284269524-2015-3-Guia-Farmacologia-II.docx

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICA

GUÍA DE PRÁCTICA Farmacología II

Semestre Académico 2015 3 3 –

IX CICLO Docente: Dr. Orlando Oscar Acosta Cornejo Alumno: ……………………………………………………………………………………….

Lima, 2015

Universidad Inca Garcilaso de la Vega

Guía de Práctica de Farmacología II

Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica

Semestre Académico 2015 3 3 –

INTRODUCCIÓN

La Farmacología es la Ciencia que se encarga de estudiar el origen, acciones y propiedades de las sustancias químicas biológicamente activas (P.A.), empleadas para aliviar, prevenir, diagnosticar y tratar una enfermedad. El curso de Farmacología II, tiene por finalidad desarrollar competencias en los estudiantes del IX ciclo y motivarlos a involucrase en los procesos de investigación científica y tomar conciencia de la importancia que tiene el campo de la salud y sobre todo en el campo de las Ciencias Farmacéuticas durante el Descubrimiento y Desarrollo de nuevas nu evas moléculas farmacoterapéuticas. Las prácticas de Laboratorios de Farmacología II que se han programado, tienen por objetivo, brindar los conceptos complementarios de los fundamentos básicos, las técnicas y procedimientos procedimientos establecidos en los diferentes modelos experimentales que permiten comprobar y verificar, de manera experimental, las bondades terapéuticas de los P.A. En este contexto, el presente Manual de Prácticas de Laboratorio se ha diseñado con la finalidad de que el estudiante, además de realizar las experiencias programadas, ponga en práctica las competencias adquiridas con la finalidad de demostrar mediante un TRABAJO EXPERIMENTAL la actividad de fitofármacos, respetando lo que establece los modelos experimentales, el que será plasmado en un protocolo experimental y su posterior ejecución.

Docentes Responsables

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Universidad Inca Garcilaso de la Vega Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímica

Guía de Práctica de Farmacología II Semestre Académico 2015 3 3 –

PROGRAMACIÓN DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO LABORATORIO SEMANA I Introducción y Formación de Grupos de d e Trabajo Experimental.

SEMANA II Práctica No 1: Farmacología Respiratoria: Asma Experimental. SEMANA III Práctica No 2: Farmacología del Aparato Urinario: Actividad Diurética. SEMANA IV Práctica No 3: Farmacología Cardiovascular: Actividad Inótropa y Cronótropa. SEMANA V Práctica No 4: Farmacología Hematológica: Actividad Anticoagulante. SEMANA VI EXAMEN PARCIAL SEMANA VII Práctica No 5: Farmacología Endocrina: Actividad Hipoglicemiante. SEMANA VIII Práctica No 6: Farmacología Antimicrobiana: Prueba de Sensibilidad a los Antibacterianos. SEMANA IX Práctica No 7: Farmacología Antimicrobiana: Actividad Antiparasitaria. SEMANA XI Práctica No 8: Farmacología Hormonal: Prueba de Sensibilidad de la hCG SEMANA X EXAMEN FINAL SEMANA XI Informes y entrega de promedios

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Semestre Académico 2015 3 –

PRACTICA No 1

Farmacología Respiratoria: Asma Experimental 1.1. Marco Teórico. El asma bronquial es una enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) caracterizado por el broncoespasmo,la inflamación y la hiperactividad del musculo liso bronquial, generando en el paciente disnea, sibilancia, tos, opresión torácica. La farmacoterapia del asma bronquial incluye a los broncodilatadores, antiinflamatorios, estabilizadores del mastocito e inclusive la inmunoterapia. Entre

los

medicamentos

broncodilatadores

encontramos

a

los

beta

adrenérgicos como el salutamol, xantinas como la teofilina, anticolinérgicos como bromuro de ipratropio; como antiinflamatorio, los corticoides como beclometasona, estailizadores del mastocito, el cromoglicato; antileucotrienos como Montelukast.

1.2. Conceptos que el alumno debe de conocer. Fisiopatología del Asma Bronquial. Farmacología de los Antiasmáticos. Farmacología de la Histamina y de los Antihistamínicos H 1

1.3. Competencias. Inducir broncoespasmo experimental a través de la histamina en el cobayo. Evidencia experimentalmente las manifestaciones del broncoespasmo. Reconoce las propiedades terapéuticas de los fármacos antiasmáticos ( β2 adrenérgicos ) Reconoce experimentalmente el sinergismo y antagonismo entre los fármacos empleados.

1.4. Materiales, Equipos. Campana

Balón de Oxígeno

Equipo de Nebulización

Jeringas de 1 ml

Jeringas 3 ml.

Jeringas 5 ml.

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1.5. Material Biológico 02 Cobayos

1.6. Reactivos. Solución de Histamina 1 %

Solución de Adrenalina 0,1 %

Solución de Clorfenamina 1%

Suero Fisiológico

1.7. Procedimiento. PROCEDIMIENTO 1: i) Al primer Cobayo administrarle por via i.p. Suero Fisiológico 0,6 ml/Kg ii) Colocarlo en la campana y cerrarlo herméticamente y observar su comportamiento. Iii) Proceder a nebulizar solución de Histamina. iv) Determinar el tiempo de latencia del broncoespasmo y la frecuencia respiratoria. v) Retirar el cobayo y administrar inmediatamente por vía i.p. y s.c. una dosis de 0,7 mg/Kg de solución de Adrenalina. vi) Observar y anotar los resultados.

PROCEDIMIENTO 2: i) Al segundo cobayo administrarle por via i.p. Clorfenamina 10 mg/Kg ii) Colocarlo en la campana y cerrarlo herméticamente y observar su comportamiento. iii) Proceder a nebulizar solución de Histamina. iv) Determinar el tiempo de latencia del broncoespasmo y la frecuencia respiratoria. v) Retirar el cobayo y administrar inmediatamente por vía i.p. y s.c. una dosis de 0,7 mg/Kg de solución de Adrenalina. vi) Observar y anotar los resultados.

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Guía de Práctica de Farmacología II Semestre Académico 2015 3 –

1.8. Resultados. PROCEDIMIENTO 1: COBAYO

PESO ( en gr.)

FARMACO

VOLUMEN ( en ml.)

PERIODO LATENCIA

DISNEA F.R.

PERIODO LATENCIA

DISNEA F.R.

Suero Fisiológico No 1

Histamina

Nebulización

Adrenalina

PROCEDIMIENTO 2: COBAYO

PESO ( en gr.)

FARMACO

VOLUMEN ( en ml.)

Clorfenamina No 2

Histamina

Nebulización

Adrenalina

1.9. Discusión ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.10. Conclusiones ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

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1.11. Cuestionario 1.- Esquematice y explique el mecanismo de acción de la histamina sobre las células del músculo liso bronquial. 2.- Esquematice y explique el mecanismo de acción de la adrenalina empleada en el cobayo. 3.- Explique el tipo de efectos (Sinergismo o Antagonismo) que se producen durante la administración de los fármacos en cada experiencia. 4.- Fundamente, porqué se emplea el cobayo, como modelo, para ensayos de farmacología experimental de fármacos antiasmáticos. 5.- Investigar que otros modelos experimentales se pueden emplear para la evaluación de nuevas moléculas farmacológicas con propiedades broncodilatadoras. 6.- Mencione que mediadores químicos fisiológicos generan broncoespasmo.

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PRACTICA No 2 Farmacología del Aparato Urinario: Actividad Diurética 1.1. Marco Teórico. Los síndromes edematosos

son manifestaciones que se producen como

consecuencia de múltiples factores, como es el caso de una alteración de la capacidad funcional del riñón. Por ejemplo, en el hiperaldosterismo, insuficiencia cardiaca, etc. Los medicamentos empleados para controlar los síndromes edematosos se denominan diuréticos, cuyo objetivo es incrementar la diuresis; es decir, incrementar la eliminación de agua y electrolitos a través de la orina. Los diuréticos ejercen su acción sobre la nefrona, unidad fundamental del riñón. Clínicamente, los diuréticos pueden emplearse en el tratamiento de los síndromes edematosos, la hipertensión arterial (HTA), insuficiencia cardiaca, insuficiencia renal aguda, hiperaldosterismo, hipercalcemia, algunos en el glaucoma, etc. Los diuréticos se clasifican en diuréticos de ASA, como la furosemida; tiazidas, como hidroclorotiazida (HCT); ahorradores de potasio, como Espironolactona; inhibidores de la anhidrasa carbonica, como la acetazolamida y los diuréticos osmóticos, como el manitol.

1.2. Conceptos que el alumno debe de conocer. i) Fisiología del Aparato Renal. ii) Fisiopatología del Edema iii) Farmacología de los Diuréticos: ASA, Tiazidas, Inhibidores de la anhidrasa carbónica, Osmóticos, Ahorradores de potasio.

1.3. Competencias. Demostrar experimentalmente el efecto diurético sobre la diuresis normal en ratas.

1.4. Materiales, Equipos. Jaulas de Diuresis

Plumón marcador

Probeta 50 ml.

Sonda intragastrica

Jeringa 1 ml.

Jeringa 3 ml.

Jeringa 5 ml.

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1.5. Material Biológico 05 Ratas albinas: de peso no menor de 300 g

1.6. Reactivos. Solución de Furosemida 1 %

Solución de Espironolactona 2 %

Solución de Hidroclorotiazida 2,5 %

Solución de Acetazolamida 5 %

Suero Fisiológico

1.7. Procedimiento. Poner en ayuno a las 04 ratas 12 horas antes de iniciar la práctica, sin privarles de agua (ad libitum) i) Pesar y marcar las ratas de la siguiente manera ii) Hidratar las 05 ratas con 2,5 ml/Kg de Suero Fisiológico. iii) Luego de 15 minutos, Tomar nota del peso inicial y administrar por vía peroral (p.o.) 10 ml/Kg de Suero Fisiológico, 8 mg/Kg de Solución de Furosemida, 30 mg/Kg de Solución de Espironolactona, 25 mg/Kg de Solución de Hidroclorotiazida y 25 mg/Kg. de Solución de Acetazolamida respectivamente. iv) Tomar nota de la hora de cada administración. v) Colocar inmediatamente cada rata en su jaula de diuresis. vi) Colocar un beacker graduada debajo de la jaula. vii) Controlar cada 20 minutos ( 20, 40, 60, 120 minutos ) el volumen de orina eliminado mediante la probeta graduada

1.8. Resultados. PESO INICIAL

RATA

FARMACO

( en g. ) BLANCO CABEZA LOMO COLA BASE COLA

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Vol. Adm.

P.L.

VOLUMEN DE ORINA RECOLECTADA PESO ( en ml. ) FINAL 20 min. 40 min. 60 min. 120 min. ( en g. )

Suero Fisiológico Furosemida Espironolactona Hidroclorotiazida Acetazolamida





1.9. Discusión ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.10. Conclusiones ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.11. Cuestionario 1.- De acuerdo a los resultados obtenidos, explique porqué el periodo de latencia (P.L.) de los fármacos difieren. 2.- Qué fármaco presenta el menor periodo de latencia, fundamente 3.- Esquematice e indique el mecanismo de acción de los fármacos empleados 4.- Con los resultados obtenidos hacer una curva vol. orina (ml.) vs. tiempo. 5.- Supongamos que los siguientes datos correspondes a los volúmenes recolectados, construir un curva vol. orina (ml.) vs. tiempo FARMACOS

P.L.

20

40

60

80

100

120

140

160

180

min

min

min

min

min

min

min

min

min

Hidroclorotiazida

32’

-

0,3

0,8

1,1

1,9

2,5

3,3

3,3

3,3

Furosemida

25’

-

0,9

1,4

1,8

2,2

3,0

3,1

3,1

3,1

Espironolactona

42’

-

-

0,3

0,8

1,2

1,6

1,6

1,6

1,6

Manitol

38’

-

0,5

0,9

1,2

1,6

1,8

2,2

2,2

2,2

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PRACTICA No 3 Farmacología Cardiovascular: Actividad Inótropa y Cronótropa 1.1. Marco Teórico. El corazón es uno de los principales órganos del organismo, que se encarga de bombear sangre a toda la economía del organismo a través de las aurículas y ventrículos. La funcionabilidad del corazón está relacionado con las 04 propiedades que presenta el corazón como son el inotropismo, cronotropismo, batmotropismo y dromotropismo. Una de las patologías que presentan inotropismo negativo es la insuficiencia cardiaca, en donde la fuerza contráctil del ventrículo izquierdo se encuentra deficiente, lo que genera en el paciente las manifestaciones características. Los fármacos que regulan la capacidad funcional del corazón , lo hacen modulando las propiedades; en el caso de aquellos que mejoran la capacidad contráctil del miocardio reciben el nombre de agentes inotropos positivos como la adrenalina, la atropina, el deslanosido, la amrinona, etc.

1.2. Conceptos que el alumno debe de conocer. Fisiología del Aparato Cardiovascular. Fisiopatología de las Enfermedades Cardiovasculares. Farmacología de los Cardiotónicos: Deslanosido Farmacología de los Cardioestimulantes: Adrenalina. Farmacología de los Colinérgicos: Acetilcolina y Atropina

1.3. Competencias. Inducir experimentalmente insuficiencia cardiaca Demostrar experimentalmente los efectos de los fármacos sobre el miocardio empleando como indicadores de evaluación las variaciones de las propiedades inótropas y cronótropas

1.4. Materiales, Equipos. Equipo de disección

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Tablero de madera

Alfileres

Jeringas de 1 ml.





1.5. Material Biológico 02 Sapos

1.6. Reactivos. Solución Salina

Solución de Acetilcolina 1/1000

Solución de Adrenalina 1/1000

Solución de Atropina 0,25 mg/ml.

Solución de Deslanosido C 0,02 %

1.7. Procedimiento. PROCEDIMIENTO 1: Actividad Inótropa y Cronotropa de los Anticolinérgicos i) Inmovilizar el sapo mediante destrucción de la médula espinal.

ii) Colocarlo y fijarlo con ayuda de alfileres. iii) Levantar la piel abdominal con una pinza y hacer un ojal con la tijera y cortar el externón por el medio y por los costados derecho e izquierdo. iii) Retirar con cuidado el pericardio y exteriorizar el corazón. iv) Registrar la fuerza de contracción y frecuencia cardiaca ( por minuto) basal. v) Instilar III de Acetilcolina en el seno venoso y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa. vi) Instilar III de Atropina en el seno venoso y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa.

PROCEDIMIENTO 2: Actividad Inótropa y Cronotropa de los Digitalicos i) Inmovilizar el sapo mediante destrucción de la médula espinal. ii) Colocarlo y fijarlo con ayuda de alfileres. iii) Levantar la piel abdominal con una pinza y hacer un ojal con la tijera y cortar el externón por el medio y por los costados derecho e izquierdo. iv) Retirar con cuidado el pericardio y exteriorizar el corazón. v) Registrar la fuerza de contracción y frecuencia cardiaca ( por minuto) basal. vi) Instilar III de Acetilcolina en el seno venoso y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa. vii) Instilar III de Deslanosido en el seno venosos y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa.

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PROCEDIMIENTO 3: Actividad Inótropa y Cronotropa de los Cardioestimulantes i) Inmovilizar el sapo mediante destrucción de la médula espinal. ii) Colocarlo y fijarlo con ayuda de alfileres. iii) Levantar la piel abdominal con una pinza y hacer un ojal con la tijera y cortar el externón por el medio y por los costados derecho e izquierdo. iv) Retirar con cuidado el pericardio y exteriorizar el corazón. v) Registrar la fuerza de contracción y frecuencia cardiaca ( por minuto) basal. vi) Instilar III de Acetilcolina en el seno venoso y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa. vii) Instilar III de Adrenalina en el seno venosos y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa.

PROCEDIMIENTO 4: Acción Combinada de Fármacos sobre la Actividad Inótropa y Cronótropa i) Inmovilizar el sapo mediante destrucción de la médula espinal. ii) Colocarlo y fijarlo con ayuda de alfileres. Iii) Levantar la piel abdominal con una pinza y hacer un ojal con la tijera y cortar el externón por el medio y por los costados derecho e izquierdo. iv) Retirar con cuidado el pericardio y exteriorizar el corazón. v) Registrar la fuerza de contracción y frecuencia cardiaca ( por minuto) basal. vi) Instilar III de Acetilcolina en el seno venoso y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa. vii) Instilar III de Atropina en el seno venoso y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa. viii) Lavar con suero fisiológico hasta retirar el exceso de atropina. ix) Instilar III Adrenalina en el seno venoso y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa. x) Lavar con suero fisiológico hasta retirar el exceso de atropina xi) Instilar III Deslanosido en el seno venoso y registrar la variación de la Propiedad Inótropa y Cronótropa

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1.8. Resultados. PROCEDIMIENTO 1: Actividad Inótropa y Cronotropa de los Anticolinérgicos

BASAL

FARMACOS Ach Atropina

FUERZA DE CONTRACCIÓN FRECUENCIA CARDIACA PROCEDIMIENTO 2: Actividad Inótropa y Cronotropa de los Digitalicos

BASAL

FARMACOS Ach Deslanosido

FUERZA DE CONTRACCIÓN FRECUENCIA CARDIACA PROCEDIMIENTO 3: Actividad Inótropa y Cronotropa de los Cardioestimulantes

BASAL

FARMACOS Ach Adrenalina

FUERZA DE CONTRACCIÓN FRECUENCIA CARDIACA PROCEDIMIENTO 4: Acción Combinada de Fármacos sobre la Actividad Inótropa y Cronótropa

BASAL FUERZA DE CONTRACCIÓN FRECUENCIA CARDIACA

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Ach

F A R M A C O S Atropina Adrenalina Deslanosido



1.9. Discusión ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.10. Conclusiones ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.11. Cuestionario 1.- De acuerdo a los fármacos empleados quienes forman parte de los Inótropos y Cronótropos positivos y negativos 2.- Fundamente los resultados teniendo en cuenta los procesos farmacodinámicos de cada fármaco 3.- Mencione las diferencias entre la Adrenalina y Deslanosido cuando se emplea en el Servicio de Cardiología 4.- Con que finalidad se emplea el colinérgico durante el desarrollo de la práctica, explique. 5.- Explique qué tipo de efectos (Sinergismo o Antagonismo) se producen en cada experiencia.

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PRACTICA No 4 Farmacología Hematológica: Actividad Anticoagulante y Hemostática

1.1. Marco Teórico. La hemostasia, es un mecanismo defensivo del organismo que mantiene en equilibrio el proceso de coagulación y anticoagulación. Como parte del mecanismo de la hemostasia se encuentra el vasoepasmo, agregación y adhesión plaquetaria, el mecanismo de la coagulación y la regeneración celular. Los fármacos anticoagulantes al actuar sobre la cascada de la coagulación retardan el proceso impidiendo la formación de trombos, por lo tanto con frecuencia se emplean en las intervenciones quirúrgicas, para evitar la coagulación; en el tratamiento de la trombosis y algunos para recolectar muestras de sangre. Sin embargo, los hemostáticos o coagulantes activan o aceleran este mecanismo incrementando los factores de la coagulación, empleado en casos de hemorragias. Entre los fármacos anticoagulantes, podemos mencionar a heparina, nadroparina, enoxaparina, warfarina, citrao de sodio, oxalato de sodio, citrato de sodio, EDTA, etc.; y dentro de los fármacos hemostáticos destacan la vitamina K, protamina, carbazocromo, etamsilato, acido tranexamico, entre otros.

1.2. Conceptos que el alumno debe de conocer. Mecanismo de la Hemostasia. Farmacología Hematológica Farmacología de los anticoagulantes, hemostáticos, trombolíticos y antiagregantes plaquetarios

1.3. Competencias. Evaluar experimentalmente la acción anticoagulante y hemostática de los fármacos Evaluar el tiempo de coagulación frente a la acción de los fármacos .

1.4. Materiales, Equipos. Equipo de disección

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Placas de porcelana

Mondadiente

Jeringa 1 ml.



1.5. Material Biológico 02 Sapos

1.6. Reactivos. Solución salina

Solución de Heparina

Solución de Warfarina

Solución de Protamina Solución de Citrato de sodio Solución de Oxalato de sodio Solución de vitamina K EDTA

1.7. Procedimiento. i) Inmovilizar el sapo mediante destrucción de la médula espinal. ii) Colocarlo y fijarlo con ayuda de alfileres. iii) Levantar la piel abdominal con una pinza y hacer un ojal con la tijera y cortar el externón por el medio y por los costados derecho e izquierdo. iv) Retirar con cuidado el pericardio y exteriorizar el corazón. v) Con cuidado del corazón extraer 0, 1 ml de sangre y colocar I sobre la placa de porcelana que contienen II de cada fármaco. vi) Agitar con un mondadientes y determinar el tiempo de coagulación.

1.8. Resultados.

FÁRMACOS Solución salina Vitamina k Heparina Warfarina Protamina Protamina + Heparina Citrato de sodio Oxalato de sodio EDTA

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TIEMPO DE COAGULACIÓN

OBSERVACIONES



1.9. Discusión ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.10. Conclusiones ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.11. Cuestionario 1.- Clínicamente que fármacos presentan mayor eficacia anticoagulante, porque? 2.- Explique la coagulación intrínseca y extrínseca 3.- Esquematice el Mecanismo de Acción de las sustancias empleadas. 4.- De los fármacos empleados quien no demuestra actividad anticoagulante, fundamente. 5.- Qué tipo de acción se genera entre la Heparina y Protamina si se emplean conjuntamente

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PRACTICA No 5

Farmacología Endocrina: Actividad Hipoglicemiante

1.1. Marco Teórico. La Diabetes mellitus es trastorno del metabolismo de carbohidratos, caracterizado porque los niveles de glicemia se encuentran por encima de los valores normales, 80 a 110 mg/dl, produciéndose una hiperglicemia no controlada. Existen dos tipos de diabetes, la diabetes tipo I, diabetes mellitus insulino dependiente (DMID) tiene una fisiopatología relacionada con la destrucción autoinmunitaria de las células beta-pancreaticas desencadenando una deficiencia en los niveles de insulina, por lo tanto la hiperglicemia; sin embargo, la fisiopatología de la diabetes tipo II, diabetes mellitus no insulino dependiente (DMNID) está relacionada con la insensibilidad de los receptores insulínicos, lo que impide el almacenamiento de la glucosa en los tejidos, por lo tanto también hay hiperglicemia. Si esta patología no se controla puede producir complicaciones a nivel ocular, renal, hematológico, generando ceguera, insuficiencia renal y amputaciones de los miembros inferiores. Los medicamentos antidiabéticos, se caracterizan porque tiene por objetivo regular los niveles de glicemia, por lo que también se les conoce como agentes hipoglicemiantes. Se clasifican en fármacos insulínicos, donde destaca la actividad de la insulina, administrada en la DMID por vía s.c. y los antidiabéticos orales (ADOS) como la glibenclamida, metformina, rosiglitazona, repaglinida, etc. empleados en la terapia de la DMNID.

1.2. Conceptos que el alumno debe de conocer. Fisiopatología de la Diabetes Mellitus. Farmacología de los Antidiabeticos: Insulina, Glibenclamida, Metformina

1.3. Competencias. Evaluar la actividad Hipoglicemiante en ratas normoglicemicas. Evidenciar la curva de tolerancia a la glucosa.

1.4. Materiales, Equipos. Glucómetro

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Tiras reactivas

Sonda metálica

Jeringas 1 ml





1.5. Material Biológico 04 Ratas

1.6. Reactivos. Suero fisiológico

Sol. Glucosa 50%

Sol. Metformina 5 mg/ml

Sol. Insulina 5 U/ml

Sol. Glibenclamida 0,5 mg/ml

1.7. Procedimiento. PROCEDIMIENTO No 1: Efecto Hipoglicemiante en ratas normoglicémicas i) Tomar la glicemia basal de cada animal. ii) Administrar los fármacos de la siguiente manera: Insulina 10 U/Kg, Glibenclamida 1,5 mg/Kg y Metformina 17 mg/Kg respectivamente a los animales. Determinar la glicemia de cada rata utilizando el glucómetro en el tiempo 5, 15, 30, 60 minutos.

PROCEDIMIENTO No 2: Evaluación Hipoglicemiante en curva de tolerancia la glucosa i) 24 horas antes retirar la alimentación y solo estar con agua. ii) Tomar la glicemia basal de cada animal iii) Administrar Glucosa 2 ml/Kg por vía i.p. iv) Transcurridos 5 minutos, administrar los fármacos de la siguiente manera: Insulina

3

U/Kg,

Glibenclamida

1,5

mg/Kg

y

Metformina

17

mg/Kg

respectivamente a los animales. v) Determinar la glicemia de cada rata utilizando el glucómetro en el tiempo 5, 15, 30, 60 minutos

1.8. Resultados. PROCEDIMIENTO No 1: Efecto Hipoglicemiante en ratas normoglicémicas RATON Blanco Cola Lomo Cabeza

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BASAL

Fármacos S. Fisiológico Insulina Glibenclamida Metformina

5 min.

15 min. 30 min. 60 min.



PROCEDIMIENTO No 2: Evaluación Hipoglicemiante en curva de tolerancia la glucosa RATON BASAL Glucosa Fármacos 5 min. 15 min. 30 min. 60 min. S.Fisiologico Blanco Cola Insulina Lomo Glibenclamida Cabeza Metformina 1.9. Discusión ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.10. Conclusiones ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

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1.11. Cuestionario 1.- Esquematizar el mecanismo de acción de los fármacos empleados 2.- Hacer la curva (mg% vs. tiempo) de ambas experiencias. 3.- Investigar que otros modelos experimentales se pueden emplear para evaluar la actividad hipoglicemiante. 4.- Experimentalmente, qué sustancias químicas pueden emplearse para inducir hipoglicemia. 5.- Qué otros animales de experimentación se pueden emplear para evaluar la actividad hipoglicemiante, fundamente.

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PRACTICA No 6

Farmacología Antimicrobiana: Prueba de Sensibilidad a los Antibacterianos

1.1. Marco Teórico. La

infección

es

generada

por

la

invasión

de

un

organismo

vivo

(microorganismo) sobre otro organismo vivo (hospederero), en donde encuentra condiciones de nutrición, de temperatura, de pH y de presencia o no de oxígeno para prolifera y llevar a cabo su ciclo vital de crecimiento y desarrollo. Los cuadros infecciosos suelen ser producidos por patógenos de tipo bacteria, hongos, virus y parásitos responsables

de las manifestaciones clínicas. En lo que

respecta a la infección bacteriana, clínicamente para controlarse es necesario que a través de la microbiología se identifique al agente responsable, empleando cultivos de muestras biológicas como sangre (hemocultivos), orina (urocultivos), heces (coprocultivos), etc.; posteriormente, en caso de ser necesario se llevaran a cabo el antibiograma o la prueba de sensibilidad a los antibióticos, con la finalidad de apreciar el comportamiento de las bacterias frente a los ATB; es decir, determinar la resistencia o la sensibilidad que tiene a los diferentes antibacterianos, contribuyendo así en la elección, por parte del médico, la mejor alternativa de tratamiento para dicho cuadro infeccioso.

1.2. Conceptos que el alumno debe de conocer. Microbiología bacteriana. Prueba de sensibilidad microbiana. Farmacología antibacteriana.

1.3. Competencias. Prepara medios de cultivos universales y/o selectivos. Prepara diluciones de cepas gram + y gran – Realiza la prueba de sensibilidad antibacteriana. Interpreta los resultados de la prueba de sensibilidad

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1.4. Materiales, Equipos. Tubos de ensayo

Mechero de alcohol Gradilla

Placas petri

Papel kraft

Hisopos estériles

Pabilo

Plumón marcador

Asa de siembra

Pinza de metal

Mascarilla

Gorra

Guantes

1.5. Material Biológico Cepas de Gram + : Estafilococos Cepas de Gram – : Enterobacterias

1.6. Reactivos. Agar Miuller Hinton

Agar MacConkey

Agar Manitol Salado

Caldo nutritivo

10 Discos de ATB Gram +

10 Discos de ATB Gram –

Alcohol etílico

Hipoclorito de sodio

1.7. Procedimiento. Preparación del área de trabajo Desinfectar el área de trabajo con hipoclorito de sodio, posteriormente utilizar alcohol etílico.

Preparación del personal. Colocarse la indumentaria adecuada (guardapolvo, guantes, mascarilla, gorra) con la finalidad de llevar adecuadamente las normas de bioseguridad.

Preparación del medio de cultivo. i) Verter agar fundido en las placas petri, cerca al mechero. ii) Dejar en reposo hasta su solidificación. iii) Verter en los tubos de ensayo 10 ml aproximadamente de caldo nutritivo.

Siembra por agotamiento en superficie. i) Tomar una o dos colonias de la cepa (Gram + / Gram – ) con ayuda del asa de siembra, cerca al mechero ii) Introducir y sumergir en los tubos que contienen caldo nutritivo y agitar.

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iii) Repetir la experiencia hasta obtener una turbidez en el caldo nutritivo. iv) Introducir el hisopo en los caldos nutritivos y presionar sobre las paredes del tubo. v) Sembrar en estrías las placas, por agotamiento en superficie.

Prueba de Sensibilidad i) Con la ayuda de la pinza esterilizada colocar 05 discos de ATB en las placas sembradas y presionarlas suavemente. ii) Asegurarse de exista una distancia adecuada entre disco y disco, previo mercado o plantilla. iii) Preparar las placas con papel kraft y rotularlo. iv) Incubar a 37º C por 24 horas y proceder a realizar las lecturas midiendo los halos de inhibición.

1.8. Resultados. FÁRMACOS

Halo de inhibición

Sensibilidad

Resistencia

1.9. Discusión ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

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1.10. Conclusiones ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.11. Cuestionario 1.- Esquematice el procedimiento de la práctica realizada 2.- Indique la importancia clínica de la prueba de sensibilidad. 3.- Indique las ventajas y desventajas de la prueba de sensibilidad. 4.- Cuáles son los criterios que se emplean para determinar si el agente patógeno es sensible o resistente a un determinado antibiótico. 5.- En que situaciones clínicas se lleva a cabo la prueba de sensibilidad antibacteriana.

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PRACTICA No 7

Farmacología Antimicrobiana: Actividad Antiparasitaria.

1.1. Marco Teórico. Los parásitos son agentes microbianos que se pueden encontrar bajo la forma de huevos, larvas, quistes y en estado de adultez como lombrices, responsables de muchas infestaciones. La helmintiasis es la infección parasitaria mas común en el hombre y se clasifican en nematodos, trematodos y cestodos. Los antiparasitarios, son agentes farmacológicos, que pueden ser de origen natural y sintético, que se emplean con la finalidad de ejercer su acción sobre los parásitos, desencadenando una alteración de su ciclo vital; cuando se encuentran bajo la forma de lombrices, estos agentes antiparasitarios ejercen su acción sobre ellos provocando una alteración de su placa neuromuscular, produciendo parálisis espástica y parálisis flácida. Entre los antiparasitarios más empleados clínicamente se encuentran el albendazol, mebendazol, tiabendazol, fluendazol, metronidazol, prazicuantel, pamoato de pirantel, ivermectina, entreotros.

1.2. Conceptos que el alumno debe de conocer. Microbiología de los parásitos. Farmacología Antiparasitaria: Antihelmínticos y Antiprotozoarios.

1.3. Competencias. Prepara extractos de especies vegetales. Evidenciar la actividad antiparasitaria mediante la parálisis que produce. Comparar la eficacia antiparasitaria de antihelmínticos sintéticos y naturales

1.4. Materiales, Equipos. Tubos de ensayo

1.5. Material Biológico Lombrices de tierra.

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Pipetas

Mortero

Placas petri

Pinzas





1.6. Reactivos. Agua destilada

Suero fisiológico

Solución de Albendazol

Solución de Mebendazol Solución de Pirantel

Solución de Praziquantel

Extracto de menta

Extracto de calabaza

Extracto de zapallo

Extracto de papaya

1.7. Procedimiento. PREPARACIÓN DE EXTRACTOS i) Pesar 50 g. de pepa del vegetal (zapallo, calabaza, papaya), dejarlo secar y pulverizarlo. ii) Hervir con 500 ml. de agua, filtrar y envasarlo en un frasco de boca ancha. iii) Rotularlo indicando la fecha de preparación. iv) Para el caso de la menta, pesar 50 g. de hojas y hervirlo con 300 ml. de agua. Filtrar y rotularlo indicando la fecha de preparación.

ACTIVIDAD ANTIPARASITARIA i) Seleccionar 09 tubos de ensayo y marcarlo. ii) Colocar en cada tubo 05 ml. de las soluciones. iii) Colocar en cada tubo una taenia, áscaris o lombriz de tierra. iv) Observar el estado y el tipo de parálisis que presenta los gusanos cada 05 minutos durante 30 minutos.

1.8. Resultados. TUBO

FÁRMACOS

01 02 03 04 05 06 07 08 09

SUERO FISIOLÓGICO SOLUCIÓN DE ALBENDAZOL SOLUCIÓN DE MEBENDAZOL SOLUCIÓN DE PIRANTEL SOLUCIÓN DE PRAZIQUANTEL EXTRACTO DE ZAPALLO EXTRACTO DE CALABAZA EXTRACTO DE PAPAYA EXTRACTO DE MENTA

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EFECTOS: Parálisis Espástica ( PE ) / Flácida ( PF ) / Muerte ( M ) 5 min. 10 min. 15 min. 20 min. 25 min. 30 min.



1.9. Discusión ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.10. Conclusiones ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………………………………………

1.11. Cuestionario 1.- Esquematice y explique el mecanismo de acción de los fármacos utilizados sobre la placa neuromuscular. 2.- Investigue modelos experimentales para evaluar la acción antihelmíntica. 3.- Según los fundamentos teóricos de los fármacos empleados, que tipos de parálisis produce sobre las lombrices.

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PRACTICA No 8

Farmacología Hormonal: Prueba de Sensibilidad de la hCG

1.1. Marco Teórico. La hormona gonadotrofina coriónica (hCG), es considerada como la hormona del embarazo, cuyos valores se incrementan notablemente posterios a los 7 dias de la concepción, el cual es detectado mediante los test de embarazo. Los test de embarazo, son productos farmacéuticos, usados como medio de diagnóstico, que se basan en la cromatografía, porque en ella participa la fase móvil (muestra de orina) y la fase estacionaria (tira reactiva), cuyo resultado se fundamenta en la detección cualitativa de dicha hormona, siempre que se encuentre por encima de los niveles de 25 mU/ml. En la fase estacionaria se encuentran anticuerpos monoclonales y pliclonales que al entrar en contacto con la hCG permiten la formación de bandas colorimétricas, dando como resultado positivo cuando se colorean dos bandas y negativos cuando es solo una, que corresponde al patrón de referencia.

1.2. Conceptos que el alumno debe de conocer. Proceso de la ovulación. Hormona Gonadotrofina Coriónica Humana (hCG). Farmacología Hormonal: Test de Embarazo, Anticonceptivos.

1.3. Competencias. Evidenciar la presencia de hCG en muestras biológicas de mujeres embarazadas. Fundamentar la técnica en la prueba de sensibilidad de la hCG.

1.4. Materiales, Equipos. 02 Test de embarazo

1.5. Material Biológico Muestra de orina de mujer gestante, recolectada por la mañana.

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