca de 40% da população de um organismo em apenas dois minutos. Enquanto a tintura da mesma substância mata aproximadamente 85% no mesmo tempo de exposição. Outras substâncias que têm a ação antimicrobiana intensificada quando combinado com os álcoois é o iodo e a clorexidina. Em laboratórios de análises clínicas é comum o uso de etanol a 70% para desinfecção de bancadas e outros intrumentos. Contudo, fiquem atentos quanto à vedação do recipiente onde se encontra armazenado o álcool. Eles não podem permitir a evaporação do produto pois diminuem a atividade antimicrobiana sobrando apenas água, e água todo mundo gosta....inclusive as bactérias. (dito pelo instrutor)

Exercícios 1. “O álcool etílico, na concentração de 90%, é mais eficaz do que na concentração de 70%”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “O isopropanol ou isopropílico, vendido para limpeza, é um pouco mais efetivo que o etanol como antiséptico e desinfetantes, ainda evaporam menos, prolongando a ação microbicida e mais barato”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “A solução de etanol a 70% é muito utilizada em laboratórios de análises clínicas, porém os recipientes que armazenam para uso diário na bancada costumam não ser bem vedados pelos usuários, necessitando de produção quase que diária, para manutenção de sua concentração e atividade microbicida”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 4. “Os álcoois apresentam vantagens com relação ao seu uso: baixo custo, dissolve em água, agem e evaporam sem contudo deixar resíduos, fácil acesso e ação rápida” a) Incorreta b) Correta

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Respostas dos Exercícios 1. “O álcool etílico, na concentração de 90%, é mais eficaz do que na concentração de 70%”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “O isopropanol ou isopropílico, vendido para limpeza, é um pouco mais efetivo que o etanol como antiséptico e desinfetantes, ainda evaporam menos, prolongando a ação microbicida e mais barato”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “A solução de etanol a 70% é muito utilizada em laboratórios de análises clínicas, porém os recipientes que armazenam para uso diário na bancada costumam não ser bem vedados pelos usuários, necessitando de produção quase que diária, para manutenção de sua concentração e atividade microbicida”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “Os álcoois apresentam vantagens com relação ao seu uso: baixo custo, dissolve em água, agem e evaporam sem contudo deixar resíduos, fácil acesso e ação rápida” RESPOSTA CORRETA: B

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Os peroxigênios são desinfetantes com ação antimicrobiana oxidando os componentes celulares. São representantes: ozônio, peróxido de hidrogênio e ácido peracético. O ozônio é utilizado principalmente na desinfecção de água para consumo. O peróxido de hidrogênio é mais utilizado como antiséptico e é conhecido como água oxigenada. O ácido paracético é um excelente esterilizante químico líquido, tendo inclusive atividade esporocida.

AULA 12 • MÉTODOS DE DESINFECÇÃO QUÍMICOS: PEROXIGÊNIO Os peroxigênios são utilizados como desinfetantes devido a ação antimicrobiana oxidando os componentes celulares. Exemplos desses componentes: ozônio, peróxido de hidrogênio e

ácido peracético.

Ozônio Diferentes de outras substâncias desinfetantes que agem difundindose através dos envoltórios celulares de bactérias, para atingir em componentes intracelulares como DNA e proteínas, o ozônio (O3), por ser mais oxidante (tabela 1) , age diretamente na parede celular, causando sua ruptura , necessitando de um tempo menor de contato e tornando impossível a reconstrução da parede.

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Tabela 1 Oxidante

Potencial (V)

Ozônio

2,07

Peróxido

de

1,78

Hidrocloreto

1,49

Cloro

1,36

Dióxido de cloro

1,27

Oxigênio

1,23

O ozônio é um gás instável, incolor nas condições atmosféricas, com odor característico mesmo a baixas concentrações. Age de forma muito rápida, que é uma de suas grandes vantagens de seu uso, chegando a ser 1.000 vezes mais rápido que outros desinfetantes como o cloro, na inativação celular, dependo do microorganismo a ser eliminado. O ozônio é uma forma altamente reativa do oxigênio que é gerado quando uma corrente alternada de alta voltagem é descarregada na presença de oxigênio. Desta forma, a geração de ozônio ocorre pelo princípio de descarga elétrica que acelera elétrons o suficiente para partir, através do impacto, as ligações da molécula de oxigênio. Os átomos livres reagem com outras moléculas de oxigênio para a formação do ozônio. A formação do ozônio na natureza é observada em dias de tempestade devido às elevadas descargas elétricas provenientes dos relâmpagos. É freqüentemente utilizado para substituir o cloro na desinfecção da água, pois neutraliza o odor e o sabor. A existência do ozônio na natureza tornouse conhecido em 1837 e somente reconhecido como substância química cerca de trinta anos depois que sua fórmula triatômica (O3) foi descrita. http://www.okte.com.br/Tecnologias/Ozonio_Hist.htm

Já a sua utilização para desinfecção da água, e consequentemente atividade antimicrobiana, foi realizada quase 51 anos depois. A primeira instalação industrial de ozônio ocorreu em Oudshoorm, na Holanda, em 1893, para desinfecção da água potável na estação de tratamento de água da cidade. Em 1936 o número passou para 100 instalações na França e 140 no mundo. Além do tratamento de água potável, o ozônio tem aplicabilidade: • Tratamento de efluentes de indústrias químicas e farmacêuticas; 63


• Processo de branqueamento de matéria prima, água mineral enxágüe de desinfecção de reatores, garrafas e tanques, saladas; • Desinfecção e Oxidação de Esgotos da indústria têxtil; • Controle Microbiológico em Armazéns de Grãos; • Controle Microbiológico de Frutas e Flores Armazenadas • Desinfecção de água de piscina. O ozônio apresenta algumas vantagens por não ser tóxico e se decompor em oxigênio. Porém, apresenta algumas desvantagens, tais como: • Alto custo; • Atividade residual baixa, podendo algumas espécies mais resistentes como fungos e esporos bacterianos sobreviverem durante o tratamento.

Peróxido de hidrogênio O peróxido de hidrogênio (H2O2) é mais utilizado como antiséptico popularmente conhecido como água oxigenada. É encontrado com freqüência em ambientes domésticos e médicos. Tem ação extremamente tóxica produzindo radicais livres que destroem os envoltórios celulares de muitos microrganismos, principalmente algumas bactérias. Radicais livres são moléculas instáveis, pelo fato de seus átomos possuírem um número ímpar de elétrons. Para atingir a estabilidade, estas moléculas reagem com o que encontram pela frente para roubar um elétron.

Porém, não tem bom desempenho em feridas abertas, pois células sangüíneas produzem uma enzima chamada de catalase que degrada o peróxido de hidrogênio em água e gás oxigênio, tirando assim sua atividade microbicida, além disso, atrasa a melhora do ferimento. Algumas espécies de bactérias que sobrevivem na presença do oxigênio também produzem esta enzima, tornandose resistente a essa substância. http://www.worthingtonbiochem.com/CTL/default.html

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No entanto, quando é usado em objetos inertes mantidos em recipientes fechados, a concentração do peróxido de hidrogênio ultrapassa a produção dessas enzimas chegando ate mesmo a ter poder esporocida. Devido a essas características, esta substância tem sido utilizada: • No empacotamento asséptico de alimentos (os produtos passam por uma solução quente do peróxido de hidrogênio antes de serem transformados em embalagens); • Lentes de contato (existe um catalisador presente no kit de limpeza que retira a presença de peróxido de hidrogênio residual para não irritar a mucosa ocular); • Irrigar feridas profundas (liberam oxigênio gasoso quando degrada liberandoo nessas camadas evitando o crescimento de bactérias anaeróbias obrigatórias); • Tratamento de acnes na formulação de peróxido de benzoíla, que inibe o crescimento da bactéria anaeróbia responsável pela acne, através da liberação do gás oxigênio; • Desinfecção de material hospitalar. http://www.scielo.br/pdf/rsp/v29n1/11.pdf

Ácido peracético Mesmo sendo estuda aqui com o desinfetante, o ácido paracético é um excelente esterilizante químico líquido, tendo inclusive atividade esporocida. É capaz de eliminar em 30 minutos esporos bacterianos e vírus e em 5 minutos as formas vegetativas. Sua atividade antimicrobiana é devido à oxidação de enzimas essenciais para a sobrevivência do microrganismo.

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É bastante utilizado como desinfectante de instrumentos e equipamentos médicos. Possuem algumas vantagens do seu uso: • Não é tóxico; • Não deixa resíduos; • Praticamente sofre pouca alteração na presença de matéria orgânica; • Ativo a baixas concentrações de 0,001 a 0,2%. A desinfecção química de material de uso intrahospitalar ocorre imergindo o material em ácido peracético a 0,2% por dez minutos. Desvantagens são encontradas, tais como: • É corrosivo para cobre, bronze, aço carbono e ferro galvanizado; • Risco de lesão ocular grave se houver contato; • Necessita de EPIs

Exercícios 1. “O ozônio é um gás formado naturalmente na atmosfera após uma descarga elétrica, provocada pelos relâmpagos”. É utilizado para desinfetar água potável e esgostos. Porém, tem atividade residual baixa, podendo algumas espécies mais resistentes como fungos e esporos bacterianos sobreviverem durante o tratamento”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “O ozônio é uma excelente opção para os tratamentos à base de cloro, especialmente em matéria orgânica, porém ainda é muito caro para ser empregado em alta escala”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “O peróxido de hidrogênio é mais utilizado como antiséptico e conhecido popularmente como água oxigenada”. Em feridas abertas não é aconselhado o seu uso. Mas em objetos inertes a concentração chega a ter efeitos esporocidas. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta

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4. O ácido paracético é um excelente esterilizante químico líquido, tendo inclusive atividade esporocida É capaz de eliminar em 30 minutos esporos bacterianos e vírus e em 5 minutos as formas vegetativas, porém é corrosivo e pode causar lesão ocular grave se houver contato. a) Incorreta b) Correta

Respostas dos Exercícios 1. “O ozônio é um gás formado naturalmente na atmosfera após uma descarga elétrica, provocada pelos relâmpagos”. É utilizado para desinfetar água potável e esgostos. Porém, tem atividade residual baixa, podendo algumas espécies mais resistentes como fungos e esporos bacterianos sobreviverem durante o tratamento”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “O ozônio é uma excelente opção para os tratamentos à base de cloro, especialmente em matéria orgânica, porém ainda é muito caro para ser empregado em alta escala”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “O peróxido de hidrogênio é mais utilizado como antiséptico e conhecido popularmente como água oxigenada”. Em feridas abertas não é aconselhado o seu uso. Mas em objetos inertes a concentração chega a ter efeitos esporocidas. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. O ácido paracético é um excelente esterilizante químico líquido, tendo inclusive atividade esporocida É capaz de eliminar em 30 minutos esporos bacterianos e vírus e em 5 minutos as formas vegetativas, porém é corrosivo e pode causar lesão ocular grave se houver contato. RESPOSTA CORRETA: B

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Os halogênicos (cloro e iodo) são componentes de muitos agentes químicos antimicrobianos. São oxidantes que destroem os componentes vitais da célula microbiana. Os compostos clorados, hipocloroso (HOCl) e hipoclorito de cálcio (CaOCl)2, são utilizados na desinfecção da água e utensílios. O iodo é usado como desinfetante de pele, sendo as cloraminas um dos mais antigos antisépticos. Os iodóforos são combinações de iodo que liberam lentamente.

AULA 13 • MÉTODOS DE DESINFECÇÃO QUÍMICOS: HALOGÊNICOS (HIPOCLORITOS, IODOS, IODÓFOROS) O grupo dos halogênicos, representado principalmente pelo cloro e pelo iodo, é componente de muitos agentes químicos antimicrobianos. São fortes agentes oxidantes isoladamente ou em combinação, em virtude dessa propriedade, são altamente reativos e destroem os componentes vitais da célula microbiana. Halogênicos são os elementos químicos que pertencem à série química do grupo 17 (7A) da tabela periódica dos elementos. Todos apresentam 7 elétrons no seu último nível de energia, terminando a sua configuração eletrônica em subnível p com 5 elétrons.

O cloro Na sua forma gasosa (Cl2) ou em combinação, é um dos desinfetantes mais utilizados pela população. Sua ação germicida é causada pelo ácido hipocloroso (HOCl) que se forma quando o cloro é adicionado a água. Nessa forma, o cloro é muito utilizado no tratamento de água potável e piscinas , porém o seu residual altera sensivelmente o gosto e odor da água que bebemos. A aplicação do cloro é feita visando combater os vírus, algas e bactérias que possam estar presentes na água, mas quando aplicado em excesso, tornase prejudicial para o organismo, podendo causar problemas intestinais, azia, má digestão, gastrite, irritações na pele e fermentação intestinal.

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O cloro gasoso é difícil de ser manipulado, o que torna sua aplicação limitada a operações de larga escala. Por conta disso, existem muitos compostos clorados que podem ser manuseados mais convenientes do que o cloro gasoso. O ácido hipocloroso é um forte agente oxidante que impede o funcionamento do sistema enzimático celular. É a forma mais eficaz do cloro, pois tem carga neutra e se difunde com a mesma velocidade que a água na parede celular. Outro composto clorado é o hipoclorito (OCl) que é utilizado em combinação com o Ca, formando o hipoclorito de cálcio (CaOCl)2 que é utilizado para desinfetar equipamentos de fábrica de lacticínios o os utensílios de restaurantes. Este composto já era usado desde 1825 como cloretos de cálcio em ataduras de hospitais na França. Outra combinação conhecida é com o sódio, formando o hipoclorito de sódio (NaOCl) que é utilizado como alvejante doméstico e em sistemas de hemodiálise. Em condições emergenciais em que ocorra dúvida sobre a potabilidade da água, duas gotas de hipoclorito de sódio para 1 litro de água tornam a água segura, após 30 minutos de descanso, para seu consumo. Uma vez que o cloro é rapidamente perdido sob forma de gás, as soluções são úteis, somente quando preparadas no momento de usar. Outro derivado é o dióxido de cloro (ClO2), uma forma gasosa do cloro utilizada para desinfetar material contaminado como a bactéria antraz. As cloraminas são substâncias a base de amônia e cloro. A mais simples combinação é a monocloroamina, as outras são a CloraminaT e a azocloramida, que apresentam formas moleculares mais complexas. As cloraminas são substâncias estáveis, que liberam cloro durante períodos prolongados. São relativamente eficazes em matéria orgânica, mas agem de forma lenta.

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São utilizados para desinfetar louças e utensílios alimentares e equipamentos de fábrica de lacticínios e piscinas. As cloraminas controlam o odor e sabor deixados pelo cloro com outros compostos nitrogenados na água. Quando aplicado em água com alta concentração de matéria orgânica (animais em decomposição, restos de comidas, madeira, folhas, etc.) o cloro e seus compostos merecem grande atenção, pois essa combinação leva a produção um elemento chamado trihalometano, que é altamente cancerígeno. www.hidroall.com.br/br/download/library/o_que_sao_residuos

Além disso, pode produzir gosto e cheiros desagradáveis na água. No banho, a água muito clorada pode também provocar coceiras na pele e nos olhos e ressecamento dos cabelos. Quando em estado líquido, ao entrar em contato com os olhos ou pele, pode causar graves queimaduras. Exposto ao ar, evapora imediatamente irritando e sufocando mucosas. Estes efeitos foram aproveitados durante a I Guerra Mundial, onde se usaram gases mortíferos feitos à base de cloro. O cloro é detectável pelo cheiro em concentrações de apenas 3,5 ppm (partes por milhão), mas provoca irritação a partir de 15 ppm, sendo bastante perigoso se inalado numa concentração de 40 ppm durante uma hora. Uma dose de 1000 ppm é letal após algumas inspirações.

O Iodo O iodo é um dos mais antigos antisépticos. Tornouse conhecido em 1830 e utilizado na guerra civil americana para tratar ferimentos. Puro, o iodo possui a cor pretoazulada com brilho metálico. Diferente quando diluído em água, o iodo é extremamente solúvel em álcool etílico e em solução de potássio (K) na sua forma aquosa, formando iodeto de potássio (KI) e em solução aquosa de Na, formando o iodeto de sódio (NaI). O iodo é um agente microbicida de alta eficiência contra as espécies microbianas, tem ação bactericida, fungicida, viricida, vermicida e até esporocida. O iodo pode destruir compostos metabólicos essenciais aos microorganismos através da oxidação. A habilidade do iodo em combinarse com o aminoácido tirosina resulta na ativação das enzimas e de proteínas.

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Na forma de tintura de iodo, que é uma solução alcoólica de uma mistura medicinal, é altamente utilizado como antiséptico da pele sendo um dos mais efetivos. Outras aplicações do iodo em diferentes combinações são encontradas na desinfecção de utensílios de alimentação, água em pequenas quantidades, e o ar quando em estado gasoso.

O Iodóforos Os iodóforos são combinações de iodo e uma molécula orgânica que atuam como carreadores e agentes solubilizadores da qual o iodo é liberado lentamente. Eles possuem atividade antimicrobiana, sendo menos irritantes e não provocam manchas. A povidonaiodo, por exemplo, é um complexo de iodo e polivinilpirrolidona, conhecidos comercialmente como Betadine e Isodine. A povidona é um iodóforo com atividade em superfície, que melhora a ação de embebimento e funciona como um reservatório de iodo livre. Os iodóforos são utilizados em massa em ambientes hospitalares para execução de anti sepsia em ferimentos, ou previamente a aplicações de procedimentos invasivos como drenos e catéteres, além de procedimentos cirúrgicos.

Exercícios 1. “O cloro é uma substância usada com freqüência, principalmente na forma de hipocloroso, no tratamento de água potável, porém seu uso em grandes quantidades de matéria orgânica resulta em substâncias cancerígenas, como o trihalometano”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “No banho, a água muito clorada pode também provocar coceiras na pele e nos olhos e ressecamento dos cabelos. Quando em estado líquido, ao entrar em contato com os olhos ou pele, pode causar graves queimaduras. Exposto ao ar evapora imediatamente irritando e sufocando mucosas.”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “O iodo é um dos antisépticos mais antigos. Utilizado até hoje em ambientes hospitalares, principalmente na forma de tintura que é uma solução alcoólica de uma mistura medicinal, porém é irritante para algumas pessoas e causa mancha”. Podese dizer que essa idéia está: 71


a) Correta b) Incorreta 4. “Os iodóforos são combinações de iodo e uma molécula orgânica onde o iodo é liberado lentamente. Eles possuem atividade antimicrobiana, sendo menos irritantes e não provocam manchas. Por liberar iodo de forma gradual, se tornam mais eficientes que outras combinações com o iodo”. a) Incorreta b) Correta

Respostas dos Exercícios 1. “O cloro é uma substância usada com freqüência, principalmente na forma de hipocloroso, no tratamento de água potável, porém seu uso em grandes quantidades de matéria orgânica resulta em substâncias cancerígenas, como o trihalometano”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “No banho, a água muito clorada pode também provocar coceiras na pele e nos olhos e ressecamento dos cabelos. Quando em estado líquido, ao entrar em contato com os olhos ou pele, pode causar graves queimaduras. Exposto ao ar evapora imediatamente irritando e sufocando mucosas.”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “O iodo é um dos antisépticos mais antigos. Utilizado até hoje em ambientes hospitalares, principalmente na forma de tintura que é uma solução alcoólica de uma mistura medicinal, porém é irritante para algumas pessoas e causa mancha”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “Os iodóforos são combinações de iodo e uma molécula orgânica onde o iodo é liberado lentamente. Eles possuem atividade antimicrobiana, sendo menos irritantes e não provocam manchas. Por liberar iodo de forma gradual, se tornam mais eficientes que outras combinações com o iodo”. RESPOSTA CORRETA: B

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Metais pesados têm ação antimicrobiana ou antiséptica. O mecanismo de ação é devido à combinação de metais pesados com os grupos sulfidrilas das proteínas, que as desnatura. O nitrato de prata a 0,5% é aplicado em compressas para prevenir infecções em queimados. O sulfato de cobre tem ação algicida. Os compostos contendo mercúrio orgânico possuem atividade antimicrobiana. Compostos a base de zinco são também fungicidas.

AULA 14 • MÉTODOS DE DESINFECÇÃO QUÍMICOS: METAIS PESADOS E SEUS COMPOSTOS Alguns metais pesados podem ter ação antimicrobiana ou antiséptica, incluindo nesse grupo a prata (Ag), o cobre (Cu), mercúrio (Hg) e o zinco (Zn). O uso desses metais com esse fundamento tem sido aplicado há muitos anos, mesmo sem o conhecimento científico e comprovado da ação. Antigamente toda água para beber era armazenada em recipientes de prata ou cobre e observavase que estes vasilhames protegiam a água. A sífilis, uma doença secular já foi controlada pelo mercúrio. No século passado um composto a base de mercúrio era usado como desinfetante geral, sendo atualmente substituído por outros agentes menos tóxicos. Outro fato curioso do emprego da prata acontece até hoje em cidades de pequeno porte no Brasil. Através da crendice popular, muitas infecções bacterianas oculares como obstruções de glândulas sebáceas da pálpebra dão origem a uma infecção que é popularmente conhecida como tersol, eram submetidas a compressas diretas com alianças de prata que reduziam os sintomas da infecção. Mesmo em quantidades muito pequenas, metais pesados, como o prata, exercem efeito letal sobre as bactérias, denominado de ação oligodinâmica. Este fenômeno pode ser facilmente observado quando colocamos uma moeda de prata (limpa) em um meio de cultura sólido inoculado com bactérias. Após certo período de incubação é observado um halo de inibição em torno da moeda, ou seja, sem crescimento . A quantidade de íons do metal dissolvido no meio sólido é tão pequena que é calculada em partes por milhão (ppm).

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Oligodinâmica: do grego: oligos=pequeno; dinamikós=poder.

O mecanismo de ação dos íons de prata ou de outros metais e seus compostos é resultado da combinação entre os íons do metal com os grupos sulfidrilas (SH) presentes nas proteínas celulares, que são levadas a um estado de desnaturação, principalmente em proteínas ricas em cisteína (um aminoácido rico em pontes dissulfeto). Estado de desnaturação: ocorre, por exemplo, com as proteínas, que após serem submetidas a determinadas temperaturas ou em combinação com outras substâncias químicas, perdem a sua conformação não exercendo corretamente sua função.

Prata O nitrato de prata a 1% foi muito utilizado como antiséptico. Crianças recémnascidas, filhas de mães com suspeita de gonorréia eram tratadas com algumas gotas de nitrato de prata para prevenir a doença oftalmia gonorréia neonatal, adquirida durante o parto. Atualmente antibióticos fazem esse mesmo papel. Atualmente o nitrato de prata a 0,5% tem sido aplicado em compressas como camadas de gaze, para prevenir infecções em queimaduras. Bandagens impregnadas com prata liberam lentamente os íons no local sendo inclusive mais eficiente do que alguns antibióticos contra espécies mais resistentes. Cremes tópicos para queimaduras são produzidos industrialmente com a combinação de prata com sulfas (sulfadiazina) produzindo a sulfadiazina de prata. Procedimentos invasivos, como os cateteres, que costumam permanecer no paciente por longos períodos, são fontes comuns de infecções hospitalares e são impregnados com prata. Recentemente a combinação de íons de prata, que forma o iodeto de prata com as biguaninas, tem produzido excelentes resultados antisépticos contra a uma variedade imensa de microrganismos encontrados na pele e em superfícies.

Cobre O cobre e seus compostos, como o sulfato de cobre (CuSO4), tem ação algicida e portanto é utilizado no controle de proliferação de algas em manaciais, piscinas e aquários. Quantidades 74


baixas de cobre, o equivalente a 1 ppm, são utilizadas em reservatórios com baixa concentração de matéria orgânica. Por ter ação fungicida o sulfato de cobre é utilizado na forma da mistura de Bordeaux no controle de praga de plantas.

http://www.scielo.br/pdf/fb/v31n2/30011.pdf

Assim como o mercúrio, pode ser incluído na composição de tintas na forma de 8 hidroxiquinolina de cobre para redução de mofo.

Mercúrio Produtos à base de mercúrio são divididos naqueles que utilizam mercúrio orgânico e mercúrio inorgânico. Os compostos contendo mercúrio orgânico possuem maior atividade antimicrobiana e são menos tóxicos. Entre esses compostos estão: • Merbromim (mercurocromo) encontrado como antiséptico de uso doméstico; • Timerosal (mertiolate). (Figura 5); • Nitromersol (metafen). Estas substâncias são utilizadas como antisépticos em pequenos cortes e infecções cutâneas. Os compostos inorgânicos, a exemplo do cloreto de mercúrio (HgCl), são mais utilizados como desinfetantes. Tem ação bacteriostática, atingindo uma ampla variedade de espécies, mas devido a sua toxicidade, por ser corrosivo e perder ação diante de matéria orgânica, teve seu uso reduzido. Atualmente, pela sua ação fungistática, é incluído na composição de tintas para controlar mofos provocados por fungos filamentosos.

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Zinco O zinco é um outro metal utilizado como desinfetante com ação antimicrobiana. O seu efeito germicida pode ser observado nos telhados dos prédios em que são utilizadas telhas revestidas de zinco (telha galvanizada), processo esse que já se encontra em regime de comercialização. Compostos a base de Zinco são também fungicidas e utilizados em ungüentos e em pós tratamento de micoses superficiais. O cloreto de zinco (ZnCl2) é um componente bastante encontrado em soluções para bochecho Outra formulação a base de zinco é o óxido de zinco, que tornouse o antifúngico mais amplamente empregado nas formulações de tintas de parede, principalmente por ser um componente das fórmulas das cores.

Exercícios 1. “Os íons de metais pesados têm ação antimicrobiana devido à combinação com grupos de sulfidrilas presentes em proteínas, desnaturandoas. Esse fenômeno resulta na perda de envoltórios ricos em proteínas presentes nas membranas de vários microrganismos” Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta. b) Correta 2. “Atualmente, compostos de prata como o nitrato de prata a 0,5%, tem sido aplicado em compressas utilizadas em ferimentos para prevenir infecções em queimaduras. Os íons de prata são liberados lentamente no local sendo, inclusive, mais eficiente do que alguns antibióticos contra espécies mais resistentes”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “Em reservatórios de água utilizados para abastecimento público é realizada a desinfecção pelo sulfato de cobre, que tem ação germicida em mananciais com baixa concentração de matéria orgânica”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta

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4. “O mertiolate, um antiséptico muito usado na década de 80, tinha ação antimicrobiana devido à presença na sua composição do mercúrio. Atualmente, o timerosal ou methiolate, passou por uma reformulação e voltou a ser comercializado”. a) Incorreta b) Correta

Respostas dos Exercícios 1. “Os íons de metais pesados têm ação antimicrobiana devido à combinação com grupos de sulfidrilas presentes em proteínas, desnaturandoas. Esse fenômeno resulta na perda de envoltórios ricos em proteínas presentes nas membranas de vários microrganismos” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA:B 2. “Atualmente, compostos de prata como o nitrato de prata a 0,5%, tem sido aplicado em compressas utilizadas em ferimentos para prevenir infecções em queimaduras. Os íons de prata são liberados lentamente no local sendo, inclusive, mais eficiente do que alguns antibióticos contra espécies mais resistentes”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Em reservatórios de água utilizados para abastecimento público é realizada a desinfecção pelo sulfato de cobre, que tem ação germicida em mananciais com baixa concentração de matéria orgânica”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “O mertiolate, um antiséptico muito usado na década de 80, tinha ação antimicrobiana devido à presença na sua composição do mercúrio. Atualmente, o timerosal ou methiolate, passou por uma reformulação e voltou a ser comercializado”. RESPOSTA CORRETA: B

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O fenol é um desinfetante com ação antimicrobiana que causa lesões nas camadas lipídicas dos microorganismos. É encontrado em cosméticos, antisépticos bucais e cirúrgicos, resina, vernizes, tintas e explosivos. Porém, em doses elevadas causa queimaduras e mutação. Os derivados do fenol, denominados compostos fenólicos, são distribuídos em cresóis, timol (timol halogenados, 4clorotimol e 4cloroxilenol), bifenois e triclosan.

AULA 15 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: COMPOSTOS FENÓLICOS E CLOROXILENOIS O fenol (ácido carbólico ou fênico) foi uma das primeiras substâncias utilizada como desinfetante na prática médica. Ele possui ação antimicrobiana por provocar lesões nas membranas plasmáticas lipídicas e por coagular proteínas de microorganismos como as bactérias e fungos. Esta propriedade bactericida e fungicida dos fenóis foi descoberta por volta de 1870. Nesta época era comercializado como antiséptico na forma de solução aquosa, e foi essencial para reduzir o número de mortes causadas por infecção pósoperatória.

http://www.simpep.com.br/mundo_id.php?id=6

O uso do fenol para assepsia foi proibido após a descoberta que este composto causa queimaduras quando em contato com a pele, por ser corrosivo, e ainda é venenoso quando ingerido por via oral, além do odor desagradável. Por conta dos riscos apresentados, a concentração dos fenóis em substâncias utilizadas como antisépticos diminuíram bastante. Com pouco efeito antimicrobiano, os fenóis têm sido empregados em pastilhas para garganta por conta do seu efeito anestésico local. Em concentrações mais elevadas de 0,2 a 1% encontradas em produtos como spray para garganta, os fenóis atingem um efeito desinfetante considerável dependendo da espécie bacteriana. Os fenóis são compostos orgânicos que apresentam o grupo hidroxila ligados de forma direta a um carbono do núcleo benzênico. São muito usados na indústria, na fabricação de perfumes, resinas, vernizes, tintas, adesivos, cosméticos, corantes e explosivos.

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Os derivados do fenol, denominados compostos fenólicos, contêm uma molécula de fenol que foi quimicamente alterada para reduzir sua qualidade irritante ou aumentar sua atividade antimicrobiana em combinações com detergente ou sabão. Os compostos fenólicos exercem atividade antimicrobiana lesando membranas plasmáticas lipídicas, o que termina com o vazamento do conteúdo celular. ‘As paredes das microbactérias, que causam a lepra e a tuberculose, por serem muito ricas em lipídios, terminam sendo muito susceptíveis a estes compostos. Uma propriedade importante dos compostos fenólicos é a sua capacidade de tornarse um desinfetante ativo e estável em contato com compostos orgânicos, mesmo após longos períodos de aplicação. Por esse motivo, os compostos fenólicos são agentes aceitáveis para desinfetar o pus, a saliva, e as fezes. Um dos compostos fenólicos mais freqüentemente usados é derivado do alcatrão, um grupo de substâncias conhecida quimicamente como cresóis. Alcatrão é uma substância betuminosa, espessa, escura e de forte odor, que se obtém da destilação de certas matérias orgânicas, principalmente de carvão, ossos e de algumas madeiras resinosas. Destes tipos, o alcatrão de hulha é o produto mais conhecido e comercializado, geralmente por siderúrgicas. À semelhança de um derivado do carvão do qual retirou o seu nome, o alcatrão é uma substância que se encontra presente no fumo do tabaco. O alcatrão é um resíduo negro e viscoso composto por centenas de substâncias químicas, algumas das quais são consideradas carcinogênicas ou classificadas como resíduos tóxicos.

Com a mesma toxicidade, porém cerca de 3 vezes mais ativo que o fenol, os cresóis são empregados em mistura contendo os, orto, meta e paracresol, sendo o metacresol o mais ativo.

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Nas fazendas, usamse essas misturas para a desinfecção do local de ordenha das vacas, para não haver contaminação do leite, desinfecção de sanitários ou instrumentos cirúrgicos veterinários. Essa mistura de fenóis é conhecida popularmente como Creolina. Dada a baixa solubilidade em água, a creolina é utilizada em solução a 50%, saponificada com óleo vegetal. Saponificada substâncias que têm propriedades de sabão ou detergente, que emulsificam as gorduras ou matérias orgânicas devido à propriedade de suas moléculas possuirem uma parte hidrófila (que atrai moléculas de água) e uma parte lipófila (que é hidrófoba). Esta propriedade é obtida ao oxidar um ácido graxo de cadeia longa, exemplo: palmítico, esteárico ou oleico, com uma base alcalina, frequentemente de sódio ou cálcio. Este processo é denominado saponificação.

Um derivado do fenol, o timol, é cerca de 30 vezes mais ativo que o fenol e possui toxicidade. Em substâncias de concentrações mais elevadas de 5% e diluídas em álcool, o timol é bastante utilizado como antiséptico particularmente no tratamento de infecções fúngicas. A introdução dos compostos halogênicos nos produtos à base de timol resultou em um poder mais efetivo dessa substância. Um exemplo de compostos de timol halogenados é o 4 clorotimol e o 4cloroxilenol. Esses compostos são excelentes desinfetantes e antisépticos com concentrações que variam de 5 a 0,5%, fazendo parte da composição de sabões. Quando comparado ao timol, os compostos halogenados em especial o 4clorotimol é duas vezes e meia mais potente. Outros derivados dos fenóis são os bifenóis,, que possuem dois grupos fenólicos ligados por uma ponte. Um bifenol conhecido é o hexaclorofeno. Ele é um dos ingredientes de substâncias utilizadas em procedimentos de controle microbiano cirúrgico e hospitalar. É aplicado em lavagem cirúrgica, limpeza e desinfecção da pele. É eficiente no controle de focos de infecções hospitalares causadas por bactérias Grampositivas, Mycobacterium e vírus envelopados quando outros métodos são ineficazes. É usado com freqüência para controlar infecções por cocos grampositivos em berçários. Porém, já foi constatado que seu uso freqüente

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em banhos de recémnascidos ou lactentes pode levar a lesões graves, principalmente cardíacas e neurológicas.

Outra aplicação freqüente dos bifenois é encontrada em material de limpeza doméstica como desengordurantes de pisos, azulejos, etc. O bifenol é utilizado na produção de policarbonatos (um plástico “inquebrável” utilizado para lentes, garrafas, etc.) e de algumas resinas epóxido (como a cola Araldite, muito utilizada como revestimento de latas na indústria alimentar e como substituto das amálgamas em produtos dentários naqueles tratamentos em que o dentista aponta ao dente uma pistola de UV, na realidade polimeriza in situ a resina utilizada). Epóxido. é um grupamento funcional reativo (éter cíclico) formado por um átomo de oxigênio unido a dois átomos de carbono, que por sua vez, estão unidos por uma ligação covalente. As substâncias derivadas deste grupo funcional recebem o prefixo epoxi, e o mais simples é o epoxietano (óxido de etileno). Os epóxidos são líquidos, incolores, solúveis em álcool, éter e benzeno. Polimeriza (ou polimerização) é a reacção química que dá origem aos polímeros. As unidades estruturais que dão origem às macromoléculas polímeros são denominadas monômeros.

Outro bifenol amplamente utilizado é o triclosan ou triclosano. O triclosan tem atividade bacteriostática e fugistática. Não é tóxico e raros são os casos e alta sensibilização por parte dos usuários quando aplicado na pele. Por isso, entra na composição de muitos sabões medicinais antibacterianos, desodorantes, antitranspirantes e pastas de dentes.

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O uso do triclosan foi incorporado inclusive às tábuas de cozinha e em cabos de facas e outros utensílios de cozinha feitos de plástico, resultando em um material menos contaminado. Seu uso freqüente em diferentes materiais já resultou no surgimento de cepas bacterianas mais resistentes. Essa resistência ao triclosan pode estar relacionada ao aparecimento de algumas amostras bacterianas resistentes a certos antibióticos.

Cepa é um representante genético de uma espécie

O triclosan tem poder antimicrobiano por inibir as ações de uma enzima necessária para a produção de ácidos graxos, que são os lipídios encontrados em grande quantidade nas membranas das bactérias, afetando dessa forma esta estrutura e resultando no extravasamento do material citoplasmático do microrganismo. O triclosan é um agente antimicrobiano de largo espectro, capaz de reduzir em cerca de 20% a placa dentária ou tártaro. É especialmente eficaz contra bactérias grampositivas, principalmente os gêneros Staphylococcus e Streptococcus, como também funciona contra fungos filamentosos e bactérias gramnegativas. Um exemplo de resistência bacteriana ao triclosan são algumas espécies de gramnegativas, como a espécie Pseudomonas aeruginosa, que é muito resistente ao triclosan, como também a outros antibióticos e desinfetantes. Em geral, qualquer composto de fenol é absorvido mesmo quando aplicado na pele íntegra, alcançando a circulação sistêmica e sendo excretado pelos rins. Em concentração igual ou superior a 5% pode causar necrose tecidual e efeitos sistêmicos de depressão do sistema nervoso central e cardiovascular. Não foram observadas teratogenicidade ou mutagenicidade; porém, uma vez que o fenol atravessa a placenta, pode ocorrer hepatotoxicidade, nefrotoxicidade, convulsões ou depressão da medula óssea fetal.

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Teratogenicidade referese à formação e desenvolvimento no útero de anomalias que levam a malformações. mutagenicidade que provoca mutações. hepatotoxicidade o mesmo que dano ao fígado. nefrotoxicidade o mesmo que dano aos rins.

Exercícios 1. “Apesar do uso do fenol como antiséptico na forma de solução aquosa ter sido essencial para reduzir o número de mortes causadas por infecção pósoperatória, seu uso como antiséptico foi, em seguida, proibido por causar queimaduras quando em contato com a pele, por ser corrosivo, e ainda é venenoso quando ingerido por via oral e tem odor desagradável”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “Uma propriedade importante dos fenólicos é a sua capacidade de tornarse um desinfetante ativo e estável em contato com compostos orgânicos, mesmo após longos períodos de aplicação. Por esse motivo, os compostos fenólicos são agentes aceitáveis para desinfetar o pus, a saliva, e as fezes”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “Com a mesma toxicidade, porém menos ativo que o fenol, os cresóis são empregados nas fazendas, na desinfecção do local de ordenha das vacas, para não haver contaminação do leite, desinfecção de sanitários e em instrumentos cirúrgicos veterinários. Essa mistura de fenóis é conhecida popularmente como Creolina. Dada a baixa solubilidade em água, a creolina é utilizada em solução a 50%, saponificada com óleo vegetal. Porém, não é utilizada como antiséptico”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 4. “O triclosan tem poder antimicrobiano por inibir as ações de uma enzima necessária para a produção de ácidos graxos, que são os lipídios encontrados em grande quantidade nas membranas das bactérias. É um agente antimicrobiano de largo espectro capaz de reduzir cerca de 20% a placa dentária, principalmente contra bactérias Grampositivas. Porém, resistência a este antiséptico é observada em algumas espécies de Gramnegativas, como a espécie Pseudomonas aeruginosa.” a) Correta b) Incorreta

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Respostas dos Exercícios 1. “Apesar do uso do fenol como antiséptico na forma de solução aquosa ter sido essencial para reduzir o número de mortes causadas por infecção pósoperatória, seu uso como antiséptico foi, em seguida, proibido por causar queimaduras quando em contato com a pele, por ser corrosivo, e ainda é venenoso quando ingerido por via oral e tem odor desagradável”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “Uma propriedade importante dos fenólicos é a sua capacidade de tornarse um desinfetante ativo e estável em contato com compostos orgânicos, mesmo após longos períodos de aplicação. Por esse motivo, os compostos fenólicos são agentes aceitáveis para desinfetar o pus, a saliva, e as fezes”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Com a mesma toxicidade, porém menos ativo que o fenol, os cresóis são empregados nas fazendas, na desinfecção do local de ordenha das vacas, para não haver contaminação do leite, desinfecção de sanitários e em instrumentos cirúrgicos veterinários. Essa mistura de fenóis é conhecida popularmente como Creolina. Dada a baixa solubilidade em água, a creolina é utilizada em solução a 50%, saponificada com óleo vegetal. Porém, não é utilizada como antiséptico”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4. “O triclosan tem poder antimicrobiano por inibir as ações de uma enzima necessária para a produção de ácidos graxos, que são os lipídios encontrados em grande quantidade nas membranas das bactérias. É um agente antimicrobiano de largo espectro capaz de reduzir cerca de 20% a placa dentária, principalmente contra bactérias Grampositivas. Porém, resistência a este antiséptico é observada em algumas espécies de Gramnegativas, como a espécie Pseudomonas aeruginosa.” RESPOSTA CORRETA: A

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O hexaclorofeno é um derivado do fenol halogenados, pertencente ao grupo dos bifenois. O hexaclorofeno desinfeta a pele de forma lenta e tem efeito residual. É encontrado em uma variedade muito grande de produtos, incluindo sabonetes, pastas de dentes, xampus e cosméticos. Porém, sua concentração nesses produtos deve ser controlada por oferecer toxicidade com efeitos teratogênicos.

AULA 16 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: HEXACLOROFENO O hexaclorofeno, de nome científico 2,2 metileno bis (3,4,6triclorofenol), consiste num composto orgânico bactericida de fórmula molecular C13H6O2Cl6. O hexaclorofeno é um derivado do fenol halogenados, pertencente ao grupo dos bifenois. É uma substância branca, cristalina, que possui seis átomos de cloro. É inodoro e virtualmente insolúvel em água, porém solúvel em álcool e acetona. É considerado um antiséptico e desinfetante com atividade bacteriostática e de detergente.

Esta substância é muito utilizada na lavagem cirúrgica, sendo um dos ingredientes da loção pHisoHex, usada nas lavagens de mãos de profissionais da área da saúde, banhos de pacientes e conseqüentemente no controle de focos de infecções hospitalares. O hexaclorofeno desinfeta a pele de forma lenta e, após a lavagem das mãos, deixa uma espécie de película que age ativamente com ação antibacteriana prolongada, devido justamente a 85


esse efeito residual. Esta camada pode ser removida através de lavagens comuns com água e sabão. O hexaclorofeno foi anteriormente incorporado a uma grande quantidade e variedade de produtos de consumo em concentrações de 3%, como sabonetes, xampus, desodorantes, pastas de dentes, ungüentos e cosméticos. Mesmo assim, aplicações prolongadas são tóxicas e seu uso deve ser apreciado com cautela. Até bem pouco tempo era também utilizado em cremes dentais, sendo sua presença detectada através das listas vermelhas que uma marca trazia, mas seu uso para esse propósito foi descontinuado. Atualmente a concentração permitida em diferentes produtos é de 0,1%. A alcalinidade do sabão é suficiente para conservar o hexaclorofeno em solução aquosa. Na concentração de 0,75% o hexaclorofeno se incorpora em sabões sólidos e líquidos, cremes, detergentes e outros veículos para desinfecções cutâneas préoperatória. Bactérias Grampositivas, principalmente o gênero taphylococcus e Streptococcus, que são causas freqüentes de infecções de pele de crianças recémnascidas, são sensíveis a essa substância. Por este motivo, o hexaclorofeno tem sido aplicado na prevenção de infecções de pele dessa população em berçários. Além desse grupo de bactérias, o hexaclorofeno também se mostra efetivo contra Mycrobacterium, alguns fungos e vírus envelopados, mas tem ação limitada contra formas bacterianas mais resistentes como os esporos. Sua ação antimicrobiana é devido à precipitação de proteínas levando a destruição da parede microbiana. Apesar de seu uso freqüente na prevenção de infecções, já foi constatado que ou uso freqüente em banhos de recémnascidos ou lactentes pode levar as lesões graves principalmente cardíacas e neurológicas. O hexaclorofeno é um agente antimicrobiano introduzido pela indústria farmacêutica, em 1948, em preparações líquidas e em pó. Subseqüentemente foi utilizado como antiséptico tópico. Nos anos de 1970, estudos em crianças demonstraram que causa encefalopatia por absorção transdérmica. Estudos mais recentes sugerem também potencial teratogênico. Segundo a proposta da Organização Mundial de Saúde a definição de efeito teratogênico engloba “qualquer defeito morfológico, bioquímico ou de conduta, produzido em qualquer etapa da gestação e descoberto ao nascer ou logo depois”. As alterações morfológicas ou estruturais são aquelas que se apresentam ao nascimento e interferem na viabilidade ou no bemestar físico do recémnascido. Acreditase que 3% dos neonatos possuam defeitos teratogênicos, constituindo o aspecto mais destacado na pesquisa de fármacos na gestação. 86


No Japão, as formulações em pó do hexaclorofeno foram banidas das preparações farmacêuticas, desde que edema de cérebro foi descoberto in vitro utilizando cobaias. Vários outros países baniram esta substância ou restringiram seu uso. Usado em sabões, óleos de banho e detergentes, por sua atividade bacteriostática, é absorvido pela mucosa vaginal de adultos e crianças quando empregado em aplicações diárias e repetidas. A absorção é maior em queimados, portadores de ictiose e quando aplicado em extensa superfície cruenta. Ictiose a ictiose é um distúrbio cutâneo hereditário comum, caracterizado por pele ressecada e escamosa.

Existe uma grande atenção ao uso de hexaclorofeno como substância desinfetante em gestantes. Estudo realizado em gestantes apontou a presença de hexaclorofeno no sangue materno e no cordão umbilical durante o parto. Foi também encontrado no leite materno após a limpeza dos mamilos com antisépticos contendo hexaclorofeno, porém, em concentrações muito baixas afastando risco de toxidade fetal. Em mulheres que manipulam frequentemente esta substância como as enfermeiras, relatouse a associação entre o uso tópico rotineiro de hexaclorofeno e defeitos congênitos desenvolvidos por enfermeiras grávidas. A toxicidade do hexaclorofeno é vista com mais freqüência em filhotes de cães e gatos que foram banhados com pHisoHex. Os sinais de intoxicação por essa substância incluem: • Fraqueza; • Tremores; • Letargia; • Choque; • Tremores musculares; • Hipotermia (redução da temperatura); • Taquicardia (aceleração dos batimentos cardíacos); • Taquipnéia (aceleração da respiração). Apesar de sua ação tóxica, o hexaclorofeno possui algumas vantagens, tais como: • Ação residual;

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• Ampla ação antimicrobiana; • Não confere odor desagradável; • Ser de fácil aplicação; • Não é corrosivo; • Pode ser utilizado em sabonetes e detergentes.

Exercícios 1. “Dentre os fenóis, o hexaclorofeno é considerado um antiséptico e desinfetante, com atividade bacteriostática e de detergente. São efetivos contra principalmente bactérias Grampositiva, mas não tem ação esporocida” Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “Uma das vantagens do uso do hexaclorofeno e sua ação prolongada devido à película residual deixada por essa substância após lavagem das mãos”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “As aplicações prolongadas e de uso freqüente do hexaclorofeno são tóxicas. Até bem pouco tempo era também utilizada em cremes dentais, sendo sua presença detectada através das listas vermelhas que algumas marcas traziam, mas seu uso para esse propósito foi descontinuado. Atualmente a concentração permitida em diferentes produtos é de 3%”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 4 “Existe uma grande atenção do uso de hexaclorofeno como substância desinfetante em gestantes. Já foi detectado no leite materno após a limpeza dos mamilos com antisépticos contendo hexaclorofeno, porém, em concentrações muito baixas, afastando risco de toxicidade fetal”. a) Correta b) Incorreta

Respostas dos Exercícios 1. “Dentre os fenóis, o hexaclorofeno é considerado um antiséptico e desinfetante, com atividade bacteriostática e de detergente. São efetivos contra principalmente bactérias Grampositiva, mas não tem ação esporocida” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B

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2. “Uma das vantagens do uso do hexaclorofeno e sua ação prolongada devido à película residual deixada por essa substância após lavagem das mãos”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “As aplicações prolongadas e de uso freqüente do hexaclorofeno são tóxicas. Até bem pouco tempo era também utilizada em cremes dentais, sendo sua presença detectada através das listas vermelhas que algumas marcas traziam, mas seu uso para esse propósito foi descontinuado. Atualmente a concentração permitida em diferentes produtos é de 3%”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4 “Existe uma grande atenção do uso de hexaclorofeno como substância desinfetante em gestantes. Já foi detectado no leite materno após a limpeza dos mamilos com antisépticos contendo hexaclorofeno, porém, em concentrações muito baixas, afastando risco de toxicidade fetal”. RESPOSTA CORRETA: A

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O gluconato de clorexidina é comercialmente conhecido como clorexidina. A clorohexidina tem efeito antiséptico e é ativa contra diversas bactérias, mas é ineficaz contra micobactérias e esporos. É encontrado como constituinte de antiséptico oral, gel, pasta de dente, além das áreas médicas e odontológicas. Clorexidina em altas concentrações deve ser mantida longe dos olhos e ouvidos pois causa cergueira e surdez, respectivamente.

AULA 17 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: DIGUANINAS (CLOREXIDINA) O gluconato de clorexidina (ou gluconato de clorexidina), é comercialmente conhecido como clorexidina. A clorexidina é um composto constituído de dois anéis fenólicos clorados e dois grupos diguanidas interligados, pertencendo ao grupo das Diguaninas, com larga atividade. Tem reação alcalina, é levemente hidrossolúvel e relativamente atóxico. A clorohexidina é ativa contra diversas bactérias e outros microrganismos e tem boa ação na presença de matéria orgânica.

A clorexidina tem se mostrado um excelente agente antimicrobiano, sendo usado desde 1950 em diferentes concentrações como antiséptico oral, gel, pasta de dente, chicletes, além de seu grande uso nas áreas médicas e odontológicas. Em baixas concentrações tem efeito bacteriostático; já em altas tem efeito bactericida. Acreditase que o mecanismo de ação bactericida ocorra através da ruptura da membrana celular.

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Em função de sua carga positiva, a clorexidina, reage com a superfície da célula microbiana, destruindo a integridade da membrana celular, principalmente pela ligação dos grupos diguanida aos fosfolipídios da membrana. Assim, ela induz modificações estruturais como a ruptura da membrana, o vazamento de componentes intracelulares, precipitando o citoplasma, levando a uma ação bactericida. Tem ainda excelente ação microbicida contra fungos, sendo constituinte das formulações de xampu anticaspa. No entanto, micobactérias, esporos bacterianos, alguns vírus envelopados e cistos de protozoários são resistentes.

Produtos usados durante a escovação das mãos no preparo préoperatório da equipe médica e do próprio paciente são à base de clorexidina em combinações com álcool ou detergentes. Produtos contendo o Gluconato de Clorexidina em altas concentrações devem ser mantidos longe dos olhos como também evitar seu contato direto com o ouvido, podendo causar lesões como úlceras de córnea e até surdez. Em odontologia é uma opção eficaz, particularmente, na prevenção e no tratamento das periodontopatias em razão do significativo poder antiplaca que esta substância possui. Periodontopatias patologias associadas a todos os tecidos envolvidos na fixação do dente aos ossos (maxila ou mandíbula).

A clorexidina como desinfetante demonstrou ser útil na desinfecção de equipamentos e instalações contaminadas, panos de limpeza do úbere e equipamentos de ordenha. Tem boa ação no controle da mastite, pela imersão das tetas após a ordenha. Normalmente, a concentração recomendada para esta finalidade é de 0,2% a 1% .

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Úbere em algumas espécies como o homem, os ductos da glândula mamária desembocam de forma separada em uma superfície carnosa chamada de mamilo. Em outras espécies como a vaca, os ductos secretam o leite em um reservatório comum (o úbere), o qual secreta para o exterior através de uma única abertura em uma teta. Mastite – é uma inflamação da glândula mamária.

A redução de novas taxas de infecção na mastite bovina foi significativa com a utilização de digliconato de clorexidina a 0,5% com glicerina a 6%. É utilizado em pequenas concentrações nos seguintes produtos: • Soluções para lentes de contato; • A para combater a placa bacteriana e mau hálito; • Prevenção de afecções gengivais como a gengivite; • Componente de antiséptico como o merthiolate; • Como detergente; • Agente de fricção na limpeza da pele para a inserção de agulhas hipodérmicas ou intravenosas em substituição do Iodo; • Aplicação em curativos cirurgicos. Para um melhor efeito germicida, produtos de enxágue à base de clorexidina, devem ser usados, no mínimo, trinta minutos após outros produtos dentais, pricipalmente aqueles constituidos de compostos aniônicos encontrados em cremes dentais responsáveis pela produção de espuma que neutralizam a ação da clorexidina. Esta mesma precaução deve ser estendida evitando contato entre compostos de clorexidina, algumas substâncias como o cloro, detergente aniônico, como sabões em geral, e água “dura”, que é uma água que contém, principalmente, sais de cálcio e magnésio, pois eles precipitam os sais de clorexidina, diminuindo o efeito bactericida do produto. O digluconato de clorexidina vem sendo adicionado às pastas de hidróxido de cálcio, uma vez que as virtudes de um complementam as deficiências do outro. No entanto, devido à estrutura molecular da clorexidina e aos níveis elevados de pH promovidos pelo hidróxido de cálcio, há indícios de contaminação sistêmica na sua utilização por causa da provável decomposição da clorexidina em radicais livres que podem promover câncer em humanos.

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Outra estratégia recomendada para o uso do gluconato de clorexidina é a antisepsia do canal de parto. O uso tópico de solução aquosa de clorexidina a 0,2% vaginal durante o trabalho de parto tem reduzido pela metade as infecções em recémnascidos, fortalecendo ser essa substância seu efeito benéfico na prevenção dessas infecções. O uso de clorexidina e seus derivados apresentam as seguintes vantagens: • Baixo custo; • Aplicação simples; • Solúvel em água; • Solúvel em álcool; • Relativamente atóxico; • Ação bactericida; • Ação bacteriostática; • Pode ser usado como constituinte de detergente; • Ativo na presença de matéria orgânica. • Desvantagens de sua aplicação são as seguintes: • Tem pouco efeito esporocida; • Não é efetivo contra micobactérias e vírus envelopados; • Em altas concentrações, podem causar lesões oculares e provocar surdez; • Não pode ser administrado juntamente com compostos aniônicos, que inativam a sua ação microbicida.

Exercícios 1. “A clorexidina tem se mostrado um excelente agente antimicrobiano, sendo usado em diferentes concentrações como antiséptico oral, gel, pasta de dente, além de seu grande uso nas áreas médicas e odontológicas. No entanto, não é considerado um agente esterilizante porque não elimina esporos bacterianos”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta

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2. “Em odontologia o uso de gluconato de clorexidina é muito eficaz, particularmente, na prevenção e no tratamento das periodontopatias em razão do significativo poder antiplaca que esta substância possui”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “Uma das aplicações recomendadas para o uso do gluconato de clorexidina é a antisepsia do canal de parto. O uso tópico de solução aquosa de clorexidina a 0,2% vaginal durante o trabalho de parto tem reduzido pela metade as infecções em recémnascido”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 4 “Diferente de substância a base de hexaclorofeno, produtos a base de clorexidina são utilizados com cautela por mulheres grávidas por oferecer efeitos teratogênicos, independente da sua concentração”. a) Correta b) Incorreta

Respostas dos Exercícios 1. “A clorexidina tem se mostrado um excelente agente antimicrobiano, sendo usado em diferentes concentrações como antiséptico oral, gel, pasta de dente, além de seu grande uso nas áreas médicas e odontológicas. No entanto, não é considerado um agente esterilizante porque não elimina esporos bacterianos”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “Em odontologia o uso de gluconato de clorexidina é muito eficaz, particularmente, na prevenção e no tratamento das periodontopatias em razão do significativo poder antiplaca que esta substância possui”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Uma das aplicações recomendadas para o uso do gluconato de clorexidina é a antisepsia do canal de parto. O uso tópico de solução aquosa de clorexidina a 0,2% vaginal durante o trabalho de parto tem reduzido pela metade as infecções em recém nascido”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4 “Diferente de substância a base de hexaclorofeno, produtos a base de clorexidina são utilizados com cautela por mulheres grávidas por oferecer efeitos teratogênicos, independente da sua concentração”. RESPOSTA CORRETA: B

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Os compostos quaternários de amônia são detergentes sintéticos catiônicos com ação bactericida, fungicida, amebicida e têm ativos contra vírus envelopados, porém não elimina esporos e micobactérias. Três compostos de amônia conhecidos são o Cloreto de benzalcônio, Cloreto de cetilpiridínio e a Cetrimida. Esses compostos são encontrados com freqüência em formulações para higiene bucal, colírios, antisépticos e compressas.

AULA 18 • MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO QUÍMICOS: COMPOSTOS QUATERNÁRIOS DE AMÔNIA (BENZALCÔNIO, CETRIMIDA) Quando falamos em limpeza de pisos ou outras superfícies, a primeira coisa que nos vem à mente é a imagem de baldes de sabão ou de detergentes para este fim. Detergentes são também indispensáveis quando pensamos na lavagem de louças e outros utensílios domésticos, juntamente a uma esponja de aço. A limpeza realizada com base em detergentes é possível graças à redução da tensão superficial entre as moléculas de um líquido. Esses agentes de superfícies são conhecidos como

sufactantes. Os detergentes funcionam como umectantes, por possuírem na sua constituição compostos anfipáticos. Umectantes são substâncias higroscópicas (que absorvem a umidade do ar). São muito utilizadas em alimentos porque retêm a água destes, evitando o seu ressecamento ou solidificação. Em geral, os umectantes são formados por compostos que possuem moléculas hidrofílicas, como é o caso das substâncias orgânicas formadas pelo grupamento hidroxila. A glicerina, uma substância hidrofílica comestível, é um dos exemplos mais conhecidos de umectantes. Os umectantes visam tornar os alimentos mais úmidos e molhados. Anfipático que tem uma extremidade ("cabeça") hidrófila (pólo lipófobo) e uma "cauda" lipófila (pólo hidrófobo), que quando se encontra em um meio aquoso, se orienta espacialmente, de tal maneira que as cabeças hidrofílicas se orientam até o exterior (até o meio aquoso) e as caudas hidrófobas se dirigem ao interior, formando uma região lipófila.

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As gorduras, que são encontradas durante as lavagens diárias de louças, por exemplo, são substâncias apolares e, portanto sofreriam repulsão da água, mas quando misturada a um detergente aquoso, os grupos hidrofóbicos do detergente ligamse a substâncias enquanto os grupos hidrofílicos produzem uma superfície que pode ser misturada com a água, resultando na retirada mecânica das gorduras. Nesse grupo de agentes de superfície incluem, além dos detergentes, os sabões. Os sabões são sais de sódio e potássio combinados com ácidos graxos de cadeia longa, que são hidrossolúveis. São produzidos utilizando bases fortes, no caso hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio, que são aquecidos juntamente às gorduras. Os sabões têm pouco valor como antiséptico, mas têm uma função importante na remoção mecânica dos microrganismos retidos com esfregões. A pele contém muitas células mortas e outras substâncias, incluindo microrganismos que se encontram aderidos a secreções das glândulas sebáceas. A ação do sabão é emulsificar essa camada oleosa, ou seja, transformandoa em pequenas unidades que são em seguida removidas mais facilmente de forma flutuante e levadas pela água. A eficiência do sabão depende do pH da água, pois se estiver ácida ou alcalina, este produto irá sofrer precipitação. Para suprir esta deficiência, foram produzidos novos produtos de limpeza denominados detergentes sintéticos. Estes novos produtos são divididos em três grupos: • Detergentes não iônicos. São aqueles que não ionizam quando dissolvidos em água. Ex. polissorbato 80 e octoxinol • Detergentes iônicos. • Detergentes catiônicos. São aqueles que a carga de detergente fica na porção carregada negativamente do composto, ou seja, no ânion. Ex. [C12H25OSO3] – Na + dodecil sulfato de sódio. • Detergentes aniônicos. São aqueles que a carga de detergente fica na porção carregada positivamente do composto, ou seja, no cátion. Ex. NH4Cl. Cloreto de amônio que pertence ao grupo dos compostos quaternários de amônia (quats).

Os compostos quaternários de amônia, esse nome devido às modificações sofridas pelos íons de amônio que é tetravalente. Esses compostos são bactericidas, em especial, contra as Grampositivas, mesmo em concentrações baixas e pouco menos ativo contra as Gramnegativas. Os quats são também fungicidas, amebicidas, e ativos contra vírus envelopados, porém não eliminam esporos e micobactérias.

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As concentrações bactericidas dependem da diluição realizada em água dos quats que pode variar de uma parte do composto quaternário para poucos milhares a centenas de milhares de partes de água. Em concentrações abaixo das bactericidas, os quats podem ter também efeitos bacteriostáticos. O mecanismo de ação dos compostos quaternários nos microrganismos devese a desnaturação de proteínas das células, interferência com os processos metabólicos e lesão da membrana plasmática que causa perda de constituintes citoplasmáticos essenciais como o potássio. Três compostos de amônia conhecidos popularmente são o Cloreto de benzalcônio, Cloreto de cetilpiridínio conhecido como Cepacol e a Cetrimida, Esses compostos são encontrados com freqüência em formulações para higiene bucal, que espumam quando agitados. Além da atividade antimicrobiana, esses produtos possuem outras vantagens, tais como: • Não são tóxicos; • São incolores; • São inodoros; • Não possuem sabor. Porém, algumas desvantagens são encontradas, tais como: • Tem sua atividade sofre interferência na presença de matéria orgânica; • São neutralizados pelos sabões e detergentes aniônicos.

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O cloreto de benzalcônio é um antiséptico encontrado em compressas para ferimentos como o BANDAID® e em Spray antisépticos, que protegem e desifetam ferimentos, respectivamente. Recentemente, seu uso tem sido aplicado na conservação de descongestionantes nasais, mas não se sabe os efeitos a longo prazo dessa associação no que diz respeito ao seu uso crônico, pois pode vir a causar rinite medicamentosa. Não se deve usar cloreto de benzalcônio com sabões como já foi mencionado e com outros detergentes em geral, tais como citratos, iodatos, nitratos, permanganatos, salicilatos, sais de prata e tartaratos. Observaramse outras incompatibilidades com algumas misturas comerciais de borracha, de plástico, e de outras substâncias, como alumínio, roupas de algodão, peróxido de hidrogênio (água oxigenada), lanolina e algumas sulfonamidas. O cloreto de cetilpiridínio, além de antiséptico bucal, é utilizado na forma de pastilhas, ou solução para o tratamento de pequenas infecções da boca e garganta. Como agente antimicrobiano. é também encontrado em soluções oftálmicas empregadas para cuidados com lentes de contato. O composto de quaternário de amônia, conhecido como Cetrimida, é utilizado como anti séptico com ação bactericida sobre bactérias Grampositivas e Gramnegativas. Além disso, apresenta atividade sobre certos vírus e fungos, não é ativo contra esporos bacterianos. É indicado para lavagem da pele, feridas e queimaduras e até mesmo no tratamento da dermatite seborréica.

Exercícios 1. “Apesar do pouco valor antiséptico, os sabões são utilizados com freqüência na lavagem de pequenos ferimentos domésticos. Essa lavagem inicial é indispensável na remoção mecânica dos microrganismos retidos nesses ferimentos, reduzindo o risco de infecção”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “Os compostos quaternários de amônia são encontrados com freqüência em antisépticos bucais. Para reconhecimento de sua presença nessas formulações, basta observar a formação de espuma quando os recipientes são agitados”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta

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3. “Algumas das desvantagens do uso dos quats como antiséptico são que sua atividade sofre interferência na presença de matéria orgânica e não podem ser misturados com sabões e detergentes aniônicos que neutralizam sua ação” Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 4 “O cloreto de cetilpiridínio é administrado além de antiséptico bucal, é utilizado na forma de pastilhas ou solução para o tratamento de pequenas infecções da boca e garganta”. a) Correta b) Incorreta

Respostas dos Exercícios 1. “Apesar do pouco valor antiséptico, os sabões são utilizados com freqüência na lavagem de pequenos ferimentos domésticos. Essa lavagem inicial é indispensável na remoção mecânica dos microrganismos retidos nesses ferimentos, reduzindo o risco de infecção”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “Os compostos quaternários de amônia são encontrados com freqüência em antisépticos bucais. Para reconhecimento de sua presença nessas formulações, basta observar a formação de espuma quando os recipientes são agitados”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Algumas das desvantagens do uso dos quats como antiséptico são que sua atividade sofre interferência na presença de matéria orgânica e não podem ser misturados com sabões e detergentes aniônicos que neutralizam sua ação” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 4 “O cloreto de cetilpiridínio é administrado além de antiséptico bucal, é utilizado na forma de pastilhas ou solução para o tratamento de pequenas infecções da boca e garganta”. RESPOSTA CORRETA: A

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São utilizados indicadores de esterilização que podem ser mecânicos, químicos e biológicos. Os controles mecânicos são: controles de temperatura, pressão, limpeza e conservação das peças. Os controles químicos são substâncias termosensíveis que mudam de cor com o aumento da temperatura ou após contato com substâncias químicas. Os controles biológicos são esporos bacterianos resistentes ao modo de esterilização a ser monitorado.

AULA 19 • MONITORAMENTO DA ESTERILIZAÇÃO Em laboratório, utilizamos diferentes métodos de esterilização, mas a segurança de que o método escolhido de fato eliminou todas e quaisquer formas de vida, às vezes é negligenciado. Iremos tomar alguns métodos de esterilização para conhecer as formas de monitoramento. Um dos métodos de esterilização mais utilizados em laboratório e em ambientes hospitalares é a esterilização a calor, seja ele úmido ou seco. Nesse tipo de técnica em que são utilizados aparelhos como a autoclave ou estufas, há necessidade de um monitoramento da eficácia da esterilização apresentada pela máquina. Colocar o material dentro da autoclave ou mergulhálo em um esterilizante químico e, simplesmente esperar que termine o ciclo ou o tempo exigido não nos dá nenhuma certeza ou garantia de que esse material tenha efetivamente sido esterilizado. Os indicadores que demonstram a eficácia dos métodos de esterilização podem ser mecânicos, químicos e biológicos.

Controle mecânico São considerados indicadores mecânicos: monitores de tempo quando existe, temperatura, pressão, relatórios impressos ou informados via sistema de computação. Esses controles devem ser feitos com freqüência rotineira de forma simples e objetiva, da seguinte forma: • Escrever em planilha específica os registros de cada ciclo ou pelo menos fazer isso ao menos uma vez ao dia. Informar o desempenho dos manômetros, vacuômetros e termômetros;

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• Utilizar o teste de bowiee dick na primeira esterilização do dia, com a autoclave vazia indicado para detecção de ar residual em autoclaves prévácuo (aplicada em autoclaves de prévácuo);

http://www.cipamed.com.br/testevacuoautoclaves.htm

Verificar diariamente a eficácia da hermeticidade das suas portas para garantir a manutenção da temperatura e da pressão do vapor de água que são essenciais na realização da esterilização como também se existe boa penetração do vapor. Um bloco de folhas de papel prensado contendo no seu interior um indicador da presença da umidade devido o contato com o vapor, deve ser colocada para realizar o controle da penetração do vapor de água. Hermeticidade manutenção da temperatura.

• Verificar em estufas a temperatura com o auxílio de um termômetro com uma escala capacitada para a temperatura utilizada. • Manter um calendário de manutenção preventiva em que será convocada a assistência técnica do aparelho; • Estabelecer a freqüência de limpeza do dreno e da câmara interna no caso das autoclaves, que deve ser realizada com água e sabão.

Controle químico Indicador químico externo • É utilizada fita crepe zebrada ou etiquetas adesivas ou tinta que será impressa na embalagem. A fita crepe ou etiqueta são impregnadas com substância química termosensível específica que quando a temperatura interna chega ao valor mínimo, ela muda de cor, escurecendo. Indica que o vapor entrou em contato com a superfície exposta. Devem ser colocadas em todos os pacotes em todos os processos. Já a tinta indicativa termosensível deve ser impressa diretamente na embalagem, que ao ser retirada da autoclave, deverá apresentar mudança na coloração.

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Indicador químico interno • Indicam que o vapor penetrou o interior da embalagem em lugares considerados de difíceis acessos. Estes indicadores devem ser colocados dentro dos pacotes em posições estratégicas, de modo que os múltiplos parâmetros do processo sejam controlados. São utilizadas tiras de papel impregnado com tinta em diferentes concentrações com substâncias químicas termosensíveis específicas ao vapor. Ao serem retiradas da autoclave, estas fitas deverão apresentar coloração marrom a preto.

Controle Biológico São testes utilizados para monitorar o processo de esterilização, consistindo em uma população padronizada de microrganismos viáveis conhecidos como resistentes ao modo de esterilização a serem monitorados, sendo geralmente esporos bacterianos. Usualmente são utilizadas tiras de papel impregnado com esporos dos bacilos ou outro método conhecido como autocontido, que consiste em ampolas contendo os bacilos e meio de cultura líquido. São utilizados esporos de bacilos pertencentes às espécies de Geobacillus stearothermophillus para esterilização a vapor e Bacillus atrophaeus (antigo Bacillus subtillis) para esterilização a baixas temperaturas. Os esporos dessas espécies serão colocados dentro de pacotes a serem esterilizados; estes pacotes devem ser colocados em posições diferentes e de difícil acesso de vapor dentro da autoclave (de modo que um fique próximo ao dreno e à porta). A recomendação técnica atual é de um por dia, na primeira carga do dia, semanalmente ou com freqüência testada e definida pela política da instituição. Este indicador é um controle obrigatório pela legislação. Para se validar a esterilização química utilizando o gás de óxido de etileno, devem ser realizados também testes físicos, químicos e microbiológicos. Os testes físicos envolvem o controle da temperatura, da pressão (positiva e negativa) e do tempo de exposição. Os testes químicos envolvem a avaliação da umidade, da concentração do óxido de etileno, da pureza do ar e do gás, dos resíduos ambientais e nos produtos após a esterilização. É utilizado como indicador químico Interno, uma fita multiparamétrica, de 1,5 centímetro de largura por 20 centímetros de comprimento, impressa por substância química que muda da cor vermelho vinho para a cor verde, quando exposta às condições mínimas de concentração, tempo, temperatura e umidade relativa necessárias ao processo. 102


Para os controles biológicos é utilizada a técnica do autocontido, contendo fitas de papel com uma população de um milhão de esporos secos da espécie Bacillus atrophaeus. De preferência utilizamse cepas específicas conhecidas como ATCC (American Type Culture Collection). A tira contendo esporos está armazenada em uma ampola plástica que também acondiciona uma ampola de vidro, contendo um caldo nutriente próprio para o cultivo dos microorganismos. A ampola plástica é fechada por uma tampa perfurada e protegida por um papel de filtro hidrofóbico. Quando é finalizado o término do ciclo de esterilização, essas ampolas do autocontido são colocadas em estufas bacteriológicas, respeitando a atmosfera e temperaturas ideais à transformação da forma esporulada para a forma vegetativa do microrganismo. Constatando turvação do meio líquido no período de 2448horas, é indicativo que a esterilização não atingiu seus objetivos. Existem outros modelos de auto contido, com eficiência de 48 horas em que é empregado um meio de cultura contido numa ampola de vidro com Púrpura de Bromocresol como indicador de pH. A produção de ácido associado ao crescimento origina a mudança de cor do meio, de púrpura para amarelo, facilitando a detecção do crescimento.

Exercícios 1. “É indispensável o uso de controles de esterilização mesmo reconhecendo o perfeito funcionamento do método utilizado”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “Relatórios diários da temperatura e pressão dos aparelhos são importantes para o acompanhamento da manutenção dessas características, assegurando o funcionamento estável da máquina e confiança do seu funcionamento”. Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 3. “Os controles biológicos envolvem formas vegetativas bacterianas em uma população padronizada de microrganismos viáveis, sensíveis ao modo de esterilização a serem monitorados” Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 103


4 “O uso de controles biológicos é obrigado por lei em materiais que são empregados em pacientes que são submetidos a ato cirúrgicos”. a) Correta b) Incorreta

Respostas dos Exercícios 1. “É indispensável o uso de controles de esterilização mesmo reconhecendo o perfeito funcionamento do método utilizado”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “Relatórios diários da temperatura e pressão dos aparelhos são importantes para o acompanhamento da manutenção dessas características, assegurando o funcionamento estável da máquina e confiança do seu funcionamento”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Os controles biológicos envolvem formas vegetativas bacterianas em uma população padronizada de microrganismos viáveis, sensíveis ao modo de esterilização a serem monitorados” Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 4 “O uso de controles biológicos é obrigado por lei em materiais que são empregados em pacientes que são submetidos a ato cirúrgicos”. RESPOSTA CORRETA: A

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O controle da desinfecção que utiliza diferentes produtos químicos depende do cumprimento de normas de concentração e do tempo de contato com a substância. O controle biológico pode ser feito através da coleta da superfície do material esterilizado e colônias das bactérias vegetativas cultivadas em meio liquido. Além disso, formas de armazenamento são importantes para a manutenção do potencial antimicrobiano desses produtos.

AULA 20 • CONTROLE DA DESINFECÇÃO A desinfecção, como já foi visto, difere da esterilização quanto à capacidade de eliminar os esporos bacterianos que é uma propriedade inerente da esterilização. A desinfecção é um processo amplamente reconhecido que quando aplicado rotineiramente em diferentes produtos, independente do método empregado, seja para limpeza ou para a própria desinfecção, melhoram as condições de segurança para a manipulação de artigos. A desinfecção reduz de forma significativa a carga microbiana e potencializa o processo de esterilização, porque possibilita a padronização de ciclos mais rápidos e menos onerosos. Existem vários métodos e produtos específicos para validação e monitoração dos ciclos de limpeza e desinfecção. O controle da desinfecção utilizando o álcool é basicamente restrito à concentração utilizada e o tempo de contato com essa substância. A concentração deve ser feita entre 60 e 90%, sendo 70% a mais eficaz contra a maioria dos microrganismos, e nunca abaixo de 50%, pois sua atividade de eliminar células vegetativas diminui bastante. Como evapora rapidamente, sua ação é limitada, havendo necessidade de submersão de objetos para uma ação mais ampla. Além disso, as diluições devem ser feitas previamente ao seu uso, no volume que será consumido. Esta observação é indispensável para desinfecção dos materiais e superfícies de vidro e bancadas. O álcool é aplicado para a desinfecção de nível intermediário ou médio de artigos e superfícies, com tempo de exposição de 10 minutos devendo ser aplicado três vezes. As aplicações devem ser feitas da seguinte forma: friccionar o álcool 70%, esperar secar e repetir três vezes. É um erro imenso quando se produz alíquotas de álcool a 70% e esta mesma amostra permanece dia no laboratório, sendo utilizada para desinfecção quando na verdade não terá mais

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este efeito, pois a evaporação do álcool irá reduzir sua concentração e, conseqüentemente, sua ação microbicida. O controle biológico da desinfecção do álcool pode ser feito mergulhando um barbante estéril ou instrumento de vidro por 2 minutos em cultura liquida de bactéria vegetativa, geralmente aquelas mais freqüentes em superfícies. Em seguida submergilo por 30 minutos na amostra diluída de álcool. O barbante será em seguida plaqueado em caldo BHI. Nas bactérias Gram positivas, durante este período de contato com o álcool a 70%, não é observado crescimento detectável desses microorganismos. A escolha das espécies utilizadas no controle da desinfecção tem como base o trabalho realizado por Silva e Jorge (2002), no qual foi verificado que os microrganismos mais freqüentemente isolados das superfícies de equipamentos, principalmente odontológicos são Estafilococos cogulase negativa, leveduras do gênero Candida, e enterobactérias. Pseudomonas

aeruginosa e S. aureus são inseridos nos testes por serem resistentes a vários desinfetantes (MIMICA et al., 1994). Resultados semelhantes são obtidos no controle biológico utilizando o hipoclorito de sódio, cuja ação desinfetante depende da sua concentração, tempo de exposição e temperatura. Esses dois fatores devem ser respeitados para a obtenção da atividade bactericida. • 0,000015% eliminam bactérias vegetativas em 30 segundos; • 0,01% eliminam fungos em 1 hora; • 0,02% eliminam 25 tipos diferentes de vírus em menos de 10 minutos; • 0,01% eliminam 10 7 de S. aureus e P. aeruginosa em 10 minutos; • 0,05% eliminam 10 6 de vírus da Hepatite B em 10 minutos a 20°C; • 0,005% eliminam 10 5 de HIV em 10 minutos a 25°C; • 1% eliminam a grande maioria dos microrganismos.

O Hipoclorito de Sódio deve ser colocado em recipiente plástico escuro com tampa, devido à sua fotossensibilidade e volatilidade. Compostos clorados são altamente instáveis, por isso devem ser utilizados imediatamente depois de diluídos e desprezados 24 horas após a diluição. São formulações comercializadas na forma líquida. Na forma não diluída, o tempo máximo de armazenamento é de seis meses. Já o controle do uso do iodo tem demonstrado que sua eficácia como antiséptico está relacionada à sua concentração associado à macromolécula. Concentrações mais baixas de 106


iodóforos, como o iodo – povidine (0,1% e 1,0%) ocorre um efeito bactericida mais rápido do que com a solução não diluída (10%). A diluição pode resultar em um enfraquecimento da ligação do iodo com seu polímero carreador com um aumento concomitante na quantidade de iodo “livre” em solução. (BERKELMAN et al., 1982).

O acondicionamento dos iodóforos deve ser feito em frasco fechado, escuro e depositado em local ventilado. As soluções de Iodóforo, comercializadas atualmente no Brasil, destinamse à antisepsia, não devendo ser usadas como desinfetantes. Devese fazer controle biológico igualmente ao do álcool. Utilizando a Clorexidina, um trabalho realizado por Silva e Jorge (2002) verificou que soluções aquosas de clorexidina a partir da concentração de 1% demonstraram maior eficácia na desinfecção de superfícies quando comparadas com solução aquosa de clorexidina 0,5%, álcool 70% gel e líquido, sendo também a solução de melhor custo benefício, sendo efetiva à maioria dos microrganismos. O controle da desinfecção utilizando peróxido de hidrogênio é mais relacionado à sua concentração. Numa solução a 3%, é um dos mais potentes desinfetantes que existe. Porém há necessidade de embalagens de excelente vedação, sendo mantida em recipientes que evitem a liberação do oxigênio. O controle biológico pode ser feito utilizando culturas de Streptococcus SP, que são sensíveis à presença dessa solução. O ácido peracético é indicado para desinfecção de alto nível (10 min) e esterilização de artigos críticos e semicríticos (60 min). O processo de esterilização dura 20 min em temperatura entre 50° e 56°C em concentrações baixas entre 0,001% a 0,2%. Na literatura são encontradas diferentes opiniões sobre a forma de monitoramento. Existe uma fita indicadora específica para a leitura da concentração do ácido peracético. O controle biológico pode ser feito através da pesquisa de microorganismos de cultura microbiológica de uma área de superfície ou artigos desinfetados. Produtos à base de quaternário de amônia são utilizados para a desinfecção de baixo nível. O tempo de exposição é de 30 minutos, na concentração indicada pelo fabricante. Ao ser aplicado, precisa de fricção sobre a superfície. Com o uso de desinfetantes ineficazes, o objetivo dos processos em questão, que é a destruição dos microorganismos, não é alcançado. Portanto, sempre observe com cuidado o tipo de material a ser esterilizado e o esterilizante e desinfetante adequado 107


http://dtr2001.saude.gov.br/influenza/docs/errata_plano1.pdf

Exercícios 1. “Compostos clorados e à base de álcool são altamente instáveis, por isso devem ser utilizados imediatamente depois de diluídos e desprezados 24 horas após a diluição”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 2. “O controle biológico de desinfetante é extremamente importante para a validação de vários processos. Esporos bacterianos são utilizados com freqüência no monitoramento de diferentes métodos”. Podese dizer que essa idéia está: a) Incorreta b) Correta 3. “Se faz necessário o controle da diluição de compostos iodados como os iodóforos. Concentrações mais baixas de iodóforos como o iodo – povidine (0,1% e 1,0%) ocorre um efeito bactericida mais rápido do que com a solução não diluída (10%).” Podese dizer que essa idéia está: a) Correta b) Incorreta 4 “Estudos com clorexidina têm demonstrado a necessidade de um controle rigoroso de sua diluição. Soluções a partir de 1% demonstraram maior eficácia na desinfecção de superfícies quando comparadas com solução aquosa de clorexidina 0,5%, sendo efetiva para a maioria dos microrganismos”. a) Correta b) Incorreta

Respostas dos Exercícios 1. “Compostos clorados e à base de álcool são altamente instáveis, por isso devem ser utilizados imediatamente depois de diluídos e desprezados 24 horas após a diluição”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: B 2. “O controle biológico de desinfetante é extremamente importante para a validação de vários processos. Esporos bacterianos são utilizados com freqüência no monitoramento de diferentes métodos”. Podese dizer que essa idéia está: RESPOSTA CORRETA: A 3. “Se faz necessário o controle da diluição de compostos iodados como os iodóforos. Concentrações mais baixas de iodóforos como o iodo – povidine (0,1% e 1,0%) ocorre um efeito bactericida mais rápido do que com a solução não diluída (10%).” Podese dizer que essa idéia está:

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RESPOSTA CORRETA: A 4 “Estudos com clorexidina têm demonstrado a necessidade de um controle rigoroso de sua diluição. Soluções a partir de 1% demonstraram maior eficácia na desinfecção de superfícies quando comparadas com solução aquosa de clorexidina 0,5%, sendo efetiva para a maioria dos microrganismos”. RESPOSTA CORRETA: A

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BIBLIOGRAFIA APECIH. Manual de Esterilização de Artigos em Unidades de Saúde. 2º edição, revisada e ampliada 2003. BERKELMAN, R. L.; HOLLAND, B. W.; ANDERSON, R. L. Increased bactericidal activity of dilute preparations of povidoneiodine solutions. J Clin Microbiol, v. 15, n. 4, p. 635639, Apr. 1982. Costa, A.O.; Cruz, E.A.; Galvão, M.S.S.; Massa, N.G. Esterilização e desinfecção:

fundamentos básicos, processos e controles. São Paulo: Cortez, 1990. Lewis, R.J., Sr. and R.L. Tatken, Eds. Registry of Toxic Effects Murray, P. R.; Rosenthal, K. S.; Kobayashi, G. S; Pfaller, M. A. Microbiologia Médica. 4ª edição, Rio de Janeiro. Guanabara Koogan LTDA, 2002 Pelczar, J. A brief history of sterilization. In: Asepsis – the infection prevention forum.

Fourth quater, v.16, n.4, 1994. Pelczar, Jr., Joseph Michael. Microbiologia: conceitos e aplicações. vol 1, 2ªedição. São Paulo. Makron Books,1996. SILVA, C. R. G.; JORGE, A. O. C. Avaliação de desinfetantes de superfície utilizados em

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